布氏艾美耳球虫保定株早熟系的选育及致病性研究

本实验采用按照Jeffers建立的球虫早熟株选育方法对布氏艾美耳球虫保定株进行早熟选育,经20代的选育获得了布氏艾美耳球虫早熟株。与保定亲本虫株相比,该早熟株潜隐期缩短了37h,即由125h减至88h;卵囊大小为24.4μm×20.0μm,形状指数为1.22;并且繁殖力下降了约40%,致病力显著低于亲本虫株;再经5代非选择性传代后,该虫株的早熟特性和弱毒性均得以保持。     

鸡和缓艾美耳球虫早熟虫株选育及其生物学特性研究

按照Jeffers1975年建立的艾美耳属球虫早熟虫株选育方法,对鸡和缓艾美耳球虫巴彦淖尔株（SY-MB株）进行了单卵囊分离、扩增和早熟虫株的选育。经SPF鸡15代传代之后,分离株的潜隐期由96 h缩短至77 h,缩短了19 h。按索勋等1998年建立的方法对选育出的和缓艾美耳球虫巴彦淖尔早熟株（SY-mb77株）进行10代非选择性传代,证明该早熟虫株的潜隐期、卵囊产量、免疫原性和致病性均具备早熟虫株特性,并能有效抵抗强毒虫株的攻击。     

布氏艾美耳球虫保定株早熟系的免疫原性研究

经过20代的选育，选育出了布氏艾美耳球虫保定株早熟系虫株，该早熟系虫株与亲本株均对常见的抗球虫药物-克球素、地克珠利、磺胺喹噁啉和尼卡巴嗪高度敏感，敏感性与保定亲本株一致；分别接种200个该早熟系虫株和亲本株孢子化卵囊，21d 后鸡群均能抵抗1.0×10^5个布氏艾美耳球虫强毒株孢子化卵囊的攻击，说明早熟株仍然保持良好的免疫原性。     

布氏艾美耳球虫保定株早熟系的免疫原性研究

经过20代的选育,选育出了布氏艾美耳球虫保定株早熟系虫株,该早熟系虫株与亲本株均对常见的抗球虫药物——克球素、地克珠利、磺胺喹恶啉和尼卡巴嗪高度敏感,敏感性与保定亲本株一致;分别接种200个该早熟系虫株和亲本株孢子化卵囊,21d后鸡群均能抵抗1.0×105个布氏艾美耳球虫强毒株孢子化卵囊的攻击,说明早熟株仍然保持良好的免疫原性。     

巨型艾美耳球虫山西早熟株诱导及生物学特性研究

本研究采用早熟选育技术，诱导选育出1株与已获得的山东株免疫原性差异较大的巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)山西株的早熟弱毒株，并对其进行生物学特性研究。结果表明：早熟诱导获得的巨型艾美耳球虫山西早熟株卵囊略小于亲本株，潜隐期为109 h;早熟株各组小肠病变记分差异显著低于(P<0.05)亲本株组，且临床症状较亲本株组弱；等剂量下，早熟株组的卵囊产量及卵囊繁殖力低于亲本株组；早熟株单次免疫剂量≥400个卵囊/只、2次免疫的一免剂量≥100个卵囊/只、二免剂量≥200个卵囊/只时可达到良好免疫效果。本研究结果为制备高效广谱、免疫原性良好的鸡球虫疫苗提供虫株和理论依据。     

堆形艾美耳球虫早熟株选育及相关生物学特性研究

为了选育堆形艾美耳球虫（Eimeria acervulina）早熟株及观测其生物学特性,运用Jeffers创立的艾美耳属球虫早熟株选育方法,对实验室保存的堆形艾美耳球虫进行连续传代早熟选育,并对获得的早熟株与母株孢子化卵囊大小、繁殖能力、致病性以及免疫保护力等指标进行了测定,比较堆形艾美耳球虫早熟株与母株之间的基本生物学特性差异。经过18代早熟选育后,堆形艾美耳球虫的潜在期由母株的99h缩短至84h。与母株相比,早熟株的孢子化卵囊大小明显减小（P〈0．05）,卵囊繁殖能力降低了17％～42%。致病性试验中,早熟株感染组的平均增重均高于母株,而病变记分相当。免疫保护试验中,早熟株与母株的免疫保护力相当,其卵囊抑制率略低于母株,差异不明显（P〉0．05）。结果表明,本研究成功选育出堆形艾关耳球虫早熟株,对母株攻击具有保护力,为鸡球虫疫苗的研制奠定了基础。     

紫外线诱导巨型艾美耳球虫的早熟株选育

本试验分离获得了1株巨型艾美耳球虫，通过紫外线诱导和非紫外线诱导两种方法对该虫株进行早熟选育，获得了2个巨型艾美耳球虫早熟减毒株。通过对2个早熟株的潜隐期、繁殖力、致病力以及免疫原性进行对比研究，证明紫外线诱导下的早熟选育可明显缩短选育所需代数，且与传统方法选育的早熟株在繁殖力、免疫原性与免疫保护力等方面基本相同。紫外线诱导下，经7代早熟选育，潜隐期由母株的142h缩短到116h，而非紫外线诱导的选育需要20代才能达到同样的选育结果。两早熟株卵囊的繁殖能力与母株相比有所下降，但仍保留了母株原有的免疫原性。     

陕西省杨凌区柔嫩艾美耳球虫早熟株选育及致病性研究

采用球虫早熟系虫株选育的方法,反复收集感染后最先排出的卵囊,选育出杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株并对早熟株的潜伏期、致病性及繁殖能力进行了研究。结果表明,经18代选育的鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌早熟株的潜伏期比母株缩短了24h;早熟株卵囊的形态与母株相似,但没有母株卵囊的大;早熟株的繁殖能力低于母株,每羽鸡所排卵囊总量与剂量呈正相关,而每个卵囊的繁殖能力与剂量呈负相关;早熟株的致病性低于母株。     

陕西省杨凌区柔嫩艾美耳球虫早熟株选育及致病性研究

采用球虫早熟系虫株选育的方法,反复收集感染后最先排出的卵囊,选育出杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株并对早熟株的潜伏期、致病性及繁殖能力进行了研究。结果表明,经18代选育的鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌早熟株的潜伏期比母株缩短了24h;早熟株卵囊的形态与母株相似,但没有母株卵囊的大;早熟株的繁殖能力低于母株,每羽鸡所排卵囊总量与剂量呈正相关,而每个卵囊的繁殖能力与剂量呈负相关;早熟株的致病性低于母株。     

和缓艾美耳球虫保定株的分离鉴定与致病性研究

采用单卵囊分离技术,从河北省保定市暴发球虫病的某鸡场鸡粪便中成功分离出1株和缓艾美耳球虫(Eimeria mitis),并对其生物学特性和致病性进行了研究。该虫株主要寄生于小肠后段,潜隐期为97 h,孢子化时间为22 h,卵囊呈球形,平均大小为15.9μm×14.4μm,卵囊指数为1.10,PCR鉴定为纯种的和缓艾美耳球虫,将其命名为和缓艾美耳球虫保定株。该虫株排卵期为感染后第4～10天,其中第5～6天为高峰期。SPF鸡分别感染5×10~4个、1×10~5和2×10~5个和缓艾美耳球虫保定株孢子化卵囊后,均出现精神不振、排水样粪便等球虫病引起的临床症状,且各组相对增重率分别为78.5%、63.5%和59.3%,明显低于空白对照组,该虫株具有一定的致病性,表现为发病和减重。     

和缓艾美耳球虫早熟系选育及其生物学特性研究

按照Jeffers建立的艾美耳属球虫早熟系选育方法，对和缓艾美耳球虫涿州株(Eimeria mitis Zhuozhou strain，EmiZ)进行了早熟选育。经石歧杂肉仔鸡15次传代之后，EmiZ潜在期由96h缩短至77h，缩短了19h。选育出的和缓艾美耳球虫涿州株早熟系(Eimeria mitis Zhuozhou strain precocious line，EmiZP)在致病性与繁殖力上均较母株弱，但保留了母株的免疫原性。经EmiZP免疫的石歧杂肉仔鸡，可抵抗母株EmiZ的攻虫。对选育的早熟系EmiZP进行放松选择传代10代，其潜在期、排卵囊高峰、卵囊产量和致病性均保持了早熟系的特征，说明所选育的EmiZP已在遗传上保持了稳定。     

大型艾美耳球虫早熟株的选育及18S rDNA系统发育分析

通过对6株田间大型艾美耳球虫早熟选育,经20次传代,潜在期由156h缩短至132h,连续5次无选择压力传代,其潜在期不变,说明所获得的大型艾美耳球虫早熟株遗传性状稳定;早熟株与原始株卵囊的结构有差异(早熟株每个孢子囊含有1个大折光体而原始株每个孢子囊含有2个小折光体),大小差异不显著;同时对早熟株进行了系统发育分析,进化树显示:大型艾美耳球虫早熟株、原始株及GenBank中兔大型艾美耳球虫18SrDNA序列均聚为一个分支。     

堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)早熟株与毒株的繁殖力和致病性比较试验

对经15代选育的堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)北京株的早熟株与其毒株的繁殖力和致病性进行了比较研究，证实早熟株的潜隐期比毒株缩短27h，繁殖力有所下降；对致病性的研究显示，早熟株感染后对鸡只增重的影响较小，而且肠道病变记分亦较毒株下降。由此认为，该早熟株符合球虫早熟株的基本生物学特性，适宜用于鸡球虫病早熟苗的制作。     

鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株的放松传代及其特性研究

为了进一步验证鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株经本动物(鸡)连续传代后的毒力和遗传稳定性,为虫种种子传代提供依据,试验对鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株(Etpp)用11日龄敏感鸡连续放松传代10次,其潜隐期、排卵囊高峰、卵囊产量、致病性和免疫原性均保持了早熟耐药株(Etpp)的特征,说明所选育的虫株(Etpp)在遗传上具有稳定性。     

柔嫩艾美耳球虫早熟株的初步选育及免疫原性的测定

为选育柔嫩艾美耳球虫的早熟株和了解其免疫原性,本试验通过鸡体的传代培养,初步得到了柔嫩艾美耳球虫早熟株P9。以早熟株免疫雏鸡后,以亲本株P0半数致死量攻毒,以确定其免疫原性。结果表明:P9的潜隐期由P0的141h缩短至131.5h,免疫后攻毒显示该早熟株具有良好的免疫原性。     

鸡柔嫩艾美耳球虫YL株多次传代后的致病性研究

为研究多次传代后的鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)YL株的致病性,分别以不同剂量的36代次柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊感染7日龄雏鸡,通过临床症状、死亡率、血便程度、潜隐期、盲肠病变、平均增重及每克粪便卵囊数(OPG)对其致病性进行评价.结果显示,不同剂量孢子化卵囊感染雏鸡均在感染后3d～4d出现血便,球...     

大型艾美耳球虫生物学特性研究

为了掌握大型艾美耳球虫原始株的生物学特性,通过对大型艾美耳球虫原始株的潜隐期、致病性、免疫原性及药敏特性等方面进行研究。结果表明,大型艾美耳球虫原始株的潜隐期为168h,孢子化所需时间为37h~42h;在致病性试验中,不同接种剂量的显露期和排卵高峰一致,但卵囊产量不同,其中接种剂量为5×10~3个卵囊组的产卵囊量最多,与对照组相比,各感染组均出现不同程度的临床症状和病理变化。在免疫原性试验中,低剂量免疫(100个卵囊)可以对30 000个卵囊的攻虫量产生完全的保护力。在药敏试验中,根据临床表现、卵囊排出量、饲料转化率判断,大型艾美耳球虫对3种抗球虫药的药效最好是莫能菌素,药效最低的是氯苯胍。大型艾美耳球虫原始株致病性较强,免疫原性良好,对莫能菌素敏感,即莫能菌素对其有良好的防治效果,可作为防治家兔感染大型艾美耳球虫的首选药之一。     

斯氏艾美耳球虫四川株生物学特性研究

为了解斯氏艾美耳球虫四川株致病性、免疫原性等生物学特性,为后续免疫和防控等研究提供参考。将45只36日龄幼兔随机分为9组,第1组为空白对照组,第2组～第5组为致病性试验组,于50日龄每只兔分别经口感染1×10~4、5×10~4、1×10~5、2×10~5个孢子化卵囊;第6组～第9组为免疫原性试验组,于36日龄每只兔分别口服接种5×10~2、5×10~3、1×10~4、5×10~4个孢子化卵囊,14 d后给予2×10~5个孢子化卵囊的感染量。测定最小潜隐期和排卵高峰并以临床症状、卵囊排出量、相对增重、肝指数、肝脏病理变化作为评价指标。分离培养斯氏艾美耳球虫四川株卵囊,测定其最短孢子化时间及卵囊大小。结果表明,斯氏艾美耳球虫四川株最小潜隐期是13 d,排卵高峰在感染后22 d～23 d,孢子化卵囊的平均大小为36.2μm(28.2μm～38.1μm)×19.9μm(17.80μm～22.3μm),卵囊指数为1.81,27℃恒温培养最短孢子化时间为41 h。致病性试验组与空白对照组肝指数、平均增重、相对增重率差异显著(P0.05);免疫原性试验组与攻毒对照组肝指数、平均增重、相对增重率差异不显著(P0.05)。斯氏艾美耳球虫四川株致病性较强,低剂量感染就能显著降低增重并引起明显病变,但其免疫原性较差。     

巨型艾美耳球虫早熟减毒株的选育

对巨型艾美耳球虫(长春株)经20代的早熟选育,其潜隐期由132h缩短到116h,成为早熟株.该早熟株不经选择传递2代,仍保持了早熟的特性.该早熟株比其亲代株繁殖力下降74%,致病力降低,但仍然保持了其免疫原性.     

柔嫩艾美耳球虫早熟株的内生发育及其致病性

为了给鸡球虫早熟弱毒疫苗的开发提供依据,对柔嫩艾美耳球虫(Eim eria tenella) 北京株经10 代早熟选育获得的早熟株的内生发育研究发现,其第2 代裂殖生殖发育较快,第2 代裂殖体含裂殖子较少,提前进入配子生殖,从而造成卵囊“早熟”。该早熟株致病性大大下降,经口感染10×104 个/只的致病性仅相当于剂量0.1×104 个/只亲本毒株的致病性。该虫株可作为研制早熟弱毒苗用虫株。