发酵法生产透明质酸的工艺研究

本文主要研究兽疫链球菌(NACF-036)产透明质酸的条件及其特性.正交实验表明,产透明质酸的最合适培养基是淀粉3%,蔗糖2%,酵母膏1%,蛋白胨2%,轻质碳酸钙0.1%,磷酸氢二钾0.2%,硫酸镁0.1%.在37℃,170rpm,发酵40小时,发酵液中透明质酸的含量达3～4g/L.     

发酵法生产透明质酸菌种的筛选

[目的]寻找利用发酵法生产透明质酸的菌株。[方法]从奶牛鼻黏膜分离到1株透明质酸产生菌,对其进行筛选和菌落生化反应鉴定。分别用紫外线诱变和亚硝基胍诱变处理该菌株,研究诱变前后透明质酸含量的变化。[结果]经初步鉴定该菌株为兽疫链球菌的C群链球菌。筛选菌株的产物呈典型的HA红外吸收图谱。经诱变处理后,菌种菌落形态更大且更明显,呈黏液状。该菌株透明质酸的产量由初始菌株的3.69g/L提高到6.94g/L。[结论]该研究为利用发酵法生产透明质酸提供了科学依据。     

透明质酸的发酵及提取工艺

采用诱变筛选获得的马疫链球菌EF02,发醇后透明质酸(hyaluronic acid,HA)的产量达3.05g/L,通过单因素及正交试验摇瓶培养优化发酵培养基,再经15L发酵罐发酵,发酵后HA的产量为3.47g/L,与EF02优化处理前相比,提高了13.77%;通过对发酵条件优化,发酵后HA的产量为3.66g/L,与EF02优化处理前相比,提高了20.0%。对产物HA进行分离纯化,HA提取率达98.36%,HA纯度达91.28%,蛋白质残留率为0.97%。     

透明质酸摇瓶发酵培养基的优化

[目的]优化透明质酸摇瓶的发酵培养基。[方法]利用Plaekett—Btmnan设计及响应面分析法（RSM）对透明质酸产生菌摇瓶发酵培养基进行优化,确定影响透明质酸产量的关键因子。[结果]影响透明质酸产量的关键因子为葡萄糖和酵母膏,葡萄糖最佳浓度为55．78g／L,酵母膏的最佳浓度为23．43s／L;在此条件下,发酵液透明质酸的平均产量为0．219（‰。）。[结论]通过对培养基的优化,透明质酸产量得到提高。试验值与预测值基本一致。     

透明质酸摇瓶发酵培养基的优化

[目的]优化透明质酸摇瓶的发酵培养基。[方法]利用Plaekett-Burman设计及响应面分析法(RSM)对透明质酸产生菌摇瓶发酵培养基进行优化,确定影响透明质酸产量的关键因子。[结果]影响透明质酸产量的关键因子为葡萄糖和酵母膏,葡萄糖最佳浓度为55.78 g/L,酵母膏的最佳浓度为23.43 g/L;在此条件下,发酵液透明质酸的平均产量为0.219(OD400nm)。[结论]通过对培养基的优化,透明质酸产量得到提高,试验值与预测值基本一致。     

一种低毒透明质酸产生菌的选育及诱变

用牛鼻黏膜作为菌种的来源,经过血琼脂平板分离和NTG-LiCl复合诱变,获得了一株无溶血性的透明质酸产生菌,经过鉴定为牛链球菌(S. bovis).该菌在37 ℃、pH值7条件下液体发酵24 h,透明质酸最大产率为2.6 g/L,具有微生物发酵法生产透明质酸的潜力.     

透明质酸生产菌的分离鉴定

从牛鼻黏膜中分离纯化得到1株生产透明质酸的菌株,用16S rDNA分析鉴定该菌为马链球菌马亚种,该菌摇瓶发酵生产透明质酸的产量可达3.0 g/L,适合进行透明质酸的发酵生产,Hyl和sagA是影响透明质酸生产质量的最为关键的2种基因,采用PCR检测技术检测出该菌有毒力因子Hyl和sagA.研究结果为构建毒力基因缺失突变株和进行高产透明质酸菌种的选育奠定了理论基础.     

透明质酸产生菌的诱变选育及发酵工艺的研究

研究了透明质酸产生菌兽疫链球菌的诱变筛选及摇瓶发酵条件.通过紫外线和NTG复合诱变处理得到溶血性弱的菌株,突变菌株比出发菌株透明质酸产量提高1倍以上.同时,对摇瓶发酵条件进行了优化,确定了最佳发酵培养基、最适反应温度、最适pH、碳源及氮源的选择.     

不同诱变方法对兽疫链球菌产透明质酸的影响

[目的]采用不同诱变方法对兽疫链球菌（Streptococcus zooepidemicus）进行处理,以期达到提高发酵法生产透明质酸产量的目的。[方法]具体讨论了紫外、DES、微波、温度等不同诱变方法单独和复合诱变对兽疫链球菌产透明质酸的影响。[结果]复合诱变比单一诱变效果好。而最优的复合诱变处理方式为首先紫外诱变处理90s,然后微波诱变处理100s。在此条件下得到的菌株,其透明质酸产量由原始菌株的1．99g／L提高到3．42g／L,相对于原始菌株增加了72％,极大地提高了透明质酸产率。     

透明质酸摇瓶发酵条件的优化

为了进一步提高兽疫链球菌发酵生产透明质酸的产量,通过控制温度、pH值、发酵时间、装液量来优化发酵条件.通过对结果的比较得出最适pH值、最适温度、最适发酵时间、最适装液量.发现在36℃条件下菌体量最多,在38℃条件下透明质酸产量最高；pH值为7.0时菌体量最多,pH值为7.5时透明质酸产量最高；发酵时间为24h时,透明质酸产量最高、菌体量最多；装液量在40％时,透明质酸产量最高,菌体量最多.     

植物氮源对透明质酸发酵的影响

以七种植物蛋白代替牛肉膏和蛋白胨作为氮源进行透明质酸发酵,研究了直接添加、酸解、碱解以及酶解这几种植物氮源的不同处理方式对透明质酸发酵的影响,结果表明:使用碱性蛋白酶水解的棉籽蛋白作为氮源时的效果最好,在摇瓶和30 L发酵罐中的透明质酸发酵产量分别达到了1.47 g·L~(-1)和5.94 g·L~(-1)。     

同步发酵法加工柿醋工艺研究

在传统自然发酵工艺基础上,为缩短柿醋发酵时间,以水柿为原料,在发酵过程中只接种酵母菌,采用同步发酵法,对以柿果浆为原料加工柿醋的加工工艺进行研究.提出同步发酵法加工柿醋的工艺参数为:柿果浆加水量30﹪,酵母菌接种量0.1﹪,发酵温度32℃,发酵周期7 d,每天搅拌3次.通过对该工艺技术在生产中实际应用,取得了较好的效果.     

固态发酵法生产大豆多肽的初步研究

以豆粕粉为原料,以大豆多肽转化率为指标对固态发酵生产条件进行了优化,并对获得的13株蛋白酶产生菌株进一步筛选。结果表明:最佳发酵条件为基质含水量40%,接种量1%,初始pH值6.5,发酵时间120 h,发酵温度28℃;各菌株对蛋白含量无明显影响,但蛋白水解度存在较大差异,其中米曲霉(Aspergillus oryzea)1001和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵后大豆多肽含量可高达26.44%和25.46%。     

透明质酸的微生物发酵法生产与应用概况

透明质酸是由葡萄糖醛酸和N-乙酰葡萄糖胺的二糖组成的高分子黏多糖,广泛地存在于动物组织中,具有独特的生理特性,在许多领域得到广泛的应用.目前,透明质酸的生产方法主要有提取法、微生物发酵法和人工合成法.对微生物发酵法进行了概述,对透明质酸在化妆品、保健品和医学医疗领域的应用进行了简要介绍,并对透明质酸的生产和应用前景进行了展望.     

发酵法生产γ-亚麻酸的研究进展

本文对γ—亚麻酸的来源、生理功能和发酵法生产γ—亚麻酸等有关问题作了简要的综述.     

发酵法生产丙酮酸钠提取工艺的研究

建立了发酵法生产丙酮酸钠的提取纯化工艺:发酵液经超滤膜过滤,滤液使用纳滤膜浓缩,浓缩液过HD-1树脂脱色除杂,收集流出液,流加NaOH溶液调pH至6.8,醇沉结晶,滤除母液后湿粉在46℃条件下真空干燥,粉碎成产品。经检验,提纯产品小样含量、水分等均符合质量标准。     

固态发酵法生产食醋技术

我国食醋生产采用的工艺,大都为固态发酵法,其产品在形态和风味方面都具有独特风格.同态发酵生料制醋工艺,生产设备简单,操作管理比较容易,产品质量和出品率也比较稳定.     

苹果渣发酵法制备黄腐酸的工艺

从实际应用的角度出发,以黑曲霉、绿色木霉、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和假单胞菌组成复合菌剂,对利用苹果渣进行混合发酵生产黄腐酸的工艺进行了研究.试验结果表明,苹果渣发酵制备黄腐酸最佳工艺为:黑曲霉、绿色木霉、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和假单胞菌按1∶1∶1∶2∶2配成复合菌剂,按5％的接种量接入发酵培养基,物料含水量调至50％,以尿素为氮源,添加量1％,发酵时间25 d.