叶片不同保存方法对杨树基因组DNA提取效果的影响

以杨树叶片为试验材料,采用改良SDS法提取基因组DNA,分析5种不同保存方法对样品提取效果的影响.通过A260 /A280、琼脂糖凝胶电泳、ISSR-PCR扩增分析对提取的基因组DNA进行鉴定,结果表明,低温保存杨树叶片是比较理想的方法,而在远距离野外资源调查收集时,采用硅胶干燥保存样品是比较可行的.     

三叶木通叶片保存时间对基因组DNA提取效果的影响

为了考察三叶木通叶片保存时间与基因组DNA提取质量的关系,以低温保存1个月和6个月的三叶木通〔Akebia trifoliata(Thunb)Koidz〕叶片为材料,采用改良的CTAB法提取其基因组DNA,用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测获得的DNA质量。结果表明:低温保存1个月三叶木通叶片中提取的DNA质量较高,检测条带清晰,可用于后期的分子生物学研究。结论:三叶木通叶片保存时间过长,其核酸结构易发生改变而降解,从而影响DNA的提取质量。     

改良CTAB法提取益智基因组DNA

益智叶片中多酚和多糖等杂质的含量较高,为获得高质量的益智基因组DNA,试验在传统CTAB法的基础上加以改良,提取益智基因组DNA,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测。结果表明,改良后的方法较之传统方法简单高效,所获得的基因组DNA质量较好,OD260/OD280在1.7~2.0之间,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析条带清晰,多态性好。适合于进行以PCR为基础的DNA多态性的研究。     

不同保存方法对中麻黄基因组DNA提取效果的影响

通过对不同方法采集和保存的中麻黄样品基因组DNA提取效果进行比较,确定中麻黄的最佳采集和保存方法。应用改良CTAB法提取中麻黄基因组DNA,并采用琼脂糖凝胶电泳检测其完整性,利用紫外分光光度计法测定其浓度和纯度。结果表明,新鲜样品采集后立即冷冻保存或置于液氮和硅胶后冷冻保存,均能提取出高质量的基因组DNA;鲜样阴干几天后冷冻保存会导致基因组DNA降解;阴干后在室温下保存则降解更严重。采集的中麻黄鲜样采取不同方法带回实验室均不影响基因组DNA的提取效果,但应在低温环境中保存才能有效防止基因组DNA的降解。     

核桃叶片不同保存方法对其DNA提取质量的影响

以核桃叶片为试材,分析采用10种不同的样品保存方法,采用改良CTAB法对样品进行了基因组DNA提取效果的比较.通过A260/A280、琼脂糖凝胶电泳、SSR-PCR扩增分析对提取的基因组DNA进行了鉴定,认为低温保存核桃叶片是比较理想的方法,而在远距离长时间野外资源调查收集时,采用室内自然风干或硅胶保存样品也同样是比较可行的方法.     

番木瓜组培苗叶片基因组DNA的微量提取

比较了3种从番木瓜组培苗叶片中提取基因组DNA的方法.结果表明:改良CTAB法步骤简单,DNA得率与质量均较高,并能用于转基因植株的PCR检测、限制性内切酶酶切以及后续的反向PCR反应;SDS-KAc法存在RNA残留;试剂盒法的DNA得率与质量均较低.     

马铃薯叶片基因组DNA提取方法比较研究

以马铃薯叶片为试验材料,采用改良CTAB法和试剂盒法提取马铃薯叶片基因组DNA。结果表明,2种方法均可得到满足SSR-PCR扩增要求的DNA,其中试剂盒较改良CTAB法提取的DNA质量高、杂质少,DNA得率低,操作简单,耗时短,毒害小,但费用较改良CTAB法高。实践中可根据条件选择适宜方法提取马铃薯基因组DNA。     

雷公藤叶片基因组DNA不同提取方法比较

[目的]比较雷公藤叶片中基因组DNA的提取方法。[方法]采用常规CTAB法、改良CTAB法、常规SDS法、高盐低pH值法和一步法分别提取雷公藤叶片基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法测定样品OD260与OD280的比值以及RAPD扩增结果,判断所得DNA样品的纯度,并根据OD260值计算不同提取方法的DNA得率。[结果]改良CTAB法提取效果最佳,所提DNA的平均得率为219.3μg/g,OD260/OD280比值在1.869～1.903,用于RAPD-PCR均有较好的扩增结果。[结论]改良CTAB法是雷公藤叶片基因组DNA提取的最佳方法。     

用于DNA提取的油茶叶片保存方法探讨

探讨用于DNA提取的油茶叶片保存方法，比较了冷冻(-70℃)保存与3种不同配方溶液(室温)保存油茶叶片对提取DNA质量的影响。结果表明，冷冻法保存10d、20d、30d、60d的油茶叶片提取的DNA分子量约为48kb，A260／A280值为1．833∽1．936，得率为307∽382μg／g(FW)，与从新鲜叶片提取的DNA质量基本一致。实验结果表明．冷冻法适合于油茶叶片的保存．而3种不同配方溶液保存法不适合于油茶叶片的保存。     

不同保存方法对胡杨、灰叶胡杨叶片总DNA质量的影响

针对胡杨、灰叶胡杨分布偏远、新鲜叶片褐化快等特点,探索了新鲜叶片、硅胶干燥后-70℃保存3个月的叶片、硅胶干燥后常温保存15个月的叶片、自然晾干3天的叶片、3个月标本的叶片、15个月的标本的叶片等六种采集保存方法对胡杨、灰叶胡杨总DNA提取质量的影响,并利用分子系统学研究的常用的核糖体RNA基因、线粒体基因、叶绿体基因的保守引物对所提的DNA进行PCR扩增,结果表明：硅胶干燥-70℃保存3个月的叶片和自然晾干3天的叶片均能得到与新鲜叶片相当质量的DNA。考虑到野外样品采集条件的限制,认为野外采集大量样品进行胡杨、灰叶胡杨分子系统学研究的最佳方法为采样后硅胶干燥-70℃长期保存。     

野生益智的光合特性研究

以陵水、保亭、万宁3地的野生益智(Alpinia oxyphylla Miq.)为材料,研究不同地点益智的光合特性,包括净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率、叶面积、叶绿素含量、土壤养分及它们之间的关系。结果表明,除保亭和万宁的气孔导度没有显著差异外,其他光合指标都存在显著差异;3地的叶面积存在显著差异,保亭和万宁、陵水和万宁的叶绿素含量也存在显著差异;陵水与万宁、保亭与万宁的土壤氮、磷含量差异都达到了显著水平,保亭与陵水、万宁与陵水的土壤钾含量差异达到了显著水平;净光合速率与叶面积、叶绿素含量呈显著正相关,胞间CO2浓度与叶绿素含量呈极显著正相关;土壤磷含量与益智的高度和密度呈显著或极显著正相关,与净光合速率呈显著负相关,与胞间CO2浓度呈极显著正相关;钾含量与净光合速率、蒸腾速率呈极显著负相关;氮含量与气孔导度、蒸腾速率呈显著正相关。试验结果为提高益智的品质,为野生益智的驯化、改良和保护提供了基础资料与科学依据。     

益智野生居群的群落特征及植物种类

为了解益智野生居群的分布状况、生境、群落特征和伴生植物状况,更好地保护和利用野生资源,采取野外群落调查、标本采集和分类鉴定等方法,对海南地区的益智野生居群进行调查。结果表明:益智群落中共有53科94属104种植物,包括蕨类植物9科10属12种,裸子植物1科1属1种,被子植物43科83属91种,以大戟科、菊科种类较多;入侵植物8种,占群落中物种总数的7.69%。不同样区的益智均为群落的优势种,重要值均最大;琼中和保亭样区益智的盖度都显著大于陵水和万宁,其他各样区之间差异未达显著水平;保亭和琼中益智的高度显著大于陵水和万宁,其余各样区之间差异达显著水平;各样区间益智的密度均未达显著性差异;益智的盖度与土壤温度呈极显著负相关,密度与土壤温度呈显著负相关,高度与土壤水分呈极显著正相关,高度与土壤pH和土壤温度呈极显著负相关;益智的重要值与土壤因子均无相关性。     

海南益智野生居群表型多样性分析

[目的]分析益智野生居群间的遗传变异。[方法]统计海南野生益智居群的平均株高、单丛茎杆数、单丛果穗数、单穗重等影响产量的形态表型数据并计算其变异系数。[结果]居群间性状差异显著,变异系数差异较大,具有较丰富的遗传多样性。[结论]可以从海南野生益智群体中筛选出一些优良性状以供益智栽培种的品种改良。     

益智的本草考证

为益智的临床应用及开发利用提供本草学依据,通过查阅古今历代本草,地方植物志以及相关文献,对益智的名称、植物形态、产地、生境分布及性味功效进行了考证。明确了益智以药用部位命名,对其植株形态特征,产地来源以及功效应用有了进一步的认识。     

改良CTAB法对碗莲叶片基因组DNA提纯效果的影响

通过试验比较，分析了CTAB法中EDTA（乙二胺四乙酸）浓度和PVP（乙稀吡咯烷酮）对碗莲叶片DNA提纯结果的影响；同时还比较了叶片采集时间及遮光处理对提纯结果的影响。结果确定了适于碗莲叶片基因组DNA提取的方法以及如何选择最合适的材料进行DNA的提取，从而获得RAPD、RFLP、SSR等分子标记手段所需要的高纯度基因组DNA。     

益智挥发油的气相指纹图谱的研究

[目的]建立不同产地益智挥发油的气相指纹图谱分析方法,为其质量评价提供参考。[方法]采用气相色谱法测定来自10个不同产地益智挥发油,并用SPSS软件对气相指纹图谱数据进行聚类分析和相似度分析,研究10种不同产地益智挥发油气相指纹图谱的相似性。[结果]10个产地制备的益智精油得率在0.21%~0.96%,以广东阳江产益智产油率最高。各色谱峰的相对保留时间的相对标准偏差为0.02%~1.00%,相对峰面积的为0.6%~2.5%,符合指纹图谱的要求。不同产地的益智挥发油的成分含量相似但个别存在差异。质量不尽相同,海南产益智较好,为地道药材,广东次之,广西较差。[结论]该研究建立的测定益智药材挥发油的气相指纹图谱分析方法准确可靠,可用于药材质量评价。     

黄刺玫基因组DNA提取方法的研究

以黄刺玫的嫩叶为材料，比较了改良SDS法、CTAB法和陈大明法等3种方法对其基因组DNA的提取效果。结果表明：采用裂解前加入不含SDS的缓冲液，提取过程中用4％β-巯基乙醇的改良SDS法，可有效地控制材料的褐变及DNA污染。提取的DNA纯度和产率均较高，可完全满足RAPD扩增的需要。