披针叶黄华碱成分分析研究

目的:研究披针叶黄华碱的种类及含量。方法:采用超声波辅助甲醇浸提法、硅胶柱层析分离结晶技术从披针叶黄华全草粉中分离生物碱,利用GC-MS对总碱和结晶进行分析测定。结果:分离获得生物碱结晶Ⅰ、结晶Ⅱ,总碱中含有7种喹诺里西啶类生物碱,其中结晶Ⅰ为黄华碱,结晶Ⅱ为金雀花碱。结论:本试验为进一步研究披针叶黄华碱的生物活性提供了理论依据。     

披针叶黄华

1　形态特征披针叶黄华 ( Thermopsis lanceolala R.Br.) ,别名野决明、苦豆子。多年生草本 ,高 1 8～ 2 0 cm,全株披黄白色长柔毛。茎直立 ,单一或分枝 ,基部具厚膜质鞘。掌状三出复叶 ,具 3小叶 ,小叶倒披针形成矩圆状倒卵形 ,长 2 .5～ 4.5 cm,宽 0 .5～1 .0 cm,基部渐狭 ,全缘 ,两面密生平伏长柔毛 ,小叶柄短。托叶 2 ,卵状披针形 ,先端锐尖 ,基部稍联合 ,长 1 .5～ 2 .5 cm,宽 4～ 7mm,被长柔毛。总状花序顶生 ,苞片 3个 ,轮生 ,卵形 ,基部联合。花黄色 ,每 2～ 3朵轮生 ,长 2 5～ 2 8mm。花萼筒状钟形 ,略成二唇形 ,长 1 .6cm,密生平伏长柔毛 ,萼齿披针形 ,长 5～ 8mm。旗瓣近圆形 ,基部渐狭或呈爪状 ,顶端微凹。翼瓣与龙骨瓣比旗瓣短 ,有耳有爪。子房条形 ,密被毛 ,具短柄。荚果扁 ,条状矩圆形 ,长 5～ 9cm,宽 7～1 2 cm,顶端具喙 ,密生短柔毛 ,含种子 6～ 1 4粒 ,种子近肾形 ,黑褐色 ,有光泽。2　地理分布主要分布于东北、华北、西北及四川、西藏。前苏联、蒙...     

披针叶黄华碱体外细胞毒性的研究

目前,一些植物中的生物碱成分已被开发成抗癌药应用于临床,并显示出很好的临床效果[1-2]。披针叶黄华碱具有多方面的药理作用[3-4],特别是该类化合物的抗癌活性引起了研究人员的兴趣。披针叶黄华碱所含的生物碱成分多样,生物碱单体是否具有抗癌作用及在总碱中所起的作用,有待于进一步研究。本试验对披针叶黄华碱的体外细胞毒性进行了研究,     

披针叶黄华碱对细胞免疫功能的影响

为研究披针叶黄华碱对小鼠细胞免疫功能的影响。取80只小鼠,按灌服剂量为6、13、25mg/kg,共分3个试验组和1个蒸馏水对照组(0.5ml/d),连续给药20d,观察披针叶黄华碱对小鼠体重、脏器质量、脏器指数、巨噬细胞吞噬能力及淋巴细胞数量的影响。结果表明,与对照组相比,灌服3个不同浓度披针叶黄华碱后小鼠体重、脏器质量、脏器指数、巨噬细胞的吞噬能力及淋巴细胞数量均有所降低。在本试验条件下,中高浓度的披针叶黄华碱对小鼠的免疫功能有抑制作用。     

披针叶黄华碱对小鼠半数致死量的测定

目的：以小鼠为试验动物,对披针叶黄华碱的毒性进行研究,测定其生物碱组分的半数致死量.方法：用体积分数为95％的乙醇结合超声波对披针叶黄华植物进行提取,以小鼠为试验动物,研究拨针叶黄华碱氯仿萃取组分的毒性.结果：通过试验测得披针叶黄华碱萃取组分的半数致死量为127.04 mg/kg,95％可信限为115.41-139.72 mg/kg.结论：试验结果与报道数据差异较大,可能与试验方法、萃取药液的实际浓度等因素有关.     

绵羊披针叶黄华中毒病的研究

调查、分析了二十几年来阿左旗绵羊披针叶黄华中毒病的流行情况及典型病例．涉及7个群1141只羊，其中绵羊762只。发生中毒的绵羊196只．中毒率25．72％．死亡85只，死亡率43．37％．治疗23只，治愈21只，治愈率91．30％。披针叶黄华常规营养成分含量(％)：干物质89．70、粗灰分8．20、粗脂肪3．10、粗纤维16．50、粗蛋白14．60、钙2．13、磷0．09、无氮浸出物47．30；营养元素含量(mg／kg)：铜8．380、锌10．400、铁443、锰50．700、钴0．300、硒0．189；总生物碱含量1．89％．其中含有14种化合物．12种化合物已鉴定出分子结构，2种待定。生物碱中起主导作用．造成动物中毒的主要是臭豆碱、黄华碱和金雀花碱三种。用小白鼠和山羊分别进行毒性试验，以不同剂量的总生物碱给小白鼠灌服，300mg／kg体重的2—3．5min内急性死亡．剂量为200mg／kg体重的7d出现死亡，其它在14d左右出现明显的中毒症状．剖栓尸体，脏器均有不同程度的病变；每天以5g／kg体重剂量的毒草干草粉饲喂山羊．30d后出现体重下降、食欲不振等中毒症状，剖栓尸体，除心脏无肉眼可见的病变外．其它脏器均有不同程度的病理变化。     

披针叶黄华对奶山羊的毒性

4只杂种奶山羊按5g/kg体重剂量投服披针叶黄华干草粉,分别于试验的第0、7、14、28、35、42天采血样作血常规、血清酶学及血清生化指标检验,并每天观察临床症状,试验结束时剖检进行病理学检查,结果表明:受试羊于试验的第30天开始出现中毒症状,表现为体重下降,机体消瘦,被毛粗乱,于试验的第41天出现运动异常,驱赶时突然倒地;血红蛋白含量和白细胞数升高,与试验前比较差异显著(P<0 05);血清谷草转氨酶活性和碱性磷酸酶活性明显升高,与试验前相比较差异极显著(P<0 01);血清尿素氮从第14天起显著下降,与试验前比较差异极显著(P<0 01);剖检变化以组织器官肿大、出血为主,组织学检查以组织脏器出现空泡化为主,超微结构检查,首次观察到肝脏胶原纤维增生。     

披针叶黄华生物碱的毒性试验研究

通过披针叶黄华碱对小鼠毒性试验的研究,复制出喹喏里西啶类生物碱中毒病理学模型。结果表明,小鼠一次性灌服总碱200mg/kg时,即出现急性中毒死亡,由此大致推断其LD50≤200mg/kg;对慢性中毒小鼠的血液生化检查中发现,披针叶黄华碱可使小鼠体内血红蛋白、红细胞、白细胞数量升高,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)含量升高,尿素氮(BUN)浓度下降;对慢性中毒小鼠的临床病理学检查中发现,以心、肝、肺、肾实质器官的细胞变性坏死为主,尤其是以肝脏、肾脏的损伤较为严重,也说明披针叶黄华碱毒性作用的靶器官可能是肝脏和肾脏。     

披针叶黄华试管苗玻璃化特性的研究

以披针叶黄华（Thermopsis lanceolata）试管正常苗和玻璃苗为材料,从解剖结构及生理生化2方面探讨了披针叶黄华试管苗玻璃化的机理。结果表明：玻璃苗叶表皮细胞不完整,栅栏组织退化消失,叶肉细胞的细胞壁发育不完全而出现大的裂隙腔,茎维管组织分化不完全等都与正常苗的解剖结构有较大差异。在生理生化方面,与正常试管苗相比,玻璃苗的组织含水量增加3.80%,纤维素含量和苯丙氨酸解氨酶活性分别降低85.72%和26.31%;叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总量分别降低43.75%,53.36%和45.83%,而叶绿素a/b升高了27.12%;可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量、淀粉及干物质积累较正常苗低38.71%, 46.37%, 30.77% 和26.85%;丙二醛（MDA）含量和电解质渗出率则高112.5% 和16.40%。说明玻璃苗的茎叶解剖结构与正常试管苗相比发生了较大变化,脂质过氧化加剧,膜结构和功能受损,使其水分代谢、光合能力、蛋白质合成和糖代谢方面显著不同,生理功能发生了紊乱。     

披针叶黄华碱对奶牛子宫内膜炎病原菌增殖的影响

为研究披针叶黄华碱对奶牛产后子宫内膜炎致病菌的体外抗菌活性,采集宁夏地区20头确诊为子宫内膜炎的患牛子宫黏液,通过有氧条件和厌氧条件培养,依据细菌形态学和生化特性进行分离鉴定。利用披针叶黄华碱中的总碱、黄华碱、四氢脱氧阿艮亭碱、金雀花碱进行药物敏感试验,以试管双倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,患牛细菌感染率为100%,病料分离细菌68株,其中大肠埃希菌占55.8%,溶血性链球菌占20.5%,非溶血性链球菌占14.7%,沙门菌占9.0%。披针叶黄华总碱、黄华碱、四氢脱氧阿艮亭碱对大肠埃希菌、溶血性链球菌、非溶血性链球菌、沙门菌均有一定的抗菌活性,其中最为敏感的是非溶血性链球菌,MIC为15.63 mg/mL~62.5 mg/mL,其次为沙门菌,MIC为31.25 mg/mL~125mg/mL,大肠埃希菌的MIC为62.5.25mg/mL~250mg/mL,溶血性链球菌的MIC为125mg/mL~500mg/mL,金雀花碱则对以上4种细菌无抗菌活性。     

披针叶黄华内生真菌的分离与鉴定

旨在探讨有毒植物披针叶黄华内生真菌种类与种群分布情况,本试验以采自青海的披针叶黄华为试验材料,用表面消毒法对样品消毒后进行内生真菌分离,结合形态学鉴定和5.8S rDNA-ITS序列分析对分离菌株进行种属鉴定,并应用MEGA7.0软件进行系统发育分析。结果显示,从披针叶黄华中共分离获得29种内生真菌,分属于7纲、9目、11科、12属。披针叶黄华内生真菌总相对分离频率为79.31%,其中,叶的内生真菌种类最多（41.38%）,茎次之（37.93%）,种子（13.79%）和根（6.90%）相对较少;根据系统发育分析,所有内生真菌分属于两大种群,种群间亲缘关系较近。综上表明,披针叶黄华内生真菌种类丰富,青霉属是优势菌属。     

中药常山中常山碱超声提取工艺研究

采用稀盐酸溶剂和超声提取的组合方法从中药常山中分离常山碱,用紫外-可见分光光度计测定常山碱含量;以浸膏重量和常山碱含量作为评价指标,应用正交设计法考察提取温度、料液比和提取时间三个因素对常山碱提取率的影响。结果表明,常山碱超声提取最佳工艺：提取温度50℃,料液比1"5,提取时间1 h;在此条件下,浸膏重量为0．513 g,其中常山碱含量为0．453％,同比常山饮片中常山碱含量提高了40倍以上;三个因素对常山碱提取率的影响：提取温度＞料液比＞提取时间。说明常山碱采用超声提取工艺切实可行,具有省时、操作简便和提取率高等优点。     

牧马豆中生物碱的提取分离及鉴定

采用醇类溶剂提取法和硅胶柱层析对牧马豆生物碱进行了提取、分离 ,得到了 3个单体化合物 (结晶 B、油状物 E、结晶 I)和 A、C、D、F、G、H六段生物碱混合物。结晶 B、油状物 E、结晶 I经红外光谱鉴定分别为黄华碱、臭豆碱和金雀花碱     

超声波提取牛奶中细菌DNA方法的优化

本试验通过采集乌鲁木齐燕儿窝种牛场2003年5月份所有泌乳奶牛的牛奶样品,使用不同超声波功率（0、100、120、140、160 W）处理后,采用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、十二烷基磺酸钠（SDS）法提取牛奶中细菌DNA,并通过DNA浓度、纯度和细菌通用引物扩增16S rDNA的V6-V8区判定DNA的质量,筛选出提取牛奶中细菌DNA的最佳方法。结果表明,未使用超声波处理样品,直接采用CTAB、SDS法提取出的DNA无法扩增出细菌16S rDNA V6-V8区,而使用不同超声波功率（100、120、140、160 W）处理后能扩增出细菌16S rDNA V6-V8区,其中超声波功率140 W处理样品10 min并结合CTAB法提取牛奶中细菌DNA的浓度最高,为203.35 μg/mL。因此,超声波功率140 W处理样品并结合CTAB法提取牛奶中细菌DNA的方法最优,能满足从分子水平上进一步研究乳房炎相关细菌的要求。     

响应面法优化超声波提取浮萍多糖工艺研究

为优化浮萍多糖的提取工艺,基于单因素试验结果对影响浮萍多糖提取率的三个显著因素及水平：料液比(1∶40、1∶50、1∶60)、超声时间(40 min、60 min、80 min)和超声功率(300 W、350 W、400 W)进行了研究。以浮萍多糖提取率为响应值,运用Design-Expert软件进行响应面设计并开展试验,通过工艺优化确定浮萍多糖的最佳提取条件为料液比1∶40.06、超声时间79.58 min、超声功率341.37 W,此条件下浮萍多糖提取率的理论值可达到1.188%;验证试验的浮萍多糖提取率为1.125%,与理论值仅相差0.063%。优化后的提取工艺条件准确可靠,可用于实际操作。     

青藏高原东缘披针叶黄华叶片形态特征对海拔变化的响应

为揭示青藏高原地区披针叶黄华叶片形态特征对海拔梯度的响应机制,研究了不同海拔梯度对披针叶黄华叶长、叶宽、叶面积、叶周长、叶厚、叶干重、比叶重和比叶面积的影响,分析了披针叶黄华叶片形态特征对海拔的响应规律。结果表明:随着海拔的升高,土壤含水量、全氮含量和有机质增加;低海拔地区披针叶黄华的叶厚显著高于高海拔的地区;叶长、叶宽、叶面积和叶周长等表现出随着海拔的升高逐渐降低的变化趋势。海拔与光强、土壤含水量、土壤全氮含量和土壤有机质含量之间极显著正相关(P0.01);叶长、叶面积分别与土壤含水量、pH和土壤有机质含量显著相关(P0.05),主要受土壤pH的影响;叶片厚度与海拔、光强和土壤全氮含量之间显著相关(P0.05),主要受光强影响(R=0.641,P0.05);叶干重与土壤含水量之间呈显著的负相关关系(P0.05),主要受空气温度,尤其是土壤含水量影响(R=0.856,P0.01)。为了适应高海拔地区的土壤和气候特点,披针叶黄华采取了减少叶面积和叶厚度的策略,叶片随着海拔的升高表现出"小型化"的趋势。     

披针叶黄华试管正常苗与玻璃化苗茎叶的解剖特征比较

利用解剖学方法,对披针叶黄华(Thermopsis lanceolatar)试管正常苗与玻璃化苗茎叶的解剖结构进行了观察比较。结果表明,玻璃化试管苗叶片和茎的解剖结构与正常试管苗有显著差异。前者叶片肥厚,无角质层,上表皮细胞多肿胀破裂;叶肉中栅栏组织退化消失,海绵组织细胞体积膨大,液泡化,某些区域细胞壁发育不完全,出现大的裂隙腔;叶片维管束退化;茎部表皮不完整,皮层和髓部组织的细胞皱缩变形,维管组织分化不完全等。这些结构上的畸形发育是影响披针叶黄华试管苗正常生长和增殖的重要原因。