芍药黑斑病病原菌鉴定及其对杀菌剂敏感性分析

对在江苏省扬州市芍药(Paeonialactiflora)叶片上发现的一种黑斑病,采集其病叶,分离和纯化病原物,根据柯赫氏法则明确其致病性。基于病原物形态特征和多基因(r DNA-ITS、endo PG、OPA2-1、Alt a 1)序列联合分析,鉴定该病原物为链格孢(Alternaria alternata)。该病原菌的最适生长条件是:温度为28℃,p H 7.0,最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为硝酸钾。室内毒力测定发现,在测试的4种杀菌剂中,嘧菌酯和吡唑醚菌酯乳油对病原菌离体生长的抑制作用较强,而戊唑醇和异菌脲对其生长的抑制作用较差。     

青海省同仁市黄果梨黑斑病病原菌鉴定

青海省同仁市黄果梨种植产业已成为当地乡村振兴的支柱产业。近几年,随着种植规模的不断扩大,黄果梨黑斑病的发生日益严重,对当地的经济造成了严重影响。本研究从病组织中分离到2株真菌,经科赫法则验证全部为引起黄果梨黑斑病的病原物,且其形态学均一致,选取代表性菌株基于形态、分子生物学鉴定和系统发育树分析,该菌株被鉴定为交链格孢（Alternariaalternata）。因此,引发青海少同仁市黄果梨黑斑病的病原菌为交链格孢（A.alternata）。本研究为青海省同仁市黄果梨黑斑病的有效防控提供重要理论依据。     

冀中南地区黄冠梨黑斑病病原菌鉴定

为明确黄冠梨黑斑病的病原种类,采用组织分离法对100片病叶、20个病果进行病原菌分离纯化,基于TEF、ITS、GPD和Alta1序列构建多基因联合系统发育树,并结合形态学特征及致病性测定来确定黄冠梨黑斑病的病原种类及分类地位。试验共得到62个链格孢属菌株,选取6个代表性菌株进行分类鉴定,其中HG3-1、HG5、GL1、GG12和GL14与Alternaria alternata聚为一簇,HG2与A. tenuissima聚为一簇。分离菌株HG3-1、HG5、GL1、GG12和GL14的分生孢子链为1～10个分生孢子,有分支;HG2的分生孢子链为1～14个分生孢子,有分支。6个代表性菌株接种离体叶片和果实后均可发病。确定引起黄冠梨黑斑病的病原菌为A. alternata和A.tenuissima,首次从黄冠梨黑斑病中分离出A. tenuissima。     

常用杀菌剂对莲藕黑斑病病原菌室内毒力及田间防治效果研究

针对由链格孢(Altemaria.)引起的莲藕黑斑病,用在莲藕上已登记的2个化学农药(丙环唑及多菌灵)及当地防治莲藕叶斑病常用的3个化学药剂(氟硅唑、噁霉灵和醚菌酯)对该病原菌进行了室内毒力测定,根据室内试验结果,选用毒力较高的药剂进行了大田防治试验,最终获得了对莲藕黑斑病防治效果较好的氟硅唑和多菌灵2个药剂.     

连翘褐斑病病原菌鉴定及其对杀菌剂敏感性研究

采用组织分离法分离纯化得到连翘褐斑病病原菌,依据科赫氏法则验证其致病性,结合病原菌形态学特征及其ITS、LSU和SSU序列的多基因联合分析,确定病原菌为链格孢Alternaria alternata。测定了培养基、温度、pH、光照、碳源和氮源等处理对该病原菌生长、产孢和孢子萌发的影响,并采用菌丝生长速率法测定其对8种杀菌剂的敏感性。结果表明,菌丝生长最适条件为25～30℃,pH 7.0,碳源为木糖醇和甘露醇,氮源为蛋白胨;产孢最适条件为25℃,pH 7.0,碳源木糖醇,氮源为尿素;孢子萌发最适条件为15～35℃,pH 5～9,碳源为木糖醇,氮源为牛肉浸粉。在测试的8种杀菌剂中,嘧菌环胺(EC50=0.032 mg·L^-1)和苯醚甲环唑(EC50=0.054 mg·L^-1)对其具有较强的抑制作用。     

大樱桃黑斑病病原鉴定及其致病性研究

 针对大樱桃黑斑病进行了病原菌鉴定及致病性测定,通过形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析,确定其病原菌为链格孢（Alternaria alternata）。致病性测定结果表明：该菌可以直接侵染或通过自然孔口和伤口侵染大樱桃果实,伤口接种的果实发病较重;病原菌对有伤叶片具有一定的致病能力,不侵染无伤叶片;该菌对梨、杏、李等果实致病性较强,对山楂果实的致病能力相对较弱。     

梨黑斑病病原菌生物学特性研究

对梨黑斑病病原菌链格孢菌(Alternariaalternata)生物学特性的研究结果表明,不同菌株在PSA平板上培养,平均日生长速率、产孢量、菌落颜色以及菌落厚度有显著不同。病原菌生长适宜温度为20～30℃,最适温度为28℃,孢子萌发的最适温度为28℃;病原菌适宜生长相对湿度为50%～100%,最适生长相对湿度为98%～100%,孢子萌发必须具备相对湿度98%以上的高湿条件,在水滴中萌发率最高;病原菌菌丝适宜生长的pH值为4～12,最适生长pH值为7～8,孢子萌发最适pH值为7～8,病原菌培养一段时间后培养基的pH值会发生改变。该病原菌对多种单糖、双糖和多糖等碳源及有机氮、无机氮均可利用,最适碳源为蔗糖,最适氮源为蛋白胨,硫酸胺和氯化胺会抑制病原菌菌丝生长。     

山东省芍药红斑病病原菌鉴定

从山东菏泽和泰安两地感病芍药（Paeonia lactiflora Pall.）植株的叶片上进行了红斑病病原分离纯化和致病力检测,并对致病菌进行了形态学鉴定及rDNA-ITS 序列分析。研究结果表明,病样组织中可分离到两种疑似病原菌,分离比例为4.8︰1,初步鉴定为链格孢（Alternaria alternata）和细极链格孢（A. tenuissima）。进一步rDNA-ITS分析结果表明,两种病原菌5.8S rDNA及其两侧ITS区序列分别与GenBank中序列号为KF380822.1、HM467832.1的同源性最高,均为99%,由此确定两种病原菌分别为链格孢Alternaria alternata和细极链格孢A. tenuissima,其序列已在GenBank登录,登录号分别为KR912224和KR912225。因此,确定山东省芍药红斑病是由链格孢A. alternata和细极链格孢A. tenuissima两种病原菌引起的复合侵染。     

青岛地区大白菜黑斑病病原菌分离鉴定与致病性研究

为明确山东省青岛地区大白菜黑斑病病原菌种类,2019—2020年从青岛市胶州市、莱西市、即墨区采集大白菜黑斑病病样18份,采用组织分离法分离病原菌,通过形态学观察结合分子生物学技术进行分类鉴定,并按照柯赫氏法则进行致病性测定。结果表明：从青岛地区采集的大白菜黑斑病病样中共分离到21株菌株,分别属于芸薹链格孢（Alternaria brassicae）、日本链格孢（A. japonica）、交链格孢（A. alternate）,其中交链格孢为优势致病菌,检出率为76.2%;但致病性最强的为芸薹链格孢,病情指数为48.15。     

鹿蹄草素对梨采后黑斑病病原菌的抑制作用

为研究鹿蹄草素对梨采后黑斑病病原菌的抑制作用以达到防腐保鲜的目的,采用生长速率法测定了鹿蹄草素对链格孢菌(Alternaria alternata)菌丝体生长的抑制作用;通过梨果实创伤接种病原菌试验,测定了鹿蹄草素对梨采后黑斑病的防治效果;并用扫描电镜和透射电镜观察鹿蹄草素对链格孢菌超微结构的影响。结果表明,鹿蹄草素对链格孢菌表现出较强的抑制作用,且浓度越高,抑制作用越强,当鹿蹄草素浓度为2.50、5.00g/L时抑菌率均达到了100%;鹿蹄草素对链格孢菌在梨果实上的发生和蔓延有着不同程度的抑制和延缓作用;扫描电镜下可见,处理菌丝扭曲变形,表面粗糙、局部凹陷,菌丝间相互黏连,菌丝断裂,内容物外漏;透射电镜下可见,处理菌丝细胞结构不规整,胞质不均匀,出现质壁分离现象,细胞内部组成紊乱,内含物减少,出现大量电子空白区。     

贵州六盘水地区大白菜黑斑病病原菌鉴定及培养特性研究

黑斑病是大白菜重要病害之一,常对大白菜田间生产造成严重损失。为明确引起贵州省六盘水地区大白菜黑斑病的病原菌种类,采用稀释涂布法从六盘水地区4个种植点大白菜黑斑病病样上分离到4个菌株。基于形态学和ITS、Alt-a1、tef-1多基因序列分析,4个菌株的鉴定结果均为芸薹链格孢Alternaria brassicae。生物学特性研究表明,该病原菌最适培养基为PDA,最适氮源为酵母浸粉和蛋白胨,最适碳源为葡萄糖;菌丝生长及孢子萌发最适温度均为25 ℃,菌丝生长最佳pH值为7;分生孢子致死温度为55 ℃下处理10 min。     

山东牡丹黑斑病的病原菌鉴定与ITS序列分析

牡丹黑斑病的致病菌尚不明确。通过对泰安地区的牡丹病叶进行组织分离,利用分子生物学技术结合形态学方法对病原菌进行鉴定,并利用Mega5软件对链格孢属的22个种进行系统发育树分析,进一步明确其分类地位。结果表明：该病致病菌ITS序列与GenBank中登录的Alternaria alternata、A. tenuissima、A. metachromatica相似性均为100%,利用DNAMAN软件对核苷酸一致性进行比较,发现样品菌株与A. alternata的一致性最高,结合形态学方法鉴定该病致病菌为链格孢A. alternata（GenBank登录号为：KJ682317）。回接鉴定后分离得到的菌株,菌饼刺伤接种的病叶与无伤接种的病叶均发病,但刺伤叶片病斑扩展快。     

杀菌剂对冬枣黑斑病原细菌的室内抑菌效果

应用43种常用杀菌剂室内测定对黄单孢杆菌属细菌和假单孢杆菌属细菌的抑制效果。结果表明，红霉素和链霉素对两种细菌均有较强的抑菌作用，其次为轮纹宁、福美双、克菌康和枣病必克。以代森锰锌为主要成分的几种杀菌剂(大生M-45、易保、杀毒矾、安克锰锌、凯克灵)和大富丹、噻枯唑对假单孢杆菌属细菌有明显的抑菌效果，但对黄单孢杆菌属细菌抑菌效果不明显。其余供试剂对两种细菌无抑菌作用。     

库尔勒香梨果萼黑斑病病原鉴定及其ITS、GPD和EF-1α序列分析

采用常规组织分离法对库尔勒香梨果萼黑斑病病样进行病原菌分离,依据科赫氏法则进行病原菌田间致病性测定,并利用分子生物学手段结合形态学鉴定确定病原菌及其分类学地位。田间致病性测定结果表明链格孢属菌株为致病菌株,利用真菌通用引物进行致病菌株保守基因(ITS、GPD和EF-1α)PCR扩增及测序,获得序列Gen Bank数据库登录号为KU145269、KU145271、KU145273。根据田间致病性、形态学观察以及保守基因遗传进化分析结果确定库尔勒香梨果萼黑斑病病原为链格孢属链格孢(Alternaria alternata)。     

百合枯萎病菌Fusarium commune的鉴定及其对杀菌剂敏感性研究

采集龙牙百合(Lilium brownii var.virididum)枯萎病典型症状的鳞茎进行病原物分离、纯化和致病性测定,结合病原菌形态学观察及其rDNA-ITS、EF-1a、mfSSU和IGS基因的序列分析,确定病原菌为共享镰孢菌Fusarium communie.测定了光照、温度、pH、碳源和氮源等处理对该病原...     

蓝莓枝枯病病原菌鉴定、生物学特性及对杀菌剂敏感性研究

以蓝莓为试材,采用组织分离法获得蓝莓枝枯病的病原菌,进行形态学和分子生物学鉴定;并基于不同碳源、氮源、温度、pH开展病原菌的生物学特性研究,最后采用菌丝生长速率法测定了病原菌对4种常用化学杀菌剂的敏感性的研究方法,研究了该病原菌分类地位、生物学特性及敏感杀菌剂,以期为严重影响蓝莓经济价值的枝枯病的流行预测和科学防控提供参考依据。结果表明：蓝莓枝枯病致病菌为棒状新拟盘多毛孢(Neopestalotiopsis clavispora),其最适碳源为麦芽糖,最适氮源为磷酸二氢铵,最适pH为8,最适温度为25℃。抑菌敏感性测定结果显示,戊唑·咪鲜胺对病原菌的抑制效果最好。     

云南省蒙自市辣椒黑斑病初步研究

以蒙自市草坝镇辣椒黑斑病病果为试材,采用平板划线法分离,科赫法则验证,形态特征比对,菌丝生长速率法,研究了辣椒黑斑病菌的分类地位、生物学特性及药敏性。结果表明:云南省蒙自市辣椒黑斑病由链格孢属Alternariasp.侵染引起;病菌菌丝生长最佳条件为玉米琼脂(MA)培养基、可溶性淀粉为碳源、甘氨酸为氮源、pH 8、温度25℃、全光照;该病菌对58%甲霜灵·锰锌WP和50%扑海因WP药敏性最高。该结论可为其防治提供基础数据。     

柑桔链格孢菌杀菌剂的室内筛选

利用菌丝生长速率法,测定了18种化学杀菌剂对柑桔链格孢菌Alternaria citri的毒力。结果表明,70%丙森锌抑菌效果最好,EC50为0.247 5μg/mL;10%苯醚甲环唑效果次之,EC50为0.346 5μg/mL;其次为50%丙环唑、27.12%碱式硫酸铜、10%井冈霉素、40%氟硅唑、70%氢氧化铜、22%抑菌唑、1.5%噻霉酮、65%代森锰锌,EC50均在2.4μg/mL以下;其余药剂效果不理想,EC50在11μg/mL以上,尤其多菌灵效果最差,EC50为911.774 7μg/mL。