鸡抗小鹅瘟精致高免蛋黄抗体的研制

利用发生小鹅瘟死亡的鹅的病料分离病毒,经处理后制备抗原,以制备的小鹅瘟灭活油乳剂抗原对试验鸡颈部皮下注射0.5ml/只;2周后加倍量进行强化免疫;间隔2周后用灭活油乳剂抗原再次强化免疫1次,颈部皮下注射2.0ml/只;以后间隔8周进行1次强化免疫,每次颈部皮下注射2.0ml/只;用琼扩方法检测萃提蛋黄上清液中抗小鹅瘟特异抗体效价,直到抗体效价达到1：64以上即可集蛋,用于制备琼扩抗体效价达到1：32及以上小鹅瘟蛋黄抗体;并对抗体进行无菌检验、安全试验、效力试验、临床治疗试验等,效果明显。     

小鹅瘟高免血清的制备和临床应用

根据山羊体对小鹅瘟病毒(GPV)的应答反应,采用多次免疫,间隔采血的方法,制造山羊抗小鹅瘟高免血清.颈部皮下或肌肉注射,预防雏鹅24 800只,预防成功率达100%,对15日龄内的病雏鹅按1.0 mL/只进行注射治疗,治疗病雏鹅2 640只,治愈2 586只,治愈率为97.95%.     

抗小鹅瘟高免血清的研制与应用

抗小鹅瘟高免血清的研制与应用张道华（湖南生物药厂，长沙４１０００７）唐启松（武冈县种鹅场）小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起雏鹅的一种急性或亚急性传染病。主要侵害３～２０日龄的雏鹅，发病率和死亡率都很高。目前防治小鹅瘟中使用最广泛的是小鹅瘟弱毒疫苗和抗小鹅瘟高...     

绵羊抗小鹅瘟高免血浆（HPGP）的研制和应用

绵羊抗小鹅瘟高免血浆（ＨＰＧＰ）的研制和应用潘玉民，石全瑞，于为民，辛英（吉林省兽医科学研究所，长春１３００６２）随着养鹅业的发展和品种交换，以及高密度饲养增加，小鹅瘟（ＧＰ）这种烈性传染病广泛地发生和流行。为加强防治工作，我们于１９９１～１９９３年...     

水牛抗小鹅瘟高兔血清的研制和应用

用小鹅病毒浓缩乳化抗原，皮内多点注射分３次免疫水牛，可获得琼扩抗体为１：６－１：６４的抗小鹅瘟高免血清，此血清具有良好的预防效果和较高疗效，在疫区注射１－５日龄雏鹅预防小鹅瘟，可提高雏鹅成活率３６．４％；治疗发病雏鹅，治愈率达８８．７％。乳化抗原以首免后血清琼扩抗体效价高低而定，抗体高加倍剂量大，低则加倍剂量小。同时测得水牛三免后１３－１６天血清琼扩抗体开始达高峰。血清达高峰后，至少可以持续１６天     

抗鸡传染性法氏囊病高免蛋黄液的研制及应用

鸡传染性法氏囊病(IBD)是近年来对养鸡业危害最大的传染病之一,本病于1989年4月首次在我县发现,随后即广泛流行。据我县兽医诊断室资料记载.从89年4月至91年12月底,共诊断病鸡89群96781只.其中IBD占67群74061只,分别占诊断鸡数的73％和76.5％。统计40群,原存栏50391只,仅发病早期畜主送病、死鸡来诊断时的登记死亡数是7752只(诊断回去后的死亡数字未作统计),死亡率为15.38％,单是某蛋鸡场就因IBD死亡4837只,占存栏20.6％,直接经济损失29022元。     

抗小鹅瘟牛源高免血清的研制

我县小鹅瘟病的发生比较普遍,严重制约了全县养鹅业的发展。为有效控制本病,我们研制了抗小鹅瘟牛源高免血清,获得了良好效果。报告如下。1　材料与方法1.1　免疫接种用小鹅瘟病毒浓缩乳化抗原、自然野毒浓缩液和检测用琼扩抗原、标准阴、阳性血清　均来源于四川畜牧兽医学院。     

板蓝根多糖抗小鹅瘟病毒的作用

在鹅胚内用板蓝根多糖(IRPS)作直接杀毒和阻断感染试验,对鹅胚尿囊液中小鹅瘟病毒(GPV)含量、鹅胚存活时间、存活率、病变和免疫组化进行测定。结果显示,40μg/胚IRPS阻断感染组,GPV接种后72h ELISA检测为阳性的尿囊液最高稀释倍数23;鹅胚平均存活时间192h;存活率6/6;胚体肉眼观察未见病变;切片镜检可见肝、肾轻度淤血和细胞变性,心、脑轻度淤血和水肿;免疫组化显示肝、肾内GPV表达抗原为弱阳性,心、脑内为阴性。而攻毒对照组尿囊液GPV阳性的最高稀释倍数28;鹅胚存活时间138h;存活率0/6;胚体严重萎缩、出血、水肿,各组织细胞碎裂、坏死,组织内GPV表达抗原全为强阳性。两者比较,各指标具有极显著差异。这表明在鹅胚内IR-PS具有极强的阻断GPV感染、增殖和保护胚体组织器官免受其损伤的作用。     

小鹅瘟与鹅几种常见病的鉴别诊断

小鹅瘟(Goose parvovirus,GP)又称得舍氏(Derzsy)病、小鹅病毒性肠炎、鹅细小病毒感染等,是由小鹅瘟病毒引起的一种急性或亚急性的败血性传染病.本病多发生于2～30 日龄内的雏鹅,特别是以10日龄时发病率和死亡率最高,其发病率和病死率随雏鹅日龄增大而降低.病鹅表现为食欲减退甚至废绝、精神不振、嗜睡,两腿麻痹或痉挛;肛门向外突出,周围被毛潮湿并沾有污染物,排出灰白色或者淡黄色稀粪便,常混有气泡.     

Epidemiologic investigation of an outbreak of goose parvovirus infection in Sweden

An outbreak of goose parvovirus (GPV) infection on a Swedish goose farm in the spring of 2004 increased the mortality rates from 2% in the early unaffected hatches to 90% and 99% respectively in the two hatches following virus introduction and 40% in goslings hatched later in the same breeding season. In this paper we describe the clinical observations, diagnostic procedures, and epidemiologic investigation carried out to elucidate the source of the infection. The diagnosis was confirmed by serology, virus isolation, and sequence analysis of a 493-bp-long fragment of the VP1 gene. Phylogenetically the causative virus was closely related to pathogenic GPV strains isolated in 2003 and 2004 from Poland and the United Kingdom, respectively. The Swedish isolate exhibited less homology with pathogenic strains from Hungary and Asia and with attenuated vaccine strains. The epidemiologic investigation showed that the virus was first introduced to a contract farm (farm A) and then was transferred with newly hatched goslings to the farm that had submitted the birds for necropsy (index farm). The exact time and source of the virus introduction to farm A could not be determined with absolute certainty. Possible sources of the infection included backyard goose eggs that had been delivered to farm A for subcontract incubation and hatching, wild geese that frequented the flock of breeding geese on pasture on farm A, and a clutch of Canada goose eggs (Branta canadensis) that had been produced by wild geese and was hatched in the same machine as the eggs produced by farm A.     

原位PCR检测雏鹅体内鹅细小病毒方法的建立及其应用

通过建立能对石蜡切片中鹅细小病毒(GPV)核酸进行定位的原位PCR方法,为GPV在鹅体内的定位、致病机理研究等提供有效的试验手段.根据GPV的VP3基因序列设计PCR引物和寡核苷酸探针,以GPV感染鹅肝脏和空肠组织石蜡标本制作切片,经蛋白酶K消化、原位PCR扩增和碱性磷酸酶标记的寡核苷酸探针原位杂交,建立了检测石蜡标本中GPV的间接原位PCR方法并应用于自然感染GPV高免血清紧急免疫后鹅肝脏和空肠组织临床病料检测.结果显示间接原位PCR对人工感染GPV死亡鹅肝脏和空肠的石蜡标本检测结果为阳性,而鹅病毒性肝炎、鹅多杀性巴氏杆菌病、鹅沙门菌病和鹅大肠杆菌病死亡鹅肝脏的石蜡标本检测结果为阴性;间接原位PCR对自然感染GPV高免血清紧急免疫后第6天的鹅肝脏和空肠组织检测20个样本中,空肠组织有8个呈阳性,肝脏组织有4个阳性结果均为阳性,阳性细胞有空肠上皮细胞、肝窦上皮细胞等.     

鹅细小病毒和番鸭细小病毒双重PCR检测方法的建立

根据GenBank上登录的鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)基因序列,分别设计合成针对GPV非结构蛋白(NS)和MDPV NS2-VP1基因片段的2对引物GPV U/L和MDPV U/L,将GPV和MDPV提取核酸混合后作为模板,优化PCR反应条件,建立了能同时检测这2种病毒的双重PCR。特异性试验结果显示,引物GPV U/L仅特异性扩增出GPV-GZ1和GPV-GZ2株730bp核酸片段,引物MDPVU/L仅特异性扩增出MDPV的624bp核酸片段,双重PCR扩增出长度分别为730bp和624bp的2条特异性片段,而扩增鸭瘟病毒(DPV)和鹅副黏病毒(GPMV)的核酸扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,双重PCR能同时检测到14.4pg的GPV核酸和28.8pg的MDPV核酸。结果表明,建立的双重PCR可用于GPV和MDPV的鉴别诊断和联合检测。     

犬细小病毒基因疫苗单克隆抗体的制备

为获得可用于犬细小病毒(CPV)感染的治疗和快速诊断的单克隆抗体,从病料中分离了1株犬细小病毒,经PCR扩增VP1全基因并进行序列分析,确定为CPV-2 a型。再将VP1基因克隆到真核表达质粒pc DNA3中,构建了基因疫苗pc DNA3-VP1。用该基因疫苗免疫BALB/c小鼠3次后,取抗体效价高的两只小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA检测,结果获得了3株杂交瘤细胞株,该3株单抗与犬、猫细小病毒能发生反应,均不与犬瘟热病毒、流感病毒和犬腺病毒发生反应,诱生的腹水可体外中和犬细小病毒,其中两株单抗的中和效价为1∶256,1株单抗腹水的中和效价低于1∶128。结果表明,该CPV VP1基因疫苗可制备具有一定中和效价的CPV单克隆抗体。     

鹅细小病毒NS2基因的原核表达及抗原性检测

为原核表达鹅细小病毒(GPV)NS2蛋白,本研究利用特异性引物扩增获得GPV的H1分离株NS2基因,将其克隆于pMD18-T载体后进行序列测定。并将NS2基因亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1中,获得重组质粒pGEX-NS2。该质粒转化于感受态菌BL21(DE3)plysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析,表达的重组蛋白约为75ku左右。经过亲和层析方法获得了纯化的重组NS2蛋白。Westernblot和Dot-ELISA鉴定结果表明,表达的重组NS2蛋白可以与GPV阳性血清发生特异性反应。     

番鸭细小病毒与鹅细小病毒PCR鉴别诊断方法的建立

根据番鸭细小病毒（MDPV）和鹅细小病毒（GPV）基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1／R1和GPVF1／R1，建立了一种PCR方法，用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒（DPV）、鸭肝炎病毒（DHV）、鸭呼肠孤病毒（DRV）、犬细小病毒（CPV）和猫泛白细胞减少症病毒（FPLV）的病毒培养物及其核酸进行扩增。结果，引物MDPVF1／R1仅特异性扩增出MDPV的900bp核酸片段，引物GPVF1／R1仅特异性扩增出GPV的465bp核酸片段。表明，建立的PCR方法可用于GPV和MDPV的鉴别诊断。     

小鹅瘟病毒荧光PCR检测方法的建立

依据GenBank小鹅瘟病毒(GPV)的NS基因保守区设计一对特异性引物,利用PCR扩增NS区片段,克隆、测序,采取Taqman探针法,构建小鹅瘟病毒的荧光PCR检测方法.结果表明,该方法检测GPV具有很高的特异性和敏感性,可以用于小鹅瘟病毒的检测.