草莓茎尖脱毒技术研究

为建立操作简便、脱毒效率高的病毒脱除技术,促进草莓脱毒苗产业化发展,采用感染草莓斑驳病毒的草莓母株为材料,通过对草莓茎尖组织培养法、热培养处理后茎尖组织培养法、组培苗再生匍匐茎茎尖培养法等方式进行脱毒技术研究,比较几种脱毒技术手段的优缺点。结果表明:热处理后,草莓组培苗的脱毒率虽然比直接茎尖培养有所上升,但其成活率却下降。而组培苗再生匍匐茎茎尖培养法与直接茎尖培养法、热培养处理后茎尖培养法相比,在相同茎尖长度时,脱毒率和生存率更高,且茎尖长度为0.8～1.0 mm时,其存活率和成活率达到93.3%和96.4%。因此,组培苗再生匍匐茎茎尖培养法对草莓脱毒是比较有效的方法。     

草莓试管内诱导匍匐茎和高温处理结合茎尖培养脱毒技术研究

【目的】获得可用于生产的无病毒草莓种苗。【方法】在试管内对深山草莓花瓣愈伤组织分化产生的优良变异新品种的试管苗进行匍匐茎诱导,并采取试管内高温处理结合茎尖培养对该品种进行脱毒研究,应用均匀设计法对各步骤主要影响因子进行优化筛选。【结果】该草莓新品种试管苗匍匐茎诱导的适宜培养基为:LS+6-BA1.00mg/L+GA31.90mg/L+KT1.00mg/L,其诱导率为99.5%以上;将含有匍匐茎的试管苗在试管内于56℃条件下培养85d后,切取1mm的茎尖在培养基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L中进行茎尖愈伤组织诱导,然后将茎尖愈伤组织转接到培养基MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.05mg/L中进行愈伤组织芽苗再分化培养,对再生芽苗进行病毒检测,脱毒率为100%。【结论】利用试管内高温处理结合茎尖脱毒的方法可以完全脱除草莓病毒,从而建立了草莓脱毒体系。     

草莓试管内匍匐茎诱导技术

[目的]探讨试管内诱导草莓匍匐茎发生的最佳激素浓度配比,为草莓进一步脱毒奠定基础。[方法]应用均匀设计法对影响草莓丰香试管内诱导匍匐茎发生的激素浓度配比进行优化筛选,对各步骤各主要因子和水平的作用进行探讨,进而获得可用于脱毒的草莓匍匐茎茎尖。[结果]草莓丰香试管苗匍匐茎诱导的适宜培养基为：LS＋6-BA 1.00 mg/L＋GA3 1.90 mg/L＋KT 1.00 mg/L,在该培养基上其诱导率达99.5%以上。[结论]在试管内对草莓进行匍匐茎诱导是可行的。该研究为进一步茎尖脱毒奠定了基础。     

关于草莓脱毒技术研究

1986～1990年以圆球草莓品种为试材,对茎尖培养、药剂处理、热处理和花药培养4种脱毒方法进行比较,结果表明,花药培养效果最好,脱毒率100%,茎尖切取长度需小于0.5mm 才能达到20%以上脱毒效果,用较大材料接种培养成试管苗,再用38°±1℃温度处理2周后,切取小茎尖培养能提高脱毒效果,茎尖培养脱毒必须经过病毒鉴定,方能用于生产。     

利用玻璃化超低温技术脱除草莓斑驳病毒(SMoV)的初步研究

以携带草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus)的‘红颜’草莓为材料,通过对玻璃化超低温脱毒技术中各程序的优化,建立适合‘红颜’草莓的茎尖玻璃化超低温脱毒体系。结果表明:1~2mm的茎尖在0.5mol/L蔗糖的预培养基预培养3~7d,室温装载处理60min,0℃玻璃化处理180min,液氮冷冻60min,40℃解冻2min,高糖溶液卸载20min后接种到MS+2.0mg/L 6-BA再生培养基上,成活率可达70%以上。再生培养60d后,随机选取20株再生植株,利用RT-PCR技术检测草莓斑驳病毒的脱毒效果,脱毒率为100%。利用该体系可以克服传统茎尖脱毒受茎尖大小的限制(0.1~0.3mm),并有效脱除草莓斑驳病毒。     

影响“达赛莱克特”草莓茎尖培养因素的研究

以“达赛莱克特”草莓匍匐茎作为外植体,研究MS培养基浓度对初代培养试管苗成活率的影响．结果表明,将MS培养基浓度减半（1／2MS）可有效降低外植体褐化,成活率比MS培养基高,达71．8％,且试管苗生长良好．切取试管苗茎尖研究影响其成活的因素,结果发现茎尖培养的适宜培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．01mg／L＋蔗糖30g／L;为获得脱毒苗,进行茎尖培养时茎尖以0．3mm为宜;“达赛莱克特”草莓试管苗在38℃下处理38d后切取茎尖0．5mm,既可脱毒又可提高茎尖成活率,是生产脱毒苗的有效方法．     

草莓茎尖分生组织一步成苗试验

利用草莓匍匐茎茎尖分生组织进行脱毒培养一步生根成苗,结果表明,1/2MS+IAA 0.1mg/L培养基对草莓茎尖分生组织一步成苗具有较好效果,试管苗出苗率达到83%～90%。     

草莓无毒苗繁育技术

1草莓脱毒技术1．1热处理与茎尖培养脱毒1．1．1热处理将盆栽小苗2个月后或未经脱毒的试管苗置于恒温箱中,在35～40℃条件下变温处理4～5周。白天保持40℃处理5h,夜间在35℃下处理6h。处理过程中空气湿度不宜过高,一般维持在50％～70％,     

红颜草莓茎尖组培脱毒苗技术研究

为解决草莓的病毒病,进行草莓茎尖脱毒组培技术试验。北京金六环农业园2009年从日本引入试验用红颜草莓在北京金六环农业园组培室进行组培。取2.0～3.0cm长的健壮草莓苗匍匐茎顶芽,灭菌、消毒后进行热处理、灭菌消毒处理,茎尖初代培养后进行继代培养,达到第5代后再生根培养20～35d,然后进行草莓苗的驯化及移栽。结果显示:生根培养基中加入生长素IAA、IBA或NAA,可以大大提高诱导生根的速度和生根率,作用效果NAA>IBA>IAA。采用本研究方法获得的脱毒草莓苗进行大规模生产种植,草莓产量达3500kg/667m~2。     

草莓种苗的脱毒技术试验研究

草莓病毒病是草莓生产中的一大危害,草莓脱毒种苗成为了草莓高效生产中的一个关键环节。本试验旨在研究提出一种操作简便、脱病毒率较高的草莓种苗脱毒技术,通过设置5种试验处理并获得草莓组培苗,经病原检测后分析各种处理的病原脱毒效果。研究结果表明,最佳的草莓种苗脱毒技术为直接茎尖培养(0.2～0.5 mm茎尖生长点)+冷处理(组培苗置于5℃的冰箱中培养60 d),该技术不仅可推广应用于草莓脱毒种苗规模化育苗中,同时对其他作物的脱毒技术的研究与应用具有重要的参考价值。     

二次茎尖脱毒法对草莓茎尖培养及脱毒效果的影响

为了解决生产上常用的脱毒方法不能保证草莓的成苗率和脱毒率的问题,以童子一号草莓茎尖为外植体,采用热处理和二次茎尖培养相结合的方法脱除病毒,研究二次茎尖脱毒法对草莓茎尖培养及脱毒效果的影响。结果表明:热处理结合二次茎尖培养脱毒方法的成苗率高达60.33%,脱毒率也高于其它处理,平均脱毒率达到80.58%。     

草莓快繁的影响因子研究

目前生产上培育草莓脱毒苗主要是通过茎尖培养获得脱毒苗,再通过快速繁殖,从而获得大批量的种苗。快速繁殖优质脱毒种苗,既可以快速育苗,又可以克服草莓长期营养繁殖导致病毒积累而产生的退化现象,使草莓品种和优良特性得以保持。以万德、章姬、红颜和利玉女4种当地主栽草莓的匍匐茎为试材,在MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.04 mg/L培养基上,对茎尖和匍匐茎的不同位置进行组培快繁,以期建立1个高效的草莓快繁体系。结果表明：草莓基因型对茎尖诱导起着决定性作用,诱导率以红颜最高（70%）,章姬次之,万德最低（仅30%）;4个草莓品种匍匐茎3个段位的诱导率顺序均为上段〉中段〉下段;灭菌时间以4～5 min比较适宜,外植体成活率高,污染率低。在草莓组培快繁时,选取匍匐茎上段作为外植体,用0.1%氯化汞溶液灭菌4～5 min,可以简化操作、提高繁殖效率和降低生产成本。     

宜兴百合脱毒技术

1997～2000年以宜兴百合为试材，对3种脱毒方法(茎尖培养、热处理结合茎尖培养、花药培养)进行研究。结果表明，珠芽经(50±1)℃热水处理40min，培养30d后，切取0.8～1.0mm茎尖培养的脱毒效果最好，脱毒率达100%；(38±1)℃热空气处理后切取茎尖培养也能提高脱毒效果。只有通过病毒鉴定的试管苗，方能用于生产。     

草莓优良品种的组培快繁和脱毒苗生产技术研究

以7个草莓优良栽培品种的匍匐茎为起始材料,试验出以MS为基本培养基附加BA 0.50 mg/L诱导草莓匍匐茎芽和茎尖植株再生、增殖、生根的培养基,确立草莓组培快繁技术的基本措施,在此基础上剖析低造价草莓试管苗的培育手段,不仅可以快速培育出脱毒苗,也可以获得理想的经济收益。     

7个品种草莓茎尖组培脱毒苗技术研究

以青海互助地区主栽的7个不同品种草莓匍匐茎茎尖为外植体,利用MS基本培养基添加适宜浓度的6-BA、GA₃或IBA,探索草莓茎尖组织培养获得脱毒苗的方法。结果表明：以草莓茎尖组织培养技术培育出的草莓脱毒苗,幼苗移栽后生长、开花和结果正常。草莓茎尖分化培养基MS+0.5mg/L 6-BA+0.2mg/L GA₃适合“红颜”等4个品种茎尖生长;增殖培养基MS+0.5mg/L 6-BA+0.2mg/L GA₃适合草莓“红颜”、“通州公主”、“小白”、“京泉香”和“章姬”5个品种幼苗增殖,增殖系数均在7以上。生根培养基MS+0.25mg/L IBA短期内各品种生根较快,但生根超过20d时幼苗根部生长异常,还需进一步试验找到适宜培养基。     

草莓脱毒苗最优增殖培养基的筛选

以草莓的匍匐茎尖为外植体,培养出离体脱毒苗后,将茎段转接到试验培养基中,研究适合草莓增殖培养的最佳培养基配方,以建立一套快繁技术体系。结果表明:在培养基中添加适宜浓度的6-BA2.0mg/L和GA31.0mg/L,可以促进草莓脱毒苗的快繁。     

外源激素对马铃薯扦插苗腋芽薯形成的影响

以剪取的马铃薯品种大西洋试管脱毒苗移栽成活后20天、30天、40天的茎尖为试验材料,在扦插前用四种不同的生根液进行处理,研究它们对扦插苗腋芽薯形成的影响。结果表明,剪取茎尖的幼苗的苗龄越小,四种生根处理的差异愈小,幼苗的苗龄越大,四种生根处理的差异愈大,其中用赤霉素 NAA处理的扦插苗匍匐茎最多,结薯量最高。     

罗汉果组培苗脱毒方法研究

采用热处理结合茎尖技术对罗汉果组培苗进行脱毒培养,并用间接酶联免疫法和电镜观察法对脱毒效果进行检测.结果表明,组培苗经38.5℃热处理10 d后,剥取0.2～0.5 mm微茎尖培养或切取1.0～1.5 mm茎尖进行二次茎尖脱毒培养,茎尖苗的脱毒率均为100％,建立了两种有效的罗汉果组培苗脱毒方法.     

不同脱毒技术对马铃薯病毒脱毒效果的影响

以三个感染了不同病毒的马铃薯品种作为试验材料,研究了3种不同的马铃薯脱毒技术,对脱毒效率及脱毒苗的成活率进行对比研究,筛选出不同病毒种类最适宜的脱毒技术方法。用茎尖剥离,热处理结合茎尖剥离技术和病毒唑结合茎尖剥离技术,设计不同的热处理周期和病毒唑浓度对材料进行脱毒处理,在计算植株的成活率及成苗率的基础上对其进ELISA检测法检测脱毒率。试验结果表明以上三种方法中热处理加茎尖剥离和病毒唑加茎尖剥离的复合脱毒的方法在提高试管苗的脱毒率上有明显的优势,单一的茎尖剥离处理的茎尖成活率及脱毒率普遍较低。通过变温热处理加茎尖剥离处理中(5周)热处理时PVY, PLRV, PVS均可达到较高的脱毒。脱毒率最高为V病毒100%。病毒唑浓度为45mg/L时,通过病毒唑及茎尖剥离方法得到的PVY和PLRV的最高脱毒率为100%。PVS的最高脱毒率为92%(结论)。比起单一的茎尖剥离技术复合脱毒技术较有优势,在5周的热处理加茎尖剥离技术(只取一个叶原基的茎尖)处理适合PVS病毒的脱毒。变温热处理培养后茎尖剥离处理适于PVY病毒脱毒。试验中三种方法均适合脱去PLRV病毒。经过设计不同的热培养温度和化学处理浓度...     

组培条件下脱毒与带毒丰香草莓植株表型的比较

为了区分草莓微繁殖苗生长表型中的组培效应和脱毒效应,以草莓主栽品种丰香为试材,通过茎尖培养进行脱毒,采用RT-PCR技术进行病毒鉴定,并比较脱毒微繁殖苗、带毒微繁殖苗(草莓斑驳病毒)和带毒普通苗在田间和日光温室条件下性状表现.结果表明:无论带毒与否,微繁殖苗的单株匍匐茎子苗数、新茎数、花序数、开花数和结果数均高于带毒普通苗,而它们的物候期差异不大.在整个生长季内,脱毒微繁殖二代苗的生长势最强.其株高始终高于一代苗和普通苗.脱毒和带病毒微繁殖一代苗与带病毒普通苗的产量差异不大,但脱毒微繁殖二代苗的产量比普通苗和一代苗高19.7%,差异显著.微繁殖苗的自粉病发病较早.在发病早期,微繁殖苗的感病率比普通苗高5%～10%,微繁殖苗的病情指数约是普通苗的1.5倍.组培效应导致了微繁殖苗在单株匍匐茎子苗数、新茎数、花序数、开花数和结果数上高于普通苗.微繁殖苗对白粉病的抗性有所下降.