加味四君子汤对脾虚犬小肠组织形态及EGF表达的影响

【目的】探究加味四君子汤对脾虚犬小肠组织形态及EGF表达的影响。【方法】选择1岁龄的比格犬24只,随机分为4组,每组6只,分别为对照组、脾虚组、自然恢复组、中药恢复组。对照组犬饲喂基础饲粮;脾虚组、自然恢复组、中药恢复组犬每天以6 mL/kg番泻叶灌喂造模。第7天,将脾虚组犬解剖采样,中药恢复组在基础饲粮中添加2%加味四君子汤,自然恢复组饲喂基础饲粮。第14天,全部犬解剖采样。采集犬十二指肠、空肠中段、回肠进行HE染色,测量肠绒毛长度、隐窝深度,计算V/C值;检测小肠EGF蛋白表达量以及mRNA相对表达量。【结果】与对照组相比,脾虚组犬小肠出现弥漫性的肠道黏膜充血、水肿,并有大量黏液渗出;小肠绒毛稀疏、变短;肠绒毛长度极显著降低(P0.01),隐窝深度极显著升高(P0.01),十二指肠、回肠V/C值显著降低(P0.05),空肠V/C值极显著降低(P0.01);小肠EGF的蛋白表达量极显著降低(P0.01),mRNA表达量显著降低(P0.05)。用加味四君子汤治疗后,中药恢复组各项指标均恢复到接近对照组水平。【结论】加味四君子汤能够使番泻叶诱导犬脾虚证的小肠组织形态、EGF蛋白表达量以及mRNA相对表达量恢复正常,对犬脾虚证有明显的治疗效果。     

加味四君子汤对犬消化吸收功能及小肠EGF、SS表达的影响

【目的】探究加味四君子汤对犬消化吸收功能及小肠EGF、SS表达的影响.【方法】选择1岁龄的比格犬18只,随机分为3组,每组6只,分别为A组(对照组)、B组(1%加味四君子汤组)、C组(2%加味四君子汤组).A组犬饲喂基础饲粮,B、C组在基础饲粮中分别添加1%、2%加味四君子汤.在14 d,全部犬解剖采样.分别在0、7、14 d,测定犬血清中D-木糖含量;解剖后测定胰腺中消化酶水平,肠道小肠EGF、SS的表达情况.【结果】在饲粮中添加加味四君子汤能显著提高犬血清中D-木糖含量(P0.05),提高胰腺中淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶水平(P0.05),增加小肠EGF蛋白表达和EGF的mRNA相对表达量,减少小肠SS蛋白表达和SS的mRNA相对表达量;添加2%加味四君子汤优于添加1%加味四君子汤的效果.【结论】加味四君子汤可以提高犬血清中D-木糖含量、胰腺消化酶的水平和小肠中EGF的表达,降低SS的表达,增强犬消化吸收功能.     

加味四君子汤对脾气虚犬血清细胞因子水平、肠道免疫球蛋白水平以及脾脏组织形态及功能的影响

【目的】研究加味四君子汤对脾气虚犬免疫机能的影响.【方法】将24只1岁龄健康‘比格犬’随机均分为对照组、脾气虚组、自然恢复组和加味四君子汤组,用番泻叶药液复制犬脾气虚模型.第7 d造模成功,脾气虚组犬处死采样,对照组和自然恢复组犬饲喂基础日粮,加味四君子汤组犬在基础日粮中添加2%加味四君子汤.试验期14 d.第0、7、14天,采集血液,采用酶联免疫吸附法测定血清中干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6水平;在第14天,全部试验犬处死采样,计算脾脏指数,测定脾脏组织中促吞噬肽(Tuftsin)水平,观察脾脏显微和超微结构的变化;免疫组织化学(IHC)检测小肠各段分泌型免疫球蛋白A(sIgA)蛋白阳性表达水平,荧光定量PCR检测小肠各段免疫球蛋白A(IgA)、IgG、IgM mRNA相对表达量.【结果】与对照组犬相比,脾气虚犬血清细胞因子IL-4、IL-6水平显著升高(P0.05),IFN-γ、IL-2水平显著降低(P0.05);脾脏指数、脾脏Tuftsin水平、小肠sIgA蛋白阳性表达水平以及IgA、IgG、IgM mRNA的相对表达量均显著或极显著降低(P0.05,P0.01).经加味四君子汤治疗后,脾气虚犬上述指标和脾脏组织结构恢复正常.【结论】脾气虚犬免疫功能低于对照组犬,饲粮中添加加味四君子汤可以显著改善脾气虚症状,增强机体免疫机能.     

加味四君子汤对脾虚犬生理生化指标及消化吸收功能的影响

【目的】探究加味四君子汤对脾虚犬相关指标及功能的影响,为临床脾虚犬的治疗提供参考。【方法】选择24只1岁龄的比格犬,随机平均分为4组,分别为对照组、脾虚组、自然恢复组、加味四君子汤恢复组。对照组犬饲喂基础饲粮;其余3组犬先饲喂基础饲粮并每天灌喂6 mL/kg番泻叶水煎液,上下午各1次,构建脾虚模型。模型构建成功后,将脾虚组犬解剖采样,加味四君子汤恢复组饲喂添加加味四君子汤的饲粮(每50 g添加1 mL),自然恢复组饲喂基础饲粮。分别在第0,7,14天采血,测定血常规指标(白细胞(WBC)数、淋巴细胞(LYM)数、中性粒细胞(Gran)数、红细胞(RBC)数、血红蛋白(HGB)含量、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)数),并分离血清测定生化指标(丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、胆红素(TBIL)含量)以及D-木糖含量。第14天,全部犬解剖采集小肠和胰腺组织,观察小肠形态并测定胰腺消化酶活性。【结果】番泻叶水煎液灌喂第7天,试验犬出现脾虚证候群,表明脾虚模型构建成功。第0天时,各组犬各类指标均无显著差异。第7天时,与对照组相比,脾虚犬体质量极显著降低(P0.01);血液中WBC、LYM数量,血清TP含量及胰腺组织中淀粉酶、脂肪酶、胃蛋白酶活性显著降低(P0.05),RBC数量、HGB含量、HCT及血清ALB、GLU、D-木糖含量极显著降低(P0.01),ACT活性显著升高(P0.05)、胆红素含量极显著升高(P0.01)。电镜观察发现,脾虚组犬小肠绒毛稀疏且部分断裂、缺损,细胞器结构损伤。第14天时,脾虚犬经加味四君子汤治疗后,各项指标均恢复到对照组水平。【结论】加味四君子汤能够使脾虚犬的生理生化指标及消化吸收功能恢复正常,对犬脾虚证有明显治疗效果。     

加味四君子汤对仔猪血清免疫因子水平及肠黏膜免疫的影响

【目的】探讨加味四君子汤对仔猪免疫功能的影响。【方法】将6窝60头1日龄健康仔猪随机分为3组,每组20头,14日龄开始分别饲喂代乳料、代乳料+1%(以生药计)的加味四君子汤、代乳料+2%(以生药计)的加味四君子汤,21日龄断奶,试验期14d。在14日龄、21日龄、28日龄,每组随机选择10头仔猪,前腔静脉采血,ELISA法检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白介素2(IL-2)、IL-4、IL-6水平。在28日龄,各组随机选择6头仔猪剖杀,刮取小肠黏膜,-20℃保存,ELISA法检测肠黏膜SIgA水平;取小肠各段分别置于4%多聚甲醛和液氮保存,免疫组化法(IHC)检测SIgA蛋白表达水平,RT-qPCR法检测IgA mRNA相对表达量。【结果】加味四君子汤能显著或极显著提高仔猪血清4种免疫因子水平,极显著提高仔猪肠道黏膜SIgA水平(P0.01),显著或极显著提高小肠SIgA蛋白表达量和IgA mRNA相对表达量,且2%加味四君子汤的添加效果优于1%加味四君子汤。【结论】加味四君子汤能够促进仔猪小肠IgA mRNA表达与SIgA蛋白表达,提高仔猪机体免疫应答能力。     

猪圆环病毒2型感染对猪小肠上皮细胞Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1基因mRNA表达的影响

紧密连接在维持肠道黏膜完整性和免疫系统正常发挥功能中作用重大。【目的】旨在探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染对猪小肠上皮细胞(IPEC)紧密连接的影响。【方法】利用基因克隆获得Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)基因的重组质粒并建立荧光定量RT-PCR标准曲线;利用所建立的方法检测PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1mRNA的动态变化。【结果】构建的两种紧密连接蛋白基因的重组质粒荧光定量RT-PCR标准曲线线性关系良好,相关系数均达0.99以上。PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和ZO-1mRNA表达在4、12、24、48、72h均显著下降。【结论】PCV2感染可抑制猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白相关基因的表达,破坏细胞间的紧密连接,增加肠道通透性。     

猪圆环病毒2型感染对猪小肠上皮细胞Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1基因mRNA表达的影响

紧密连接在维持肠道黏膜完整性和免疫系统正常发挥功能中作用重大。【目的】旨在探讨PCV2感染对猪小肠上皮细胞(IPEC)紧密连接的影响。【方法】利用基因克隆获得Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)基因的重组质粒并建立荧光定量RT-PCR标准曲线;利用所建立的方法检测PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1mRNA的动态变化。【结果】构建的两种紧密连接蛋白基因的重组质粒荧光定量RT-PCR标准曲线线性关系良好,相关系数均达0.99以上。PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和ZO-1 mRNA表达在4、12、24、48、72 h均显著下降。【结论】PCV2感染可抑制猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白相关基因的表达,破坏细胞间的紧密连接,增加肠道通透性。     

猪圆环病毒2型感染对猪小肠上皮细胞Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1基因mRNA表达的影响

紧密连接在维持肠道黏膜完整性和免疫系统正常发挥功能中作用重大。【目的】旨在探讨PCV2感染对猪小肠上皮细胞(IPEC)紧密连接的影响。【方法】利用基因克隆获得Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)基因的重组质粒并建立荧光定量RT-PCR标准曲线；利用所建立的方法检测PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1mRNA的动态变化。【结果】构建的两种紧密连接蛋白基因的重组质粒荧光定量RT-PCR标准曲线线性关系良好，相关系数均达0.99以上。PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和ZO-1 mRNA表达在4、12、24、48、72 h均显著下降。【结论】PCV2感染可抑制猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白相关基因的表达，破坏细胞间的紧密连接，增加肠道通透性。     

谷氨酰胺对慢性酗酒大鼠肠道上皮细胞间连接蛋白表达的影响

目的观察谷氨酰胺对慢性酗酒大鼠肠道上皮紧密连接(TJ)特征性紧密连接蛋白Occludin、ZO-1和粘附连接(AJ)特征性蛋白钙粘连蛋白E表达的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组、谷氨酰胺组(谷氨组)、慢性酗酒处理组(酗酒组)、慢性酗酒并谷氨酰胺组(谷氨 酗酒组),每组10只,并给予相应的处理。用荧光示踪剂测定肠道上皮的渗透性、运用免疫印迹和RT-PCR测定肠道上皮细胞中Occludin、ZO-1和钙粘连蛋白E的蛋白及mRNA表达。结果慢性酗酒导致肠道上皮渗透性明显增高3倍左右(P<0.01);补充谷氨酰胺可以明显改善由慢性酗酒引起的肠道上皮渗透性增高(P<0.05)。免疫印迹和RT-PCR显示在酗酒组的Occludin、ZO-1、钙粘连蛋白E的蛋白和mRNA表达水平均较对照组的表达水平明显下降(P<0.01);在谷氨 酗酒组中Occludin、ZO-1、钙粘连蛋白E的蛋白和mRNA表达水平较酗酒组的表达水平明显增高(P<0.05)。结论慢性酗酒可使TJ分子Occludin、ZO-1和钙粘连蛋白E的mRNA、蛋白表达水平降低导致肠道上皮屏障功能受损,补充谷氨酰胺通过上调上述TJ分子而对慢性酗酒的肠道上皮屏障功能起保护作用。     

黄芪多糖对犬血清中白介素水平及肠道Toll样受体信号通路的影响

【目的】研究黄芪多糖(APS)对犬血清中白介素(IL)水平及肠道Toll样受体信号通路的影响,探索APS发挥免疫调节效应的作用及机制。【方法】将18只比格犬平均分为对照组(基础日粮)、APS低剂量组(基础日粮+质量分数1%的黄芪多糖)和APS高剂量组(基础日粮+质量分数2%的黄芪多糖),饲喂2周。于试验0,7,14 d采集血清,ELISA法检测血清中IL-2、IL-4和IL-6水平;第14天,解剖全部犬,采集十二指肠,用RT-qPCR、免疫组化(IHC)和Western Blots等技术检测TLR4信号转导途径相关蛋白(TLR4、TLR7、MyD88、TRAF-6和AP-1)的表达。【结果】试验7和14 d时,与对照组相比,APS低剂量组犬血清中IL-2、IL-4和IL-6水平显著(P0.05)或极显著(P0.01)升高,APS高剂量组犬血清中IL-2、IL-4和IL-6水平均极显著升高(P0.01)。与对照组相比,APS低剂量组犬肠道组织中TLR4、TLR7、MyD88、TRAF-6和AP-1蛋白表达光密度值、蛋白及其mRNA相对表达量显著升高(P0.05),APS高剂量组显著(P0.05)或极显著(P0.01)升高,APS低剂量组与高剂量组之间差异不显著(P0.05)。【结论】黄芪多糖可显著提高犬血清中IL-2、IL-4和IL-6水平,并通过调节Toll样受体通路蛋白表达增强犬机体免疫力。     

铁皮石斛粗多糖预防化疗性肠道黏膜炎作用的研究

【目的】探究铁皮石斛粗多糖对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导引起的小鼠化疗性肠道黏膜炎(CIM)的预防作用。【方法】健康雄性昆明鼠40只,随机分为正常组、CIM模型组(腹腔注射5-FU 130 mg/kg)及铁皮石斛粗多糖低、中、高剂量组(分别灌胃铁皮石斛粗多糖50、100和200 mg/kg,每日1次,持续2周,24 h后腹腔注射5-FU 130 mg/kg,每日1次,持续2 d),观察小鼠体质量变化情况,在腹腔注射5-FU 48 h后处死动物,对小肠进行形态学评价,检测小肠增殖细胞核抗原(PCNA)表达,对小肠屏障闭锁小带蛋白1 (ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、炎症因子白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达量进行检测。【结果】与CIM模型组相比,铁皮石斛粗多糖中剂量(100 mg/kg)组小鼠体质量明显降低;可增加小肠绒毛长度、降低隐窝深度、增加绒毛长度与隐窝深度比值;小肠PCNA表达量明显增加;可提高小肠屏障ZO-1和Occludin mRNA表达量;抑制炎症因子IL-1β和TNF-αmRNA表达量。【结论】铁皮石斛粗多糖具有预防5-FU引起的化疗性肠道黏膜炎。     

肉仔鸡卫星细胞氧化应激时MAPK信号通路

 【目的】在地塞米松(DEX)诱导骨骼肌卫星细胞氧化应激的体外条件下,筛选丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号系统中起关键作用的信号通路。【方法】 将体外培养的肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞(SCs)分别进行处理：Ⅰ、对照组;Ⅱ、DEX;Ⅲ、p38 MAPK抑制剂;Ⅳ、DEX+p38 MAPK抑制剂;Ⅴ、JNK抑制剂;Ⅵ、DEX+JNK抑制剂;Ⅶ、ERK5抑制剂;Ⅷ、DEX+ERK5抑制剂;Ⅸ、ERK1/2抑制剂;Ⅹ、DEX+ERK 1/2抑制剂。除处理Ⅰ和处理Ⅱ外,其它处理首先用抑制剂预处理30 min,弃去培养基后,再按处理设置分别加入含DEX的培养基或者正常培养基继续处理24 h。处理结束后,分别测定细胞培养液中丙二醛(MDA)、活性氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性;同时采用RT-PCR方法检测通路蛋白及SOD与GST基因表达量。【结果】 抑制剂单独处理组MDA和ROS的产生量显著低于DEX处理(P＜0.05);DEX+ERK5抑制剂处理与DEX+ERK 1/2抑制剂处理的MDA和ROS产生量显著高于ERK 5抑制剂处理和ERK1/2抑制剂处理(P＜0.05); DEX+p38 MAPK抑制剂处理与 DEX+JNK抑制剂处理组的MDA和ROS产生量与p38 MAPK处理和JNK处理的差异不显著(P＞0.05)。抑制剂单独处理组的SOD和GST活性比DEX处理高(P＜0.01);DEX+ERK5抑制剂处理与 DEX+ERK 1/2抑制剂处理的SOD和GST活性极显著低于ERK5抑制剂处理组和ERK1/2抑制剂处理组(P＜0.01),DEX+p38 MAPK抑制剂处理与DEX+JNK抑制剂处理的SOD和GST活性与p38 MAPK抑制剂处理和 JNK抑制剂处理的差异不显著(P＞0.05)。基因表达结果表明,DEX能够抑制GST和SOD基因的表达,抑制率达37%以上。与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38 MAPK和JNK通路后,DEX对GST和SOD基因的表达无明显抑制作用。【结论】 在DEX诱导的肉仔鸡胸肌骨骼肌SCs产生的氧化应激过程中,p38 MAPK和JNK通路起着关键作用。     

热应激对奶山羊瘤胃上皮细胞屏障通透性的影响

【目的】研究热应激对奶山羊瘤胃上皮细胞屏障通透性的影响,为动物在炎热环境中能够维持正常生理机能以及探索促进动物抗热应激的方法提供理论基础和试验依据。【方法】选用泌乳中后期奶山羊,采用逐渐加热的方式建立奶山羊热应激模型,研究热应激对奶山羊血浆中D-乳酸、DAO、内毒素及炎性细胞因子等异常代谢产物的浓度,瘤胃上皮细胞间紧密连接的变化及紧密连接蛋白Occludin表达的影响。【结果】①热应激显著提高了血浆中D-乳酸和DAO浓度;②热应激显著提高了血浆中内毒素及炎性细胞因子TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-1β、干扰素-γ的浓度;③热应激破坏了瘤胃上皮间紧密连接的结构,并显著降低了紧密连接蛋白Occludin蛋白表达和mRNA表达。【结论】热应激可导致奶山羊瘤胃黏膜屏障功能受损、通透性增加、菌群移位,其机制可能与瘤胃上皮细胞紧密连接蛋白Occludin表达下降有关。     

犬源复合益生菌对脾虚犬抗氧化及消化吸收功能的影响

试验旨在研究犬源复合益生菌对脾虚犬血清抗氧化、消化吸收功能的影响。选用24只1岁龄健康比格犬,随机分为对照组、脾虚组、自然恢复组和益生菌治疗组。对照组饲喂基础饲粮,其余3组每日饲喂基础饲粮+10 mL/kg番泻叶水煎液,灌服造模7 d。第7天,随机选取4只脾虚组犬解剖采样;对照组和自然恢复组饲喂基础饲粮;益生菌治疗组每日饲喂基础饲粮+1×10~9CFU复合益生菌制剂,持续7 d。第14天,试验犬全部解剖取样。番泻叶水煎液灌喂第7天,试验犬出现脾虚证候群,表明脾虚模型构建成功。与对照组相比,脾虚组TSOD、GSH-Px、D-Xylose和胰腺蛋白酶含量极显著降低(P0.01),胰腺淀粉酶和脂肪酶显著降低(P0.05),MDA含量极显著升高(P0.01);且脾虚组十二指肠和空肠绒毛高度及V/C值显著下降(P0.05)。透射电镜观察发现,与对照组相比,脾虚组小肠黏膜上皮细胞顶端微绒毛稀疏,细胞间连接复合体被破坏,胞内线粒体和粗面内质网发生肿胀,部分发生融合降解。脾虚犬经复合益生菌制剂治疗1周后,各项指标均恢复到对照组犬水平(P0.05)。犬源复合益生菌能够使脾虚犬抗氧化功能和消化吸收功能恢复正常,对犬脾虚证有较好的治疗效果。     

四君子汤及加味四君子汤对商品肉鸡免疫功能的影响

【目的】为开发优质高效的中药免疫增强剂提供参考依据。【方法】选用420只1日龄AA肉鸡,随机分成Ⅰ~Ⅶ7个处理组,每组设3个重复,每重复20只。试验鸡在新城疫Lasota系冻干苗免疫时分别用四君子汤和加味四君子汤煎剂按2.5,5.0,7.5 mL/L 3个添加量兑水自由饮用,连用4 d。于14,28和42日龄分别在鸡翅静脉采血,进行白细胞、淋巴细胞计数,α-醋酸萘酯酶染色(ANAE)和β-微量血凝抑制试验检测各项免疫指标,研究四君子汤及加味四君子汤对商品肉鸡免疫功能的影响。【结果】新城疫疫苗免疫时以2.5 mL/L剂量添加四君子汤或加味四君子汤,在14,28和42日龄均可极显著提高鸡的淋巴细胞数和血液中新城疫的抗体水平(P<0.01);四君子汤以5.0mL/L剂量或加味四君子汤以2.5 mL/L剂量添加均能显著提高白细胞数和T淋巴细胞百分率(P<0.05)。【结论】四君子汤和加味四君子汤均能有效提高鸡的特异性免疫和非特异性免疫水平。     

刺五加苷E对仔猪小肠上皮细胞屏障功能基因表达的影响

为研究刺五加苷E(Eleutheroside E)对仔猪小肠上皮(IPEC-J2)细胞紧密连接蛋白及炎性细胞因子m RNA表达量的影响。在正常DMEM/F12培养基中分别添加0,0. 05,0. 1,0. 2 mg/m L的刺五加苷E,测定刺五加苷E对IPEC-J2细胞增殖活性的影响。选择对IPEC-J2有显著作用的刺五加苷E浓度为有效浓度,研究刺五加苷E对仔猪小肠上皮细胞的机械屏障和免疫屏障的影响。细胞增殖试验结果表明,0. 1 mg/m L的刺五加苷E对IPEC-J2有极显著的增殖作用(P0. 01)。选择0. 1 mg/m L的刺五加苷E处理剂量对IPEC-J2的主要紧密连接蛋白和细胞因子进行基因表达水平测定,采用实时荧光定量PCR方法测定紧密连接Claudin-3、Occludin和ZO-1,抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β,炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的m RNA相对表达量。试验结果表明:刺五加苷E上调了仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Claudin-3和ZO-1的基因表达(P0. 05),在细胞免疫方面下调炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的基因表达;上调了抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β的基因表达。这说明刺五加苷E能够改变细胞间紧密连接蛋白和细胞因子的基因表达,进而促进肠道机械和免疫屏障功能的完整性,有益于仔猪肠道的健康发育。     

刺五加苷B对仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白及细胞因子mRNA表达量的影响

以仔猪小肠上皮细胞为模型,应用实时荧光定量PCR方法测定相关基因指标,研究刺五加苷B(EB)对仔猪小肠上皮(IPEC-J2)细胞紧密连接蛋白及炎性细胞因子mRNA表达量的影响。结果表明:0.1 mg/m L刺五加苷B显著增强肠道细胞紧密连接蛋白Occludin、Claudin-3、ZO-1和抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β的mRNA表达量,且减弱促炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的mRNA表达量。说明刺五加苷B可通过改变细胞间紧密连接蛋白和细胞因子的表达从而对维持肠道屏障功能的完整性起到促进作用,有益于仔猪肠道的健康发育。     

不同教槽料对断奶仔猪肠道黏膜免疫相关基因表达的影响

为探讨不同教槽料对断奶仔猪肠道黏膜免疫相关基因表达的影响,选取90头21日龄体质量[(6.85±0.25)kg)]相近的杜洛克×长白×大约克断奶仔猪,随机分为3组。对照组(CON)饲喂基础饲粮,优质蛋白源组(HP)在基础饲粮中添加优质蛋白原料(基础饲粮中的豆粕蛋白原料用发酵酶解豆粕、酵母提取物和小麦水解蛋白粉代替),优质蛋白源+肠道保护包组(HPP)在基础原料中添加优质蛋白原料和肠道保护包(主要成分为复合酸化剂、植物精油、复合益生菌组合)。试验期14 d。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测仔猪饲喂不同教槽料后,十二指肠、空肠、回肠、结肠黏膜TNF-α、IL-1β、TGF-β、IL-10的基因表达量,回肠和结肠黏膜紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1、ZO-1的基因表达情况。结果显示,与CON组相比,仔猪断奶3 d时,HPP组十二指肠IL-1β及回肠IL-1β、Occludin、Claudin-1、ZO-1的基因表达量均显著升高(P0.05);仔猪断奶7 d时,HP组和HPP组空肠、回肠TNF-α、IL-10的基因表达量升高(P0.05),并且回肠Occludin、Claudin-1、ZO-1的基因表达量显著升高(P0.05);仔猪断奶14 d时,HPP组空肠TNF-α、IL-1β、TGF-β、IL-10和回肠TGF-β的基因表达量显著升高(P0.05)。可见,断奶仔猪饲喂新型教槽料能够上调肠道黏膜免疫因子相关基因的表达量,增强早期断奶仔猪回肠和结肠黏膜中紧密连接蛋白相关基因的表达量,降低断奶应激对仔猪肠道造成的损害。     

青蒿素对敏感/抗性疟原虫感染小鼠肠紧密连接蛋白表达及膜流动性影响差异研究

为研究青蒿素对敏感/抗性疟原虫感染小鼠肠紧密连接蛋白表达及膜流动性影响,采用Western blot试验测定目的蛋白表达,TMA-DPH细胞膜流动性试剂盒结合荧光偏振法测定膜流动性,研究青蒿素给药前后对敏感/抗性伯氏疟原虫感染小鼠肠主要紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1表达及细胞膜流动性差异。结果表明：青蒿素敏感/抗性疟原虫感染小鼠肠脏器指数增加,青蒿素处理后脏器指数较模型组亦显著提高;抗性模型组(K-CMC-Na)肠紧密连接蛋白ZO-1、claudin-1水平均较正常组和敏感组显著下调,但occludin表达较正常组上调,与敏感组无显著差异;青蒿素给药后使健康小鼠claudin-1、ZO-1水平异常下调,且显著降低敏感/抗性疟原虫感染小鼠相关蛋白的表达水平,同时青蒿素处理抗性组claudin-1表达较敏感组上调,但occludin、ZO-1水平则显著下降;青蒿素给药显著降低敏感/抗性组小鼠肠细胞膜流动性,且前者较后者更低。这一研究提示青蒿素对疟原虫感染所致的肠道反应可能无治疗作用,反而通过进一步破坏宿主肠道屏障,加重肠炎和感染;同时青蒿素耐药疟原虫感染后引起肠...     

日粮添加壳聚糖螯合锌对大肠杆菌攻毒断奶大鼠回肠形态结构及屏障功能的影响

[目的]本试验旨在探讨壳聚糖螯合锌对大肠杆菌攻毒断奶大鼠回肠形态结构、屏障功能和炎症反应的影响。[方法]选用48只断奶SD大鼠(初始平均体重55.65 g),分为4组:空白对照组(N-CON)、攻毒对照组(CON)、硫酸锌组(ZnSO_4)和壳聚糖螯合锌组(CS-Zn)。正式试验开始,N-CON和CON组大鼠饲喂基础日粮,ZnSO_4组大鼠饲喂添加含50 mg·kg~(-1) Zn的硫酸锌日粮,CS-Zn组大鼠饲喂添加640 mg·kg~(-1)壳聚糖螯合锌颗粒(锌含量50 mg·kg~(-1))的日粮。试验期为14 d,试验第9～12天,CON、ZnSO_4和CS-Zn组每天灌胃4 mL总菌数量为1×10~(10) CFU·mL~(-1)的大肠杆菌菌液。[结果]与N-CON组相比,CON组大鼠回肠绒毛高度以及绒毛高度/隐窝深度显著降低,隐窝深度以及髓过氧化物酶(MPO)活性显著增加,炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著增加,IL-10浓度显著降低。而与CON组相比,CS-Zn组大鼠绒毛高度以及绒毛高度/隐窝深度显著上升,隐窝深度显著降低;肠黏膜紧密连接蛋白基因ZO-1、Occludin、Claudin-1表达量显著上升,组织MPO活性显著降低,促炎因子TNF-α和IL-6水平显著降低,抑炎因子IL-10水平显著升高,TLR-4信号通路相关分子基因MyD88、IRAK1、TRAF6表达量明显下调,MyD88蛋白表达量显著下降;有益菌Lactobacillus的数量显著上升。[结论]壳聚糖螯合锌可显著改善大肠杆菌攻毒大鼠的回肠形态结构,并且可通过上调有益菌含量及抑制TLR-4信号通路,降低炎症细胞因子水平,降低炎症反应,保护肠黏膜屏障功能。