青贮玉米优良乳酸菌的分离与筛选

为改善和提高青贮饲料的品质提供优良菌种,采用MRS平板分离、生理生化分析和16SrDNA鉴定相结合的方法对新疆阿克苏地区青贮玉米(Zea mays L.)中乳酸菌的种类、形态学及生理生化特性进行研究。结果表明:从青贮玉米分离到10个菌株,其中,2株为地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenniformis),2株为面包乳杆菌(Lactobacillus crustorum),4株为鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus),2株为干酪乳杆菌(L.casei),均为异型乳酸菌。地衣芽孢杆菌(B.lichenniformis)在pH 3.0~3.5能生长,其他菌不生长或者生长较弱,但在pH 4.0~8.0均能生长;10个菌株均可在6.5%和8.0%NaCl条件下生长;地衣芽孢杆菌(B.lichenniformis)的生长速度快、产酸性能好,可作为制作青贮饲料的优良菌株。     

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为改善和提高青贮饲料的品质提供优良菌种,采用MRS平板分离、生理生化分析和16S rDNA鉴定相结合的方法对新疆阿克苏地区青贮玉米(Zea ma ys L.)中乳酸菌的种类、形态学及生理生化特性进行研究.结果表明:从青贮玉米分离到10个菌株,其中,2株为地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenni formis),2株为面包乳杆菌(Lactobacillus crustorum),4株为鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus),2株为干酪乳杆菌(L.casei),均为异型乳酸菌.地衣芽孢杆菌(B.lichenni formis)在pH 3.0～3.5能生长,其他菌不生长或者生长较弱,但在pH 4.0～8.0均能生长;10个菌株均可在6.5％和8.0％NaCl条件下生长;地衣芽孢杆菌(B.lichenni formis)的生长速度快、产酸性能好,可作为制作青贮饲料的优良菌株.     

乌昌地区传统酸牛奶中乳酸菌的分离鉴定

[目的]新疆酸奶中菌种资源丰富,因地域性差异,其中所含乳酸菌也有所不同,进一步了解乌昌地区菌种资源,为该区酸奶发酵剂的开发提供参考.[方法]采集新疆乌昌地区酸奶样品,采用传统形态学、生理生化特性方法对分离并纯化出的20株乳酸菌进行鉴定.[结果]经传统形态学、生理生化特性方法鉴定为7株德氏乳杆菌乳亚种(L.delbrueckii subsp.lactis),3株干酪乳杆菌(L.casei),2株发酵乳杆菌(L.fermentum),3株乳酸乳球菌(L.lactis subsp.lactis),2株乳酸粪肠球菌(Enterococcus faecalis),1株唾液链球菌(S.salivarius),2株未鉴定到种.[结论]结合生理生化鉴定结果,对样品中分离出的CJ2、QT1、QT2、DBC1四株乳酸菌进行16S rDNA基因序列分析,构建系统发生树.经分析QT2和DBC1两株乳酸菌为Lactobacillus delbrueckii subsp.indicus,CJ2和QT1两株为Enterococcus faecalis.     

侗族传统腌鱼中乳酸菌的分离鉴定与生物学特性

对侗族传统发酵腌鱼中的乳酸菌进行分离鉴定,并对其生长特性进行研究。从产品中分离得到乳酸菌疑似菌株16株,经生理生化鉴定,初步确定为消化乳杆菌(8株)、植物乳杆菌(4株)、草乳杆菌(2株)和发酵乳杆菌(2株)。结合生理生化鉴定结果,对样品中分离出的ZZY-6、CJY1-1、ZZY-3和CJY2-3等4株分离菌株进行16S r DNA基因序列分析,构建系统发生树。经分析可知,ZZY-6为消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius),CJY1-1为植物乳杆菌(L.plantarum),ZZY-3为草乳杆菌(L.graminis),CJY2-3为发酵乳杆菌(L.fermentum)。生长特性研究结果显示,分离所得菌株均具有良好的生长性能、产酸性能和耐盐性,但均未检测到脂肪酶活性,仅植物乳杆菌表现出蛋白酶活性。     

马奶酒中产抑菌物质乳杆菌的筛选及鉴定

从内蒙古传统乳制品酸马奶酒中分离出乳酸杆菌99株,通过双层琼脂平板扩散法筛选出具有明显抑菌作用的菌株。在排除有机酸、H2O2等的干扰后,其中5株乳酸杆菌的发酵上清液对受试的指示菌表现出明显抑制作用。依据形态特征和生理生化特征,初步鉴定MKB6和MKB57为瑞士乳杆菌(L.helueticus),MKB38鉴定为嗜酸乳杆菌(L.acidlophilus),MKB41格氏乳杆菌(L.gasseri),MKB49为旧金山乳杆菌(L.sanfrancisco)。     

乳扇中乳酸杆菌的分离鉴定以及产酸量的测定

通过细菌培养、菌体鉴定和生理生化试验对分离到的乳酸杆菌(简称乳杆菌)进行属种的鉴定.结果显示:从3份乳扇中分离得到8株乳酸杆菌,将8株乳酸杆菌编号为001至008,其中编号001、002、003、005、006等5株乳酸杆菌为植物乳杆菌,编号004、007、008等3株为弯曲乳杆菌.然后用0.1 mol/L NaOH滴定发酵液测定其产酸量,测得001～ 008酸度分别为0.017 2、0.015 4、0.016 7、0.013 2、0.015 3、0.015 7、0.013 9、0.013 6°T.说明植物乳杆菌的产酸量均比弯曲乳杆菌的高,为乳扇中乳杆菌种类及优势种群的调查奠定了基础.     

动物微生态制剂菌种的分离与鉴定--鸡肠源乳杆菌的分离与鉴定

试验的菌种是从宁夏固原山区完全自然生长的土种健康产蛋母鸡的大肠和盲肠中分离获得的,共分离出51株菌株．通过对这51株菌株的菌落形态的观察和革兰氏染色镜检．筛选出11株进行了乳杆菌属的生理生化鉴定,初步确定为乳杆菌(Lactobacillus)．再通过糖醇类发酵产酸鉴定,确定6株为类布氏乳杆菌(L．parabuchneri),4株为短乳杆菌(L.brevis),1株为戊糖乳杆菌(L．pentosus)．各项鉴定结果均符合乳杆菌属和种的鉴定标准．     

传统酸面团中优势乳酸菌的分离及性能研究

以自然发酵的传统酸面团为研究对象,对其中的优势乳酸菌进行分离及鉴定,并评价其产酸性能。结果表明:共筛选到7株乳酸菌,经形态学及16S rDNA序列分析鉴定为面包乳杆菌1株、短乳杆菌1株、植物乳杆菌3株、白面粉乳杆菌2株;供试乳酸菌的产酸能力具有菌种及菌株特异性,其中植物乳杆菌L2-2产酸能力最强,37℃发酵24 h发酵液pH值可达3.81。     

甜高粱与苜蓿混贮品质评价与乳酸菌分离鉴定

为了评价混合青贮的品质和筛选优良的乳酸菌菌株,本研究以不同比例(甜高粱与苜蓿比例分别为0∶100,20∶80,40∶60,60∶40,80∶20,100∶0)的甜高粱与苜蓿混合青贮为材料,对混合青贮进行了感官评价和发酵品质分析,通过MRS平板分离、生理生化分析和16S rRNA相结合的方法对不同比例混合青贮中乳酸菌的种类、生理生化特性进行了研究。结果表明,40%SS比例的混合青贮效果最佳。从不同比例混合青贮中共分离得到18株乳酸菌,4株鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),5株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),3株耐久肠球菌(Enterococcus durans),2株肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconstoc mesenteroides subsp mesenteroides),2株屎肠球菌(Enterococcus faecium),乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)各1株。各菌株产酸试验和生长试验结果表明,植物乳杆菌产酸性能好,生长速度快,可作为制作混合青贮饲料的优良菌株。     

香蕉茎叶中乳酸菌的分离和鉴定

从海南热带地区的香蕉茎叶中分离出3株高产酸菌,利用经典分类法在产乳酸、形态学、生理生化特性等方面对其进行了细菌学鉴定。结果表明,3株菌株分别为植物乳杆菌(Lactobacillus planetarium)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)和乳酸片球菌(P.pentosaceus)。对这3株菌株产酸性能的测试结果表明,植物乳杆菌HN1和短乳杆菌HN2产酸速率大于乳酸片球菌HN3。     

盐穗木青贮中乳酸菌的分离及筛选

【目的】合理利用牧草资源,为新疆南疆地区畜牧业提供优质青贮,研究探讨了花果期盐穗木青贮后的营养价值和发酵品质,同时为提高青贮饲料发酵品质筛选提供乳酸菌资源。【方法】以新疆阿克苏地区花果期盐穗木为原料制作实验室小剂量自然发酵青贮,在发酵第150天时对比青贮前后盐穗木的干物质（DM）、粗蛋白（CP）、可溶性糖（WSC）、中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的含量变化,测定盐穗木青贮的pH、氨态氮（NH3-N）、乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（PA）和丁酸（BA）含量,并采用实验室纯培养方法结合生理生化分析,对青贮中乳酸菌的种类和形态学进行分类,通过葡萄糖发酵产酸产气试验、细菌微量生化反应碳源发酵试验、耐盐试验、耐酸试验和温度生长试验等生理生化试验对所筛选菌株进行研究。运用核酸 Blast技术,将所测序列与GenBank数据库进行对比,选择并下载与所测序列同源性最高的已知分类地位的菌种,与本试验所测菌株的序列一起,采用 Clustal 进行比对,用MEGA5.0绘制系统发育树,确定各菌株分类地位,对分离的菌株进行种属鉴定。【结果】与青贮前相比,由于乳酸菌发酵利用原料中的糖类物质导致青贮后盐穗木中的干物质和可溶性糖含量下降,同时在青贮发酵过程中盐穗木茎秆中难降解的水溶性碳水化合物被乳酸菌降解为易被利用的纤维,导致中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的含量升高,青贮pH为4.250-4.286,乳酸含量为60.923-61.283属于优良品质青贮饲料的范围。从自然发酵盐穗木青贮中分离得到3株粪肠球菌（Enterococcus faecium）、1株屎肠球菌（Enterococcus lactis）、2株蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）、1株戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus）、1株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和1株布氏乳杆菌（Lactobacillus buchneri）。9株菌均能在pH4-7环境下能生长,在3.0%和6.5% NaCl条件下及10-45℃范围内生长,且生长状况良好,同时能利用D-葡萄糖、D-甘露糖、纤维二糖、D-甘露醇、D-果糖、蔗糖等多种碳源。其中,戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus）、布氏乳杆菌（Lactobacillus buchneri）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）产酸速率和生长速率较快,且具有很强的耐酸耐盐能力,在5-45℃范围内生长良好。【结论】将盐穗木制成青贮后其营养成分含量和发酵品质均处于良好水平,可将戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus）、布氏乳杆菌（Lactobacillus buchneri）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）这3株菌选作青贮饲料制作过程中的添加剂。     

新疆酸马奶中优良乳酸菌的分离鉴定及发酵特性分析

从新疆地区自然发酵酸乳中分离到25株乳酸细菌,通过在牛乳中的传代发酵试验筛选出3株遗传性状稳定、凝乳状态好、风味独特乳酸菌菌株,其中杆菌1株,球菌2株,经形态特征、生理生化特性和16 Sr DNA序列同源性分析,将菌株5-3鉴定为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides),菌株6-7鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),菌株1-6鉴定为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),同时对3株菌进行发酵性能测定及感官综合评价,结果表明:3株菌都具有较好的发酵性能和良好的发酵风味.     

动物微生态制剂菌种的分离与鉴定--猪肠源乳杆菌的分离与鉴定

本次试验的菌种是从宁夏平罗县边远农村半自然状态生长的健康肉猪的小肠、大肠弄口盲肠中分离获得的，共分离出64株菌株．通过对这64株菌株的菌落形态观察和革兰氏染色镜检．筛选出14株进行了乳杆菌属的生理生化鉴定，初步确定这14株杆菌属于乳杆菌属（Lactobacillus）．再通过糖醇类发酵产酸鉴定，确定4株为植物乳杆菌（L．plantayum），3株为短乳杆菌（L．brevis），2株为小鼠乳杆菌（L．murinus），3株为类布氏乳杆菌（L．parabuchneri），1株为丘状乳杆菌（L．collinoides），1株为玉米乳杆菌（L．zeae）．各项鉴定结果均符合乳杆菌属和相应种的鉴定标准．     

PCR-DGGE方法分析玉米及苜蓿青贮动态发酵体系中菌群多样性

[目的]探讨玉米青贮和苜蓿青贮动态发酵过程。[方法]以玉米和苜蓿为青贮原料,利用氯化苄方法对青贮中微生物基因组DNA进行提取,以P2f和P3r为引物扩增目的片段并利用PCR—DGGE方法对玉米青贮及苜蓿青贮进行动态发酵多样性研究。[结果]玉米青贮的pH值在发酵过程中维持在4．0～4．5,而苜蓿青贮则维持在5．5—6．0。PCR-DGGE分析显示2种物料青贮在0和1d、3和7d、20和60d相似性均很高,并且它们具有基本相似的谱带类型,其中条带1、3、13、14、17、21、22为所有样品共有,只是亮度上有差异。DGGE研究结果表明大多数序列代表乳酸菌（LAB）类细菌,并以Lactobacillus类最多;其次为Lactococcus和Weissella。[结论]该研究为青贮添加剂的制作奠定基础。     

不同添加剂对油莎豆青贮品质及有氧稳定性的影响

【目的】分析不同添加剂对油莎豆(Cyperus esculentus)青贮品质变化的影响,筛选出适宜的青贮添加剂。【方法】设计3个不同添加剂处理,分别为0.2%植物乳杆菌(W₁ 处理)、0.5%纤维素酶(W₂处理)、0.2%植物乳杆菌+ 0.5%纤维素酶(W₃处理),以不添加为对照处理(CK),添加至粉碎的油莎豆中,共发酵60 d,检测发酵期间各处理的第 0、7、15、30、45和60 d的干物质(DM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、水溶性碳水化合物(WSC)、氨态氮(NH₃-N)和pH值的变化,并动态监测开窖后各处理青贮内部温度变化规律,对比开袋前后的相对饲喂价值(RFV)。【结果】青贮发酵时间和3个添加剂处理在油莎豆青贮pH 、DM、CP、WSC、NH₃-N均表现出极显著的交互作用(P<0.01),对 NDF、ADF有显著影响(P<0.05)。处理W₃的pH、NH₃-N、NDF和ADF最低,且CP、WSC、RFV含量最高;处理W₃有氧稳定时间显著高于其它处理(P<0.05),达到115 h。综合评价排序W₃处理>W₁处理>W₂处理>CK处理。【结论】3种添加剂均能有效改善油莎豆青贮品质,提高其营养价值,延长青贮有氧稳定性的时间,其中添加植物乳杆菌(0.2%)+纤维素酶(0.5%)的处理青贮效果最好。     

小麦秸秆发酵液中优质乳酸菌的分离·纯化与鉴定

[目的]从小麦秸秆发酵液中筛选并鉴定适合于青贮添加剂的高效乳酸菌。[方法]用MRS＋CaCO3固体培养基筛选,分离出78株乳酸菌;经形态学、革兰氏染色、生理生化试验、产酸效率试验、耐酸能力试验和耐盐试验等挑选出43株产酸率高的乳酸菌。通过16S rDNA法对该乳酸菌进行鉴定。[结果]已获得43株产酸能力强的菌株1,6S rDNA鉴定结果表明,37株为副干酪乳杆菌亚种（Lacto-bacillus paracasei subsp.）1,株为鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）,5株为肠球菌（Enterococcus faecium）。[结论]从小麦秸秆中筛选出43株具有较强产酸能力的乳酸菌,对研发优质青贮饲料添加剂具有一定的指导意义。     

类开菲尔粒的发酵特性及强产酸乳酸菌的分离鉴定

株ZX1-3和ZX5-5具有一定的耐酸性,预示着菌株在乳制品发酵及饲料青贮中有潜在的开发前景.     

自然发酵东北酸菜中乳杆菌的分离与鉴定

文章从15份自然发酵的东北酸菜样品中分离乳杆菌,并对其种属进行鉴定。通过形态学观察及H2O2酶、糖发酵等生理生化试验对所分离菌株进行初步鉴定,再利用16S rDNA序列同源性分析的方法对所分离菌株进行16S rDNA基因扩增与测序,并将测序结果与GenBank中该属内菌株的16S rDNA基因序列进行同源性比较分析。结果表明,从15份自然发酵的东北酸菜中分离获得21株菌,其中6株为植物乳杆菌,8株为短乳杆菌,6株为罗伊氏乳杆菌,1株为米酒乳杆菌。本研究为从多角度开发利用东北酸菜中的微生物资源提供依据。     

新疆饲料乳酸菌的多样性与系统进化分析

[目的]对新疆吐鲁番地区常用饲料样品(玉米、苜蓿、小麦)的乳酸菌资源进行初步调查及多样性分析。[方法]利用平板分离法分离3种饲料原料中的乳酸菌,再以MRS+CaCO3固体培养基进行筛选。对所分离得到的80株乳酸菌进行形态学观察、生理生化检测生理生化和16S rDNA基因序列鉴定可知8,0株乳酸菌分属于2个属,即乳杆菌属、肠球菌属;7个种,即干酪乳杆菌(lactobacillus casei)、鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)、副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)、肠道球菌(Entercoccus faecium)、耐久肠球菌(Entercoccus durans)、植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)、海氏肠球菌(Entercoccus hirae)。3种饲料原料中干酪乳杆菌和肠道球菌普遍存在。除了这2种乳酸菌外,小麦中还有鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌。苜蓿内有植物乳杆菌、副干酪乳杆菌、海氏肠球菌、耐久肠球菌。玉米内有植物乳杆菌、耐久肠球菌。[结论]新疆吐鲁番地区不同饲料中乳酸菌存在较大的多样性,干酪乳杆菌、肠道球菌等乳酸菌为饲料发酵的关键菌群,该试验结果为饲料乳酸菌资源开发及饲料乳酸菌应用提供了一定的理论基础。