穴位接种猪TGE苗家兔β－EP与免疫活性细胞动态研究

本试验用酶标组化方法对穴位接种猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）苗家兔外周血、脾、淋巴结的β－内啡肽（β－ＥＰ）进行了动态定量和定位研究，外周血β－ＥＰ在穴位注苗后３０ｍｉｎ有一个峰值，迅速下降后缓慢升高，第５天达第２个峰值，然后缓慢下降；脾和淋巴结仅在注苗后５天出现一个峰值。首次发现活化Ｔ细胞存在β－ＥＰ阳性反应细胞，而Ｂ细胞不存在。     

家兔胚源性特异蛋白－1的分泌特征及生物活性

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＰＡＧＥ分离，以双波长薄层自动扫描仪扫描测定了家兔胚源性特异蛋白－１（ｒＥＳＰ－１）的分泌特性；离体组织培养分析了ｒＥＳＰ－１对子宫蛋白质合成的影响。结果表明，早孕期ｒＥＳＰ－１的分泌呈二次曲线，第３天分泌出现，第４天出现第一峰值，第５天下降，然后迅速增加，最大分泌在第７天，第８天迅速回降。其分泌量随胚胎数（或黄体数）的增加而升高，且受ＦＳＨ－ＬＨ和ＰＭＳＧ－ＬＨ的影响。ｒＥＳＰ－１使子宫细胞ＲＮＡ增加，促进子宫蛋白质合成     

半胱胺引起绵羊外周血液β－内啡肽和几种主要代谢激素的变化

在４头装置长久性胃肠道瘘管和临时性颈静脉血管插管公绵羊研究表明，经十二指肠瘘管灌注半胱胺（８０ｍｇ／ｋｇ体重）后５ｄ内外周血液的血浆ＳＳ浓度降低３３．６８％（２３３．１±４．４ｐｇ／ｍｌ对１５４．６±＋５．２ｐｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０１）；胃泌素水平升高２３．９％（Ｐ＜０．０５），ＧＨ、胰岛素分别升高１２４．２％（Ｐ＜０．０１）和１４４．０８％（Ｐ＜０．０１）；Ｔ３、Ｔ４水平分别增加７１．８％（ｐ＜０．０１）和１７．５５％（Ｐ＜０．０５）；β－ＥＮＤ水平第３天升高５８．１１％（５７．２９±１．６９ｐｇ／ｍｌ对３２．４４±２．５０ｐｇ／ｍｌ，Ｐ＜０．０１），第５天回落（Ｐ＜０．ｍ）。本实验证明半胱胺可抑制反刍动物ＳＳ水平，使外周血液ＧＨ、胃泌素、胰岛素、Ｔ_３、Ｔ_４和β－ＥＮＤ水平均相应升高，提示促进了反刍动物的消化代谢水平。     

激光穴位照射对子宫卵巢病牛血浆β—内啡肽含量和发情的影响

３４头黑白花奶牛，患子宫炎或卵巢疾病而不孕，将其随机分为２组。激光组（２４头）用Ｈｅ－Ｎｅ激光照射交巢穴，７ｄ为１疗程。间歇７ｄ再照射第２疗程。对照组（１０头）不用激光照射。ＲＩＡ法分析血浆β－内啡肽（β－ＥＮＤ）含量。结果发现，激光组病牛血浆β－ＥＮＤ由照射前（第０天）的１１２．８６４±５８．９４７ｐｇ／ｍｌ升高到第１疗程后（第８天）的１７５．６３４±１０４．３１０ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０５），间歇１周后为（第１４天）２３７．６２７±１５３．１３６ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１），第２疗程后（第２２天）为１９３．４４８±１０４．３７８ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０５）。显著高于对照组同期测定值。同时观察到，激光组发情牛头数为２１头，发情率８７．５％；对照组发情３头，发情率３０％。组间差异显著（Ｐ＜０．０１）。表明激光照射穴位可使病牛β－ＥＮＤ分泌增加，并参与调节生殖机能     

西农萨能奶山羊妊娠期外周血浆孕酮、17β──雌二醇和皮质醇的变化

采用放射免疫分析法测定了１４只西在萨能奶山羊妊娠期外周血浆孕酮（Ｐ４）、１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和皮质醇（Ｆ）水平。血浆Ｐ４水平在配种当日为０．５ｎｇ／ｍｌ，以后升高，妊娠２０天时为４．７ｎｇ／ｍｌ。在妊娠３０－５０天，Ｐ４水平有所下降，最低值在４０天，为３２ｎｇ／ｍｌ，Ｐ４水平从６０天开始一直维持在６．２ｎｇ／ｍｌ左右，到妊娠结束时降低到０．６ｎｇ／ｍｌ。血浆１７ｐ－Ｅ２水平在配种后保持稳定，从妊娠４０天开始稳定上升，在妊娠结束时达到峰值７９．８ｐｇ／ｍｌ，血浆下水平在配种后呈波动式下降，到妊娠６０天变为波动式升高，并在妊娠结束时达到峰值１７ｎｇ／ｍｌ。前言西农萨能奶山羊是经过数１０年选育的高产品种，在国内享有盛名。关于西农萨能奶山羊初情期［１］、发情周期［２，３］、分娩期［４］以及非繁殖季节［５］的内分泌状况已有研究报告，但对其妊娠期的内分泌变化迄今尚无资料。为了研究西农萨能奶山羊妊娠期主要生殖激素的变化情况，给奶山羊妊娠生理学及妊娠病理学提供基础资料，我们应用放射免疫分析法（ＲＩＡ）分析了西农萨能奶山羊妊娠期外周血浆孕酮（Ｐ４）、１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和皮质醇（Ｆ）的水平。材料和方法在西?     

番鸭细小病毒弱毒株的选育及其生物学特性

应用生物技术对番鸭细小病毒莆田株（ｍｕｓｃｏｖｙｄｕｃｋｌｉｎｇｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＭＰＶ－Ｐ）进行诱变，选育出符合制苗用的弱毒疫苗株（ＭＰＶ－Ｐ１）。该弱毒株失去了对１日龄雏番鸭的致病力，对番鸭胚的ＥＬＤ５０为ｌｇ４．５～ｌｇ５．０；对ＭＤＥＦ细胞ＴＣＩＤ５。为ｌｇ５．０～ｌｇ６．０；在雏番鸭体内连续传５代，未见毒力返强现象。１日龄番鸭免疫接种ＭＰＶ－Ｐ１后，第３天部分鸭血清中出现抗体，第７天全部出现抗体，第２１～３０天抗体效价值达高峰。肌肉注射比滴鼻免疫接种方法效果好。该弱毒株具有良好的免疫原性和遗传稳定性。     

绵羊妊娠期外周血T细胞及其亚群的观察

应用酸性ａ－萘酯酶（ＡＮＡＥ）组化反应标记绵羊妊娠期外周血Ｔ细胞，与间情期相比，Ｔ细胞总数和辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）无明显变化（Ｐ＞０．０５），而抑制性Ｔ细胞（Ｔｓ）明显增加（Ｐ＜０．０５）。间情期和妊娠期Ｔｈ／Ｔｓ分别为４．６７和２．６。结果提示，妊娠期羊可能通过增加Ｔｓ细胞来压低母体免疫水平。     

水牛实验感染肝片吸虫后IGF—I和β内啡肽含量变化及其对免疫功能的影响

８头健康阉公水牛，５头经口每日感染肝片吸虫囊蚴６０个／头，连续２０ｄ；３头不感染作对照，于感染前和感染后每周采集颈静脉血样１次，共２７次，分别测定血浆ＩＧＦ－Ｉ，β内啡肽（β－ＥＰ）以及ＷＢＣ，ＤＣ；Ｔ，Ｂ淋巴细胞比例和血清抗肝片吸虫ＩｇＧ水平，结果ＩＧＦ－Ｉ和β－ＥＰ分别在开始感染后第５周和第４周显升高，并持续互第２３周和第９周，ＩｇＧ水平也在第４－２２周显高于对照组，嗜酸性粒细胞和Ｂ淋巴细     

水貂病毒性肠炎弱毒疫苗株的选育及实验免疫研究

从自然发病死亡貂体内分离到１株水貂病毒性肠炎（ＭＶＦ）强毒株－ＭＥＶ，将该株病毒在犊牛睾丸（ＣＴ）细胞和猫肾传代细胞（ＣＲＦＫ）上混合培养进行适应。当传至５６代时，在ＣＴ细胞上出现细胞病变（ＣＰＥ），而后单独在ＣＴ细胞上传至７０代，经终点稀释克隆和鉴定获得一弱毒株。以其制备的ＣＴ细胞弱毒疫苗，给每只貂注射或口服１～５ｍＬ均未见任何不良反应。注苗后１２、６０、７２、１８０ｄ攻毒，保护率均为１００％。     

半胱胺对小鹅血浆中β-END和某些激素的影响

选用２４只二月龄的杂交鹅（川白×太湖）,随机分成对照组（１２只）和试验组（１２只）。试验组于日粮中一次性添加半胱胺（１００ｍｇ／ｋｇ·ＢＷ）。处理后第三天从翅静脉采取血样。用ＲＩＡ双抗法测定其中的β－ＥＮＤ、ＩＧＦ－Ｉ和各种激素的含量。结果表明：试验组的ＳＳ含量较对照组低１９．６４％（Ｐ＜０．０５）、而ＧＨ、ＩＧＦ－Ｉ和β－ＥＮＤ含量较对照组分别高５０．００％（Ｐ＜０．０１）、６２．８０％（Ｐ＜０．０１）和４４．５５（Ｐ＜０．０５）;与对照组相比较,试验组的ＴＳＨ低３２．３２％（Ｐ＜０．０５）,Ｔ４下降１４．７２％（Ｐ＞０．０５）,而Ｔ３升高２６．８０％（Ｐ＜０．０１）。以上结果提示：半胱胺可能是通过降低鹅血液中ＳＳ含量,使β－ＥＮＤ、ＩＧＦ－Ｉ、ＧＨ和Ｔ３水平升高,从而促进了鹅的快速生长。     

家兔外用免疫器官β－内腓肽的免疫组织化学研究

采用荧光免疫组织化学方法，对家兔外周免疫器官β－内腓肽（β－Ｅｐ）进行定位研究．β－Ｅｐ阳性反应细胞存在于Ｔ淋巴细胞区，而Ｂ淋巴细胞区不存在。推恻β－Ｅｐ对外周免疫器官调节作用是通过Ｔ淋巴细胞完成的。在Ｔ淋巴细胞区即有细胞膜上的β－Ｅｐ阳性细胞反应，又有细胞浆内β－Ｅｐ阳性细胞反应，说明β－Ｅｐ对免疫器官的调节作用可能存在反馈调节机制。     

家兔外周免疫器官β—内腓肽的免疫组织化学研究

采用荧光免疫组织化学方法，对家兔外周免疫器官β－内腓肽（β－Ｅｐ）进行定位研究。β－Ｅｐ阳性反应细胞存在于Ｔ淋巴细胞区，而Ｂ淋巴细胞区不存在。推测β－Ｅｐ对外周免疫器官调节作用是通过Ｔ淋巴细胞完成的。在Ｔ淋巴细胞区即有细胞膜上的β－Ｅｐ阳性细胞反应，又有细胞浆内β－Ｅｐ阳性细胞反应，说明β－Ｅｐ对免疫器官的调节作用可能存在反馈调节机制。     

仔猪后海穴注苗对经穴阻抗变化的影响研究

于仔猪后海穴注猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）疫苗，观察了三窝仔猪督胺经百会穴，任脉经中脘穴，膀胱经肾俞穴及非穴点低阻抗的变化。结果，督脉百会穴在注苗后０－３小时间与注苗前生理值比较呈显著下降变化，而中脘，肾俞，非穴点却无显著变化，三窝猪所测各穴低阻抗在注苗后２４小时又已基本恢复到注苗前的生理水平。证明后海穴注苗能增强所在经穴阻抗的敏感性。     

具有中和活性的减蛋综合征病毒单抗的研制

用减蛋综合征病毒毒株ＷＰＤＶ２０５纯化抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，在最后一次免疫后第３天取脾细胞与ＳＰ２／０细胞在ＰＥＧ－４０００的作用下融合。用间接ＥＬＩＳＡ初步筛选出阳性克隆１０株（４Ｂ１、１Ｄ４、２Ｄ６、３Ｄ６、３Ａ５、２Ａ１、３Ｃ６、３Ｃ１、１Ｂ３和２Ｃ５）。这些杂交瘤细胞经克隆化和再次检测后生产腹水，用微量细胞中和试验筛选出具有中和活性的单克抗隆体４株（４Ｂ１、３Ｃ１、３Ｃ６和２Ｃ５），其     

山莨菪碱对内毒素诱导山羊弥漫性血管内凝血(DIC)的影响

３０头杂交山羊随机分成３组，第Ⅰ组（ｎ＝６）作为对照组；第Ⅱ组（ｎ＝１２）静注大肠杆菌内毒素（１８００ＥＵ／ｋｇ）两次，间隔２４小时；第Ⅲ组（ｎ＝１２）在第Ⅱ组处理基础上提前１０分钟静注山莨菪碱（２．５ｍｇ／ｋｇ），于处理后第１、３、５、７、９、１２小时分别检测血小板数、血浆纤维蛋白原含量、血浆凝血酶原时间（ＰＴ）、血浆凝血酶时间（ＴＴ）、副凝试验３Ｐ和ＥＧＴ指标。结果表明：第Ⅱ组迅速发生ＤＩＣ，表现血小板减少、纤维蛋白原含量下降、ＰＴ和ＴＴ延长、３Ｐ和ＥＧＴ阳性（Ｐ＜０．０１）；而第Ⅲ组血小板数在１３小时明显高于第Ⅱ组，纤维蛋白原含量于第５小时后高于第Ⅱ组（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），ＰＴ和ＴＴ亦比第Ⅱ组显著缩短（Ｐ＜０．０１），３Ｐ和ＥＧＴ的阳性检出率低于第Ⅱ组，结果提示应用山莨菪碱能明显抑制血小板减少，阻止ＤＩＣ的发生     

兔轮状病毒致细胞病变株的分离鉴定

用ＭＡ－１０４细胞培养，结合电镜和ＲＮＡ电泳检查，自幼兔腹泻粪便中分离鉴定出一株致细胞病变的兔轮状病毒ＡＤ７．４株，该株传至第４代时，于３６小时开始出现细胞病变效应（ＣＰＥ）；传至第７代时，于２４小时ＣＰＥ达７５％，以上，且病毒滴度为１０＾５．０ＴＣＩＤ５０／０．１ｍｌ。     

冷热应激对蛋鸡生理生化指标的影响

１８周龄的伊莎蛋鸡在１３～１８℃、６０％～７０％ＲＨ的环境条件下，饲养至２３周龄（产蛋率为７０％）时，随机分为８组，（每组８只），用于模拟蛋鸡在南京地区自然急性冷热应激条件下的部分生理生化指标变化。试鸡分别在３０℃－７０％ＲＨ、３５℃－７０％ＲＨ、３５℃－９０％ＲＨ和２℃－５５％～７２％ＲＨ条件下进行试验，每种处理均设有一组适宜温度组为对照，试验期均为７天。结果表明，急性热应激时，蛋鸡血液的ＰＣＶ、ＰＣＯ２、ＬＤＨ的活性、血糖、血清钙、Ｔ４、Ｔ３和Ｅ－１７β的含量均与对照组有显著（Ｐ＜００５）或极显著（Ｐ＜００１）降低；直肠温度较对照组有极显著升高（Ｐ＜００１）。急性冷应激时，蛋鸡直肠温度较为恒定，血液ｐＨ、ＰＣＯ２、Ｈｂ、ＰＣＶ、血糖、Ｃｏｒ含量和ＬＤＨ活性略有升高，但除血糖外差异均不显著（Ｐ＞００５），血清钙、Ｔ４、Ｔ３和Ｅ－１７β的含量降低，且Ｔ４和Ｅ－１７β的含量与对照组差异极显著（Ｐ＜００１）。     

撒坝猪血清蛋白基因型交配组合与繁殖性能的关系

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ＰＡＧＥ） 对撒坝猪前白蛋白（ＰＡ） 、转铁蛋白（ＴＦ） 、酯酶（ＥＳ） 、淀粉酶（ＡＭ） 和碱性磷酸酶（ＡＫＰ）５ 个血清蛋白位点的多态性进行了检测，并根据最小二乘原理对不同蛋白基因型交配组合与繁殖性能的关系进行了分析。结果表明，所检测的５ 个血清蛋白位点均处于Ｈａｒｄｙ －Ｗｅｉｎｂｅｒｇ 平衡状态；除ＡＫＰ 位点外，ＰＡ、ＴＦ、ＥＳ 和ＡＭ 不同基因型交配组合在部分繁殖性状上均表现出显著差异。表明血清蛋白基因型交配组合与繁殖性能之间存在着一定的相关。     

猪流行性腹泻弱毒株的培育

用ＰＥＤＶＣＶ７７７株强毒适应Ｖｅｒｏ细胞系并传至１４７代。以ＰＥＤＶ沪株做效检用强毒，传代毒８３代之后适应仔猪肾原代细胞，自９０年代起进行了５次克隆纯化，克隆是２次群斑（由５～７个单斑组成）的基础上，再进行３次单斑挑选（均是１ｍｍ以内小空斑）以８３－７斑５株继续传代并做系列试验，传代毒的毒价为１０＾７．０～１０＾７．５ＴＣＩＤ５０／０．３ｍｌ。免疫接种途径为后海穴位，克隆后５代（总代次１０４代）     

口蹄疫病毒适应于细胞培养的研究

将不同型（Ｏ，ＡｓｉａＩ）系（兔系和鼠系）和不同代次的口蹄疫病毒适应于ＢＨＫ２１细胞培养物，免化Ｏ型毒传至第１５代即产生明显的细胞病变ＴＣＩＤ５０可达７．０－７．６；兔化ＡｓｉａＩ需传２０代以上才能产生ＣＰＥ，ＴＣＩＤ５０为６．０－６．５。