丁香花粉生活力测定及贮藏特性研究

以丁香花粉为试材,研究了蔗糖和H3BO3的交互作用对丁香花粉萌发的影响和不同贮藏条件及时间对丁香花粉萌发的影响。结果表明:H3BO3、蔗糖及其两者的交互作用对丁香花粉萌发有显著影响,最适宜的花粉培养基为:蔗糖20mg/L+H3BO330mg/L;丁香花粉在室温下可以贮藏21d,加干燥剂的花粉比不加干燥剂的生活力高,在-80℃条件下耐贮藏力为35d,贮藏27d后生活力仍达4%左右。     

3种柳树花粉最适贮藏温度及离体培养基研究

为了解不同柳树品种花粉贮藏的适宜条件及最适离体培养基，以粉枝柳、黄花柳、旱柳3种柳树花粉为试验材料，采集新鲜花粉进行离体培养，以筛选适宜培养基，并将花粉分别置于室温20～25、4、-5、-20℃条件下干燥贮藏后，通过测定花粉萌发率，筛选适宜的贮藏条件。结果显示：粉枝柳和旱柳花粉在100 g/L蔗糖+100 mg/L硼酸的培养基中萌发情况较好，黄花柳则在50 g/L蔗糖+100 mg/L硼酸中萌发率较高。随着贮藏时间的延长，贮藏温度越低，3种柳树花粉贮藏效果越好。在-20℃干燥情况下，3种柳树花粉贮藏60 d后仍可保持较高的萌发率，萌发率分别为粉枝柳42.6%,旱柳39.5%,黄花柳29.5%;而室温条件下贮藏12～15 d基本丧失活力。     

测定杜鹃花花粉萌发力的液体培养基和贮藏方法研究

以满山红、映山红、马银花、锦绣杜鹃的新鲜花粉为试料,研究了适宜杜鹃花花粉萌发的液体培养基、贮藏温度以及花粉的采摘贮藏方式。试验结果表明,适宜的测定杜鹃花花粉萌发力的培养液为:100g/L蔗糖+20mg/L H3BO3+20mg/L CaCl2,适宜花粉萌发的温度为25°C,8h花粉管开始萌发,16h萌发基本结束。满山红、映山红、马银花和锦绣杜鹃4种杜鹃花的花粉萌发力依次为:88.76%,74.32%,70.47%和82.62%。适宜杜鹃花的贮藏温度依次为:-20°C>4°C>室温,花粉生命力大于5%可用作父本的时间依次为:32d,24d,6d。适宜的保存花粉方式为仅去掉花瓣后的花朵,在4°C条件下,可保持杜鹃花花粉萌发力大于5%的时间达40d。     

君子兰花粉生活力测定及贮藏方法筛选

以大花君子兰品种胜利为试材,利用单因子试验比较了固体培养基中蔗糖、硼、钙、镁、钾及琼脂质量浓度对花粉萌发的影响,在此基础上进行正交试验。结果表明,适宜的花粉培养基为蔗糖100 g/L+H3BO3150 mg/L+CaCl2100 mg/L+琼脂4 g/L,新鲜花粉萌发率最高达91.4%。用醋酸洋红染色法和I-KI染色法测定君子兰花粉生活力分别为88.1%和89.4%,比培养基法(78.7%)略高。不同贮藏方法对君子兰花粉生活力影响差异较大,最佳贮藏方法为-20℃冷冻干燥贮藏,贮藏120 d后花粉生活力为24.4%。     

茶树花粉的离体萌发研究

选用无性系茶树品种龙井长叶花粉为材料,通过离体条件下花粉的萌发来探讨茶树离体花粉萌发的最适条件及最适保存方法.取蕾白期茶树花苞,干燥15 h后取花粉,以30 mmol/L的MES缓冲液(pH值5.5)为母液配制0.01% H3BO4+0.03% Ca(NO3)2+10% 蔗糖+15% 聚乙二醇4000(PEG-4000)溶液(pH值6.5),作为基本培养基,统计不同组分的浓度、不同pH值和不同碳源对25 ℃处理1 h的花粉萌发率的影响.结果表明,茶树花粉萌发和花粉管生长的最适液体培养基是:0.01% H3BO4+0.05% Ca(NO3)2+5% PEG-4000+5%麦芽糖,pH值在5.0~6.0之间(30 mmol/L MES).在此条件下的萌发率为82.24%,花粉管生长长度为492 μm.     

石蒜花粉萌发与贮藏性研究

以石蒜盛花期的花粉为试验材料,采用液体培养基法研究了培养基组成、贮藏温度和时间对花粉萌发特性的影响。结果表明院石蒜花粉萌发的最适培养基为150 g/L蔗糖+10 mg/L硼酸,花粉萌发率达41.07%;石蒜花粉生活力随贮藏时间的延长而下降,适宜的贮藏温度为-20℃,可保持生活力达28 d。     

蜂糖李花粉离体萌发及活力保存研究

【目的】明确蜂糖李花粉活力影响因素和贮藏特性,为蜂糖李花粉的保存提供支持。【方法】以蜂糖李花粉为研究对象,青脆李花粉为对照,采用离体培养萌发法,研究不同质量浓度蔗糖、H_3BO_3、植物生长调节剂(NAA、GA_3和6-BA)以及不同贮藏方式(4℃低温干燥、-20℃冷冻干燥及蔗糖密封保存)对2种李花粉活力的影响。【结果】蜂糖李和青脆李花粉萌发及花粉管生长的最佳培养基组合为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂,在此条件下花粉萌发率分别为53.68%和57.06%,花粉管长度分别为1 554.70和1 353.43μm,均无较大差异。10～30 mg/L NAA能极显著提高蜂糖李的花粉萌发率;但所有NAA处理均极显著抑制其花粉管的生长;不同质量浓度GA_3均可极显著促进蜂糖李花粉的萌发,且20和50 mg/L GA_3可极显著促进其花粉管生长;5～10 mg/L 6-BA能极显著提高蜂糖李花粉萌发率,质量浓度达20 mg/L时会极显著抑制其花粉管伸长。蔗糖密封保存能有效减缓2种李花粉活力的下降速度,延长花粉贮藏时间;贮藏至20 d时,蔗糖密封保存的蜂糖李花粉萌发率(39.54%)分别是4℃低温干燥保存、-20℃冷冻干燥保存的2.11和1.94倍。【结论】蜂糖李最适花粉萌发和花粉管生长培养基组分为150 g/L蔗糖+0.10 g/L H_3BO_3+10 g/L琼脂;GA_3是最适宜的植物生长调节剂,20和50 mg/L GA_3能同时促进蜂糖李花粉萌发和花粉管生长;花粉保存以蔗糖密封保存方式为宜。     

唐菖蒲花粉离体萌发的液体培养基研究

以唐菖蒲栽培品种"粉友谊"的新鲜花粉为试验材料,采用花粉离体培养法,研究蔗糖、H3BO3、CaCl2所组成的基本培养基配方不同组分浓度对唐菖蒲花粉萌发率的影响,并在此基本培养基配方的基础上,研究Mg2+、Zn2+、Fe3+、Cu2+和K+离子对花粉萌发的影响.蔗糖、H3BO3、CaCl2单因子和正交试验结果表明,蔗糖和H3BO3对唐菖蒲花粉萌发有显著影响,蔗糖是花粉萌发的必需物质.低浓度的Mg2+、Fe3+和K+对花粉的萌发有促进作用.离子浓度过高对花粉萌发产生抑制作用.而Cu2+、Zn2+在所设定的浓度范围内均表现出抑制作用.唐菖蒲花粉培养液最适配方:蔗糖100 g·L-1+H3BO3100 mg·L-1+CaCl2150 mg·L-1+Fe2(S04)350 mg·L-1+KNO350 mg·L-1+MgSO4·7H2O 100 mg·L-1;最适培养温度为25℃,且光照、黑暗的环境条件对花粉萌发无显著影响.     

刺梨花粉萌发的培养基筛选

为筛选刺梨花粉萌发的最佳培养基,研究了不同蔗糖浓度、硼酸浓度和Ca2+浓度对刺梨花粉萌发率的影响,进一步探讨了不同品种在最佳培养基上花粉萌发率的差异.结果表明,最佳培养基组合为200 g/L蔗糖+20 mg/LH3BO3+20 mg/L CaCl2+10 g/L琼脂;不同刺梨品种的萌发率差异较大,贵农1号、2号、5号、6号、7号花粉的萌发率分别为74.8%、54.51%、83.29%、70.92%和80.48%.     

野牡丹花粉生活力与贮藏特性研究

以野牡丹(Melastoma candidum)花粉为材料,利用扫描电镜观察其形态结构,筛选花粉活力测定的最佳方法,探讨光照及不同贮藏条件对花粉萌发的影响.结果表明:野牡丹异型雄蕊花粉的形态无显著差异,花粉粒赤道观为长椭圆形,极面观为三裂圆形,极轴P为33.04(±1.37)μm,赤道轴E为15.05(±0.88)μm;与TTC染色法相比,离体培养基法测定花粉生活力更可靠;紫红色雄蕊和黄色雄蕊上的花粉生活力无显著差异,但二者萌发最适培养基存在差异,适合紫红色雄蕊的最佳萌发培养基为蔗糖50 mg/L+硼酸5 mg/L+CaCl25 mg/L,适合黄色雄蕊的培养基为蔗糖50 mg/L+硼酸10 mg/L+CaCl2 20 mg/L;光照对花粉萌发无显著影响;不同低温条件贮藏过程中花粉均出现短暂休眠现象,贮藏温度以-7℃和-23C优于-4℃,贮藏60 d时仍保持较高花粉活力.     

3种百合组培快繁体系的优化

为优化百合组培快繁体系,以东方百合‘索邦’、野生淡黄花百合及新铁炮百合‘雷山3号’为研究对象,采用组织培养技术,研究不同外植体诱导分化、组培苗继代增殖和鳞茎增大的最佳培养条件。结果表明:淡黄花百合种子萌发的适宜培养基为MS+0.01 mg/L NAA+60 g/L蔗糖;适宜‘索邦’、‘雷山3号’鳞片诱导不定芽的适宜培养基分别为MS+2.0 mg/L 6–BA+0.3 mg/L NAA和MS+0.5 mg/L 6–BA+0.2 mg/L NAA;适宜这3种百合组培苗增殖培养的培养基为MS+2.0 mg/L 6–BA+0.2 mg/L NAA;适宜‘索邦’无菌苗鳞茎增大的培养基为3MS+0.5 g/L AC+3.0 mg/L PP333+80 g/L蔗糖。     

不同高山杜鹃品种花粉活力测定及贮藏方法研究

以大白花杜鹃、XXL、亮叶杜鹃、马缨花杜鹃和黄杯杜鹃为研究对象,采用花粉离体培养,比较不同的贮藏条件下花粉活力随贮藏时间的变化情况。结果表明,不同杜鹃品种花粉培养基琼脂均为0.7%,大白花杜鹃最适萌发培养基为:蔗糖50 g/L,硼酸50 mg/L,氯化钙50 mg/L;马缨花杜鹃最适萌发培养基为:蔗糖100 g/L,硼酸30 mg/L,氯化钙30 mg/L;黄杯杜鹃、XXL和亮叶杜鹃最适萌发培养基均为:蔗糖100 g/L,硼酸0 mg/L,氯化钙30 mg/L;不同品种的杜鹃花新鲜花粉萌发率差异较大,按花粉萌发率从大到小排序为黄杯杜鹃亮叶杜鹃大白花杜鹃XXL马缨花杜鹃;黄杯杜鹃花花粉在4个不同温度贮藏条件下花粉萌发率均比XXL和马缨花杜鹃高,说明黄杯杜鹃花花粉的活力较强,在杂交育种中可以优先考虑。     

西葫芦花粉生活力测定方法及最佳授粉时间的研究

研究了西葫芦新鲜花粉的生活力测定方法、离体培养条件、短期贮藏方法以及不同时间的花粉生活力强度。结果显示:TTC染色法的测定值与离体培养法的测定结果相近且差异不显著,是一种快捷、准确测定西葫芦花粉生活力的染色方法。培养基15%蔗糖+100mg/L硼酸+300mg/LCa(NO3)2.4H2O+200mg/L MgSO4.7H2O+100mg/L KNO3,适宜西葫芦花粉离体萌发,花粉离体萌发率最高,为60.602%,0℃黑暗干燥或4℃黑暗干燥贮藏花粉,生活力保持最好,均在70.000%以上,且散粉情况较好;人工授粉最好在上午10:00之前完成,最佳授粉时间为6:00-8:00,此时种子的结实率最高。     

堇薇花粉粒活力研究

本试验以堇薇(L.indica’Jinwei’)长、短雄蕊花粉为试验材料,采用I-KI、 TTC、液体培养法测定这两个紫薇品种活力。研究表明:I-KI、 TTC不适宜测定紫薇花粉的生活力,适宜的测定花粉萌发力的培养液为:250 g/L蔗糖+20 mg/L H3BO3+20 mg/LCaCl2。     

早开堇菜花粉生活力研究

以早开堇菜新鲜花粉为试材,使用扫描电镜观察花粉表观形态,采用双重二因素试验用离体培养法研究不同培养基组分对花粉萌发的影响,筛选最佳的贮藏方法,并探讨花粉形态结构与花粉萌发之间的关系。结果表明:蔗糖和硼酸对花粉萌发具有促进作用。在280 g/L蔗糖和240 mg/L硼酸的条件下花粉萌发率最高,为72.29%;在90 mg/L GA_3和200 mg/L Ca(NO_3)_2的条件下花粉萌发率峰值为82.48%。确定花粉离体培养最佳的培养基为:蔗糖280 g/L、GA_3 90 mg/L、Ca(NO_3)_2 200 mg/L、硼酸240 mg/L。花粉萌发率随贮藏时间的延长呈下降趋势,相同时间内贮藏温度越低花粉萌发率越高,早开堇菜花粉最佳的贮藏的条件为-80℃;花粉形态与其萌发率之间有相关性。     

糖、硼、钙对大喇叭杜鹃四合花粉萌发的影响

以大喇叭杜鹃（Rhododendron excellens）为研究对象,研究了蔗糖、硼酸及CaCl2单因子及正交试验对其四合花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明,蔗糖、硼酸和CaCl2及3因子交互效应对大喇叭杜鹃的四合花粉萌发率、单花粉粒萌发数量及单花粉粒花粉管长度均有显著影响;最适蔗糖、硼酸和CaCl2溶液浓度分别为80g/L、100mg/L、80mg/L;正交试验的最佳配方组合是：80g/L蔗糖＋50mg/L H3BO3＋40mg/L CaCl2。     

正交法优化普通油茶花粉萌发的培养成分

[目的]研究普通油茶离体花粉的培养条件.[方法]以蔗糖、维生素C、H3BO4、MgSO4、培养液pH为影响油茶花粉萌发的因素,进行单因素试验和正交试验,研究这些成分对油茶花粉萌发的影响.[结果]油茶花粉萌发的最佳培养液成分为蔗糖150 g/L,维生素C0.02 g/L,H3BO40.15 g/L,MgSO40.07 g/L,培养基pH 6;影响油茶花粉萌发主要的因素是蔗糖,其次是H3BO4.[结论]该研究结果为油茶的有性杂交打下了基础.     

索邦和西伯利亚百合的离体再生体系建立

【目的】确定索邦（Sorbonne）和西伯利亚（Siberia）百合的离体再生体系适合的诱导培养基、增 殖培养基、生根培养基以及最佳转化受体系统。【方法】选用索邦和西伯利亚百合的鳞茎球作为外植体,比较 它们在添加不同激素配比的培养基中的生长状况,得出两种百合诱导愈伤组织和不定芽、继代增殖、诱导生根 培养基和对卡那霉素敏感的最适条件。【结果】索邦百合最佳诱导培养基是 MS+2,4-D 1.5~2.0 mg/L,西伯利亚 百合最佳诱导培养基为 MS+2, 4-D 1.0~1.5 mg/L;两种百合的最佳继代增殖培养基均为 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L：两种百合的最佳生根培养基为 1/2MS+NAA 0.2 mg/L、1/2MS+IBA 0.2 mg/L;筛选转化植株时,质量浓度为 150 mg/L 的卡那霉素足以抑制非转化细胞或细菌的生长。【结论】为东方百合品种种球工厂化生产及遗传转化再 生体系充实理论依据。     

3种东方百合离体培养

【目的】研究3种东方百合离体培养技术,筛选出适宜其离体培养的统一培养基,为东方百合工厂化育苗提供技术保障。【方法】以3种东方百合提伯、索邦和西伯利亚的鳞片为外植体,筛选适宜的灭菌方法;在MS基本培养基上添加不同种类和不同浓度的激素,筛选适宜的增殖培养基和生根培养基,进一步筛选最适移栽基质。【结果】适宜3种东方百合外植体灭菌的较好方法是:75%酒精灭菌15 s结合升汞灭菌12 min;愈伤诱导和分化的适宜培养基为MS;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA是增殖培养的最适培养基,提伯、索邦和西伯利亚的增殖系数分别为3.32、3.32和3.00;MS+0.1 mg/L IBA是生根培养的最佳培养基,提伯、索邦和西伯利亚的生根率分别为96.33%、92.67%和93.67%;移栽的最佳基质为泥炭∶珍珠岩(体积比)=2∶1,提伯、索邦和西伯利亚的移栽成活率分别为97.34%、98.00%和100.00%。【结论】建立的3种东方百合离体快繁体系适用于东方百合种球工厂化生产。     

紫叶李花粉生活力及贮藏特性研究

[目的]探讨适宜紫叶李花粉萌发的最佳培养基和最佳贮藏条件。[方法]以新鲜紫叶李花粉为材料,以0、50、100、150、200和250mg/L的蔗糖浓度配制培养基,以0、10、20、30、40mg/L的浓度配制硼酸溶液,用染色法和培养基萌发法研究不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉萌发的影响,并探讨不同贮藏条件对紫叶李花粉萌发的影响。[结果]紫叶李花粉不添加蔗糖和硼酸培养基的萌发率较低,仅为5.5%,随着蔗糖和硼酸浓度的升高,其萌发率呈现先升高后降低的趋势。最佳培养基为：蔗糖100mg/L＋硼酸30mg/L,花粉萌发率可达26.7%,比对照提高3.9倍。贮藏花粉的最佳条件为-80℃,耐贮藏力长达30d,25d后萌发率达到8.8%。[结论]不同浓度的蔗糖和硼酸对紫叶李花粉萌发有显著影响;超低温是贮藏紫叶李花粉的最佳贮藏条件。