杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生研究

以杂交鹅掌楸幼胚为外植体,进行体细胞胚胎发生研究.比较了亲本基因型、发育阶段、培养条件、生长调节物质和渗透压等对体细胞胚胎发生的影响.结果表明在以1/2MS培养基为基本成分,添加2.0～3.0mg@L-12,4-D的培养基上能够成功诱导胚性愈伤组织.以蔗糖为渗透剂,提高渗透压有利于体细胞胚胎发生;以MS为基本培养基附加ZT 1.0～4.0mg@L-1对体细胞胚胎诱导最有效;ABA的使用能有效控制畸形胚的产生;基因型、幼胚发育阶段及光照条件对体胚发生起着重要作用.     

植物磺肽素在杂交鹅掌楸体胚发生中的作用

植物磺肽素(PSK),是近年来发现的一种新型植物肽类生长调节物质,具有促进单细胞的分裂增殖等生理功能.以杂交鹅掌楸未成熟胚来源的体胚发生体系为材料,探索PSK-α在植物体胚发生中的作用.研究发现PSK-α能够促进细胞分裂和增殖,有利于胚性细胞的形成.在杂交鹅掌楸体胚发生初期添加0.1 mg·L-1的PSK-α可提高未成熟胚的脱分化率并能有效改善培养细胞的状态;0.5 mg·L-1的PSK-α能够促进胚性愈伤组织的形成和增殖;体胚形成后期添加0.8 mg·L-1的PSK-α利于其正常发育以及再生植株的培养.     

杂交鹅掌楸的离体培养和植株再生研究

将杂交鹅掌楸3年生母树的饱满冬眠顶芽、侧芽接种在MS培养基上培养20d后，继以在改良MS(铵态氮与硝态氮的质量分数比为1：1)培养基上培养15d，2种培养基均含有IBA0．15mg／L。启动阶段在培养基中添加BA1．0mg／L ZT1．0mg／L TDZ0．05mg／L VC7．5mg／L S30g/L。继代增殖培养时添加BA1．0mg／L ZT0．5mg／L TDZ0．05mg／L VC7．5mg／L S30g／L，有效芽苗增殖倍数达3．8。壮苗培养时添加BA0．5mg／L ZT0．5mg／L TDZ0．05mg／L VC7．5mg／L S30g/L，芽苗粗壮，高达3．5cm。生根培养基1／2MS添加IBA0．1mg／L NAA0．1mg／L S20g／L 活性碳0．2％，生根率达75％。移栽至砻糠灰与黄心土按3：1(体积比)的混合基质中．成活率最高达65％。     

杂交鹅掌楸多聚泛素基因家族LhUBIs的分离和同源克隆

以杂交鹅掌楸的胚性愈伤组织为材料,提取其总RNA,利用RACE技术同源克隆到杂交鹅掌楸多聚泛素基因家族LhUBIs中的5个基因,分别命名为LhUBI1、LhUBI2、LhUBI3、LhUBI4和LhUBI5基因.该基因家族5个成员在3'端非翻译区(UTR)具有明显差异.LhUBI1含有与多聚泛素重复单位C末端连接的"NRIPAAAMAAGAMR"高度保守结构,这与细胞的抗性有关;而LhUBI5类似于泛素融合蛋白,其重复单位之后的拓展区域含有Ribosomal_L40e结构.泛素蛋白可以介导选择性地降解冗余蛋白质,对胁迫响应以及调控植物细胞的分化类型具有重要作用.     

杂交鹅掌楸体细胞胚萌发培养的研究

以杂交鹅掌楸体细胞胚为材料,研究体胚不同发育阶段、大量元素和维生素C、基因型、激素组合以及移栽基质对体胚苗萌发和移栽存活的影响。结果表明：鱼雷型胚萌发效果最好;3/4 MS培养基较适合体胚苗的萌发;Vc有利用保持体胚苗维持正常形态。不同基因型体胚苗萌发差异较大,基因型1×5002萌发效果最好,成苗率为84.26%;而1×4088仅有13.24%。KT 0.1 mg/L＋IBA 0.1 mg/L有利于促进体细胞胚的萌发。不同基因型体胚苗移栽存活率有差异,黄心土较混合泥炭土更适合体胚苗移栽。     

杂交鹅掌楸组织培养技术研究初探

将杂交鹅掌楸的饱满冬眠顶芽接种培养在1／2MS（铵态氮与硝态氮的质量浓度比为1：1）培养基上14d后，继以改良Risser和White(1964）培养基上培养7d，两种培养基均含有IAA2．0mg/L。初始阶段的继代培养以在改良Risser和White(1964)（Ca^2 质量浓度减半）培养基上＋VB5 1mg/L Biotin 0.01mg/L IAA 2.0mg/L ZT3.0mg/L较为适宜。     

杂交鹅掌楸间伐试验

对7年生杂交鹅掌楸进行间伐试验,结果表明,间伐2 a多后,在2 m×4 m、4 m×4 m和4 m×6 m 3个间伐密度中,2 m×4 m和4 m×4 m两者的胸径增长十分相近,为31.5%,密度4 m×6 m胸径增长最大,为45.4%,它与密度2m×4 m或4 m×4 m比较有44%的增长。     

离体培养条件下核桃器官发生和体细胞胚胎发生

采自幼树、成年树及成年树伐根萌条的嫩梢腋芽,在改良DKW培养基+6-BA1.0mg/L中可伸长生长;在加有6-BA1.0mg/L+IBA 0.01mg/L的继代培养基中,可保持腋芽的生长并形成不定芽。芽增殖率为每月600％左右。芽苗经5.0mg/L IBA处理7天,然后在含活性炭的无激素培养基中培养20天,有54％可生根成苗。5月中旬至6月上旬的幼胚,在改良DKW培养基+6-BA1.0 mg/L中,黑暗培养30天左右可产生体细胞胚,并可连续多代保持胚性分生能力。体胚在无激素的发芽培养基中黑暗培养7天左右可发芽成苗。胚性愈伤组织在悬浮振荡培养中可保持分生能力。     

杂交鹅掌楸丘陵区栽培试验研究

通过在汩罗桃林林场良繁试验点试验示范 ,杂交鹅掌楸在丘陵地区生长快 ,抗性强 ,是用材兼园林观赏的极佳树种。年生长量平均高 1 2 5m ,平均胸径 1 14cm。通过密度试验 ,幼林期以 1m× 3m的密度为佳。     

红掌离体培养

本文以红掌叶片、叶柄为外植体,从无菌系建立,进行增殖、复壮、生根培养,驯化炼苗等环节进行试验研究,探寻出一整套红掌组织培养快繁技术。能在较短的时间内,建立大量无菌系苗。     

竹子的离体培养研究

近２０ａ来已对２０个属７０余种竹子进行离体培养研究,以侧芽,顶芽,成熟胚作外植体诱导愈伤组织,由愈伤组织制备悬浮细胞进行细胞悬浮培养,由悬浮细胞制备原生质体进行原生质体培养。竹子愈伤组织经不定芽途径或体细胞胚发生途径再生完整植株。通过芽尖培养增殖新生芽进行竹微繁殖,并获得脱病毒种苗。以芽为外植体增殖的新芽或组织再生苗经继代培养诱导竹试管开花结实。     

鹅掌楸属杂交测定初步分析研究

鹅掌楸属杂交测定林的生长状况进行分析,结果表明5 a生树高、胸径、材积年平均生长量为1.92 m,2.5 cm,0.009 2 m3;生长最快杂交组合是T11×C8,其平均年生长量分别为2.39 m,3.4 cm和0.018 3 m3。3个生长性状杂交组合间都呈极显著的差异,为优良杂交组合的选择奠定基础。树高、胸径和材积的杂交组合(家系)遗传力分别为0.501,0.631和0.687,分别进行优良杂交组合选择,其现实遗传增益为16.3%,32.9%和116.1%。几种交配模式之间的材积生长比较结果是T×CC×TT自由授粉C自由授粉C×CT×S。优良杂交组合T11×C8、T12×C8、C9×T12的杂种优势率分别为108.7%,64.3%和110.7%。     

枣树离体培养研究进展

对枣树离体培养的研究现状进行了综述，包括器官培养；愈伤组织培养；花药培养；胚、胚乳培养；细胞培养；原生质体培养等。到目前为止，已有20多个枣品种以不同类型的外植体建立了无菌离体繁殖体系。然而枣树离体培养方面也存在着一定的问题，本文针对这些问题提出了自己的意见和建议。     

脱落酸和玉米素结合使用对杂交鹅掌楸体胚分化及发育的影响

【目的】探讨了不同浓度脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)处理对杂交鹅掌楸体胚发生发育的效应,为杂交鹅掌楸大规模繁殖技术的建立提供理论依据。【方法】以15-5202基因型的杂交鹅掌楸胚性愈伤组织为材料,比较在体胚分化阶段单独添加ABA以及同时添加ABA和ZT对体胚分化的影响;通过体胚发生数量统计、体胚生长状况观察等筛选出诱导效率高、体胚发育正常的体胚分化培养基。【结果】1)在体胚分化培养基中添加ABA对体胚的分化及成熟具有促进作用,添加0.5～1.5 mg·L^-1 ABA可加快体胚发育,且体胚形态正常;添加2.0～2.5 mg·L^-1 ABA时,虽使体胚分化率明显提高,但畸形胚比例增加;低浓度ABA处理30天后转入光培养2周体胚即可成熟;而未添加ABA处理的体胚在同样条件下未完全发育成熟,体胚呈白色、子叶淡黄色。2)在体胚分化培养基中同时添加ABA及ZT能提高体胚分化率及促进体胚发育; 2.0 mg·L^-1 ABA结合0.2～0.4 mg·L^-1 ZT处理后光培养2周,体胚形态发育正常,子叶分化明显,胚根健壮,生长状况较佳;未经过ZT处理的体胚生长发育较慢; ZT浓度高于0.6 mg·L^-1时体胚生长发育受到抑制,不利于体胚分化及成熟。【结论】在杂交鹅掌楸体胚分化培养基中添加2.0 mg·L^-1 ABA和0.2～0.4 mg·L^-1 ZT能够进一步提高体胚发生效率,促进体胚正常发育。     

白芨的离体培养

为快速生产大量优质白芨种苗,以白芨种子为外植体进行离体快繁研究。结果表明:MS基本培养基可促进白芨种子的快速无菌萌发,当6-BA的浓度为1.0 mg/L时可以促进幼苗的快速分裂生长,添加了2 mg/L的2,4-D的培养基可有效促进愈伤组织的形成。种子苗原球茎经切割后在MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L6-BA的培养基上愈伤组织诱导率为85%,1.0 mg/L的6-BA和0.15 mg/L的NAA配比可以诱导丛生芽的生长和增殖,添加了70 g/L香蕉泥和0.5 mg/L NAA的1/2MS培养基可有效促进根的生长。无菌发芽的种子苗移栽率可以达90%,而试管苗移栽的成活率较低,但随离体培养时间的延长有所提高。     

杂交鹅掌楸体胚苗容器育苗基质筛选

为了筛选出适于杂交鹅掌楸体胚苗生长的容器育苗基质,以草炭土、黄心土、河沙、珍珠岩为原料,按照体积比配制成5种育苗基质,开展杂交鹅掌楸体胚苗容器育苗试验,探讨不同基质组成对生物量、苗高、地径等生长指标的影响,并采用苗木质量指数对容器苗的苗木质量进行综合评价。结果表明,5种容器育苗基质处理对杂交鹅掌楸体胚苗的生长指标有显著影响,其中处理T5 （草炭土﹕河沙﹕珍珠岩=30﹕3﹕2）容器育苗效果最好。     

云南松成熟胚的离体培养

采用云南松(yunnanensis)成熟胚为外植体,培养室温度为25±4℃,培养基的蔗糖浓度为8％。以 1／2MS为基本培养基,在BA0．5-2．0mg／L+NAA0．5-1．5mg／L的激素配比范围内,可诱导离体胚产生愈伤组织及不定芽。外植体愈伤组织的诱导率达80％,由愈伤组织诱导不定芽,其分化率达17．8％。研究结果表明,激素的种类和浓度对外植体愈伤组织及不定芽的诱导起主要作用。     

油松的无性繁殖与离体培养研究

取成龄油松休眠封顶芽离体培养，获得大量组培嫩梢，并使其抽茎生长和增殖。结果表明，油松愈伤组织上形成的针叶束，是组培嫩梢的来源，继代培养必然经历自然休眠，培养基中加入活性炭、维生素类，并进行适量的暗培养，可使嫩梢伸长或增殖，从而为油松无性系林业和大规模离体元性繁殖提供了一条有效途径。     

杂交鹅掌楸良种选育与种苗繁育

从亲本选配、交配设计与杂交技术、杂种子代测定及优良遗传型选择、杂交鹅掌楸的分子鉴定等方面概括了杂交鹅掌楸四十余年来在良种选育领域的研究进展.总结了包括杂交制种、实生苗培育、无性繁育等种苗繁育常用的技术与方法,并对今后杂交鹅掌楸良种选育与繁育的工作以及推广前景进行了展望.