牡丹江市某规模化猪场日本乙型脑炎病毒的RT-PCR检测

日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）．3L称乙型脑炎病毒,简称乙脑病毒,属于黄病毒科（Flaviridae）黄病毒属,所引起的疾病称为乙型脑炎或日本脑炎,是严重威胁人畜的一种急性传染病的季节性和一定的地理分布区域,多发生于蚊虫较多的夏秋季节,属于自然疫源性疾病。猪感染乙脑后土要表现为：潜伏期为3—4d,患病幼畜高热稽留,精神沉郁,步行踉跄,最后身躯麻痹而死;育肥猪持续高热：     

铜仁地区某规模化猪场猪乙型脑炎的血清学检测

为了解贵州铜仁地区猪乙型脑炎的发病情况,采用动物疫病检测ELISA试剂盒对铜仁地区某大型规模化猪场的相关血样进行了血清学抗体检测。结果显示该猪场种母猪猪乙型脑炎病毒抗体阳性率为81.82%,处于稳定状态;而断奶仔猪猪乙型脑炎病毒抗体阳性率为30.77%,处于易感状态或已发病,该结果可为铜仁地区猪乙型脑炎病的防控提供数据支持。     

规模化猪场乙型脑炎的防制

乙型脑炎,又称日本乙型脑炎(Japanese Encephalitis,JE),简称乙脑,是由日本乙型脑炎病毒(JEV)引起的一种严重危害人畜健康的急性病毒性传染病。其症状为:妊娠母猪突然发生流产,胎儿多是死胎或木乃伊胎。公猪一侧或两侧睾丸肿胀,2～3天后消肿,多数病猪恢复正常。母猪在妊娠期感染时所产仔猪出现各种各样的畸形或弱仔,在死产或弱仔猪中可以发现各种肉眼损伤,包括脑积水、脑缺损、皮下水肿、胸腔积水、腹水、浆膜小点出血、淋巴结出血脑膜或脊髓充血,有些脑积水小猪中大脑皮质特别薄。本病主要通过带病毒的蚊虫叮咬而传播,在我国温带及亚热带地区有明显的季节性,以每年的7～9月份发生较多,而在12月至次年4月几乎无病例发生虽然多种温血动物均可感染本病,但猪是乙型脑炎病毒的保毒者。     

规模化猪场猪乙型脑炎的防制

乙型脑炎,又称日本乙型脑炎（Japanese Encephalitis，JE），简称乙脑，是由日本乙型脑炎病毒（JEV）引起的一种严重危害人畜健康的急性热性病毒性传染病。猪乙型脑炎主要以蚊子为传播媒介，在我国温带及亚热带地区有明显的季节性，以每年的7-9月份发生较多，而在12月至次年4月几乎无病例发生。虽然多种温血动物均可感染本病，[第一段]     

荧光定量RT-PCR检测猪日本脑炎病毒

通过RT-PCR方法克隆了日本脑炎病毒(JEV)N基因片段序列,构建重组质粒作为标准阳性模板,同时根据GenBank中的靶序列设计了荧光定量R-PCR的1对引物和1条TaqMan探针.通过条件优化,以定量的10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了JEV检测的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109～100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108和1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为17.33、20.52和23.90,变异系数分别为0.54%、0.74%和0.53%,均小于5%.对阳性组织病料的检测表明该方法的灵敏度高出常规PCR,与套式PCR(nested-PCR,nPCR)具有相近的灵敏度.     

猪日本脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立

设计了1对引物,利用RT-PCR技术检测乙型脑炎病毒(JEV)。从GenBank中查出收录的31株猪乙型脑炎病毒E基因的已知序列,用DNA star软件对这31株猪乙型脑炎病毒E基因进行同源性分析,以确定扩增的靶序列。以这段靶区域为模板,利用Primer 5软件设计了1对引物,用减毒株SA14-14-2建立了检测乙脑病毒的RT-PCR方法,经敏感性,特异性试验测定,证明该方法敏感,特异;该法可检出样品稀释至256倍的鼠脑毒,相当于0.06个TCID50,对4株河北地区JEV分离株进行检测,结果所设计引物对4株病毒均能扩增出预期的片段。     

湖北省部分规模化猪场猪乙型脑炎血清学调查

对湖北省部分规模化猪场的936份猪血清样品进行猪乙型脑炎抗体检测,结果阳性数532份,阳性率达56.84％.不同猪群的抗体检测结果发现公猪的血清抗体阳性率为64.23％,母猪的血清抗体阳性率为62.70％,肥育猪、保育猪及哺乳仔猪的血清抗体阳性率分别为50.83％、47.22％和32.61％;不同季节的抗体检测结果表明,3～5月份猪乙型脑炎血清抗体阳性率最低,为43.42％;6～8月份阳性率最高,达77.01％;公、母猪阳性率高主要是由于多次免疫的结果,而哺乳、保育、肥育仔猪的阳性率,可能是部分猪感染了乙型脑炎病毒而产生的.可见,湖北省已有猪乙型脑炎病毒流行.为保证人类的安全及养猪业的健康发展,需加强猪乙型脑炎的免疫工作,防止猪乙型脑炎病的发生与流行.     

乙型脑炎病毒套式RT-PCR检测方法的建立及应用

为了建立一种快速的乙型脑炎病毒(JEV)病原检测方法,根据GenBank上登录的JEV基因组序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测JEV的套式RT-PCR方法。结果:该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是100 pg,第2次扩增的敏感性是1 pg,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。研究表明建立的套式RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性,可以准确快速检测出极低含量的JEV,将为JEV感染的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查等提供一种高效、快速、特异、灵敏的检测方法。     

黑龙江省某规模化猪场猪细小病毒的PCR检测

猪细小病毒病是由猪细小病毒(PPV)引起的以初产母猪发生流产、不孕、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等为特征的猪主要繁殖障碍性疾病之一。由于该病常呈地方流行性或散发性,特别是初次感染时,可呈急性爆发,对养猪业危害较大。为了解黑龙江省猪群中猪细小病毒的病原感染情况,对规模化猪     

辽宁省某规模化猪场圆环病毒Ⅱ型的PCR检测

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是迄今为止发现的最小的一种脊椎动物病毒.PCV分为无致病性(或PK15源性)的猪圆环病毒Ⅰ型(PCV-1)和有致病性(PMWS源性)的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)两个基因型[1-2].     

新疆某规模化猪场圆环病毒的抗体检测及分析

正疫苗免疫抗体水平的检测是规模化猪场疫病监测的一项重要常规工作,是制定猪场疫病防控方案的重要手段。本试验为查明某规模化猪场猪圆环病毒病疫苗的免疫现状,采集了仔猪血清132份,采用ELISA方法对其免疫抗体进行检测和评价。实验结果说明:该场圆环病毒病疫苗的保护率只能达到15周左右,育肥后期还有待进一步提高。     

龙岩市某规模化猪场猪伪狂犬病病毒及抗体检测

为了掌握龙岩市某规模化猪场猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,用PCR检测发病猪病料中PRV gE基因,进行测序及遗传进化分析;同时应用ELISA方法检测该场母猪、不同日龄商品猪血清中gE和gB抗体水平。结果表明,从3头发病猪病料中均扩增到1 755bp特异性条带,对该基因遗传进化分析表明,本次发病为PRV变异株感染引起。血清中gE和gB抗体水平检测结果显示,母猪免疫(gB)抗体水平较高,gB抗体阳性率为100%,但不能阻止PRV感染,转阳率为20%;15日龄~55日龄商品猪具有较高水平的母源抗体,55日龄商品猪略有下降,70日龄商品猪gB抗体阳性率下降为20%,但15日龄~80日龄的商品猪gE抗体阳性率为0;而90日龄以上的商品猪存在不同程度的PRV感染,90日龄gE抗体阳性率为20%;150日龄和170日龄的gE抗体阳性率都为100%。本次检测结果可为该场猪伪狂犬病的防控措施的制定与实施提供参考。     

某猪场暴发猪乙型脑炎病毒感染的诊断

猪乙型脑炎又称流行性乙型脑炎、日本脑炎,是由流行性乙型脑炎病毒引起的一种急性、人畜共患的自然疫源性传染病。笔者对某规模化猪场发病猪进行临床症状观察,虎红平板试验、RT-PCR检测、细胞接种、序列比对及动物试验的方法。确诊病死猪为乙型脑炎病毒感染,并对发病猪场提出防控处理手段。     

福清市某猪场猪乙型脑炎的诊断报告

福清市某猪场猪乙型脑炎的诊断报告金颜辉福建省农业厅防检站林智勇福清市畜牧兽医服务中心１９９４年６月至１０月期间，福清市某猪场发生严重的母猪繁殖障碍综合症和公猪睾丸炎症状。经流行病学调查和血清学诊断，确诊为猪日本乙型脑炎病，报告如下：１．发病情况该场共...     

近年广西部分猪场蚊子携带猪乙型脑炎病毒初步检测调查

为进一步了解近年广西猪场蚊媒携带乙型脑炎病毒(JEV)情况,采用套式RT-PCR(RT-nPCR)检测方法,于2016年—2019年间对猪乙型脑炎(JE)确诊阳性病例的部分猪场进行蚊子携带JEV情况初步检测调查.对抽选16个有JE阳性病例的猪场捕捉的蚊子进行JEV检测,结果均为阳性.表明广西猪JE确诊阳性病例猪场的蚊子...     

某规模化猪场血清学检测结果分析

血清学检测,是猪场最广泛使用的检测方法之一。本案例中,笔者对江苏某猪场送检的193份血清样进行了猪瘟抗体、猪伪狂犬g B/g E抗体、猪圆环病毒抗体、猪蓝耳病毒抗体的检测和分析。结果显示该场后备母猪猪瘟免疫欠佳,猪伪狂犬病免疫不合格,猪蓝耳病抗体水平偏高;母猪猪伪狂犬病毒感染程度较高,猪呼吸与繁殖综合征普遍感染且抗体偏高;公猪猪圆环病毒抗体水平偏高;商品猪猪瘟免疫效果不稳定;猪蓝耳病感染比较普遍,且部分猪群抗体水平偏高,猪圆环病毒病免疫欠佳。结合该场免疫程序,表明该场后备母猪和商品猪的猪瘟、猪伪狂犬病免疫程序需要做适当调整;同时考虑通过测序了解本场的猪蓝耳病流行毒株,以确定合适的防控方案。     

日本乙型脑炎病毒的分离与鉴定

收集一例疑为乙型脑炎病毒感染的种公猪肿大的睾丸病料,并将其处理制成匀浆过滤后,用乳鼠脑内接毒和细胞接毒相结合的方法盲传并分离病毒,然后设计一对PrM/E基因的特异性引物,采用RT-PCR方法对所分离的病毒进行鉴定,并将其PrM/E基因扩增产物测序,测序结果与乙型脑炎GenBank登陆的SA14-14-2株(AF315119)和SA14株(U14163)进行比较。结果表明,所分离病毒的PrM/E基因序列与JEV强毒株SA14和弱毒株SA14-14-2相应序列同源性分别为98.1%和97.1%,证实分离毒株为乙型脑炎病毒。     

猪日本乙型脑炎检测技术研究进展

猪日本乙型脑炎是由黄病毒科乙型脑炎病毒引起的一种人畜共患的病毒性传染病。人与多种动物均能感染,其中猪是主要的储存宿主和扩散宿主,猪感染该病毒后引发猪的繁殖障碍,使养猪业遭受重大经济损失,因此学者们一直在致力于寻找可以快速检测和诊断日本乙型脑炎的方法,为预防和治疗该病提供基础条件。文章对猪日本乙型脑炎检测技术,包括病毒分离鉴定方法、血清学方法、分子生物学方法等方面的研究进展进行了较为全面的综述。     

辽宁省某规模化猪场猪圆环病毒Ⅱ型的PCR检测

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是迄今为止发现的最小的一种脊椎动物病毒。PCV分为无致病性(或PK15源性)的猪圆环病毒Ⅰ型(PCV-1)和有致病性(PMWS源性)的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)两个基因型[1-2]。PCV-1广泛存在于猪体内及猪原代细胞系中,无致病性,不能引起细胞病变;