猪精子冷冻损伤的研究

冷冻保存后的猪精子，结构受到损伤，妊娠率下降。其超微结构变化与正常鲜精的顶体反应非常相似，包括质膜膨胀碎裂，顶体外膜泡状化。我们提议上述变化称为假顶体反应。     

菟丝子提取物对猪精子冷冻效果的影响

在猪精液冷冻液中添加不同浓度的菟丝子提取物,研究冻后精子的形态正常率、质膜完整率、SOD活性及MDA含量,探讨菟丝子提取物对猪精液冷冻保存效果。结果表明,冷冻-解冻后,猪精子形态正常率、质膜完整率和SOD活性均显著降低,MDA含量显著高于对照组(P<0.05)。各冷冻组相比,菟丝子中剂量组精子形态正常率、膜完整率和SOD活性均高于其他冷冻组,MDA含量低于各冷冻组,但各指标仅表示与菟丝子低剂量组存在显著差异(P<0.05)。试验表明,适量的菟丝子提取物可对抗冷冻造成的膜损伤,提高精子SOD活性,降低MDA含量。     

日本猪冷冻精子人工授精成功率大幅提高

日本广岛大学副教授岛田昌之6月24日宣布,他率领的研究小组通过改良冷冻保存猪精子的方法,大幅提高了猪冷冻精子人工授精的成功率。     

猪冷冻附睾精子与体外成熟卵母细胞的体外受精

研究了不同解冻温度（39－41℃，58-60℃,69-71℃)和解冻方式（干解冻、湿解冻）对猪冷冻附睾精子解冻后的活力、存活指数以及受精能力的影响。结果表明，采用同一种解冻方式，经高温解冻的精液，虽然解冻后的活力较好，但活力却下降很快，精子的存活时间和存活指数均不如低温解冻的精液。采用同一种解冻温度，湿解冻所需的解冻时间相对短，解冻后精子活力相对低，但存活时间和存活指数相应优于对应的干解冻试验组。经低温解冻的精子，受精能力最强，精子的受精能力与解冻时间呈显著正相关（r=0.91613,P=0.0103).使用改良TCM199培养液，猪受精卵和颗粒细胞单层共培养能发育至早期桑椹胚。     

不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液，在37℃下离心，弃去精清，收集浓缩段富含精子部分，用7种不同的稀释液进行稀释，应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明，在7种稀释液中，7号稀释液优于其他6种稀释液（P〈0．05）：与其他的冷冻保护剂相比，甘油的冷冻保护性能较好（P〈0．01），其适宜浓度为2～4mL／L：干解冻（40℃～45℃）效果优于湿解冻，解冻后精于活率达0．6～0．49（P〈0．05）；稀释液中添加安钠咖可有效地延长精于的冻后存活时间（P〈0．01）。     

冷冻处理对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响

为了检测冷冻处理对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)水平的影响,试验将采用手握法采集的精液作为试验材料,对精子进行不同时间的冷冻处理,解冻后进行间接免疫荧光处理,对冻融精子PTP水平进行研究。结果表明:冷冻处理的精子PTP水平变化不明显;冷冻处理后的精子PTP位点仍然主要集中在精子颈部,这与未经处理的精子大体一致,不同的是冷冻处理组磷酸化程度加深,而且随着时间的延长精子尾部出现微弱的磷酸化位点。     

海带多糖对猪精子冷冻效果影响的研究

精子在冷冻解冻过程中易发生过氧化反应,冷冻解冻后活率、受精率等均大幅下降.海带多糖为褐藻糖胶,是一系列组成相似的杂多糖混合物,具有抗突变和抗脂质过氧化等作用,并且可提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性,对其在很多领域都进行了相关的研究和探讨,但在猪精子冷冻方面的应用尚未见相关报道.     

离心方法对冷冻后民猪精子质量的影响

通过对比离心力、离心时间和离心次数与冻融后民猪精子质量的相关性,为改进民猪精液离心程序,提高冻精效果提供理论依据。试验分2组,第1组:将采集的新鲜民猪精液分组后分别在600×g,800×g,1 000×g及1 200×g离心力条件下离心10,15和20min;第2组:在800×g,离心15min条件下,分别离心1,3和5次;离心后的精子分别经过冷冻保存再融解过程后,检测不同离心条件下民猪精子冻融后的活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体膜电位的情况。结果表明,600×g(10,15,20min)及800×g(10,15min)离心力时,不同离心时间对精子质量影响不显著(P0.05)。1 000×g和1 200×g离心力时,随着离心力和离心时间的增加,精子质量明显降低,各指标组间差异显著(P0.05)。在800×g离心力,离心15min条件下,精子质量随离心次数增加而降低,各组间差异显著(P0.05)。因此,在本试验条件下,800×g离心力,离心15min,离心1次,可以获得较高的精子收集效率和冷冻后精子质量。     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

有关猪冷冻精液人工授精效果的分析

近年来我国各地有些种猪场通过各种方式,从国外引进冷冻精液。这在猪的育种上发挥了积极的作用。据某种猪公司介绍,他们每年都要引进少量特优种猪的精液,选择性能     

小鼠精子冷冻降温时对精子的影响

无论是长期保存精子 (冷冻保存 )还是短期保存精子 (冷藏保存 )都是家畜繁殖的常用技术之一。目前精子冷冻保存技术已经建立 ,虽然这项技术在其他家畜繁殖上还未能商业化。但精液冷冻已经成为牛育种产业的一个组成部分。对精子冷冻技术相比 ,精子的短期保存技术发展则较慢。最近有研究证明 ,猴子附睾内精子 5℃保存 2 4ｈ ,仍能保持其受精能力。还有一些研究发现 ,将小鼠精子冷却至 4℃或 4℃保存 5天或 7ｄ后精子仍具有受精能力。甚至精子在 4℃保存 2 0ｄ后经精子直接注射仍然能生出后代。小鼠死亡后 2 2～2 4℃保存精子仍然能使卵母细胞…     

银狐精子冷冻前后超微结构的研究

采用按摩法采集银狐精液，将鲜精和冷冻解冻精液离心、固定，制备电镜样品，通过电镜观察，研究精子冷冻前后超微结构变化，并进一步研究受精机理和精子冷冻的基础理论，以推动狐狸人工授精技术的发展。     

钙离子载体诱导猪冷冻精子体外获能的研究

本研究首次报道了猪冷冻精子的体外获能。用 I—A 诱导猪冷冻精子体外获能,可穿透去透明带仓鼠卵。I—A 浓度以0.3μM 为宜,穿透率为60%,有原核卵百分率为39.2%。咖啡因可促进 I—A 的作用,并能促进卵内原核的发育。I—A 可诱导猪冷冻精子的顶体反应,有顶体反应活精子百分率与穿透率呈强正相关(r=0.968,P<0.01,n=12)。结果说明,用 I—A 诱导获能的猪冻精可用于猪的卵子的体外受精。猪冻精在卵内的发育能力较低,推测这是猪冷冻精子受胎率低的一个主要原因。     

德国牧羊犬冷冻精子超微结构的研究

运用电子显微镜技术观察了２头德国牧羊犬冷冻精子超微结构的变化，结果表明，冷冻的犬精子畸形率明显上升，表现出不同程度的质膜破损或脱落，精核膨胀，中段膨胀，顶体膨胀、部分脱落或全部脱落，螺旋线粒体膨胀、断裂、剥离和丢失。犬精子的原生质膜、顶体、线粒体在冷冻过程中最易受到损害，２头公犬冷冻精子的顶体完整率分别为３６．９％和２５．８％。     

猪冷冻精液在人工授精中的研究进展

猪冷冻精液在传播优良品种、提高优秀公畜利用率和降低生产成本方面具有重要作用。随着集约化养猪模式的不断发展和人工授精技术普及率的提高,以及地方猪种质资源保存和利用的持续加强,猪冷冻精液将会得到更多应用。然而,猪精子容易受冷休克的影响,且常规人工输精模式不适用于冷冻精液,导致猪冷冻精液在生产中使用率很低。文章通过介绍目前国内外猪冷冻精液在人工授精中的应用现状,分析影响猪冷冻精液应用效果的主要因素,并提出了提高猪冷冻精液在人工授精中应用效果的相关措施,以期为猪冷冻精液生产技术进步及在人工授精中的应用提供参考。     

冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响

研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响,为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液(Ⅰ组)稀释后于17℃过夜保存(Ⅱ组),然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1.5h(Ⅲ组),再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min(Ⅳ组)。通过精子形态正常率及活力检测,吖啶橙(AO)染色检测精子DNA完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子头部质膜完整性,低渗肿胀试验(HOS)检测精子尾部质膜完整性,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,并用扫描电镜(SEM)观察精子结构,评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明,与新鲜精液相比,Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义(P0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响(P0.05),但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异(P0.05)。扫描电镜检测结果表明,17℃过夜保存精子未见异常,头、颈、尾结构完整,顶体完整、光滑;Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤;Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。     

冻结环境对冻猪产品冷冻效果的影响分析

为使冻猪产品冷冻效果最佳且有利于冻猪产品的长期贮存,本研究以10个批次规格为10 kg冻猪五花肉作为检测对象,设置产品在急冻库中堆放方式、摆放位置、急冻库温度及冷冻时间为变量,检测对比分析冻猪产品在不同变量条件下的冷冻效果。结果表明:冷冻肉品堆放方式最好选择冻结架放置,肉品尽可能分散堆放,产品之间保持一定距离,急冻库温度不应高于-28℃,肉品冷冻时间在60～72 h之间时冷冻效果及感官品质较好。     

精浆对猪精子冷冻效果影响的研究

为优化猪精子冷冻技术,提高解冻后精子的活力和受精能力,本试验分别以含精浆浓度为10%、20%和30%的冷冻保护剂处理精子,以冷冻前、解冻后精子活力和质膜完整性,解冻后精子进行体外受精(IVF)的卵裂率和囊胚率等作为检测指标,同时以含有卵黄的Tris-柠檬酸－葡萄糖(Tris-citric acid-glucose,TCG)冷冻基础液作为对照研究精浆对猪冷冻精子的保护作用。结果显示,在含有10%精浆浓度的稀释液中,冷冻前质膜完整性,解冻后精子活率、质膜完整性、IVF囊胚率相对于对照组均显著提高(P<0.05);当含有10%精浆的冷冻精液解冻后用于人工授精时,与配母猪妊娠率、窝产仔数、窝产活仔数等仍显著低于鲜精授精组(P<0.05)。上述结果表明,含10%精浆的冷冻保护剂能提高精子的冷冻后活力和IVF胚胎发育率,但用于人工授精配种与鲜精相比还有一定差距。     

民猪精液冷冻技术研究

过去几十年来由于大量国外猪种的引入和大规模饲养,导致我国地方猪品种数量锐减,而且品种内血统数也在不断减少,遗传多样性降低,使很多地方猪品种濒临灭绝[1]。近年来随着保护地方品种资源的意识提高,开始采取多种措施对地方猪品种进行保护,而对公猪精液进行冷冻保存,则是一种方便有效的保存手段。并且冷冻精液可以进行长时间、长距离运输,对于加快品种内     

猪精液冷冻技术研究

本研究取得突破性进展。每次30毫升以上块状和15毫升塑料安瓿精液冷冻获得成功;利用电镜观察证明,冻后精子顶体完整率与受胎率呈显著正相关;研制优选出的冷冻、解冻稀释保护液及成套冷冻技术操作程序、其冻精活率0.5左右、情期受胎率70.59％,窝产仔8.34～9.73头。