甜瓜高效不定芽再生体系的建立

对8个基因型甜瓜再生能力进行研究,筛选出再生能力较强的基因型,并以其为材料对外植体类型,不定芽诱导、伸长和不定根诱导3个阶段植物生长调节剂的类型与质量浓度进行优化筛选,旨在建立甜瓜高效的不定芽再生体系。结果表明,不同基因型间再生能力存在差异,2个厚皮甜瓜基因型B8、P110和1个薄皮甜瓜基因型IVF05再生能力较强,其中B8再生效果最好;以B8材料为基础建立再生体系,发现不定芽诱导能力最高的外植体为子叶近胚轴端,不定芽诱导阶段最适的培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1ABA,不定芽诱导率96.7%;不定芽伸长和不定根诱导最适的培养基分别为MS+0.1 mg·L^-16-BA和1/2 MS+0.5 mg·L^-1IBA,获得的再生苗生根率达93.3%。     

西瓜高效再生体系的建立

以优质小果型西瓜品种西173和小麒麟为材料,系统研究了以子叶为外植体的西瓜组培高效再生体系。结果表明:2个西瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大差异,在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1的分化培养基上,西173不定芽诱导率最高达到92.6%,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1培养基上小麒麟不定芽诱导率最高达到89.7%;诱导出的不定芽丛伸长以MS+KT0.2mg·L-1培养基最佳;2个西瓜品种不定芽在MS+IBA0.2mg·L-1培养基上均获得了较好的生根效果。组培苗移栽后保持高温、高湿是移栽成活的重要条件。西瓜高效再生体系的建立为应用基因工程技术改良西瓜品质和提高其抗逆、抗病性奠定了基础。     

小型西瓜离体器官再生的影响因素

以3种基因型的小型西瓜无菌苗为试材,采用体外培养的方法,研究了外植体类型、激素组合、继代生根培养对离体器官再生的影响。结果表明:以子叶节为外植体的不定芽再生效果好于子叶;不同基因型最适的激素组合不同,W1的最适诱导培养基是MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,再生频率为20.00%,W2的最适诱导培养基是MS+3.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,再生频率为30.00%,W3的最适诱导培养基是MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,再生频率为24.00%;最佳生根培养基为MS+NAA 0.5mg/L。     

诱导西瓜离体器官再生的主要影响因素

以3种基因型材料的西瓜无菌苗子叶节为试材,对诱导不定芽的主要影响因素进行了探讨。结果表明：西瓜子叶节诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1;子叶节比子叶诱导不定芽的效果好;3种基因型材料之间诱导效果有显著差异;最佳生根培养基为MS+IAA 0.3 mg·L^-1。     

紫外辐照花粉授粉诱导西瓜单倍体研究

以6种不同基因型的西瓜为材料,通过用紫外线辐射的花粉授粉结合胚胎培养,研究不同基因型、辐照剂量和胚挽救时间对西瓜单倍体诱导的影响,并对再生苗进行倍性鉴定。此外,还对诱导培养基和生根培养基进行优化。结果表明:单倍体的诱导率和植株再生率受基因型、胚挽救时间和辐照剂量的影响,而且还与季节有关。     

西瓜子叶离体再生体系的建立

以西瓜品种134-2标为材料,进行子叶高效再生体系建立的研究。结果表明:西瓜子叶不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 0.2mg/L,出芽率可达96%;芽伸长最佳培养基为MS+KT 0.2mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IAA 0.1mg/L。     

西瓜未成熟胚高效再生体系的建立

为了建立西瓜高效遗传转化的再生体系,以西瓜杂交品种‘秀玲’、自交系‘97103’和野生种质‘PI296341’的未成熟胚为外植体,分析了基因型、未成熟胚发育时间和植物生长调节剂等因素对体外再生率的影响,获得了西瓜离体培养再生植株。结果表明,以授粉后24 d的西瓜未成熟胚为外植体,在MS+SH维生素+6-BA2.2 mg·L-1培养基上,‘秀玲’、‘97103’和‘PI296341’的未成熟胚外植体能够诱导出不定芽,不定芽诱导率为87.78%、82.78%和86.11%,不定芽在MS+SH维生素+6-BA 0.2 mg·L-1+IAA 0.02 mg·L-1培养基上伸长、展叶,在MS+IBA 1.0mg·L-1的培养基上诱导生根得到完整的再生植株。以未成熟胚为外植体获得再生植株的途径,可为西瓜遗传转化提供有效的受体系统。     

西瓜高效组织培养再生体系的初步研究

以不同基因型材料的西瓜品种为试材,用 MS、Miller、N6与不同激素配比的培养基,初步建立了西瓜离体组培再生体系。结果表明,不同浓度的MS培养基均可长出无菌苗,但随着MS培养基营养元素浓度的增大,无菌苗生长发育受到延尽和抑制作用加强,其中以1/2MS 0.5～2mg/L BA 0.1mg/L NAA长出的无菌苗作外植体诱导愈伤组织最快,改良的MS（MS1 2mgd/L BA 0.1mg/L NAA）是西瓜愈伤组织诱导的最适培养基,改良的MS（MS1 2mg/L BA 0.1mg/L NAA 5mg/L AgNO3）是外植体系诱导分化不定芽的最适培养基,离子束等物理因子处理愈伤组织发现对诱导分化不定芽具有刺激和促进作用。     

新疆树上干杏不定芽再生影响因子的研究

以新疆树上干杏茎段为材料,研究了外植体消毒、植物激素的种类及其浓度和取材时间等因素对茎段不定芽再生的影响。结果表明:75%酒精30 s+0.1%HgCl25 min+15%H2O220 min具有较好的灭菌效果,且不会较大影响茎段不定芽的再生;最适诱导不定芽再生的培养基为改良MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养15 d后出芽率可达到90.8%;分裂素TDZ促进不定芽再生的效果优于6-BA;春季取材效果明显优于夏季取材。     

黄瓜10个基因型材料外植体内源激素水平及比例对其离体再生的影响

以10个不同基因型黄瓜(CucumissativusL.)子叶节外植体为材料,研究外植体内源激素水平、诱导分化阶段不同外源激素及配比对外植体分化率、不定芽数量和形态的影响,揭示影响不同基因型黄瓜离体再生活力的关键激素因素,并进一步优化黄瓜再生体系。结果表明:MS培养基不添加植物生长调节剂时,10个材料的分化率差异显著,内源CTK水平与分化率呈显著正相关,相关系数分别为0.4544(培养0 d)和0.6110(培养14 d)。MS培养基添加外源1.5 mg·L-1 6-BA后,不同基因型的分化率从5.95%～20.45%提高到了42.39%～80.43%。不定芽形态观察发现:外植体再生过程形成了两种不同类型的不定芽:Ⅰ型芽为正常芽,叶片舒展,茎秆明显;Ⅱ型芽为畸形芽,有叶片形态,但无明显的茎秆结构。不同基因型材料分化形成Ⅰ型和Ⅱ型不定芽的比例差异显著,Ⅰ型/Ⅱ型不定芽比值高的基因型最终再生苗率显著高于比值低的基因型。相关性分析显示不同材料中产生Ⅰ型/Ⅱ型外植体比例与其IAA/ABA比值的相关性最高(R2=0.4214),Ⅰ型/Ⅱ型不定芽比值与再生苗率呈显著正相关(R2=0.5623)。对...     

黄瓜子叶离体再生体系研究

以20个黄瓜自交系2～3天的子叶为外植体,比较了不同植物生长调节物质组合、AgNO3质量浓度和基因型对芽的诱导、增殖、伸长、生根的影响,从而建立了快速高效的黄瓜子叶离体再生体系.结果表明,最佳的培养基配方:诱导培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L AgNO3 1.0 mg/L,增殖培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L AgNO3 1.0 mg/L,伸长培养基为MS 6-BA 0.1～0.2 mg/L;生根培养基为MS.20种基因型均能诱导出再生芽,诱导率较高的自交系排序:IL 69＞IL 103＞IL 67＞IL 99＞IL 77＞IL 57,其诱导率依次为94%,88%,87%,78%,70%,62%.     

桃叶片再生不定芽的研究

以桃栽培品种曙光、金童5号和甜桃王试管苗叶片为外植体,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类及质量浓度组合、基因型和试管苗继代次数等因素对叶片再生的影响。结果表明,适宜暗培养的培养基为LP+1.5mg·L-1TDZ+0.15mg·L-1NAA;光培养基为LP+0.5mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.3mg·L-1NAA和LP+0.6mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.4mg·L-12,4-D;金童5号和曙光具有较强的再生能力,再生率分别为21.8%和14.5%;曙光和金童5号试管苗继代第1～11次叶片的再生能力与继代前3次愈伤组织相比形成率较高;曙光再生苗在培养基1/2MS+0.5mg·L-1NAA上生根率为100%,平均生根条数为7.9。     

蝶形花亚科8种槐树的组织培养及再生能力的基因型效应

 对国槐等8种(亚种) 蝶形花亚科植物组织培养再生能力的研究结果表明: 8种槐树叶片的再生能力相差较大, 不定芽分化率由高到低排序为金叶槐( 79.03% ) 、黄金槐( 41.46% ) 、香花槐(36.2% ) 、刺槐(34.2% ) 、黄花槐(25% ) 、国槐(22.7% ) 、四倍体刺槐(21% ) 、红花槐(18% ) ; 愈伤组织诱导率、芽分化率及试管苗的生根率排列次序与叶片芽分化率基本相同。从本试验结果可得出8种槐树基因型对组织培养再生能力具有如下调控效应及特点: 属间、种间及亚种间基因型对培养基种类及植物生长调节剂的要求, 对脱分化与再分化能力的调控, 对不同组织、器官的再生能力的调控均具有同一性;不同基因型、甚至同一基因型的不同组织、器官还具有一定的特异性。     

厚皮甜瓜品种离体培养再生植株能力的基因型差异研究

以6个厚皮甜瓜品种为材料,对其子叶外植体的再生能力进行了比较。结果表明:在诱导不定芽分化培养基MS+6-BA1.0mg/L上,不同品种的不定芽分化频率差异显著,其中绿宝石品种的不定芽分化频率最高,达到100%,西域1号和黄河蜜次之,分别为96.67%和73.33%,玉金香和黄醉仙较低,分别为33.33%和16.67%,白兰瓜品种最低,为6.67%。在不定芽伸长培养基MS+6-BA0.05mg/L上,分化完全的不定芽能够长大伸长,当高度达到2cm左右时,切下转接于MS+IAA0.5mg/L培养基上诱导生根,形成完整再生植株。试验结果还表明,组培环境中光照条件的改变对不定芽分化频率影响较大,外植体置于黑暗处进行5d预培养,6个品种的不定芽分化频率均有所降低,但愈伤组织的生长更加旺盛或不受影响。     

小西葫芦黄花叶病毒外壳蛋白基因导入西瓜的遗传转化

研究了西瓜品种ZKM的再生体系和农杆菌介导小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellowmosaic virus,ZYMV)的外壳蛋白(cp)基因导入西瓜的遗传转化体系。结果表明,质量分数0.6%琼脂是适宜种子萌发的基本培养基,切取5d龄的西瓜无菌苗子叶为外植体,接种在MS+BA2.0mg/L诱导培养基上,诱导不定芽效率最高。选用75mg/L卡那霉素筛选西瓜抗性芽较为合适,外植体经预培养2～3d,菌液浓度以OD600nm值为0.4,共侵染10min有利于提高西瓜转化的效率。经PCR检测,ZYMVcp基因已经导入西瓜植株,转化频率为0.15%。     

百香果组织培养及植株再生

以MS为基本培养基,百香果茎段为外植体,进行百香果组织培养及植株再生的研究。结果表明:MS+6-BA 2.0mg/L适合丛生芽诱导,诱导率达100%;MS+6-BA 1～1.5mg/L+IBA 0.1～0.2mg/L适合继代增殖培养;1/2MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L适合生根诱导,诱导率达100%。     

膜荚黄芪子叶节植株再生体系的建立

以膜荚黄芪无菌苗子叶节为外植体,建立了简单、高效和稳定的膜荚黄芪再生体系。结果表明:不定芽诱导的最适培养基是MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.10mg/L,每个子叶节外植体平均出芽数为3个以上,再生频率达75.5%;生根最适培养基为1/2MS+IBA 0.5mg/L;移栽后成活率达75%以上。     

辐照花粉诱导西葫芦单倍体

摘　要：利用不同剂量的60Co γ射线辐照西葫芦花粉后授粉,剥取不同发育阶段的胚接种在E20A培养基上进行培养,研究不 同基因型、辐照剂量、剂量率对西葫芦单倍体诱导的影响。结果发现：单倍体的产生和植株再生率受基因型、胚发育阶段和 辐照剂量的影响明显。281基因型平均单倍体诱导率最高,为1.30 %;点状胚和箭形胚易发育成单倍体苗;辐照剂量80~100 Gy时获得点状胚和箭形胚及胚总数最多,杆状胚的植株再生率和植株成活率最高,分别是83.33 %和35.71 %;适宜的剂量率 为45.19 Gy·min^-1。     

两个花椰菜品种再生体系的研究

以2个花椰菜品种的子叶和上胚轴为外植体,以MS为基本培养基,设置不同激素浓度,建立再生体系。结果表明:子叶作为外植体时不定芽分化率低,子叶大部分发生黄化。上胚轴作为外植体不定芽分化率较高,在适合的培养基上均能达到100%,‘祁连白雪’上胚轴最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L,‘新东海明珠80天’的最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA0.5 mg/L。分化后得到的不定芽在MS+6-BA 0.5 mg/L培养基上伸长后,在MS+IAA 0.5 mg/L的培养基上生根,生根率达100%,移植成活率95%。     

青花菜DH系带柄子叶高频再生体系的建立

以青花菜DH系3-6、3-7和3-9带柄子叶为外植体,研究其高频离体再生体系,比较了不同基因型、不同质量浓度植物生长调节剂、不同时期苗龄外植体及不同浓度AgNO3添加剂对不定芽再生频率的影响。结果筛选出3-6和3-7两个基因型：8 d苗龄外植体不定芽的再生频率分别为96.9%和97.8%（培养基：MS+0.02 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA+4 mg·L-1 AgNO3 +10 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖）,平均外植体的再生芽数分别为15、14个,生根培养诱导生根率均为100%（培养基：1/2MS+0.05 mg·L-1 NAA + 7 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖）,驯化移栽成活率均达100%。