盐度对刺参碳、氮收支影响的初步研究

在温度为(15.0±0.5)℃条件下研究了不同盐度(22.0、27.0、31.5、36.0)对刺参Apostichopusjaponicus生长和碳、氮收支的影响,建立了不同盐度下刺参的碳、氮收支方程。试验刺参体质量为(37.53±1.84)g,将刺参放于品字形循环水槽(40 cm×30 cm×30 cm,水体约为35 L)中饲养,试验共进行28d。结果表明:盐度为31.5的试验组刺参特定生长率(SGR)显著高于其他各组(P<0.05),达到了1.6%/d;不同盐度下刺参对碳、氮的摄食率分别为72.32～127.85 mg/(g.d)和6.59～11.65 mg/(g.d),盐度为31.5时刺参对碳、氮的摄食率最大,盐度升高或降低均导致刺参对碳、氮的摄食率降低;刺参摄食饲料中的碳后,通过粪便排出的碳达到了61.3%～74.4%,其次是呼吸消耗碳(21.7%～34.9%),用于生长的碳最少(3.8%～4.7%);刺参摄取的氮主要消耗在粪便中(56.6%～64.7%),其次是代谢消耗氮(27.0%～32.6%),用于生长的氮最少(7.4%～10.8%)。通过刺参的特定生长率和盐度对其碳、氮收支的影响可以看出,刺参生长的最适宜盐度为27.0～31.5,盐度的升高或降低均会导致刺参的生长减慢。     

饵料和盐度对中国对虾幼虾能量收支的影响

测定了中国对虾Penaeus chinensis 在不同盐度下摄食日本刺沙蚕Neanthes japonica 与配合饲料的摄食量，生长和能量收支，在盐度5－35，水温25℃，中国对虾的摄食率在盐度13时达到最大，摄食能为2244kJ/(g.d)，而最适生长盐度为20，此时的增重率最大，分别为4．6％（干重）和12．5％（湿重），能量利用效率最高（27％），盐度13－35时对中国对虾蜕壳周期的影响不显著，变幅为4．7－4．9d，盐度5时中国对虾的蜕壳周期为6．2d，显著大于其它各盐度条件下的蜕壳周期，盐度影响中国对虾生长的机制主要取决于摄食量和物质及能量转换效率的变化，而蜕壳周期的影响不起主要作用，在盐度31时，摄食添蚕的中国对虾其生长显著大于摄食配合饲料的，摄食沙蚕的增重率为5．88％（湿重），11．95％（干重），能量利用效率为摄食能的23．24％，摄食配合饲料的增重率为3．48％（湿重），7．47％（干重），能量利用效率为摄食能的17．55％，不同饵料对中国对虾生长影响的能量学机制是由能量同化率和转化效率决定的。     

盐度对台湾红罗非鱼能量收支的影响

在水温２８℃的条件下,不限量投喂颗粒饵料,测定了台湾红罗非鱼在淡水和盐度为７,１４,２、,２８和３５％的能量收支。结果表明;盐度对台湾红罗非鱼的特定生长率,转化效率和最大摄食率均有显著影响,盐度为１４‰时,特定生长率和转化效率均达到最高水平,分别为１．４３％和５１．８８％,此时,摄食率也达了大,每天为体重的２．７５％,盐度对吸收效率无显著影响,对物质,蛋白质和能量的吸收效率的平均值分别为６２．９８     

盐度对凡纳滨对虾生长和氮磷收支的影响

采用海水、河口水与淡水及简易设施开展室内封闭式高密度对虾养殖试验,探讨了盐度对虾生长与氮磷收支的影响。结果表明,100 d养殖试验中,未曾换水与用药,养殖试验池主要水质指标虽有程度不等差异,但均控制在对虾生长安全范围。3个试验组对虾成活率随盐度降低分别显著下降88.2%、53.9%和34.8%,(P<0.05);终末体重,河口水组(9.20 g)显著高于海水组(8.49 g)和淡水组(8.45 g)(P<0.05);单位水体产量随盐度降低极显著下降2 443.52、1 597.50和659.52 g.m-3(P<0.01)。试验池氮、磷收支估算结果显示:各试验组氮磷主要收与支的同类项所占比例较接近,特点相同,投入饲料氮与磷分别占氮与磷总收入98.9%、98.1%、96.4%与99.3%、98.9%、97.9%,水层与虾苗共含氮与磷分别占1.1%、2.0%、3.7%与0.7%、1.1%、2.1%;排污、不换水水泥池水层氮占氮总输出比例最高,略高于虾体;污水磷占磷总输出比例明显高于其余项,此不同于泥底虾塘为沉积物氮、磷占氮、磷总输出的比例最高。试验池水层与污水共含氮与磷分别占氮与磷总输出57.7%、61.3%、57.2%与67.9%、66.7%、73.3%,低于虾塘泥底沉积物与水层合计氮与磷占总氮与总磷输出比例;收获虾体氮、磷占氮、磷总输出:35.3%、34.5%、34.4%与19.3%、18.9%、19.0%,饲料利用转化率较好;池水蒸发渗漏与池壁吸附等损失输出氮、磷占氮、磷总输出:7.0%、4.2%、8.5%与12.8%、14.3%、7.6%。     

盐度对仿刺参蛋白摄入量及蛋白酶活性的影响

为研究盐度对仿刺参(Apostichopus japonicus)蛋白摄入量及蛋白酶活性的影响,通过考马斯亮蓝G250染色法间接测定仿刺参蛋白摄入量,福林-酚法测定仿刺参消化道蛋白酶活力。结果表明,在盐度为3.1%时,仿刺参蛋白摄入量最多,消化道蛋白酶活力最强;在盐度2.5%~3.1%范围内,随着盐度的升高,仿刺参蛋白摄入量和消化道蛋白酶活力逐渐升高;在3.1%~3.4%范围内,随着盐度升高,仿刺参蛋白摄入量和消化道酶活力均下降。盐度对仿刺参蛋白摄入量及蛋白酶活性的影响明显。     

刺参养殖池塘周年盐度变化微观特征研究

为研究刺参养殖池塘水体盐度跃层形成机理及盐度跃层变化规律的微观特征,对旅顺一个刺参养殖池塘水体表、底层盐度周年变化和四季代表日盐度昼夜垂直变化进行了监测。结果表明:养殖池塘表层盐度变化为24.6~31.7,底层盐度变化为28.4~31.7,夏季盐度较低;7—9月、12月到翌年3月,养殖池塘表、底层存在盐度差且底层大于表层;夏季和冬季代表日池塘盐度存在昼夜和垂直变化,夏季变化幅度较大;夏季-120 cm以下和冬季-60 cm以下水层无昼夜变化。研究表明,刺参养殖池塘上层盐度波动较大,下层基本上稳定。     

刺参养殖池塘周年盐度变化微观特征研究

为研究刺参养殖池塘水体盐度跃层形成机理及盐度跃层变化规律的微观特征,对旅顺一个刺参养殖池塘水体表、底层盐度周年变化和四季代表日盐度昼夜垂直变化进行了监测。结果表明:养殖池塘表层盐度变化为24.6³1.7,底层盐度变化为28.431.7,底层盐度变化为28.4³1.7,夏季盐度较低;7—9月、12月到翌年3月,养殖池塘表、底层存在盐度差且底层大于表层;夏季和冬季代表日池塘盐度存在昼夜和垂直变化,夏季变化幅度较大;夏季-120 cm以下和冬季-60 cm以下水层无昼夜变化。研究表明,刺参养殖池塘上层盐度波动较大,下层基本上稳定。     

温度对中华鳖稚鳖氮收支的影响

于2003年12月购买当年繁殖的中华鳖稚鳖(28.42-49.50 g),投喂中华鳖稚鳖配合饲料,在饱食状态下进行摄食-生长试验(试验周期为56 d),试验设25℃、28℃和31℃3个温度处理,研究了温度对中华鳖稚鳖生长率和氮收支的影响。方差分析表明,温度对其最大摄食率、特定生长率和饲料转化效率均有显著影响(P<0.01),它们均有随温度的升高而增加的趋势,31℃时湿重、干物质和蛋白质的特定生长率(SGRw,0.88%、SGRd,1.03%和SGRp,1.21%)和湿重及蛋白质的转化效率(Kw,18.99和Kp,16.81)均为最大值。方差分析表明,温度对氮收支各组分的平均值均存在显著影响(P<0.01),它们均随温度的增加而增加,31℃时摄入氮、生长氮、粪便氮和氮排泄分别为10.84 mg/(g.d)、1.77 mg/(g.d)0、.77 mg/(g.d)和8.31 mg/(g.d),偏相关分析表明,温度对中华鳖稚鳖氮生长效率和氮排泄量的影响机制并非通过温度对最大摄食率的影响而发生作用,其作用机制很可能是温度-代谢-氮生长效率(氮排泄量)。31℃时的氮收支方程可以表述为:100CN=16.81GN 7.18FN 76.01UN,式中CN、GN、FN、UN分别表示摄入氮、生长氮、粪便氮和排泄氮。     

盐度和温度对条石鲷幼鱼能量收支的影响

以条石鲷幼鱼(初始体重5.46 g)为试验对象,研究不同盐度(17.5‰,22.5‰,27.5‰,32.5‰,37.5‰和42.5‰)和不同温度(18℃,22℃,26℃和30℃)对条石鲷幼鱼生长及能量收支的影响。结果表明：盐度和温度对条石鲷幼鱼的特定生长率、摄食率、转化效率及能量收支分配率均有显著影响,但对吸收效率影响不显著。在盐度为22.5‰,温度为22℃时,条石鲷幼鱼的特定生长率、转化率、摄食率、吸收率及生长能分配率均达到极大值,而排粪能、排泄能及代谢能分配率则处于较低水平。即在盐度22.5‰,温度22℃时,条石鲷幼鱼分别得到最佳的能量分配模式,此时的饵料系数最低,生长最快,是条石鲷幼鱼的最优养殖条件。能量收支方程分别为：100.00C=7.97F+8.66U+26.47G+56.90R(盐度22.5‰);100.00C=11.52F+6.13U+18.96G+63.39R(温度22℃)。研究发现,条石鲷幼鱼属于高代谢、低生长型鱼类。     

温度,盐度对花鲈能量收支的影响

本试验采用鱼类生物能量学的方法,对花鲈个体水平上的能量转换进行了研究。提出了不同温度、不同盐度条件下花鲈能量收支的实验方程,结果表明：盐度对大规格花钙鱼种能量收支各组分的影响大于温度;花鲈夏花鱼种和大规格鱼种分别在盐度５和１０时能获得最佳能量分配模式;温度对大规格花鲈鱼种的能量收支各组分的分配比例影响不大,在水温１５－３０℃范围内,其平均能量收支式为;１００℃＝１．７７３Ｆ＋１．１３５Ｕ＋４０．３     

低盐胁迫下仿刺参DD104基因的定量表达分析

以2龄仿刺参Apostichopus japonicus为试验材料,利用实时定量PCR技术分析了DD104基因在仿刺参不同组织中以及低盐胁迫后不同时间的表达情况.结果表明:DD104基因在仿刺参管足中的表达水平最高,在体腔液、触手、呼吸树中的表达水平次之,在体壁、肌肉和肠中的表达水平较低;仿刺参在受到低盐胁迫后,体内DD104 mRNA的表达随盐度胁迫时间的增加呈现波动性增减,胁迫72 h时DD104基因的表达最强,在肌肉和管足中的表达量达到最大;胁迫48 h时肠组织中的表达量最大;胁迫24 h时体腔液中的表达量最大.研究表明,低盐胁迫后DD104基因在仿刺参不同组织中的表达发生变化的时间点不同,低盐胁迫下DD104基因表达量的变化规律说明该基因的表达可能与渗透胁迫密切相关.     

低盐胁迫下仿刺参DD104基因的定量表达分析

以2龄仿刺参Apostichopus japonicus为试验材料,利用实时定量PCR技术分析了DD104基因在仿刺参不同组织中以及低盐胁迫后不同时间的表达情况。结果表明:DD104基因在仿刺参管足中的表达水平最高,在体腔液、触手、呼吸树中的表达水平次之,在体壁、肌肉和肠中的表达水平较低;仿刺参在受到低盐胁迫后,体内DD104 mRNA的表达随盐度胁迫时间的增加呈现波动性增减,胁迫72 h时DD104基因的表达最强,在肌肉和管足中的表达量达到最大;胁迫48 h时肠组织中的表达量最大;胁迫24 h时体腔液中的表达量最大。研究表明,低盐胁迫后DD104基因在仿刺参不同组织中的表达发生变化的时间点不同,低盐胁迫下DD104基因表达量的变化规律说明该基因的表达可能与渗透胁迫密切相关。     

不同饲料蛋白水平对仿刺参生长的影响

在水温为（14±0.5）℃、盐度为31～31.5的条件下,研究了仿刺参幼参Apostichopus japonicus对蛋白水平为6%、13%、20%、27%、34%的5种饲料（以鱼粉、鼠尾藻粉、玉米面粉、复合维生素和复合矿物质为原料）的能量收支。结果表明：当饲料蛋白水平为19.48%时,幼参的特定生长率和饲料转化效率均达到最高水平,分别为1.27%/d和5.58%,此时饲料系数最低,为1.134;在该蛋白水平下,仿刺参生长能的比例最大,能量收支方程为100C=5.28G＋27.24F＋4.22U＋3.46Rs＋59.80R。     

不同饲料蛋白水平对仿刺参生长的影响

在水温为(14±0.5)℃、盐度为31～31.5的条件下,研究了仿刺参幼参Apostichopus japonicus对蛋白水平为6%、13%、20%、27%、34%的5种饲料(以鱼粉、鼠尾藻粉、玉米面粉、复合维生素和复合矿物质为原料)的能量收支。结果表明:当饲料蛋白水平为19.48%时,幼参的特定生长率和饲料转化效率均达到最高水平,分别为1.27%/d和5.58%,此时饲料系数最低,为1.134;在该蛋白水平下,仿刺参生长能的比例最大,能量收支方程为100C=5.28G+27.24F+4.22U+3.46Rs+59.80R。     

盐度应激下刺参4个转运相关基因的适应表达研究

为研究急性低盐18胁迫对刺参Apostichopus japonicus盐度调节相关基因表达的影响,在实验室条件下,以盐度30为对照组,72 h为1个盐度波动周期,采用荧光定量的方法进行了刺参(16. 93 g±3. 08 g)不同组织不同时间段单羧酸转运蛋白家族16a13 (Monocarboxylate Transporters 13,SLC16a13)基因、单羧酸转运蛋白家族6a8 (Solute Carrier Family 6 Member 8,SLC6a8)基因、甲壳素受体蛋白(Fibrinogen C Domain-Containing Protein 1,FIBCD1)基因和AMPA型谷氨酸受体1 (Glutamate Ionotropic Receptor AMPA Type Subunit 1,Gria1)基因4个与盐度调节有关的基因差异表达分析。结果表明:SLC16a13、SLC6a8、FIBCD1、Gria1基因均在刺参不同组织中检测到且有不同程度的表达,这4个基因在刺参体腔液、肠、呼吸树中均有表达;在6、12、48 h时,刺参体腔液中SLC16a13基因的表达量均显著高于对照组(P <0. 05),在肠组织中,该基因的表达量在1. 5、3 h时与对照组无显著性差异(P> 0. 05),在其余时间点均显著高于对照组(P<0. 05),在72 h时表达量达到最高,在呼吸树组织中,该基因表达量在各时间点均显著上调(P<0. 05),在72 h表达量达到最高;试验过程中,SLC6a8基因在体腔液中的表达量显著高于其他组织(P<0. 05);总体上FIBCD1基因在体腔液中表达最高,在呼吸树中次之,在肠中最低;总体上Gria1基因在肠组织中表达最高,在体腔液中次之,在呼吸树中最低。本研究结果为刺参对环境的适应机制研究提供了数据资料。     

仿刺参体腔细胞染色方法的研究

通过改变固定时间、孵育时间、染色时间及温度、分色方式等染色条件,研究不同染料、不同染色条件对仿刺参Apostichopus japonicus体腔细胞的染色效果,并以观察体腔细胞内的颗粒、细胞核、细胞质和伪足的着色情况和细胞整体轮廓清晰程度为标准,筛选了适用于仿刺参体腔细胞的理想染色方法.结果表明:25℃室温下,采用滴片制片法,用湿盒孵育15～30 min,用甲醇固定1～2 min,用(φ)(Wright's):(φ)(Giemsa)=1:1的混合液染色1～2 min,水洗,用中性树胶封片,在此条件下对仿刺参体腔细胞的染色效果最好.     

3种微生态制剂对水质及刺参幼参生长的影响

研究了不同浓度的3种微生态制剂对水质及刺参Apostichopus japonicus幼参(鲜体质量为0.7053 g±0.0046 g)生长和免疫的影响。试验设9个处理组,分别投喂添加浓度为2、4、8 mL/m3的3种免疫增强剂、3种复合芽孢杆菌和3种EM菌;另设1个对照组,投喂基础饲料,每组均设2个重复。试验在100 L的PVC塑料桶中进行,试验水体为80 L,每桶放35头幼参。日投饵2次,投饵量为幼参体质量的5%;日换水1次,换水量为水体的1/5,换水后将微生态制剂直接泼洒至水体中。结果表明:在水体中泼洒3种微生态制剂,能明显改善水质,泼洒8 mL/m3的EM菌对水体的净化作用最有效,该处理组水体中的氨氮(NH4+-N)和亚硝酸氮(NO2--N)含量最低,分别比对照组降低36.0%和56.6%;投喂添加3种微生态制剂饲料的处理组,幼参的特定生长率均显著高于对照组(P<0.05),添加8 mL/m3的免疫增强剂对幼参生长的影响最明显,该处理组幼参的特定生长率比对照组提高31.8%;幼参体腔液中的酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LSZ)活力均与添加微生态制剂的剂量呈正比,添加8 mL/m3免疫增强剂的处理组幼参的ACP和CAT活力最高,显著高于其他组(P<0.05),分别比对照组提高164.0%和54.0%,添加8 mL/m3EM菌的处理组幼参的LSZ活力最高,显著高于其他组(P<0.05)。