季节效应对绵羊体外受精的影响

试验结果表明进行体外受精试验时，不同季节绵羊体外受精的结果差异很大。卵母细胞的成熟率、受精率、囊胚率均以秋季处理的为高，尤其是卵母细胞的体外成熟率（P＜0.01）秋季为80.78％。     

发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响

在动物卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养体系中添加一定浓度的发情牛血清可能提高卵母细胞的成熟率及胚胎的发育率。本研究以屠宰场卵巢来源的绵羊卵母细胞为试验材料,探讨了发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果表明,成熟液中添加10%第1天的发情牛血清能显著提高绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚卵裂率(P＜0.05);孤雌胚体外培养72 h后,向培养液中添加10% 第7天的发情牛血清能显著提高绵羊孤雌胚的桑囊胚率(P＜0.05)。结果表明,发情牛血清能够促进绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚发育率。     

丁内酯-I对绵羊卵母细胞体外成熟及发育能力的影响

研究从丁内酯-I(BL-I)的浓度筛选、作用时间以及作用解除后的成熟培养时间等方面分别进行了试验,以观察其对绵羊卵母细胞核成熟的抑制程度以及对卵母细胞体外成熟及发育能力的影响。结果表明:150μmol/L的BL-I能将62.9%的卵母细胞抑制在GV期。BL-I抑制8、16 h和24 h后绵羊卵母细胞停滞在GV期的比率差异不显著(P>0.05);抑制24 h时卵裂率和囊胚率低于对照组,16 h的囊胚率也低于对照组,抑制8 h的卵裂率和囊胚率与对照组差异不显著(P>0.05)。去除抑制后卵母细胞的成熟能力不受影响。由此可得出,丁内酯-I能可逆性抑制绵羊卵母细胞的核成熟,但未能提高其发育潜力。     

丁内酯-Ⅰ对绵羊卵母细胞体外成熟及发育能力的影响

研究从丁内酯-Ⅰ(BL-Ⅰ)的浓度筛选、作用时间以及作用解除后的成熟培养时间等方面分别进行了试验,以观察其对绵羊卵母细胞核成熟的抑制程度以及对卵母细胞体外成熟及发育能力的影响.结果表明:150μmol/L的BL-Ⅰ能将62.9%的卵母细胞抑制在GV期.BL-Ⅰ抑制8、16 h和24 h后绵羊卵母细胞停滞在GV期的比率差异不显著(P＞0.05);抑制24 h时卵裂率和囊胚率低于对照组,16 h的囊胚率也低于对照组,抑制8 h的卵裂率和囊胚率与对照组差异不显著(P＞0.05).去除抑制后卵母细胞的成熟能力不受影响.由此可得出,丁内酯-Ⅰ能可逆性抑制绵羊卵母细胞的核成熟,但未能提高其发育潜力.     

hCG对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

为了探讨hCG对绵羊卵母细胞体外成熟的影响。从屠宰场获取绵羊卵巢后,采用机械切割法获取卵母细胞,在hCG为0u／L（对照组）、5u／L（低浓度）、10u／L（中浓度）、15u／L（高浓度）的培养液中体外成熟培养24h,计算成熟率。结果表明：hCG对绵羊卵母细胞体外成熟培养无显著影响（P〉0．05）。     

绵羊卵母细胞体外成熟的研究

研究了FSH／LH浓度、年龄和采卵季节对绵羊卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：①FSH／LH能促进绵羊卵母细胞体外成熟，适宜的添加浓度很重妻。本实验条件下，添加量以10μg／ml为宜。②成年绵羊卵母细胞成熟率高于性成熟前绵羊，但无显著差异。③发情季节绵羊卵母细胞较乏情季节易成熟。     

不同培养时间对山羊卵母细胞体外成熟的影响

在体外受精过程中,山羊卵巢卵母细胞体外成熟情况在很大程度上决定着卵母细胞的体外受精率和胚胎发育率.影响卵母细胞成熟的因素很多,主要包括卵泡大小、培养基、激素、培养时间等.试验对不同培养时间对山羊卵母细胞体外成熟的影响进行探讨,现报道如下.     

FSH对绵羊卵母细胞体外发育能力的影响

为了探讨绵羊卵母细胞体外成熟过程中促卵泡素(FSH)的适宜添加量,试验将FSH分为0.01,0.02,0.03 IU/mL 3个浓度梯度,用于绵羊卵母细胞的体外成熟与体外受精,统计第一极体排出率、卵裂率和囊胚率。结果表明:不同浓度FSH对第一极体排出率影响差异不显著(P>0.05),体外受精后以0.02 IU/mL组效果最好,卵裂率显著高于0.03 IU/mL组(P<0.05),但与0.01 IU/mL组相比差异不显著(P>0.05);0.02 IU/mL组囊胚率与其他2组相比显著升高(P<0.05)。     

人及绵羊卵泡液对绵羊卵母细胞体外成熟受精及发育的影响

人及绵羊卵泡液对绵羊卵母细胞体外成熟受精及发育的影响孙风俊，Ｐ．Ｈｏｌｍ，Ｂ．Ｉｒｖｉｎｅ，Ｒ．Ｆ．Ｓｅａｍａｒｋ前言近年来，有报道阐述了在培养液中添加同卵泡液产生良好的效果，用于卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ），进一步体外授精（ＩＶＦ）并对ＩＶＭ、ＩＶＦ...     

放线菌酮对绵羊体外成熟卵母细胞同期化及发育的影响

实验筛选了绵羊卵母细胞同期化培养的放线菌酮(CHX)浓度,研究了CHX处理后减数分裂进程的改变和CHX处理时间对减数分裂恢复能力的影响,并比较了体外成熟不同阶段CHX处理对后期发育的影响。结果表明:20μg/mLCHX处理24h后处于GV期的卵母细胞比率与对照组差异不显著(P0.05),但显著高于5、10μg/mL组(P0.05);CHX处理24h再正常培养16、20h的成熟率显著高于正常培养12h组(P0.05),但与对照组差异不显著(P0.05);卵母细胞经CHX处理8、16、24h后再正常培养20h,其中8h和16h组卵的成熟率显著(P0.05)低于对照组和24h组;体外成熟不同阶段用CHX处理后体外受精的卵裂率、囊胚率也显著低于对照组(P0.01)。因此20μg/mLCHX可较大程度地抑制卵母细胞减数分裂,CHX处理后卵母细胞减数分裂进程将加快,但影响其后期发育。     

绵羊卵巢卵母细胞体外成熟培养的研究

在体外受精过程中,绵羊卵巢卵母细胞体外成熟情况在很大程度上决定着卵母细胞的体外受精率和胚胎发育率.影响卵母细胞成熟的因素很多,主要包括卵泡大小、卵巢的发育阶段、培养基、激素生长因子等.试验从屠宰场采集屠宰后的绵羊卵巢,抽取卵巢表面卵泡中的卵母细胞,选择一级和二级卵母细胞进行体外成熟培养.试验证明,绵羊卵巢卵母细胞体外成熟培养时间以24h为佳,FCS浓度以20%最适宜.试验还发现无菌条件、温度、湿度以及在体外对卵母细胞的操作时间对试验的结果都有很大的影响.通过试验初步探明了适宜绵羊卵母细胞体外成熟的一些基本条件,为全面掌握绵羊卵母细胞体外成熟培养以至整个体外受精技术的完善和规范提供了有益的资料.     

FSH对绵羊卵母细胞体外核成熟的影响

为了探讨FSH对绵羊卵母细胞核成熟的影响,本试验将绵羊卵母细胞体外成熟24 h,并在成熟过程中的4个不同时间段内添加FSH,统计各个时间段卵母细胞的生发泡破裂(germinal vesicle break down, GVBD)及第一极体排出情况。结果显示：①在体外成熟培养的前4 h或前8 h添加FSH,经体外成熟的卵母细胞其生发泡破裂率与不添加FSH组无显著差异;②在体外成熟的4~24 h或8~24 h添加FSH,其第一极体排出率与不添加FSH组有极显著差异。说明,在本试验条件下,FSH对绵羊卵母细胞体外成熟具有显著的促进作用,是在减数分裂的恢复后到减数分裂完成之间的某一阶段起的促进作用。     

提高绵羊卵母细胞发育能力的研究

近年来，研究者对羊卵巢在培养前的保存温度与时间，采卵方法等因素进行了研究，取得一些重要成果。在绵羊的体外受精研究中也发现，从不同温度保存的卵巢中采取的卵母细胞色泽变化明显。此次试验就绵羊卵巢的不同保存温度以及不同的采卵方法对卵母细胞发育能力的影响进行了研究，以期为提高绵羊胚胎体外生产效率提供有用的参考依据。     

季节对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响

试验采用梯度LH与E2的作用浓度比较卵母细胞的体外成熟率,并采用添加7.0μg/mLLH、1.3μg/mLE2研究季节性对绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响。结果表明:①LH与E2的作用浓度对非繁殖季节(5月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P>0.05),但以添加LH7.0μg/mL、E21.3μg/mL组卵母细胞成熟率较好。②LH与E2的作用浓度对繁殖季节(12月)卵母细胞成熟率影响差异不显著(P>0.05),以LH10.0μg/mL与E21.3μg/mL时卵母细胞成熟率较好。③湖羊和其他季节性发情绵羊卵母细胞的成熟率在繁殖季节(72.08%vs69.82%)与非繁殖季节(67.89%vs65.79%)差异不显著(P>0.05),但以繁殖季节的成熟率较高。④湖羊的卵母细胞在非繁殖季节与繁殖季节胚胎卵裂率(72.28%vs75.43%)、桑葚胚率(36.14%vs34.97%)差异不显著(P>0.05),繁殖季节囊胚率比非繁殖季节囊胚率偏高(16.18%vs14.40%)。     

成熟培养基中添加卵泡液对牛体外受精卵发育的影响

从牛屠体卵巢采得卵母细胞后，置于ＣＯ２培养箱中作２４小时成熟培养。在成熟培养液中分别添加０％、１０％、２０％、３０％牛新鲜卵泡液９ＢＦＦ）或灭活卵泡液（ｈＢＦＦ）。分层Ｐｅｒｃｏｌｌ液将解冻精子离心洗涤后，悬浮于含有１０μｇ／ｍｌ肝素的修正Ｔｙｒｏｄｅ液滴中，将培养成熟的卵子移入后作授精培养。２０小时后，固定、染色一部分卵子，镜检其受精情况，其余卵子移入发生培养基与颗粒膜细胞作混合培养。试验结果表     

影响绵羊体外受精因素的研究

本试验对影响绵羊体外受精的因素进行了分析。结果表明:在相同条件下添加和不添加VEGF(血管内皮生长因子)的卵裂率分别为81.5%、84.9%(P>0.05),但囊胚发育率分别为31.5%和22.4%,差异显著(P<0.05)。受精时间8 h和12 h对卵裂率(80.8%、83.9%;P>0.05)和囊胚发育率(28.8%、23.5%;P>0.05)没有显著影响。卵巢采回后立即切割和在25~30℃的生理盐水中保存3 h的卵裂率分别为82.9%、86.5%,囊胚发育率分别为30.4%、29.7%,差异均不显著(P>0.05)。     

不同采卵方法及卵巢所处性周期阶段对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

本试验主要从采集方法和性周期阶段2方面对绵羊卵母细胞体外成熟的影响进行了探讨。结果表明：不同采卵方法的采卵效果存在差异，卵裂率切割法显著高于抽吸法(27.9%，49.5%；P<0.05)；A、B级卵母细胞成熟率极显著高于C级(75.3%，64.4%，29.1%，P<0.01)，卵裂率A、B级均显著高于C级(42.5%，35.8%，16.0%，P<0.05)；从卵泡期和黄体期卵巢采集到的卵母细胞的体外成熟率和卵裂率分别为66.7%、62.9%；38.2%、34.4%，没有显著差异 (P>0.05)。