单细胞蛋白研究进展

单细胞蛋白(Single cell protein简称SCP)又称微生物蛋白或菌体蛋白,是食品工业和饲料工业重要的蛋白质来源。本文介绍了单细胞蛋白的定义、特点,生产单细胞蛋白的微生物与原料,单细胞蛋白的安全性与营养性评价,SCP在食品和动物饲料中的用途以及单细胞蛋白生产的一般工艺。     

单细胞蛋白研究进展

单细胞蛋白(Single cell protein简称SCP)又称微生物蛋白或菌体蛋白,是食品工业和饲料工业重要的蛋白质来源。本文介绍了单细胞蛋白的定义、特点,生产单细胞蛋白的微生物与原料,单细胞蛋白的安全性与营养性评价,SCP在食品和动物饲料中的用途以及单细胞蛋白生产的一般工艺。     

基于营养副产物资源再利用的动物饲料单细胞蛋白生产及应用

本文介绍了以啤酒厂废水生产动物饲料单细胞蛋白的生产过程,分析了单细胞蛋白在白虾及断奶仔猪饲喂中的具体应用,以期为促进废弃物资源化利用提供参考。     

单细胞蛋白在鸡饲养中的营养功效

单细胞蛋白是一种具较高营养价值的饲料蛋白,介绍了单细胞蛋白的营养特点和在鸡饲养中的营养作用功效,并讨论了在生产应用中存在的问题。     

玉米秸秆发酵生产单细胞蛋白饲料前景研究

基于实践发现,利用玉米秸秆发酵生产单细胞蛋白饲料具有很大的发展前景,笔者结合多年的实践工作经验,首先对单细胞蛋白的相关理论进行介绍,然后结合单细胞蛋白的生物学特性,对玉米秸秆发酵生产单细胞蛋白饲料进行了详细的实验分析,希望能够为该种生物转化手段的应用推广提供借鉴。     

饲料酵母可部分或全部替代鱼粉养鱼

人们普遍认为鱼用配合饲料蛋白源以鱼粉最为理想.但目前实际情况,国产鱼粉质量不够稳定,而进口鱼粉价格昂贵.寻找替代鱼粉的蛋白源已成为水产养殖业的主要研究课题.根据实验研究,饲料酵母可作为替代鱼粉的蛋白饲料,具有广阔的发展前途.酵母是微生物饲料的一种.其营养物质丰富.包括单细胞蛋白(SCP)、氨基酸、脂肪、维生素、无机盐类及生物活性物质等,近年来引起各国高度重视.在国际方面已进行了大量研究.1967～1981年先后召开三次国际单细胞蛋白会议,认为微生物单细胞蛋白是解决粮食、饲料的有效途径.生产饲料酵母,原料资源充足,各国生产量很大,如日本、英国、苏联等一些国家都在积极发展单细胞蛋白生产.我国单细胞蛋白生产始于     

大力发展我国的单细胞蛋白工业

单细胞蛋白是一种采用工业生产方法生产出的一种蛋白质产品.1967年在联合国的主持下,在美国麻理工学院召开了第一次国际单细胞蛋白会议,并在会上作出决定,将微生物生产的蛋白易名为单细胞蛋白.单细胞蛋白生产菌种大都属于酵母菌,按其用途可分为食用酵母、药用酵母、饲料酵母等,以上均应称为单细胞蛋白.近年来,我国市场上出现了3种称为饲料酵母的商品.其共同特点是名称大致相同,粗蛋白含量都在45%以上.第一种市场上商品称为饲料酵母,生产工艺采用深层发酵培养,发酵菌种采用单一的酵母菌,培养基为糖蜜、淀粉水解液、豆腐厂的黄浆水、分离后的酒精水、淀粉厂的玉米浸泡水、造纸厂的亚硫酸废液、木材水解液等等.我国较大的生产厂家有江门酵母厂、上海酵母厂、石砚     

单细胞蛋白饲料

单细胞蛋白(Single cell protein)简称SCP,是单细胞生物生产的细胞蛋白质。利用廉价的碳源和氮源培养的单细胞生物体,作为动物蛋白质类饲料称细胞蛋白饲料。     

利用废弃物生产单细胞蛋白的资源化技术研究

介绍了单细胞蛋白的优点,详细阐述了单细胞蛋白的生产工艺及原料类型。     

谷氨酸废液生产的单细胞蛋白的代谢能及喂鸡效果

测试表明,谷氨酸废液生产的单细胞蛋白中试产品的代谢能(AME)为9.246MJ/kg,用单细胞蛋白代替配合饲料中70%的秘鲁鱼粉时,饲喂内用仔鸡和产蛋鸡的料肉比和料蛋比分别为2.15和2.93,相当于或优于单独使用秘鲁鱼粉.     

利用短小芽孢杆菌发酵马铃薯渣生产单细胞蛋白饲料的研究

研究以在马铃薯淀粉生产过程中产生的马铃薯渣与汁水为原料,以短小芽孢杆菌ZY05为发酵菌种,优化马铃薯薯渣液态发酵生产单细胞蛋白饲料的工艺.初步确定了马铃薯薯渣与汁水发酵的适宜条件.具体为除茵种外不添加任何外源物质,pH自然.发酵温度为37℃,转数为180 r·min-1,发酵时间为120 h.通过本项工艺获得的马铃薯渣...     

噬纤维菌和生孢噬纤维菌作为饲用蛋白质的综合评价

探索噬纤维菌(Cytophaga)和生孢噬纤维菌(Sporocytophaga)作为单细胞蛋白的潜力,旨在开发非常规蛋白质饲料。通过大量收集哈氏噬纤维菌和生孢噬纤维菌的菌体,检测蛋白质和氨基酸含量,并采用胃蛋白酶-胰蛋白酶体外两步消化法测定菌体蛋白消化率。研究结果显示:哈氏噬纤维菌和生孢噬纤维菌的菌体蛋白质含量50%左右,必需氨基酸含量与酵母菌相当;用其发酵液喂养昆明小鼠30 d,没有表现出毒性;哈氏噬纤维菌菌体的消化率在90%以上,生孢噬纤维菌的消化率也在65%左右,均远远高于对照酵母菌,为最突出的特点。希望从高消化率方面为单细胞蛋白的开发打开新思路。     

Studies on Single Cell Culture in vitro in Wheat--The variation of grain protein content and its fractions from regenerated plants

On the basis of previous studies dealing with the variation of major agronomic and yield characteristics of regenerated plants derived from single cell culture in vitro of common wheat (Triticum aestivum L.Cultivar NE 7742),the grain protein content and its fractions from regenerated plants with stable agronomic characteristics were studied from 1992 to 1995.The results showed that the variation of grain protein content and its fractions in somaclones from single cell culture in vitro were very significant and the range was very wide (11.53-17.70%).Several types of variation were found in the studies,espercially the type with higher protein content than that of cultivar NE 7742(non-culture parent).Among them.-20.69% of lines the grain protein content was significantly higher than that of NE 7742 and combined with high yielding potential.The tendency of variation of the four protein fractions showed that the variation of albumin was not obvious and maintained the same level as NE7742,the content of gliadin increased in some somaclones and decreased in others.However,the percentages both globulin and glutenin tended to increase.The variation of total amount of structural protein and the ratio between globulin and glutenin tended to increase.the variation of total amount of structural protein and the ratio between globulin and albumm was mainly influenced by globulin under the condition of culture in vitro.The variation of total amount of storage protein and the ratio between gliadin and glutenin was mainly by glutenin.The results mentioned above bemonstrated that the induction and screening of somaclonal variation could be an effective way in wheat improvement in combining high protein content with high yield.     

紫外线辐照对3种海洋微藻蛋白质含量的效应

［目的］为通过紫外线诱变育种的方法来提高海产单胞藻饵料蛋白质含量提供参考。［方法］采用波长为253.7 nm的紫外线,分别辐照盐藻、三角褐指藻以及湛江等鞭藻3种海洋微藻0、2、4、6、8、10 min,测定蛋白质含量,分析紫外线辐照对3种海洋微藻蛋白质含量的影响。［结果］紫外线辐照后,盐藻的蛋白质含量与对照相比,呈下降趋势, 由对照的6.70 mg/g,最低下降到2.32 mg/g;三角褐指藻经2～10 min照射,蛋白质含量均呈上升趋势,其中辐照时间2 min的处理上升幅度最大, 蛋白质含量升高到5.28 mg/g;湛江等鞭藻经过2、4、6 min的照射,蛋白质含量分别是对照的653%、737%和153%,明显增加,而经过8～10 min的照射,湛江等鞭藻死亡。［结论］紫外线辐照对不同藻类的蛋白质含量具有不同的效应。     

不同生态类型品种棉籽蛋白质与脂肪累积规律的研究

以不同生态类型棉花品种为材料,研究了棉铃发育过程中棉籽蛋白质和粗脂肪含量的动态变化,以及单铃棉籽蛋白质和粗脂肪累积规律;并建立了相应的数学模型,分析了不同生态类型棉花品种棉铃发育过程中棉籽蛋白质和粗脂肪百分含量的差异及单铃棉籽蛋白质和粗脂肪累积的差异.     

干旱-高温交叉逆境对小麦叶片蛋白质表达的影响

采用溶液培养、PEG处理等方法,研究干旱、高温单一逆境以及干旱-高温和高温-干旱交叉逆境下小麦叶片蛋白质含量和组分的变化,同时探究外源 Ca²⁺和 Ca²⁺螯合剂 EGTA 对交叉逆境下小麦叶片诱导蛋白表达的影响,以探讨Ca²⁺信使系统及逆境蛋白表达与交叉适应的关系。结果表明,逆境胁迫会引起小麦叶片可溶性蛋白含量的升高,且交叉逆境下可溶性蛋白含量高于单一逆境胁迫;对小麦叶片全蛋白进行 SDS-PAGE分析发现,逆境胁迫诱导产生新的蛋白质,其中最为显著的是分子质量为34.3 ku 和 24.0 ku 的两种新蛋白,且交叉逆境下两种逆境蛋白的百分含量明也显高于单一逆境,特别是干旱-高温交叉胁迫表达量最高。用不同浓度的Ca²⁺（CaCl₂）处理小麦幼苗,均可提高两种逆境蛋白的表达量;而EGTA对两种逆境蛋白的表达产生抑制作用。逆境下可溶性蛋白质（包括新的逆境蛋白）的表达是植物对不同逆境交叉适应的生理基础之一。可见,Ca²⁺作为胞内信使参与植物的逆境信号传递过程。     

转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印迹检测

【目的】制备抗CAS9蛋白质的单克隆抗体,建立转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印迹检测方法,了解CAS9蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以带Cas9的质粒DNA为模板,PCR扩增Cas9 5′端810 bp片段后克隆到p ET30a载体中,将酶切验证且序列正确的重组质粒转入表达菌Condon Plus中,经IPTG诱导表达CAS9蛋白质(N端270氨基酸),用纯化的重组蛋白质作为免疫原免疫小鼠,制备单克隆抗体,用免疫印迹分析筛选特异性和灵敏度高的抗体细胞株。用特异性引物PCR扩增转基因水稻的Cas9,用免疫印迹检测转基因水稻中的CAS9蛋白质。将重组CAS9蛋白质和带有CAS9的水稻苗期叶片蛋白质进行平行免疫印迹分析,用Image J软件采集信号绘制CAS9蛋白质的标准曲线,进而对水稻叶片中的CAS9蛋白质进行定量分析。提取单粒稻米的总蛋白质,稀释后用免疫印迹分析CAS9蛋白质的检测下限,提取多个时期、部位的水稻材料的总蛋白质,包括苗期的地上部和地下部,分蘖期的茎、茎节、叶鞘、叶片等,用SDS-PAGE分离后免疫印迹检测比较CAS9蛋白质的表达特征。【结果】通过体外克隆、诱导表达获得了纯化的重组CAS9蛋白质N端片段,免疫小鼠后得到42株阳性杂交瘤细胞株,经筛选鉴定到#12D2细胞株对水稻样品的检测具有较好的特异性和灵敏度。用该抗体通过免疫印迹检测了转基因水稻,所建立的免疫印迹方法对重组CAS9蛋白质的检测下限约为0.25 ng。在水稻苗期叶片中,CAS9蛋白质约占鲜重的0.00005%,可检出单粒稻米8%样品(约2 mg)中的CAS9蛋白质。在苗期地上部CAS9蛋白质的表达丰度高于地下部,分蘖期茎和叶片中表达量较高,根和叶鞘表达量较低。【结论】获得特异性强、灵敏度高的抗CAS9单克隆抗体,建立了检测转基因水稻中CAS9蛋白质的免疫印记方法,揭示了CAS9蛋白质在水稻不同部位的表达特征,并展示了在其他植物中的应用潜力。     

基于转录组的油茶DHHC型锌指蛋白基因家族的鉴定及分析

DHHC型锌指蛋白参与细胞内蛋白质的棕榈酰化修饰,对植物的生长发育、器官形成、生殖发育及胁迫响应等生命活动具有重要的调控作用。基于油茶叶片转录组数据,筛选出23个DHHC型锌指蛋白基因,应用生物信息学方法对其蛋白理化性质、结构域、系统进化等进行了分析。结果表明,23个DHHC型锌指蛋白的序列大小为195~725 aa,均包含一个保守的DHHC-CRD结构域,大部分DHHC型锌指蛋白具有4个跨膜区,主要定位于细胞核和细胞膜中。系统进化分析将其分为4类,与拟南芥和水稻均有不同程度的同源关系,DHHC型锌指蛋白在不同物种间具有遗传保守性。23个DHHC型锌指蛋白基因在结实量大和结实量小的单株的不同发育时期叶片中均有不同程度的表达。CoDHHC9、CoDHHC13、CoDHHC22在油茶抽梢生长期的叶片中表达上调;CoDHHC6、CoDHHC12、CoDHHC18、CoDHHC23在花芽分化时期和果实成熟时期的叶片中表达量较高,且在结实量较小而开花较多的单株中表达上调更为明显,这些基因可能参与油茶花芽分化及花朵发育过程;CoDHHC5、CoDHHC11、CoDHHC15在不同时期的叶片中表达量均较低。研究结果为进一步对油茶DHHC型锌指蛋白家族基因的克隆和功能分析提供依据,有助于进一步研究该基因家族在油茶生殖发育中的调控功能。     

流感病毒PA蛋白与宿主蛋白PCBP1的相互作用

【背景】PA蛋白是流感病毒RNA聚合酶复合体的重要组成部分,在流感病毒基因组的转录和复制过程中发挥重要作用。前期利用酵母双杂交技术(Y2H)筛选与流感病毒PA蛋白相互作用的宿主蛋白,获得多聚胞嘧啶结合蛋白1(poly(r C)-binding protein 1,PCBP1)。【目的】探索PCBP1蛋白与流感病毒PA蛋白的互作关系及其对流感病毒复制的影响,为深入理解流感病毒在宿主体内的复制调控机制提供数据。【方法】将诱饵质粒pGBKT7-PA与筛选到的重组质粒p GADT7-PCBP1以及阴性对照组和阳性对照组按照醋酸锂法分别共转化酵母感受态细胞,并涂布在3种营养缺陷型培养基上,30℃倒置培养5—7 d,观察酵母菌落生长情况和菌落颜色,回交验证PA蛋白与PCBP1蛋白在酵母系统中的相互作用。参照GenBank中录入的PA蛋白和人源PCBP1蛋白的序列,分别设计特异性扩增引物,构建真核重组表达质粒pCAGGS-Flag-PA和pCAGGS-Myc-PCBP1,将这两种真核表达质粒分别单独转染或共同转染HEK293T细胞,于转染48 h后裂解细胞,收获上清,留取少部分作对照,余下的样品逐步加入FLAG单抗和Protein G琼脂糖珠子进行免疫共沉淀(Co-IP),经SDS-PAGE和Western blot检测PA蛋白与PCBP1蛋白在哺乳动物细胞中的相互作用。利用慢病毒包装系统pLVX-IRES-Zs Green1在HEK293T细胞中包装假病毒,将假病毒侵染A549细胞后经超速流式分选构建PCBP1蛋白过表达细胞系,Western blot检测PCBP1过表达情况,然后用流感病毒WSN以0.01 MOI感染该过表达细胞系,于感染后24和48 h收获上清,对上清中的流感病毒进行蚀斑计数。合成PCBP1蛋白的si RNA,转染A549细胞下调PCBP1蛋白的表达,干扰后48 h通过Western blot检测PCBP1蛋白表达下调情况,并以MOI=0.01感染流感病毒WSN,收获感染后24和48 h的上清,进行蚀斑滴定计数。【结果】通过酵母回交验证发现诱饵质粒pGBKT7-PA与重组阳性质粒p GADT7-PCBP1的共转酵母菌落可以在SD/-2、SD/-4、SD/-4/X/A等3种营养缺陷型平板上正常生长,并且能分解底物X-α-Gal,使菌落呈现蓝色,与阳性对照组一致,表明PA蛋白与PCBP1蛋白在酵母系统中存在相互作用。免疫共沉淀试验发现PA蛋白可以将PCBP1蛋白沉淀下来,说明PA蛋白与PCBP1蛋白在哺乳动物细胞中存在相互作用。在PCBP1过表达细胞系中,PCBP1蛋白表达水平显著提高,流感病毒的复制滴度下降;而通过si RNA干扰后,PCBP1表达水平显著下降,流感病毒的复制滴度升高,表明PCBP1对流感病毒复制具有负调控作用。【结论】通过研究发现流感病毒PA蛋白与宿主蛋白PCBP1在酵母细胞和哺乳动物细胞中均存在相互作用,且宿主蛋白PCBP1对流感病毒的复制具有负调控作用。