山核桃外果皮提取物活体抑菌活性

利用山核桃Carya cathayensis外果皮甲醇提取物对黄瓜灰霉病菌Botrytis cinerea,小麦白粉病菌Erysiphegraminis,黄瓜白粉病菌Sphaerotheca fuliginea和黄瓜霜霉病菌Pseudoperonospora cubensis进行了预防性和治疗性的室内盆栽药效试验。结果表明：质量浓度为0.1000g·mL^-1的干样山核桃外果皮甲醇提取物对黄瓜灰霉病菌保护作用和治疗作用的菌丝生长抑制率分别为85.40%和36.72%;对小麦白粉病菌保护作用和治疗作用的防治效果分别为75.00%和66.67%;室内盆栽黄瓜苗白粉病预防效果达到62.96%,治疗作用达到74.07%;对黄瓜霜霉病的保护作用效果达到56.62%,治疗效果为23.08%。山核桃外果皮甲醇提取物具有一定的活体抑菌活性,利用山核桃外果皮开发植物源农药值得进一步研究。     

山核桃外果皮提取物抑菌活性的初步研究

采用甲醇溶剂对山核桃Carya cathayensis外果皮进行提取,并用提取物对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea,番茄早疫病菌Alternaria solani,黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporumf.cucumerinum,黄瓜炭疽病菌Colletotrichum lagenarium,棉花枯萎病菌Fusarium oxysporumf.vasinfectum等15种病菌进行抑菌试验。结果表明：在供试质量浓度为干样100 g.L-1时,山核桃外果皮甲醇提取物对黄瓜炭疽病菌、黄瓜菌核病菌、苹果腐烂病菌和辣椒疫病菌等4种病菌的抑制率为100%,除玉米小斑病菌Bipolaris maydis外,对其余的10种病菌抑制率都在69%以上。对其中6种供试病菌菌丝生长的毒力测定试验表明：山核桃外果皮甲醇提取物对水稻纹枯病菌Rhizoctonia solan的菌丝生长抑制作用最好（半数效应质量浓度为29.8 g.L-1）,其次为番茄灰霉病菌（半数效应质量浓度为31.1 g.L-1）,对玉米大斑病菌Exserohilumturcicum作用最差（半数效应质量浓度为46.2 g.L-1）。利用山核桃外果皮开发植物源杀菌剂值得进一步研究。     

朱顶红叶片提取物抑菌效果的初步研究

为开发利用朱顶红提供依据,研究朱顶红叶片提取物对病原真菌的抑菌作用,以石油醚和丙酮为溶剂对朱顶红叶片中的活性物质进行索氏提取,并对其提取物进行了生物测定。结果表明,其活性物质对4种病原真菌菌丝生长都表现出抑制作用,0.06 g/mL以上浓度的抑菌效果明显。相同浓度下的孢子萌发试验结果显示:活性物质除了对枇杷叶斑病菌(Pes-tulotiopsis funerea)的抑制效果较差外,对其他3种病菌孢子的萌发抑制率均在73%以上。     

美国山核桃叶的抗菌作用

对美国山核桃Carya illinoensis叶进行体外抗菌作用研究,以期开发出一种新型的天然杀菌剂。美国山核桃叶经体积分数为75%乙醇提取后,采用系统溶剂法将抽提物分为石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水等5个不同极性的提取物。采用滤纸片法,检测以上提取物对黄曲霉菌Aspergillus flavus,根霉菌Rhzopus oryzae,青霉菌Penicillium sp.,酵母菌Saccharomyces cerevisiae,大肠埃希菌Escherichia coli和枯草杆菌Bacillus subtilis等的抑菌效果,并计算各提取物对真菌的半数抑菌质量浓度(CE50)。结果表明:乙酸乙酯提取物对青霉菌、根霉菌、黄曲霉菌和枯草杆菌均表现出明显的抑菌效果且差异显著(P<0.05,P<0.01),抑菌圈直径均值分别为9.18,10.86,8.26,10.18mm,但对于黄曲霉菌石油醚提取物(CE500.91 g·L-1)的抑菌效果优于乙酸乙酯提取物(CE50>200 g·L-1);而正丁醇提取物对酵母菌和大肠埃希菌表现出明显的抑菌效果且差异显著(P<0.05,P<0.01),其抑菌圈直径均值分别为11.13,8.83 mm,但对于大肠埃希菌水提物的抑菌效果优于正丁醇提取物,其抑菌圈直径均值为9.13 mm。综上,美国山核桃叶的正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物抑菌效果最佳。针对这一实验结果,可以根据防治对象不同,采用不同的提取方法和工艺,研发专菌专治的天然杀菌剂,以提升杀菌剂的作用效果。     

鹅掌楸树皮提取物的抑菌作用

采用滤纸片观察法,分析鹅掌楸树皮不同提取物的抗菌活性。结果表明,鹅掌楸树皮的正丁醇萃取物对枯草芽孢杆菌和金色葡萄球菌的抑菌作用较强,说明鹅掌楸树皮具有较强的抑菌作用,其抑菌活性成分主要富集在正丁醇萃取物中。     

山核桃外果皮提取物的杀虫活性

采用冷浸法用甲醇溶剂提取山核桃外果皮的杀虫活性成分。分别用浸虫浸叶法和浸叶法测定了提取物对小菜蛾2龄幼虫、斜纹夜蛾2龄中期幼虫、朱砂叶螨成螨和小麦蚜虫的杀虫活性。结果表明,山核桃外果皮甲醇提取物药剂对蚜虫具有较好的毒杀作用,其LC50为0.0428g·mL-1;山核桃外果皮甲醇提取物药剂对小菜蛾、斜纹夜蛾的毒杀作用较弱,在供试药剂为原液(质量浓度为1g·mL-1)时,小菜蛾和斜纹夜蛾的校正死亡率分别为23.40%、9.81%;所有被测质量浓度的山核桃外果皮甲醇提取物药剂对朱砂叶螨都没有毒杀作用。     

七子花不同时期叶片提取物的体外抑菌活性

为调查七子花Heptacodium miconioides生长过程中叶片提取物抑菌活性的变化规律,采集不同时期七子花叶片,以乙醇为溶剂提取活性物质,以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和大肠杆菌Escherichia coli为检定菌株,以琼脂扩散法检测不同时期七子花叶片提取物的抑菌活性。结果表明,与煮沸法和索氏提取法相比,超声波提取简单易行,不影响叶片的体外抑菌活性,1 g提取物稀释80倍后对大肠杆菌的抑制率仍超过60%,适用于大量样本的快速分析。在整个叶片生长期,七子花叶片均表现较高的抑菌活性,抑制率超过50%,且对金黄色葡萄球菌抑杀作用强于对大肠杆菌的抑杀作用,但以4月上旬、7月中旬和9月下旬的抑菌活性最强。图1表1参7     

黄顶菊叶片抑菌作用初步研究

用水、50%乙醇、80%乙醇和95%乙醇从黄顶菊叶片中提取活性成分,初步探讨了其抑菌作用,结果表明,黄顶菊提取物对大肠杆菌、产气杆菌和枯草芽孢杆菌均有不同程度的抑菌作用,其中乙醇提取液抑菌效果强于水提取液,且80%乙醇提取物抑菌作用最强;4种溶剂提取物对大肠杆菌的抑制效果最强。     

朱顶红鳞茎提取物的抑菌作用研究

以乙醇、石油醚和三氯甲烷为溶剂,对朱顶红鳞茎中的活性物质进行索氏提取,并对其提取物进行了生物测定,结果表明:其活性物质对4种病原真菌菌丝生长都表现出抑制作用,浓度0.6 g/ml以上的抑菌效果明显;孢子萌发试验结果显示,石油醚提取物仅对荸荠枯萎病菌有抑制作用,氯仿提取物对小麦赤霉病菌、荸荠枯萎病菌和枇杷叶斑病菌的孢子萌发具有较强的抑制活性,抑制率均在62%以上,氯仿为提取朱顶红鳞茎活性成分的最佳溶剂。     

枣树皮提取物的抑菌作用

利用超声提取法和牛津杯抑菌法研究枣树皮的抑菌效果。以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和迟缓爱德华菌为试验菌,对提取方法、抑菌方法、提取溶剂等条件分别进行抑菌试验研究。结果表明:以70%乙醇为提取溶剂,超声波提取法得到的提取液抑菌效果最好;牛津杯法的抑菌效果强于滤纸片法;金丝小枣的老树皮的抑菌效果强于新树皮。不同品种枣树皮的抑菌效果大小为:金丝小枣老树皮红枣老树皮马牙枣老树皮。金丝小枣老树皮在大肠杆菌与温和气单胞菌中的最低抑菌浓度为7.5×10~(-4) g·m L~(-1),在枯草芽孢杆菌、嗜水气单胞菌与迟缓爱德华菌中的最低抑菌浓度都为3.8×10~(-4) g·m L~(-1)。枣树皮提取物对5种菌有较强的抑菌效果。     

山核桃基因组DNA提取及RAPD引物筛选

分别用SDS法、CTAB法、简易CTAB法及高盐低pH法提取山核桃干叶的基因组DNA并进行了检测比较.结果显示,SDS法更适合于山核桃基因组DNA的提取;对600条10碱基的随机引物进行了初筛和复筛,结果筛选出了20条扩增多态性强、稳定性好的引物,作为全部基因纽的扩增引物.     

山核桃果皮提取液的抑菌活性研究

[目的]初步研究山核桃果皮提取液的抑菌活性。[方法]通过测定山核桃果皮提取液对供试黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum和番茄灰霉病菌Botrytis cinerea Pers.菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用,初步研究了山核桃果皮提取液的抑菌活性。[结果]核桃果皮提取液除了能抑制供试菌株菌丝生长外,对病原菌孢子萌发和芽管生长也具有显著的抑制作用。培养9h后,与对照相比,对黄瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制率为73.9%,芽管长的抑制率为63.5%;对番茄灰霉病菌孢子萌发的抑制率为82.7%,芽管长的抑制率为65.1%。此外,山核桃果皮提取液具有明显的促进黄瓜种子发芽的作用。[结论]该研究为山核桃果皮提取物开发为杀菌剂提供理论依据。     

山核桃外果皮化学成分及抑菌活性初步研究

用不同溶剂对山核桃Carya cathayensis外果皮甲醇浸膏进行萃取分离,得到石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相和正丁醇相浸膏,对番茄早疫病菌Alternaria solani,苹果腐烂病菌Valsa mali,小麦赤霉病菌Fusarium graminerum,水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani,黄瓜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum等5种植物病原真菌进行了抑菌活性试验。结果表明,正丁醇相抑菌活性最强,达到100%,氯仿相和石油醚相次之,乙酸乙酯相最弱。对抑菌活性较强的氯仿相进行了初步分离,得到2种单体化合物,鉴定为5-羟基-2-甲氧基-1,4-萘醌（5-hydroxy-2-methoxy-1,4-naphthoquinone）和β-谷甾醇。这2种化合物对番茄灰霉病菌Botrytis cirerea和小麦赤霉病菌孢子萌发均有一定的抑制作用。     

山核桃嫁接育苗成活率探讨

山核桃成年树接穗，本砧嫁接，成活率在41％以下，而苗木枝条为接穗则可达90％－93％，但缺少实用价值；化香砧和山核桃成年树接穗成少率为84％－88％，但保存率低，存在不亲和现象。分析认为：山核桃形成层薄，髓心大和单宁含量高对嫁接成活有一定影响，但并非主导因素，其主要原因可能是随母株年龄增长和穗条在枝干上分枝级数增加，穗条生活力衰退，愈伤组织形成所必需的内源激素含量减少，影响到愈伤组织产生的速度和数量，致使成活率下降。针对上述问题，提出采穗母树强度更新修剪，施行螺旋状环切一圈手术，嫁接时大棚设施育苗和穗条激素处理等思路，旨在增强接穗活力和改善愈合环境，以提高嫁接苗成活率。参10     

山核桃SSR反应体系优化

优化SSR反应体系是山核桃SSR遗传图谱构建的基础.通过对PCR反应中Taq聚合酶用量、dNTP浓度、引物浓度、Mg2 浓度和模板DNA量的组合试验,确定了山核桃SSR的最佳反应体系,即在30μL反应体系中,含600 ng模板DNA,1×PCR Buffer,2.0UTaq聚合酶,0.22mmol/L dNTP,1.0 mmol/L Mg2 ,0.13μmol/L引物.     

碳源对山核桃体细胞胚发生和植株再生的影响

以山核桃Carya cathayensis花后10～12周的幼胚为外植体,建立体胚发生及再生体系,同时分别对山核桃胚性愈合组织和体细胞胚诱导的碳源种类和质量浓度进行了比较分析。结果表明：接种在含葡萄糖培养基中的山核桃胚性愈合组织诱导率显著高于蔗糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达33.3%;在培养基中添加20 g.L-1葡萄糖,胚性愈合组织诱导率最高,达50.0%,显著高于其他处理。蔗糖为山核桃体细胞胚诱导的最佳碳源种类,体细胞胚诱导率显著高于葡萄糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达23.3%;在培养基中添加45 g.L-1蔗糖,体细胞胚诱导率最高,达30.1%,显著高于其他处理。体胚在WPM培养基（木本植物用培养基）附加5 g.L-1蔗糖的培养基上萌发率达20%,显著高于附加0,10,15,20,25,30 g.L-1蔗糖的体胚萌发率。     

不同母岩发育山核桃林地土壤性质及叶片营养元素分析

为了解不同母岩发育山核桃Carya cathayensis林地土壤性质及叶片营养的差异,于2008年7月采集和分析了板岩、花岗岩、千枚岩和砂页岩等4种母岩发育的土壤和山核桃植株叶片。结果表明,花岗岩发育的土壤酸碱度最低（pH 4.72）,有机质（43.11 g·kg^－1）和有效硫（38.73 mg·kg^－1）质量分数最高,交换性钙（5.22 mg·kg^－1）和有效锌（1.65 mg·kg^－1）质量分数最低;而有效磷（7.29 mg·kg^－1）,有效铁（31.24 mg·kg^－1）和有效锰（67.49 mg·kg^－1）质量分数则以千枚岩发育的土壤为最高;山核桃叶片中各营养元素质量分数的大小顺序表现为氮＞钙＞钾＞镁＞磷＞锰＞铁＞锌;花岗岩发育的土壤上的山核桃叶片氮、钙、镁、锌质量分数最高,磷、铁质量分数最低;不同母岩发育山核桃林地土壤pH值、有机质与多个大中微量元素有效养分之间存在显著或极显著相关关系。叶片氮、钾、钙、镁、铁与土壤多种养分质量分数之间存在一定的相关性。表5参22     

山核桃干腐病发生发展规律及防治技术

山核桃干腐病Macrophoma caryae是山核桃Carya cathayensis林的一种新病害。研究发现,该病每年3月下旬始发,至11月下旬以菌丝体在病组织越冬。为了有效控制该病的蔓延,选择14种药剂对它们开展单稀释倍数抑菌试验,并将抑菌效果好的3种药剂进行8种梯度稀释倍数试验。再按筛选出的最佳防治药剂及其稀释倍数进行实地防治试验,获得最佳防治药荆和方法。结果表明：当4—5月山核桃干腐病的病原菌孢子发生盛期,在病株上喷洒体积分数为80％402抗菌剂乳油1：100～1：2500倍液、80％乙蒜素乳油1：100～1：2500倍液和95％硫酸铜晶体1：100～1：500倍液的可选配比溶液时,均能有效控制山核桃干腐病病原菌孢子的蔓延：而在8—9月该病病原菌入侵山核桃木质部时,在刮除病斑或在病斑上深划线后,再用80％乙蒜素乳油、80％402抗菌剂和95％硫酸铜晶体中的任何一种杀菌剂的1：100～1：500倍溶液进行喷雾防治,15d后均可见明显的防治效果。图1表3参9