三种酶制备牡蛎蛋白水解物的抗氧化活性和功能特性分析

目的：比较分析木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶三种不同酶水解牡蛎获得的蛋白产物抗氧化活性和功能特性。方法：采用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶三种不同酶水解牡蛎蛋白获得水解物,并分别测定它们的在不同pH下的溶解度、乳化性以及不同浓度水解物的还原能力、DPPH自由基清除率和Fe^{2 +}螯合能力。结果：表明三种酶水解物都有较高的溶解度(p＜0.01),胰蛋白酶产生的水解物溶解高度达94.8％(p＜0.05);水解物溶解度和乳化活性指数在pH4显著降低(p＜0.05)。牡蛎蛋白质水解产物的还原能力、DPPH自由基清除能力和金属螯合活性随浓度的增加而增强,其中胰蛋白酶和胃蛋白酶抗氧化能力较强(p＜0.01)。结论：三种蛋白酶水解牡蛎蛋白可获得抗氧化活性强、溶解度高的水解物,并受浓度和pH的影响,它们的水解物可作为一种潜在的抗氧化功能多肽利用。     

核桃蛋白中性蛋白酶水解物的制备及其抗氧化活性研究

[目的]研究制备核桃蛋白水解物的最佳工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]以核桃蛋白为底物,采用正交试验研究制备其中性蛋白酶水解物的工艺条件,通过测定自由基清除能力研究酶水解物的抗氧化活性。[结果]制备核桃蛋白酶水解物的最优工艺条件为:温度40℃、底物浓度4%、酶浓度4 000 U/g、pH值8.0;核桃蛋白酶水解物的水解度与其对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除能力有关,其水解度为24.2%时对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除率分别为17.0%和52.0%。[结论]采用Sephdex G-25凝胶柱层析对水解度为24.2%的酶水解物进行分离,得到了A、B、C和D 4种肽混合物,其中,肽混合物C的自由基清除能力最大,肽混合物D最小。     

长牡蛎蛋白双酶水解工艺及其产物的抗氧化活性

使用中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解长牡蛎(Crasostrea gigas)蛋白,采用单因素试验分析了水解时间、pH和酶用量比对水解度的影响,并在此基础上设计正交试验优化酶解的工艺条件,并测定了酶解产物的还原能力和对DPPH自由基的清除能力.结果表明,中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解牡蛎蛋白的最佳工艺条件为酶解时间3h、pH 7、U中性蛋白酶∶U 胰蛋白酶=1∶3,此时水解度为27.09％;酶解产物具一定的还原能力并对DPPH自由基有较强的清除作用.     

骨蛋白水解物抗氧化活性及其作用模式

 【目的】研究骨蛋白水解物的抗氧化活性及其抗氧化作用模式。【方法】将骨蛋白用碱性蛋白酶水解0.5～6 h,测定骨蛋白水解物的还原能力、金属螯合能力、清除自由基能力来综合分析骨蛋白水解物的抗氧化作用模式。【结果】骨蛋白水解物的自由基清除能力、Cu2+和Fe2+螯合能力以及还原能力均随水解时间的延长而增大,而且抗氧化活性随着水解物浓度的增加而增加。底物浓度为7％、水解5 h的骨蛋白水解物与其它水解条件下的水解物相比,具有较高的抗氧化活性和较强的清除自由基能力,且具有丁基羟基茴香醚（butylated hydroxyanisole,BHA）、没食子酸丙酯（proply gallate,PG）等抗氧化剂所不具备的金属螯合能力。7%的骨蛋白水解物与0.02% PG的抗氧化能力相近。尽管未水解的骨蛋白也有一定的抗氧化性,但其活性远低于骨蛋白水解物。【结论】骨蛋白水解物具有较高的抗氧化活性,可以作为金属离子螯合剂、氢供体和自由基稳定剂来抑制脂肪氧化。     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明:当时间为150 min、酶用量为6%、温度为45℃、pH为7.0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110 min、酶用量为3%、温度为65℃、pH为6.0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280 nm下的吸收峰值分别相吻合。     

鱼蛋白水解物功能特性的研究

主要研究了 p H值和蛋白浓度对鱼蛋白水解物的溶解性、稳定性、粘性、发泡性及泡沫稳定性等功能特性的影响。结果表明 ,水解产物具有很好的溶解性 ,在 p H2 .0 0～ 10 .0 0的范围内溶解性均大于 94 % ;具有优良的热稳定性和冷藏稳定性 ;水解产物的粘性较母本蛋白急剧下降 ,水解产物较原蛋白具有更好的起泡性 ,为初始体积的 3 .4 0～ 4 .3 0倍 ;水解产物无苦味、无鱼腥味     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

鲤鱼鱼鳞蛋白的酶解制备工艺及其抗氧化活性

[目的]确定鲤鱼鱼磷蛋白的酶解制备工艺,并分析所得的鱼磷抗氧化肽的抗氧化性能。[方法]以鲤鱼鱼鳞为原料,选用胰蛋白酶考察其加酶量、反应温度、酶解时间、pH、底物浓度等因素对鱼鳞蛋白水解程度的影响,用单因素及正交试验的方法优选出鱼鳞蛋白酶解的最佳条件并测定其抗氧化活性。[结果]试验得到鲤鱼鱼磷抗氧化肽酶法制备的最佳工艺条件为pH 8.4、酶解温度45℃、加酶量4000 U/g、酶解时间3 h、底物浓度15%,此条件下得到的鱼磷抗氧化肽水解度较佳(29.97%),抗氧化能力较好。[结论]胰蛋白酶有溶解鲤鱼鱼鳞蛋白的能力,并且酶解产物的抗氧化活性与水解度有关。     

长萼堇菜叶蛋白水解物的制备及其活性分析

以长萼堇菜(Viola inconspicua Blume)为材料,优选碱提酸沉法参数,提取其叶蛋白;采用酶法制备叶蛋白水解物;利用超滤法分离叶蛋白水解物组分,分析叶蛋白水解物的抗氧化活性,并对叶蛋白水解物组分进行固相萃取脱盐、HPLC分析及其对肿瘤细胞的抑制活性和对线虫寿命影响的测试。结果表明：采用料液比、碱提pH和酸沉pH分别为1∶9、10.0和4.5的参数组合可稳定提取长萼堇菜叶蛋白;优选的3种蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶)均能有效将水解物主要酶解为相对分子质量小于3.3×103的组分,并通过超滤可有效分离出相对分子质量分别为<1×103(PH1)、1×103~<3×103(PH2)和≥3×103(PH3)的3个组分;长萼堇菜蛋白水解物中PH1组分的抗氧化活性和抑肿瘤细胞活性优于其他组分;PH1和PH2延长线虫寿命的效果相近,都优于PH3。可见,长萼堇菜叶蛋白水解物组分PH1更具应用开发价值。     

舟山梭子蟹蛋白水解物的制备及活性研究

梭子蟹,学名Portunus trituberculatus,梭子蟹科,全球分布广泛。在舟山地区,梭子蟹的产量尤为巨大。由于产量较大,售价较低,影响了渔民的捕获积极性。同时,受现代保鲜保活技术的限制,梭子蟹捕捞后,不易存活,大量梭子蟹死后被丢弃,这大大浪费了资源,造成了渔民朋友和经销商的损失。为此,高值化利用梭子蟹的生产方式迫在眉睫。梭子蟹是一种高蛋白低脂肪的海洋鱼类,同时又富含微量元素。因此,对梭子蟹中的蛋白进行综合开发利用,既可以减少资源浪费,又可以创造更多价值,将会为渔业经济的发展带来新的增长点。以梭子蟹下脚料为原料,优化了梭子蟹抗氧化肽制备的工艺条件,探讨了超声预处理、分子量大小、分离纯化方法同抗氧化活性之间的关系。     

牛乳酪蛋白水解物的特性分析

牛乳酪蛋白经胰蛋白酶水解，对水解物进行氨基氮含量、水解度（DH）和游离氨基酸含量等测定，并通过SDS－PAGE电泳及Sephadex-G50凝胶层析，分析了相对分子质量的分布。结果表明，在水解条件为底物质量浓度50g/ml、pH7．4、温度45℃、酶量（m)：底物量（m）＝1：1000时，DH随时间延长而增大，水解前期DH增长迅速，3h后增长缓慢，6．0h的DH为20．48％。水解物中必需氨基酸含量约占游离氨基酸总量的73％－80％，此含量随水解时间的延长略有降低；水解物相对分子质量随DH的升高有所减小，经2－3h水解的产物，相对分子质量分布主要集中于2500－3400范围。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

牡蛎蛋白肽的制备及促进生长发育功能

[目的]研究牡蛎蛋白肽的制备工艺及其功能活性评价。[方法]以新鲜无壳牡蛎为原料,采用胰酶酶解的方法制备牡蛎活性肽,经膜分离后使用HPLC测定其相对分子质量分布,使用断乳SD大鼠进行促进生长发育功能评价。[结果]得到均分子量为750 Da的活性肽,该活性肽在灌胃给药剂量为2.0 g/kg(剂量/体重)时,具有改善大鼠生长发育的功能。[结论]该研究对牡蛎肽的生产具有一定指导意义。     

酶促水解制备猪脑抗氧化活性肽

本文以新鲜猪脑为原材料,比较了13种生产用酶的酶解效率;采用筛选的几种较优酶进行酶解,获得酶解产物,经超滤分离获取不同分子质量的多肽,探究其总抗氧化能力;最后基于总抗氧化能力,优化猪脑抗氧化活性肽的酶解工艺。对13种酶进行筛选发现,胃蛋白酶、Ban 480 L、Palatase 2000 L和胰蛋白酶的酶解率显著高于其他酶。分子截留后发现分子量<1 ku组分的总抗氧化能力显著高于1~5 ku组分,且胰蛋白酶酶解产物中<1 ku组分的总抗氧化能力显著高于胃蛋白酶和Palatase 2000 L酶解产物;在加酶量20 mg、酶解时间3 h、酶解温度40 ℃、pH 7.0的条件下,胰蛋白酶酶解猪脑最佳,此时总抗氧化能力为17.03 mmol·g^-1。     

木瓜蛋白酶水解核桃蛋白的工艺条件优化及水解物抗氧化活性研究

[目的]研究采用木瓜蛋白酶水解核桃蛋白的工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]采用正交试验法确定木瓜蛋白酶水解核桃蛋白的最适工艺条件,采用Sephadex G-25凝胶色谱分离酶水解物,通过测定羟自由基（OH·）和超氧阴离子自由基清除能力研究了酶水解物的抗氧化活性。[结果]核桃蛋白木瓜蛋白酶水解的最优奈件是温度55℃,底物浓度4％,酶浓度60000U／g,pH值8．0;在水解度达到38．4％时,其酶解产物对羟自由基（OH·）和超氧阴离子自由基（O2·）的清除率分别为22．5％和46．4％。采用Sephadex G-25凝胶柱层析对水解度38．4％的酶水解物进行分离得到了A、B、C和D4个肽片段,其中肽片段c的自由基清除能力最大。[结论]核桃蛋白木瓜蛋白酶水解物具有一定抗氧化活性。     

酶解米糠制备低聚糖阿魏酸酯及其抗氧化活性分析

以米糠为原料,采用酶水解法从米糠中提取低聚糖阿魏酸酯(FOs)。以FOs的提取量为指标,研究酶浓度、温度、pH和反应时间等4个提取因素对酶解效果的影响。结果表明,当料液比为1∶25(g/mL)时,酶解最佳条件为:酶浓度1 800 U/mL,温度45℃,pH 4.0,酶解时间24 h;此时,米糠中所提取FOs的平均含量可达0.93 mmol/L。在此基础上,通过DPPH、羟自由基、超氧阴离子清除率和还原力测定,结果表明FOs具有较强的抗氧化活性,其中,FOs对超氧阴离子的清除能力和还原力与剂量呈线性相关。     

酶解鱼鳔蛋白制备抗氧化肽的研究

[目的]探索利用鱼鳔蛋白制备抗氧化肽的最佳条件。[方法]采用胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶酶解海南鱼鳔,以酶解液清除DPPH的效果为评价指标,采用单因素试验和响应面试验,研究酶解的pH、温度、时间、底物浓度、酶浓度等因素对酶解效果的影响。[结果]鱼鳔的最佳酶解条件为底物浓度6.0%,酶浓度1.6%,酶解pH 6.0,酶解时间4.1 h,酶解温度63℃;该条件下制备的鱼鳔抗氧化肽对DPPH自由基的清除率达76.06%。[结论]该研究为鱼鳔蛋白的开发利用提供了科学依据。     

酶解法制备柑橘皮渣膳食纤维的理化特性及抗氧化活性

为探究不同柑橘膳食纤维的性能差异及提高柑橘加工副产物综合利用率,利用酶解法制备4种柑橘（脐橙、苹果柚、沃柑、柠檬）皮渣膳食纤维,采用扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱及X射线衍射对纤维形态结构进行表征,并测定理化性质及体外抗氧化活性,通过主成分分析评价不同柑橘纤维综合品质。结果显示,酶法制备的柑橘纤维性能存在品种差异,柠檬纤维总纤维含量（67.63±0.46）%最高,脐橙纤维组成比例最好,沃柑、脐橙纤维水合性能和体外抗氧化活性最强,苹果柚纤维在4种纤维中表现出最高表观黏度。综合评价从高到低排序为：脐橙纤维、沃柑纤维、苹果柚纤维、柠檬纤维。结果表明,酶法制备的4种柑橘膳食纤维均有较好生理活性,其中脐橙纤维综合品质最佳,作为食品添加剂有较广应用前景。     

菲律宾蛤仔木瓜蛋白酶水解物抗氧化活性研究

以菲律宾蛤仔蛋白为原料,用木瓜蛋白酶对其进行水解,采用正交实验方法研究酶解温度、酶解时间,加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH自由基清除、超氧阴离子自由基清除率和还原力评价水解物的抗氧化性。结果表明：水解度与抗氧化性之间没有正反相关系,当温度为45℃,时间为6 h,加酶量为1 500μg/g,pH为7.0时,水解度最大;温度为45℃,时间为2 h,加酶量为2 000μg/g,pH为7.0时,水解物的抗氧化活性最强;水解物对羟自由、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均有很好的清除作用,并呈现浓度依赖性。因此,菲律宾蛤仔蛋白的木瓜蛋白酶水解物具有很好的抗氧化性。