7种中药成分对新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响

将氧化苦参碱、甘草酸、黄芪多糖、栀子苷、绿原酸、虎杖苷和木犀草素等7种中药成分稀释成安全浓度范围内的高、中、低3种浓度,分别与NDV以3种方式加入到培养成单层的CEF的培养体系中,用MTT法测定NDV感染细胞能力的变化.结果表明,先加中药后加病毒时,氧化苦参碱、甘草酸、黄芪多糖的高、中浓度、栀子苷高浓度显著抑制病毒感染细胞;先加病毒后加中药时,氧化苦参碱的高、中浓度、黄芪多糖的中、低浓度显著抑制病毒感染细胞;中药与病毒同时加入时,氧化苦参碱的高、中浓度,黄芪多糖的高、中、低浓度和甘草酸高浓度显著抑制病毒感染细胞.绿原酸、虎杖苷和木犀草素3种中药成分无论是哪种加药方式均无抑制NDV感染细胞的作用.     

3种中药及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究

为研究板蓝根、黄芪和青蒿及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用,本试验在研究板蓝根、黄芪和青蒿及其提取物对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上,研究3种中药提取物体外抗PRRSV的作用。结果显示,板蓝根多糖、黄芪多糖和青蒿素3种中药提取物对Marc-145细胞安全浓度分别为为0.03、0.03和0.06 mg/mL,板蓝根、黄芪和青蒿3种中药单方的安全浓度分别为6.25、6.25和3.13 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中,3种中药单方中黄芪的阻断作用最强,能达到100%的保护率,中药提取物中板蓝根多糖对PRRSV的阻断作用最强,在浓度为0.031 mg/mL时对细胞保护率能达到48.03%,青蒿素最差,在0.16 mg/mL时就已不具有阻断作用。板蓝根多糖对病毒不具有直接杀灭作用,黄芪多糖和青蒿素在浓度为0.32 mg/mL时,保护率都是20%左右;黄芪的直接杀灭作用保护率为100%,且非常稳定,青蒿在浓度较高时还有促进细胞生长的作用,但稳定性差,随浓度降低其保护率迅速下降。在对病毒的抑制作用试验中,3种中药提取物的作用相当,浓度为0.01 mg/mL时,板蓝根多糖、黄芪多糖和青蒿素多糖对细胞的保护率分别为24.57%、24.30%和26.20%;而3种中药单方的细胞保护率都能达到100%甚至以上。综合3种作用方式可知,3种中药提取物中,黄芪多糖的抗PRRSV作用最好,青蒿素次之,板蓝根多糖最差;3种中药单方中黄芪的效果最好,青蒿最差。因此,可知黄芪及其提取物具有非常强的抗PRRSV作用,可对其进行进一步研究,以供临床上使用。     

金英黄归汤中几个有效成分的分析

为了研究自制金英黄归汤中的有效成分。采用紫外分光光度法和高效液相色谱法定量检测金英黄归汤中几个有效成分,以期为金英黄归汤的质量控制提供一定的参考依据。结果:紫外分光光度法测得金英黄归汤中总皂苷、总黄酮和总多糖的含量分别为1.835 mg/m L和0.091 mg/m L、98.96 mg/m L;高效液相色谱法测得金英黄归汤中槲皮素、芦丁、木犀草素、绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷、阿魏酸的含量分别为1.69μg/m L、1.70μg/m L、0.71μg/m L、32.45μg/m L、36.43μg/m L、3.56μg/m L、0.95μg/m L。表明绿原酸、连翘酯苷A、总多糖在金英黄归汤中占有较大的含量,可以确定为本制剂的质量控制指标。     

抗羊传染性脓疱病毒中药组方的筛选

为了给临床兽医提供可靠的抗羊传染性脓疱病毒中药组方,试验从甘草苷、绿原酸、黄芩苷、咖啡酸、栀子苷、黄芪多糖及板蓝根多糖中选取三种中药成分按照一定比例组成10个中药组方,利用细胞病变(CPE)观察和MTT比色相结合的方法,在细胞上筛选出抗羊传染性脓疱病毒作用较强的组方。结果表明:通过细胞筛选,组方Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的抗病毒效果最好,并且不同组方加入方式和组方浓度均对其抗病毒能力有一定影响。     

利巴韦林、病毒灵、黄芪多糖体外抗ALV-J的活性试验

为寻求抗ALV—J感染雏鸡用药物,通过CCK-8试剂盒检测细胞活力以确定利巴韦林、病毒灵和黄芪多糖对DFl细胞的最大安全浓度,用ELISA试剂盒检测ALV—JP27抗原表达量,以确定上述抗病毒药物体外抗ALV—J活性。结果显示,利巴韦林、病毒灵和黄芪多糖对DFl细胞的最大安全浓度分别为0．0391、0．0625和0．0625mg／mL。在安全范围内,利巴韦林对P27的表达量具有明显的抑制作用,黄芪多糖在0．0039～O．0625mg／mL安全浓度范围内明显抑制P27的表达,病毒灵在安全范围内对P27的表达基本上没有抑制作用。试验表明,利巴韦林和黄芪多糖对ALV-J的增殖有明显的抑制作用,有望作为该病净化的辅助性防制药物。     

三种中药提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用

在前期筛选具有抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)作用的中药研究基础上,选取药效较好的三种中药：穿心莲、芦根和夏枯草。为进一步研究其有效抗病毒成分,采用MTT 法观察了穿心莲内酯盐、芦根多糖和夏枯草多糖成分对猴肾上皮细胞系(Marc-145) 生长的影响,分别采用阻断、抑制、直接杀灭3种作用方式观察了各成分抗RPPSV感染作用。结果显示：穿心莲内酯盐对细胞最大安全浓度为0.16 mg/mL,芦根多糖为0.575 mg/mL,夏枯草多糖为1.125 mg/mL;芦根多糖在三种方式上均有不同程度的抗PRRSV作用,而穿心莲内酯盐和夏枯草多糖阻断PRRSV作用不明显,抑制和杀灭PRRSV作用明显。结果表明穿心莲内酯盐、芦根多糖和夏枯草多糖均有抗病毒作用,为抗病毒中药的主要药效成分。     

黄芩苷、连翘酯苷对肺微血管内皮细胞分泌IFN-α、IFN-γ的影响

为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs）分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌IFN-α和IFN-γ的量。结果表明,黄芩苷在10 μg/mL,24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量均最高,连翘酯苷分别在20 μg/mL、12 h时和5 μg/mL、24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量最高。这一结果为体外筛选诱导PMVECs表达干扰素的中药成分提供了参考,为进一步研究中药成分的抗病毒机理奠定了基础。     

中药对奶牛乳房炎6种主要病原菌的体外抗菌活性筛选试验

目的:筛选对奶牛乳房炎主要病原菌抗菌活性较强的中药。方法:选取治疗乳房炎常用的中药20味进行超声提取,用微量肉汤法对6种奶牛乳房炎主要致病菌进行体外抗菌活性筛选试验。结果:当环丙沙星对金黄色葡萄球菌标准株ATCC29213的最小抑菌浓度都在要求抑菌范围内,说明菌数符合要求;对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度小于6.25 mg/mL的中药有甘草、黄连、大黄、黄芩、连翘、地肤子、远志、知母和丹参;对大肠杆菌最小抑菌浓度小于6.25 mg/mL的中药有黄连、黄芩和连翘;对无乳链球菌和副乳房链球菌最小抑菌浓度小于6.25 mg/mL的中药有黄连、甘草和知母;对停乳链球菌,最小抑菌浓度小于6.25 mg/mL的中药有甘草、黄连、知母、地肤子、远志和大黄;对肺炎克雷伯菌,20味中药的最小抑菌浓度均大于50 mg/mL。结论:不同中药提取物对不同细菌的最小抑菌浓度不同,其中黄连、甘草、黄芩、大黄、知母、连翘、丹参等对奶牛乳房炎6种病原菌抗菌活性均较强,且抗菌活性强的中药大多为清热解毒类。     

抗猪繁殖与呼吸障碍综合征中药单体成分的体外筛选

为体外筛选具有抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）的中药单体，本研究选择4味有效的中药单体成分，以Marc-145细胞为靶细胞，从阻断吸附、抑制复制和直接杀灭3个层面进行抗PRRSV研究，以CPE、病毒滴度评价药物抗PRRSV的效果。结果显示，绿原酸和连翘苷可明显抑制PRRSV在细胞内的复制|适当浓度的奎宁酸、绿原酸和连翘苷对PRRSV有较好的直接杀灭效果。综合阻断吸附、抑制复制和直接杀灭效果，绿原酸和连翘苷是理想的抗PRRSV中药单体药物。本研究为猪繁殖与呼吸障碍综合征防控提供了试验依据。 [关键词]猪繁殖与呼吸综合征|中药单体|抗病毒|病毒复制     

中药在vero细胞上的最大安全浓度测定方法的比较

为了测定黄芪、板蓝根、甘草、黄芩、败酱草在vero细胞上的最大安全浓度,将各中药两倍比稀释加入到长满单层的vero细胞板上,通过比较形态学观察法和MTT法,测定各中药在vero细胞上的最大安全浓度。结果显示,黄芪、板蓝根、甘草、黄芩、败酱草通过形态学观察法测得的最大安全浓度分别为78.25、35、12.5、4.688、5.23 mg/mL;MTT法测定的最大安全浓度分别为39.13、35、6.25、0.59、2.62 mg/mL。其中黄芪对细胞的毒性最低,黄芩对细胞的毒性最高。通过MTT法测得最大安全浓度比形态学观察法大约要低,说明MTT法比形态学观察法更加灵敏。     

中药成分对培养细胞的生长和抵抗病毒感染的影响

将 5种浓度的含当归多糖 (CAPS)、黄芪多糖 (APS)、板蓝根多糖 (IRPS)、淫羊藿多糖 (EPS)、蜂胶多糖 (PPS)、淫羊藿黄酮 (EF)、蜂胶黄酮 (PF)、黄芪黄酮 (AF)、黄芪皂甙 (AS)和人参皂甙 (GS) 1 0种中药成分分别加入到已培养 48h、 1 2h前接种新城疫病毒的鸡胚成纤维(CEF)细胞单层中 ,于病毒接种后 72h用中性红染料吸收法测定CEF细胞的活性 ,以评价各中药成分对培养细胞的生长和抗病毒感染的影响。结果表明 ,EF、PPS和PF显著促进细胞生长 ,CAPS、IRPS和GS显著抑制细胞生长 ,EF、GS、PPS、AF、PF、APS和EPS 7种中药成分显著抑制病毒感染 ;部分中药成分的作用各有所长 ,且有一定的量效关系。     

几种天然药物成分在体外CEF中最大安全浓度的测定

采用组织细胞培养方法，测试了板蓝根多糖、当归多糖、黄芪多糖、黄芪皂甙、人参皂、淫羊藿多糖、蜂胶多糖、蜂胶黄酮、黄芪黄酮、羊藿黄酮共10种天然药物成分在鸡胚成纤维细胞（CEF）体外培养中的最大安全浓度。结果表明：黄芪多糖、当归多糖对鸡胚成纤维细胞毒性最低，最大安全达1562.5μg/mL，其后依次是板蓝根多糖、人参皂甙、黄芪黄酮、黄芪皂甙、蜂胶黄酮的毒性最大，其最大安全浓度仅4.883μg/mL。多糖成分的毒性较黄酮成分小。     

7 味中药对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验研究

选用紫锥菊、金银花、连翘、紫苏、杜仲叶、黄芪、甘草7 味中药,分别采用75%乙醇回流法提取2 次,浓缩至每毫升含1 g生药,采用试管二倍稀释法测定其对奶牛乳房炎的3 种主要致病菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。体外抑菌结果显示：以金银花和甘草对金黄色葡萄球菌抑菌效果最强,MIC值均为15.63 mg/mL,MBC值均为31.25 mg/mL;紫锥菊对大肠杆菌的效果最强,MIC值为15.63 mg/mL,MBC值为31.25 mg/mL;金银花和连翘对无乳链球菌抑菌效果最强,MIC值均为31.25 mg/mL,MBC值均为62.50 mg/mL。结果表明：所选中药金银花和甘草对金黄色葡萄球菌具有抑制作用;紫锥菊对大肠杆菌具有抑制作用;金银花和连翘对无乳链球菌具有抑制作用。     

8种中药成分体外抗犬细小病毒的研究

本研究旨在观察8种中药成分黄芪多糖（APS）,白术多糖（RAPS）,黄芩多糖（BSPS）,金银花多糖（FLPS）,栀子苷（CS）,苦参生物碱（SFA）,黄芪皂苷（AS）和金银花黄酮（FLF）体外对犬细小病毒（CPV）感染细胞能力的影响。分别将8种中药成分通过先加中药再接病毒、病毒和中药感作后加入和先接种病毒再加中药3种加药方式加入到培养24h的F81细胞中,于病毒接种后72h用MTT法测定F81细胞活性以评价各中药成分对F81细胞抵抗犬细小病毒感染的影响。结果,在第1种加药方式下,APS、RAPS、BSPS、FLPS抗CPV作用较强;在第2种加药方式下CS的抗病毒作用最为显著;在第3种加药方式下CS、SFA抗病毒作用最为显著。结果表明,8种中药成分均能不同程度地促进F81细胞抵抗病毒感染,部分中药成分的抗病毒作用与加药方式有关且呈一定的量效关系。     

野生麻花秦艽中化感活性物质对牧草萌发及生理特性的影响

采用超声提取法从野生麻花秦艽中提取龙胆苦苷(gentiopicroside)和黄酮(flavonoids),用不同浓度龙胆苦苷和黄酮提取液处理受试植物紫花苜蓿、红三叶和白三叶,通过对受试植物种子萌发和幼苗生理特性[苗高、根长、鲜重以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)3种抗氧化酶活性]的研究,探讨了野生麻花秦艽的化感作用及抗氧化性。研究表明,野生麻花秦艽中龙胆苦苷和黄酮提取液对受体植物的种子萌发和幼苗生长大多表现出化感抑制作用,仅龙胆苦苷浓度为2.52 mg/mL时,对白三叶的苗高表现出促进生长的作用;随龙胆苦苷和黄酮提取液浓度增大,对3种抗氧化酶活性影响程度不同:3种受体植物幼苗体内的POD和CAT的活性分别在6.30和1.95 mg/mL时达到最大值,紫花苜蓿幼苗体内SOD活性在浓度分别为12.60和3.90 mg/mL时活性最大,分别为22.971和25.013 U/g,红三叶和白三叶幼苗体内的SOD活性在6.30和1.95 mg/mL时达到最大值,说明不同植物对化感胁迫的耐受能力不同,紫花苜蓿对化感胁迫的耐受能力强于红三叶和白三叶。     

黄芪多糖对巨噬细胞活化及其吞噬功能的影响

为研究黄芪多糖对巨噬细胞增殖、抗原呈递与吞噬活性的影响,揭示黄芪多糖免疫调节作用机制,试验采用不同浓度的黄芪多糖(0、0.1、1、10、50、100μg/mL)处理巨噬细胞12 h,用CCK-8比色法检测细胞增殖活性,用流式细胞仪检测细胞表面CD80、CD86、MHC-II分子表达及细胞吞噬活性.结果发现:与对照组相比...     

HPLC法同时测定连花柴芩可溶性粉中4种有效成分含量

建立HPLC法同时测定连花柴芩可溶性粉中绿原酸、甘草苷、连翘酯苷A及黄芩苷的含量。采用Venusil XBP C18分析柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,1.0 mL/min的流速下进行梯度洗脱,320 nm波长处对4种成分进行含量测定。结果表明,在此色谱条件下,4种组分分离度良好,分别在3.28~26.24 μg/mL、3.17~25.36 μg/mL、6.08~48.64 μg/mL及8.81~70.48 μg/mL范围内线性关系良好,加样回收率均大于96.61 %,RSD均小于1.75 %。该方法简便、快速、准确,重复性良好,可用于连花柴芩可溶性粉中绿原酸、甘草苷、连翘酯苷A及黄芩苷的同时测定。     

不同种类浒苔多糖的体外抗菌活性研究

为研究浒苔多糖粗提物、浒苔多糖硒的抑菌活性,本试验以硫酸黏杆菌素、林可霉素、黄芪多糖和酵母细胞壁多糖为对照品,采用药敏试验检测浒苔多糖粗提物、浒苔多糖硒对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明:10～100 mg/mL浓度的浒苔多糖粗提物对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均未产生抑菌作用,浓度为20、50、100 mg/mL的浒苔多糖硒对金黄色葡萄球菌的抑菌圈和抑菌活性分别为6 mm(-)、8 mm(+)、18 mm(++),对大肠杆菌、沙门氏菌未产生抑菌作用。     

黄芪多糖在动物机体免疫中的作用

黄芪多糖(APS)是中药黄芪的主要活性成分,具有增强免疫系统功能、抗炎症、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老、降血糖等作用.研究表明APS可通过增强巨噬细胞、B细胞、NK细胞活性.并促进IL-2、肿瘤坏死因子㈣等细胞因子的产生,促进T淋巴细胞的增殖转化,从而全面提高机体的免疫力.本文从黄芪多糖调节免疫细胞以及细胞因子和胞内信使物质等方面综述了近年来黄芪多糖增强机体免疫的研究概况.     

黄芪多糖对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌作用

采用水提醇治法提取黄芪多糖,并应用琼脂扩散法研究了黄芪多糖对几种奶牛乳房炎主要致病菌的抑制效果。结果表明,10 mg/mL的黄芪多糖对3种细菌都有一定的抑制效果,其中对大肠埃希菌的抑制作用最强,抑菌圈达11.05 mm±0.31 mm,对链球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为8.50 mm±0.71 mm和9.32 mm±0.21 mm。3种细菌的最小抑菌浓度不同,对大肠埃希菌的最小抑菌浓度为6.6 mg/mL,而对金黄色葡萄球菌和链球菌则为10.0 mg/mL。