沙地云杉胚性细胞悬浮培养研究

通过本次试验,得到了沙地云杉胚性细胞悬浮培养的最佳培养条件,即DCR+0.1mg/L 2,4-D+1mg/L 6-BA+30g/L蔗糖,pH6.0,接种量3.0%(以鲜重计),摇床转速为110r/min,25±1℃,黑暗条件下震荡培养;研究了细胞生长鲜重、干重和pH值、细胞活力以及培养液中NO3-、NH4+、PO43-和总糖的消耗动力学变化.为今后进行沙地云杉的原生质体培养分离、基因导入及细胞融合等研究提供实验基础.     

悬浮种衣剂中壳聚糖成膜性效果研究

研究天然高分子材料壳聚糖用于提高悬浮种衣剂的成膜性和有效成分释放率。采用标准测试方法,测试高分子成膜剂影响悬浮种衣剂的理化测试指标,如成膜时间、包衣均匀度、包衣脱落率、种子表面药剂浸水脱落率等。结果表明:1.0%壳聚糖配成膜剂效果最佳,成膜时间和包衣脱落率均高于现用悬浮种衣剂,并能控制和调节悬浮种衣剂膜内活性成分释放速率。     

两种常用漂白剂对江篱和鸡毛藻琼胶质与量影响的研究

本文系统研究了次氯酸钠和高锰酸钾漂白剂对两种江篱和鸡毛藻制造琼胶质与量的影响，探索了漂白剂浓度，处理时间与琼胶质与量的关系，选出了较佳的漂白方法及条件，试验结果表明，采用选定的漂白方法，既保证了产品的质与量，又用最少量的辅料，达到降低成本，提高经济效益的目的。     

水稻胚性悬浮细胞系建立的细胞学研究

胚性悬浮细胞是禾谷类作物原生质体培养的理想材料。本文研究了水稻广亲和中粳品系02428胚性悬浮细胞系建立过程中的细胞学动态变化,结果表明:建成的胚性悬浮细胞系(后期悬浮细胞系)和前、中期悬浮细胞系相比较,细胞团内细胞结合紧凑,细胞壁簿,细胞质浓厚,颗粒状内含物丰富,细胞活力强,质膜凹陷较浅,较平整,质膜强度高。本研究结果从细胞学角度初步探讨了水稻胚性悬浮细胞系适应于原生质体培养的机理。     

荔枝转基因悬浮细胞再生松散性胚性愈伤组织的原生质体分离与初步培养

以荔枝优良品种下番枝转gus和hpt基因悬浮细胞再生的松散性胚性愈伤组织(TSFEC)为试材,进行原生质体分离研究及初步培养。结果表明:潮霉素会延长荔枝TSFEC原生质体分离的酶解时间,比一般的酶解时间多2 h,但对原生质体产量和存活率的影响不大;TSFEC培养时间对原生质体分离的影响很大,其中以培养15-20 d时的原生质体产量最大,为(10.1-10.5)×107个.g-1,此时原生质体的活力最高,存活率可以达到93.1%-93.4%;酶解方式对原生质体产量和活力影响都不大,常规的酶解方式酶解的最适宜时间为14 h。     

甘薯胚性悬浮细胞遗传转化的研究

 以甘薯品种栗子香的胚性悬浮细胞为材料 ,以A2 0 8SE(pROA93)为供体菌株 ,对甘薯胚性悬浮细胞遗传转化的基本条件进行了研究。结果表明 ,对胚性悬浮细胞预培养 1～ 3d有利于转化 ,适宜的共培养时间为 4～ 5d ,适宜的Kan浓度为 5 0～ 75mg·L-1(悬浮培养阶段 )和 10 0mg·L-1(增殖培养阶段和植株再生阶段 ) ,适宜的Carb浓度为 10 0mg·L-1。获得了经GUS检测及PCR检测的转基因植株。     

水稻、玉米胚性悬浮细胞系的有效建立

研究了水稻、玉米胚性悬浮细胞系有效建立的几个关键性技术问题。指出外植体是影响初代愈伤组织状态的因素之一，提出了愈伤组织继代改造的一些措施、影响胚性悬浮细胞系建立的几个因素和判别某材料能否建成胚性悬浮细胞系的参考标准。     

琼胶分解菌Cellvibrio sp.BR的发酵条件及酶学性质研究

[目的]对琼胶分离菌Cellvibrio sp.BR的发酵条件及酶学性质进行研究.[方法]通过对琼胶分离菌Cellvibrio sp.BR发酵条件的优化,筛选该产酶菌株的最佳发酵条件,并对其酶学性质进行初步研究.[结果]该菌株产琼胶酶的最佳发酵条件为:在25℃、起始pH7.0的条件下培养36 h;该酶作用的最适pH为7.O～8.0,最适温度为35℃,最适底物质量分数为1.1％;该酶具有明显的底物特异性.[结论]为琼胶酶的进一步工业化生产提供了理论依据.     

植物细胞悬浮培养的影响因素

综述了植物愈伤组织诱导以及悬浮细胞培养的影响因素。     

新疆长绒棉胚性细胞悬浮系的建立

通过对新疆长绒棉（Ｇ．ｂａｒｂａｄｅｎｓｅＬ．）胚性意伤不同生长时期、不同继代时间的比较与选择，确定了胚性愈伤进行悬浮培养的适宜生理状态；通过对悬浮液不同成分的选择、比较与改良，确定了悬浮液适宜的组成及悬浮条件；建立了新疆长绒棉新海３号、新海７号、２８２、Ｋ２５３、军海１号５个品种的胚性细胞悬浮系。     

不同因素对狭叶柴胡悬浮细胞生长的影响

为了通过悬浮细胞培养的方法获取柴胡的生物活性成分,本文对愈伤组织接种量、摇瓶溶氧水平、茉莉酸甲酯可能影响悬浮细胞生长的因素进行了考察,并建立了一个快速生长的狭叶柴胡悬浮细胞培养体系。实验结果表明狭叶柴胡悬浮细胞生长最佳条件为:无菌条件下狭叶柴胡愈伤组织接种量为2.0g;250mL锥形瓶中添加MS培养液体积为100mL;培养液中加入的茉莉酸甲酯浓度为22.5mg·L-1。该研究表明通过调节接种量、培养液体积、茉莉酸甲酯浓度,可有效地促进狭叶柴胡悬浮细胞的生长,为今后柴胡生物活性成分的研究奠定基础。     

香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中非胚性成分的去除

[目的]研究香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中非胚性成分的去除方法。[方法]以巴西蕉的花蕾进行诱导培养后,运用孔径在250~500μm的不锈钢筛网进行过滤,并用倒置显微镜对培养物进行实时观测。[结果]运用孔径在250~500μm的不锈钢筛网能够有效去除悬浮细胞系中的褐化坏死组织和分生组织小球,但如果在悬浮细胞系诱导后3 d立即进行去除,则易使之后胚性细胞的增殖变得困难;如果在悬浮细胞系诱导后14 d左右去除,则褐化坏死组织释放的酚类物质很容易损伤并杀死正在增殖的胚性细胞。悬浮细胞系诱发后7 d是一个比较恰当的过滤去除时间点。[结论]在培养的过程中,将悬浮细胞系定期放置在倒置显微镜下进行观察,用移液器能将液泡化的细胞和胚去除。在操作前,需将倒置显微镜放置在超净工作台内,用紫外线长时间照射进行表面灭菌。这样即可以将悬浮细胞系中的非胚性成分过滤去除,又能预防感染。     

刺槐胚性细胞悬浮体系的建立1）

以刺槐（ Robinia pseudoacacia L．）未成熟合子胚为外植体材料,通过对外植体取材时期、基本培养基营养物质质量浓度、细胞起始密度、2,4－二氯苯氧乙酸（2,4－D）质量浓度等影响悬浮培养的因素的研究,建立了良好的刺槐胚性细胞悬浮系。研究结果表明：授粉后55 d的未成熟合子胚是为刺槐细胞悬浮培养提供胚性愈伤组织的最佳起始材料;添加有2．5 mg· L－1 NAA和0．5 mg· L－16－BA的1／2MS培养基为刺槐细胞悬浮培养的最适培养基;建立悬浮系的最适pH值范围在5．0～5．7;起始质量为2．0 g的悬浮系统其生长量增速较快,且细胞保持持续增长;当起始质量为3．0 g时,培养16 d后细胞进入缓慢增长期,且生长量有回落的趋势,起始质量为1．0 g时,细胞增殖速度非常缓慢,且容易出现褐化死亡的现象。     

高强度江蓠琼胶制造工艺的研究

本研究是探索由江蓠制琼胶的较好工艺条件：包括不同碱浓度、温度与处理时间对琼胶的凝胶强度的影响，采用亚氯酸钠、次氯酸钠为漂白剂，对江蓠和细基江蓠进行生产工艺的优选试验，得出“中温浓碱”法为较好的工艺条件，并设计了工业性生产工艺流程。经合浦水产公司冷冻厂和本院附属工厂实践检验，结果表明，采用这个新工艺具有生产周期短，工艺操作容易掌握，生产设备简单，建厂投资少，成本低等优点；更重要的是凝胶强度由普遍600克／cm^2以下提高到1000～1700克／cm^2，超过出口商品的标准，为国产琼胶进入国际市场开辟了新的途径。     

液体悬浮法生产猪苓有效成分的初步研究

以甾体含量为主要指标,以菌丝体生长量及多糖含量为辅助指标,对液体悬浮法生产猪苓甾体所需的培养条件进行了初步研究,结果表明:适合猪苓菌丝甾体化合物积累的最佳液体培养条件为:葡萄糖28.0 g.L-1,酵母膏4.0 g.L-1,磷酸二氢钾1.00 g.L-1,硫酸镁1.00 g.L-1,维生素VB10.1 g.L-1,1%羟甲基纤维素钠10 mL.L-1;在此培养基中每瓶所得菌丝体干重得率为2.050 g,干菌丝体及发酵液中甾体含量分别达到3.864 mg.g-1和37.68 mg.L-1;同时在此培养条件下,菌丝体和发酵液的猪苓多糖含量分别为11.542 mg.g-1和58.85 mg.L-1。