6-苄基腺嘌呤促进香菇菌丝体生长的作用机理研究

通过研究6-苄基腺嘌呤（6-BA）对香菇菌丝体两种同工酶和四种胞外酶活性的影响，来探索6-BA影响香菇生长发育的作用机理，结果表明，在代谢水平上，6-BA主要是通过激活香菇菌丝体一些胞外酶活性来增强其营养代谢从而促进香菇生长发育；同时6-BA可提高香菇菌丝体蛋白质、核酸含量，而促进其合成代谢，在分子水平，6-BA对香菇生长发育有关的基因表达且调控作用，它可以诱导促进或抑制香菇生长发育有关的酶或蛋白质的合成，其临界作用浓度为1.5mg/100mL培养液。     

金顶侧耳多糖体外抗肿瘤作用的研究

通过深层发酵获得金顶侧耳菌丝体。用水提法分别提取金顶侧耳菌丝体多糖、胞外(过滤液)多糖和全液(菌丝体 发酵液)多糖。用MTT比色法测定金顶侧耳多糖体外对小鼠S180癌细胞及人结肠低分化腺癌细胞的抑制率。结果表明,金顶侧耳胞外多糖对体外培养的S-180癌细胞有抑制作用,全液多糖和菌丝体多糖无抑制作用。这3种多糖体外对人结肠低分化腺癌细胞有抑制作用,其中金顶侧耳胞外多糖抑制率最高,全液多糖次之,菌丝体多糖最低。     

外源植物生长调节剂对桑黄发酵产黄酮的影响

黄酮是药用真菌桑黄最为重要的活性成分之一,为探究植物生长调节剂对桑黄液体发酵培养中黄酮产量的影响,以6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、激动素(KT)、吲哚丁酸(IBA)、水杨酸(SA)、2,4-二氯-苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、赤霉素(GA₃)和脱落酸(ABA)等8种植物生长调节剂作为外源添加物,测定不同处理桑黄液体发酵7 d、9 d、11 d的菌丝体生物量及胞内黄酮含量,并计算发酵11天时胞内黄酮总产量。结果表明,相比空白对照,6-BA、KT、IBA、SA、2,4-D能显著促进桑黄菌丝体生物量增加(P<0.05),但作用效果与发酵时间段有关,NAA无明显影响,GA₃和ABA引起桑黄菌丝体生物量显著下降;KT、6-BA、IBA和SA能显著提高桑黄胞内黄酮产量,NAA和2,4-D无明显作用,而GA₃和ABA则抑制桑黄黄酮代谢。综合比较,8种植物生长调节剂中以KT对桑黄菌丝体生物量和黄酮代谢的促进作用最明显,在桑黄液体发酵培养时添加KT有助提高黄酮产量。     

硼锌对佛罗里达侧耳菌丝体生长的影响

采用改进了的合成培养基培养佛罗里达侧耳(Pleu-rotus florida)菌丝体,在培养基里分别加入不同浓度的硼(B)和锌(Zn)。实验证明,低浓度的B对菌丝体生长没有明显的影响,可溶性糖含量下降,蛋白质含量提高;Zn浓度在5 ppm以内,明显地促进菌丝体生长,菌丝体可溶性搪含量增加;但对蛋白质含量无明显影响;B、Zn袭度在10ppm以上,对菌丝体生长均显抑制作用,但菌丝体的蛋白质和可溶性糖含量都比对照增加。     

菌丝生长速度与呼吸消耗及胞外酶活性的关系

以棉籽壳为主料,对平菇、刺芹侧耳、黄伞、灵芝、金针菇和香菇原种培养期间的菌丝生长速度、呼吸消耗及胞外酶活性的关系进行了研究。结果表明,6种食用菌的菌丝生长速度与呼吸消耗正相关,而有机物的降解速率与胞外酶活性的大小没有相关性。     

金针菇固体培养几种胞外酶活力变化的研究

本文主要研究了金针菇菌丝体在固体培养基上生长时胞外酶的活性变化。测定了木聚糖酶、羧甲基纤维素酶和淀粉酶的活性变化及蛋白质、还原糖的含量变化。并探讨了金针菇在改变了碳源的培养基上胞外酶、蛋白质、还原糖的变化。结果表明 :金针菇在固体培养过程中 ,三种酶均有活力 ,但呈现较大差异。培养过程中蛋白质和还原糖含量随时间变化 ,且与酶活力有关。改变固体培养基中的碳源 ,则胞外酶活性、蛋白质和还原糖含量又呈不同的变化趋势     

6-苄基腺嘌呤对双孢蘑菇菌丝体生长及生理生化特性的影响研究

在马铃薯液体培养基中，加入不同量的6-苄基腺嘌呤(6-BA)，探讨6-BA对双孢蘑菇菌丝体生长及生理生化特性的影响。结果表明：低浓度6-BA对双孢蘑菇菌丝体生长具促进作用。且能使其蛋白质、核酸、可溶性糖含量增加，高浓度6-BA则逐渐显示抑制效应，其最适作用浓度为0．1mg／L。     

高温胁迫下糙皮侧耳胞内钙离子对热激蛋白基因表达的调控

以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株CCMSSC00389为材料,研究高温胁迫(40℃、120min)下钙离子的响应及其对热激蛋白的调控。在高温胁迫条件下,在培养基中添加胞内钙离子螯合剂、胞外钙离子螯合剂、钙调蛋白抑制剂、质膜钙通道抑制剂、三磷酸肌醇受体拮抗剂,利用钙离子特异性荧光探针检测菌丝体胞内钙离子含量,采用荧光定量PCR检测热激蛋白的基因表达量。结果表明,高温胁迫促进胞内钙离子浓度升高,增加Hsp60、Grp78、Hsp90、Hsp104等4种热激蛋白的基因表达量;培养基中添加钙离子螯合剂或抑制剂会降低胞内钙离子浓度,抑制这些热激蛋白的基因表达。研究结果表明高温胁迫会诱导糙皮侧耳胞内钙离子浓度升高,参与信号转导,从而调控热激蛋白的表达来缓解高温胁迫引起的伤害。     

生长调节剂在香菇生长发育过程中的作用

用三十烷醇、α-萘乙酸和玉米素处理香菇507菌丝体,并测定菌丝生长速度和羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、愈创木酚氧化酶的活性。试验结果表明,不同生长调节剂对香菇菌丝体的生长速度及三种胞外酶活性的影响不同。三种生长调节剂虽能影响菌丝生长速度和三种胞外酶的活性,但不能改变其变化趋势。此外,本文还讨论了菌丝生长速度和三种胞外酶活性的调控机制。     

三种培养料对黄伞胞外酶活性的影响

研究了3种不同培养料对黄伞不同生长发育阶段的纤维素酶、半纤维素酶、漆酶、多氛氧化酶的胞外酶活性的影响。结果表明，不同培养料中的黄伞菌丝分泌的4种胞外酶活性在其生长发育的各阶段表现出一定的差异，但酶活性变化的总体趋势基本相同。这说明培养料的不同对胞外酶活性影响较大，而对酶活性变化趋势影响较小。     

不同培养料对真姬菇胞外酶活性的影响

以真姬菇(Hypsizygus marmoreus)为试材,以五节芒(Miscanthus floridulus)和芒萁(Dicranopteris dichotoma)2种菌草、木屑和棉籽壳为主要原料栽培真姬菇,研究真姬菇菌丝胞外纤维素酶、半纤维素酶、β?葡萄糖苷酶、淀粉酶、漆酶和锰过氧化物酶在其生长发育阶段的活性变化。结果表明:无论在何种培养料中,真姬菇菌丝分泌的木质素酶类(漆酶、锰过氧化物酶)活性最大值都在菌丝后熟阶段,而非木质素酶活性最大值则都在菌丝生殖阶段;不同培养料中真姬菇菌丝分泌的同种胞外酶,其活性在各生长发育阶段不同。在变化趋势上,木质素酶类的活性趋势差异在菌丝体后熟阶段,非木质素酶类基本相似。由此说明真姬菇胞外酶活性与生长发育阶段密切相关,并且呈现阶段性变化;真姬菇胞外木质素酶类的活性及变化趋势,与其菌丝生长阶段和培养料的组成有关,非木质素酶类活性的变化趋势由真姬菇生长阶段决定,培养料的不同仅对其活性大小有影响。     

不同菌草对皿培牛樟芝菌丝体的影响

以香茅草、忧遁草、巨菌草、象草和紫色象草5种菌草(Juncao)为试材,采用菌草浸出液进行皿培牛樟芝菌丝体的方法,研究了菌丝体生长速率、三萜、氨基酸、胞外酶活性、三萜合成途径中关键基因表达,以期筛选出促进牛樟芝菌丝体生长和活性物质积累的培养基,为今后解决牛樟芝人工培养成本高、耗时长等问题提供参考依据。结果表明：香茅草与忧遁草浸出液能显著促进牛樟芝菌丝体的生长,培养时间较对照组缩短12 d;不同菌草浸出液对牛樟芝菌丝体总三萜含量促进作用依次为香茅草>巨菌草>忧遁草>紫色象草>象草,与对照组均有显著性差异;香茅草浸出液显著促进漆酶、谷氨酸合成酶合成,显著促进AcHMGS、AcHMGR和AcSE表达。香茅草浸出液能作为牛樟芝菌丝体培养基,促进菌丝体生长和三萜含量积累。     

茯苓木腐特点的研究

测定了茯苓在松木屑-麦麸基物上生长期间,基物失重及木质纤维素的降解和有关酶活性的变化规律。实验结果表明: 1.茯苓菌分解木屑的能力较强。培养100天时,呼吸作用消耗掉的有机质达38～39％,基物中纤维素降解了46.32％,半纤维素降解了58.41％,但木素降解量极低。由此可见,茯苓菌主要是利用植物体中的纤维素和半纤维素,是一种褐腐型木材腐朽菌。 2.茯苓降解松木屑具有一定的阶段性。0—45天期间呼吸消耗的基物有机质和纤维素,半纤维素的降解量较多,在基物中茯苓菌核类物质开始产生时(45天左右),纤维素和半纤维素降解速率明显下降,呼吸强度也明显降低。 3.茯苓在生长发育过程中能向基物中释放胞外CMC酶、FP酶、木聚糖酶和淀粉酶。初期酶活性较低,在菌丝体向胞外释放菌核类物质时,4种酶活性明显上升,直到培养100天酶活性仍处于高峰水平。     

蜜环菌对硒的耐受能力及硒对其多糖产率的影响

采用不同的硒浓度对蜜环菌进行了补硒培养,研究了硒对蜜环菌生长、蜜环菌胞外多糖和胞内多糖产率的影响。结果表明:在硒处理浓度为20 mg／L以下时,能够促进蜜环菌菌丝体的生长,超过该浓度之后,硒对蜜环菌菌丝体的生长产生阻碍;对于蜜环菌多糖来说,在试验所涉及的浓度范围内,硒能够促进胞外多糖的分泌,但对胞内多糖合成的影响不如胞外多糖明显。     

真姬菇不同生长时期胞外酶活性变化研究

通过对真姬菇生长发育的八个时期胞外酶活性变化规律研究,得出胞外酶在不同时期活性变化趋势各不相同。结果表明羧甲基纤维素酶活性在成熟期及采后3d显著高于其它生长发育时期;滤纸纤维素酶在菌丝长至菌袋1/4时显著高于其它时期,随后下降,但在子实体成熟期以后又显著升高;淀粉酶活性随着生长发育进程推进酶活性升高;愈创木酚酶在菌丝生长阶段无显著差异,但在子实体成熟期以后显著升高;发现纤维素酶、淀粉酶以及愈创木酚酶在生殖生长时期的活性显著高于营养生长时期,而漆酶及β-葡萄糖苷酶活性在原基期显著高于其它各时期。说明真姬菇胞外酶活性与其不同生长发育有关,同时漆酶与β-葡萄糖苷酶在原基形成期显著升高,可考虑寻找漆酶和β-葡萄糖苷酶出现较早的配方,以期促进真姬菇较早转入生殖生长,从而缩短栽培周期。     

富硒金针菇菌丝体酯酶同工酶和可溶性蛋白研究

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，研究了不同硒浓度对金针菇001号菌株不同生长期菌丝体酯酶同工酶活性和可溶性蛋白合成的影响。结果表明，低浓度硒可提高酶活性并促进蛋白质合成，而高浓度硒则产生抑制作用。     

光照对灵芝液体发酵胞外多糖合成的影响

以灵芝为试验材料,采用干质量法测定生物量,苯酚-硫酸法测定胞外多糖产量,研究了单色LED光照处理对灵芝菌丝体液体发酵合成胞外多糖的影响。结果表明:在80μmol·m^-2·s^-1 LED光照12h条件下,不同LED光照处理均能促进细胞生长和胞外多糖合成,其中白光LED最有利于细胞生长,蓝光LED最有利于胞外多糖合成。综合考虑生物量和胞外多糖产量,以100μmol·m^-2·s^-1蓝光LED光照10h效果最佳,生物量和胞外多糖产量分别为15.16g·L^-1和3.102g·L^-1,比黑暗处理提高了45.91%和109.74%。光照对灵芝细胞生长和胞外多糖合成具有调控作用,为灵芝液体发酵合成胞外多糖的高效定向生产提供指导。     

侧耳液体培养特性及胞外酶活性研究

本文测定了侧耳在PDY液体培养基中生长时 ,培养液pH值的变化 ,蛋白质含量和菌丝体重量 ;研究了淀粉酶、羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、邻苯二酚氧化酶、愈创木酚氧化酶和漆酶的活性变化。结果表明 :在整个培养基内六种酶均有酶活性 ,但不同酶的活性有较大差异 ,产酶高峰也不尽相同     

鸡腿菇液体培养基筛选及6-BA对其菌丝体生长的影响

通过不同培养基对鸡腿菇进行液体培养表明 :鸡腿菇在小麦粉培养基中生长良好 ,玉米粉培养基次之。以小麦粉培养基为基础 ,通过添加不同浓度的 6 -BA ,探讨 6 -BA对鸡腿菇菌丝体生长的影响。结果表明 :低浓度 6 -BA对鸡腿菇生长有促进作用 ,高浓度 6 -BA有抑制作用 ,其最适作用浓度为 0 .1 5mg/L。     

糙皮侧耳多糖分解酶和木质素酶活性研究

本文测定了侧耳在ＰＤＹ培养液中生长时，培养液ＰＨ值的变化，蛋白质含量和菌丝体研究了淀粉酶，羧甲基纤维素酶，半纤维素酶，邻苯二酚氧化酶，愈创木酚氧化酶和漆酶的活性变化。结果表明；在整个培养欺内六种酶均有酶活性，但不同酶的活性有较大差异，产酶高峰也不尽相同。