菊花对潮霉素敏感性的研究

[目的]探讨菊花对潮霉素的敏感性,为菊花的遗传转化提供理论依据。[方法]以菊花品种45、34、30、44、20、35的愈伤组织为材料,采用MS培养基附加6-BA、IAA、KT,以不同浓度的潮霉素进行处理。[结果]随着潮霉素浓度的增加,全部试材的褐化率均增大,体积增殖均减小。菊花35对潮霉素最敏感,在潮霉素浓度为10 mg/L时,其褐化率为56.67%。在潮霉素浓度小于20 mg/L时,菊花愈伤组织的体积增殖平均为3 mm;在潮霉素浓度大于20 mg/L时,其体积增殖平均为0.5 mm,且其褐化率达70%~80%。作为菊花筛选标记时,潮霉素的适宜浓度为20 mg/L。[结论]菊花对潮霉素的敏感性在基因型间存在差异。来自同一基因型菊花不同部位的外植体对抗生素的反应不同。     

葛沽萝卜松散型愈伤组织的诱导

试验以天津市葛沽萝卜子叶、子叶柄和下胚轴为外植体诱导松散型愈伤组织,探究不同外植体和不同激素浓度对其松散型愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同外植体均能诱导出愈伤组织,只有子叶和子叶柄能诱导获得松散型愈伤组织。子叶诱导的松散型愈伤组织生长较快,愈伤组织诱导率为（26.88±1.44）%,子叶是诱导松散型愈伤组织的最适外植体。葛沽萝卜松散型愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.25 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,松散型愈伤组织诱导率为（95.83±2.20）%,且褐化率仅（0.83±0.83）%。     

蒙古黄芪的组织培养及辐射诱变研究

[目的]研究蒙古黄芪的组织培养技术及辐射诱变对愈伤组织诱导的影响。[方法]以蒙古黄芪无菌苗的不同外植体（叶片、子叶、下胚轴）进行愈伤组织诱导,并对子叶和下胚轴进行辐射诱变研究。[结果]3种外植体分别在MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 2.0 mg/L、LS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L、MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 2.0 mg/L培养基上的愈伤组织诱导率较高 下胚轴和子叶的最佳诱变时间均为15 min 随辐射诱变时间的增加,下胚轴愈伤组织的长势增强,但超过一定的诱变时间愈伤组织长势减弱且诱导率降低。[结论]该研究为蒙古黄芪的组织培养和诱变育种提供科学依据。     

向日葵遗传转化中抗生素适宜筛选浓度的研究

以油用向日葵新葵杂6号品种为材料,采用不同浓度梯度抗生素处理茎尖、子叶、胚轴转化外植体的方法,研究了不同浓度的卡那霉素和潮霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位遗传转化外植体的筛选效果。结果表明,卡那霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位转化外植体的筛选适宜浓度为25～30 mg/mL,潮霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位转化外植体的筛选适宜浓度为7～10 mg/mL;PCR检测结果显示阳性植株外源基因已导入;不同部位的转化外植体对卡那霉素和潮霉素的敏感性存在一定的差异,但未见明显梯度。     

不同外源激素对胀果甘草愈伤组织诱导及褐化的影响

以胀果甘草下胚轴、子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素浓度配比对胀果甘草愈伤组织诱导率和褐化率的影响.结果表明:不同浓度的6-BA、2,4-D以及6-BA、NAA组合下的子叶、下胚轴愈伤组织诱导率及褐化率均具有极显著差异;NAA对子叶愈伤组织的诱导效果好于2,4-D,较高浓度的6-BA、NAA及较低浓度的6-BA、2,4-D更易导致下胚轴、子叶愈伤组织的褐化;供试范围内胀果甘草下胚轴和子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.5mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA和MS+2.5mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA.     

萝卜诱导愈伤组织较适外植体及激素的筛选

以萝卜无菌苗的子叶和下胚轴为试验材料,比较了不同浓度的6-BA、NAA、2,4-D和IBA组合时,子叶和下胚轴的愈伤组织诱导率和质量,结果表明:子叶诱导愈伤组织的效果比下胚轴诱导愈伤组织的效果好,子叶是萝卜组织培养的较佳外植体;子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基一致,均为MS 3 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖。     

中华结缕草对潮霉素的敏感性研究

研究了中华结缕草3种不同外植体对不同浓度潮霉素溶液的敏感性。结果表明:中华结缕草不同外植体对潮霉素的敏感性存在差异,其中种子经50 mg/L潮霉素处理3周后,发芽率极显著减少,只有6%;愈伤组织经20 mg/L潮霉素处理3周后褐化率达到62%;离体叶片经50 mg/L潮霉素处理7 d后,黄化面积率超过85%。故中华结缕草的种子、愈伤组织、离体叶片在遗传转化中适宜的潮霉素筛选浓度分别为50、20、50 mg/L。     

中华结缕草对潮霉素的敏感性研究

研究了中华结缕草3种不同外植体对不同浓度潮霉素溶液的敏感性。结果表明:中华结缕草不同外植体对潮霉素的敏感性存在差异,其中种子经50 mg/L潮霉素处理3周后,发芽率极显著减少,只有6%;愈伤组织经20 mg/L潮霉素处理3周后褐化率达到62%;离体叶片经50 mg/L潮霉素处理7 d后,黄化面积率超过85%。故中华结缕草的种子、愈伤组织、离体叶片在遗传转化中适宜的潮霉素筛选浓度分别为50、20、50 mg/L。     

CPPU对津春4号黄瓜子叶和下胚轴组织培养的影响

文章研究了不同浓度的CPPU[N-(2-氯-4-吡啶基)-N-苯基脲]对津春4号黄瓜子叶和下胚轴培养的影响,初步建立了CPPU对津春4号黄瓜子叶和下胚轴愈伤组织诱导和不定芽分化的适宜水平.以津春4号黄瓜子叶和下胚轴为外植体,在附加有不同浓度生长调节剂(PGR)的MS培养基上进行培养,结果表明,下胚轴比子叶效果好,其最佳愈伤组织诱导与生长培养基为MS NAA0.4～0.5mg/L CPPU0.05～0.20mg/L;最佳芽诱导培养基为MS CPPU0.1 mg/L.     

番茄宝大906高频再生系统的建立及其潮霉素选择压的测定

以番茄宝大906品种为试材,通过对其子叶、下胚轴的离体培养,研究了不同6-BA/NAA植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导、不定芽再生及生根的影响.另外,还测定了潮霉素选择压.结果表明:以子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基分别是MS+ 2.0 mg,/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA和MS+ 2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA;诱导芽分化的最适培养基均为:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,子叶的芽分化率高达93.5％;不定芽适宜的生根培养基为MS+0.1 m g/L NAA;子叶、下胚轴的潮霉素选择压分别以20、40 mg/L为宜.     

活性炭在高山杜鹃组织培养中的应用

[目的]了解活性炭(AC)的添加量与植物激素添加量的关系,以及活性炭的加入对高山杜鹃试管苗出芽、褐化的影响。[方法]通过高山杜鹃的组织培养试验探索活性炭的添加量与植物激素添加量的关系及对高山杜鹃外植体出芽率和褐化率的影响。[结果]在MS固体培养基中,活性炭的吸附作用较复杂;高山杜鹃外植体出芽的较好培养基为1/4 MS+2-ip 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+AC 1.5 g/L和1/4 MS+2-ip 4.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+AC 1.5 g/L,有较好的出芽率,较低的褐化率。最高出芽率为56.7%,最低褐变率为40.0%。[结论]在MS固体培养基中,活性炭对生长激素的吸附量不能简单套用MS液体培养基中的吸附量,了解活性炭的吸附作用与完全克服高山杜鹃组织培养中的褐化现象,均有待进一步探索。     

甘蓝型油菜花药培养技术研究

[目的]筛选甘蓝型油菜愈伤组织的最佳分化培养基,探讨甘蓝型油菜花药培养技术。[方法]在油菜始花期,取其主茎顶端蕾盘的中圈花蕾,将花药接种于B5+2,4 D 1.0mg/L+KT 1.5mg/L的培养基进行诱导,将诱导出的愈伤组织接种于不同配方的12种培养基进行分化培养。[结果]甘蓝型油菜花药培养取花粉处于单核后期至双核初期,对应于外部特征是蕾盘中圈10～15个花蕾,所产生的愈伤组织百分率最高(16%);12种不同配方的培养基中以B5+KT 2.0mg/L+BA 2.0mg/L+IAA 0.1mg/L或MS+KT 2.0mg/L+BA 2.0mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上分化成苗最好,分化率分别为75%和70%,将分化的小苗置于1/2MS培养基上诱导生根,可长成完整幼苗。[结论]花药培养可以加速油菜育种进程。     

降低软籽石榴组织培养过程中外植体褐化的研究

[目的]研究基本培养基、植物生长物质种类和浓度及防褐剂含量对石榴组织培养外植体褐化的影响。[方法]选用淮北黄里软籽石榴的茎段为材料,采用正交试验研究基本培养基、6苄-基腺嘌呤（6-BA）、吲哚乙酸（IAA）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）对外植体褐化的影响,对所得试验数据进行极差分析和方差分析,探讨软籽石榴茎段组织培养褐化率最低的培养基。[结果]淮北黄里软籽石榴茎段组织培养褐化率最低的培养基为MS＋6-BA1.0 mg/L＋IAA 0.50mg/L＋PVP 2500mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂7g/L,各因素对褐化率的影响程度依次为PVP〉6-BA〉无机盐〉IAA。[结论]该研究可为进一步提高软籽石榴快速繁殖系数提供依据。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的研究(英文)

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0mg/L6-BA+2.0mg/LIBA和MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LIBA。200mg/LVc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

巨紫荆优良新品系组织培养快速繁殖技术

[目的]研究高效繁殖巨紫荆的途径。[方法]采用组织培养对巨紫荆进行快速繁殖。[结果]茎尖繁殖以MS+ZT 2.0 mg/L培养的组培苗中褐化率和玻璃苗发生率为0,增殖倍数为3.56倍,效果最好;健壮的继代苗可显著提高苗木的生根率和移栽成活率;0.5mg/L TA生根效果最好,0.5 mg/L IAA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L TA能有效诱导根的形成,移栽成活率达96.6%;S-1优树组培苗的生理状态优于实生苗。[结论]巨紫荆组织培养是一条快速有效的繁殖途径。     

农杆菌介导的百合遗传转化受体系统的研究

[目的]研究农杆菌介导的百合遗传转化受体系统。[方法]选取改进MS培养基为基本培养基,以百合的鳞片为材料进行外植体再生和抗生素筛选试验,确定农杆菌介导的百合遗传转化受体系统。[结果]MS改进培养基中添加0.5 mg/L2,4-D、1.0 mg/L BA最有利于鳞片不定芽的分化,分化率为59.1%。小叶块在添加0.1 mg/LBA、1.0 mg/L2,4-D的MS改进培养基中的分化率最高,达94.4%,且生根情况较好。以百合的鳞片和小叶块作为农杆菌介导的基因转化的受体材料时,所用头孢霉素的浓度以400 mg/L最好,鳞片和小叶块周围几乎没有农杆菌菌斑。潮霉素筛选鳞茎的亚致死浓度为14 mg/L,潮霉素筛选小叶块的亚致死浓度为18 mg/L。[结论]该研究为百合农杆菌介导的转基因研究奠定了基础。     

甘蓝型油菜DH系培养技术优化

[目的]研究消毒处理方式、培养基成分和胚状体培养方法对油菜游离小孢子培养的影响。[方法]以B5培养基为基础培养基,添加不同浓度的蔗糖、琼脂及不同激素组合进行试验,对油菜DH系的组培技术进行优化。[结果]含2%Cl-的NaClO消毒15 min与0.1%HgCl2消毒10 min培养效果较好,都能达到良好的消毒和产胚效果;在游离小孢子提取的过程中,B5液体培养基中蔗糖浓度为2%时能达到较好的产胚效果;小孢子培养首先在32℃暗培养5~7 d,然后25℃暗培养12~15 d,最后25℃振荡暗培养3~7 d胚状体就可完全成熟;1/2 MS培养基(附加1.2%琼脂+0.02%NAA+2.0 mg/L6-BA+3.4 mg/LAgNO3+2%蔗糖)有利于胚的分化和苗的形成,其褐化程度小,玻璃化程度低。[结论]该研究结果有助于甘蓝型油菜DH系的规模化生产及高效转化体系的建立。     

甘蓝型油菜下胚轴离体培养再生植株研究

[目的]为进一步通过基因转化获得预期优良性状的甘蓝型油菜提供借鉴。[方法]以甘蓝型油菜的下胚轴为外植体,研究不同苗龄、不同基因型、不同预培养条件以及各种生长调节剂组合对油菜外植体高频率再生的影响。[结果]试验中,7 d苗龄的甘蓝型油菜下胚轴再生频率可达35.83%;经3 d预培养处理的油菜下胚轴芽再生频率可提高至57.78%,油菜品种史力丰下胚轴的芽分化率较高,达35.00%,其次是N481-1,而N370-1的芽分化率最低;其最高分化率的激素组合为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,达38.89%。史力丰品种6~8 d无菌种子实生苗的下胚轴在预培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L上预培养3 d,在最适分化培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L中培养,再生频率最高。[结论]建立了甘蓝型油菜下胚轴离体培养高频率再生植株模式。