天门冬多糖对人工感染鸡传染性支气管炎的治疗试验

旨在评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的临床治疗效果,为鸡传染性支气管炎临床治疗提供依据。以复方天门冬多糖注射液临床给药剂量筛选试验为基础,分别设置高剂量组、中剂量组、低剂量组、药物对照组、阳性对照组及空白对照组,运用t检验和方差分析法对攻毒前后试验动物的相对体质量及试验结束后免疫器官指数进行统计分析,通过比较各组数据的显著性差异来评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的治疗效果。结果显示,复方天门冬多糖注射液能提高发病鸡的相对增量率,并促进发病鸡的生长发育。说明,复方天门冬多糖注射液对患病鸡的临床治疗效果显著,在实际生产中可以推广应用。     

复方天门冬多糖注射液的毒理学试验及安全性评价

【目的】验证复方天门冬多糖注射液的安全性,为临床用药提供参考依据。【方法】利用复方天门冬多糖注射液分别进行急性毒性试验、局部刺激性试验和亚慢性毒性试验,确定临床给药的最佳途径和最有效剂量。【结果】急性毒性试验结果表明,复方天门冬多糖注射液属于实际无毒。局部刺激试验结果表明,该复方制剂适合于黏膜给药和肌肉注射用药。亚慢性毒性结果表明,在腹腔注射剂量〈1.60g/kg时,小鼠的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性及肌酐、尿素氮水平与空白对照组（注射生理盐水）相比无显著差异（P〉0.05）,肝脏、脾脏和肾脏组织形态学也无可见病理变化。复方天门冬多糖注射液剂量在2.50～5.00g/kg时,ALT、AST活性及肌酐、尿素氮水平显著或极显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,超出正常值范围。对肝脏、肾脏和脾脏进行病理学观察,也发现肝索排列紊乱,部分肝细胞核破碎、溶解,结缔组织和内皮细胞增生。【结论】复方天门冬多糖注射液安全无毒,既可黏膜给药又可肌肉注射用药,但用药剂量应小于1.60g/kg。     

复方天门冬多糖注射液的毒理学试验及安全性评价

【目的】验证复方天门冬多糖注射液的安全性,为临床用药提供参考依据。【方法】利用复方天门冬多糖注射液分别进行急性毒性试验、局部刺激性试验和亚慢性毒性试验,确定临床给药的最佳途径和最有效剂量。【结果】急性毒性试验结果表明,复方天门冬多糖注射液属于实际无毒。局部刺激试验结果表明,该复方制剂适合于黏膜给药和肌肉注射用药。亚慢性毒性结果表明,在腹腔注射剂量<1.60 g/kg时,小鼠的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性及肌酐、尿素氮水平与空白对照组（注射生理盐水）相比无显著差异（P>0.05）,肝脏、脾脏和肾脏组织形态学也无可见病理变化。复方天门冬多糖注射液剂量在2.50~5.00 g/kg时,ALT、AST活性及肌酐、尿素氮水平显著或极显著升高（P<0.05或P<0.01）,超出正常值范围。对肝脏、肾脏和脾脏进行病理学观察,也发现肝索排列紊乱,部分肝细胞核破碎、溶解,结缔组织和内皮细胞增生。【结论】复方天门冬多糖注射液安全无毒,既可黏膜给药又可肌肉注射用药,但用药剂量应小于1.60 g/kg。     

中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型蛋鸡育雏育成期免疫功能的影响

【目的】研究肌注中药复方多糖对不同MHC B-Lβ II基因型蛋鸡免疫器官指数、血常规指标及血清中GM-CSF、G-CSF质量浓度的影响。【方法】采用PCR-SSCP方法,对试验鸡按不同基因型进行分组,将各组分成高、中、低剂量中药复方多糖试验组和空白对照组。各组试验鸡分别于8日龄肌肉注射0.2 mL 50、25和12.5 mg/mL中药复方多糖和生理盐水,连续7 d,于21、35和49日龄时从各组随机抽取5只鸡,测定胸腺、脾脏和法氏囊脏器指数,并采集血液检测血常规指标、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)质量浓度的变化。【结果】不同基因型鸡中,高、中、低剂量多糖对免疫器官、血常规部分指标及GM-CSF均有一定影响,但各剂量多糖对各基因型同一指标的影响不相同。其中,AA基因型鸡中,高、中剂量中药复方多糖可显著提高胸腺、脾脏和法氏囊的脏器指数,低剂量中药复方多糖可显著提高其白细胞总数和淋巴细胞数;BB基因型鸡中,高、中剂量中药复方多糖可显著提高胸腺和脾脏指数,而对血常规指标无影响;BC基因型鸡中,高剂量中药复方多糖可显著提高胸腺指数、白细胞总数和淋巴细胞数,中剂量中药复方多糖可显著提高白细胞总数和淋巴细胞数。【结论】不同剂量的中药复方多糖可以不同程度的提高各基因型组蛋鸡免疫器官指数、部分血常规指数及GM-CSF质量浓度,以高、中剂量中药复方多糖免疫效果更好。     

妥曲珠利-地克珠利复方溶液对鸡球虫病的疗效和安全性评价

妥曲珠利-地克珠利复方溶液设高、中、低3个剂量组,其中妥曲珠利使用浓度分别为20、10、5 mg/L,同时以百球清、妥曲珠利、地克珠利为对照药物,对鸡人工感染地克珠利耐药的柔嫩艾美耳球虫株进行临床抗球虫疗效试验。为评价妥曲珠利-地克珠利复方溶液对靶动物（鸡）的安全性,对试验鸡只连续30 d在饮水中按推荐剂量的5、10 、20倍给药,分别在第15、30 d 通过对增重、饲料报酬、器官系数、血液生化指标、病理组织学等方面进行观察和检测,与不给药对照组比较,以评价复方溶液的使用安全性。结果表明,复方溶液的低、中、高剂量组及百球清组的抗球虫指数（ACI）分别为112.1、182.5、193.9 和178.8。鸡只对妥曲珠利-地克珠利复方溶液的耐受性好,有较宽的安全使用范围。     

一种抗肿瘤中药复方制剂的小鼠急性毒性试验及对血液生理生化指标的影响研究

【目的】研究一味中药复方制剂的安全性,为人体肿瘤临床治疗用药提供参考。【方法】本试验对复方制剂进行了经口急性毒性、最大耐受量及其28 d经口毒性方面的研究。经口急性毒性预试验对各组小鼠一次灌服剂量0.2、0.6、1.8、5.4、16.2 g/kg (bw)的提取液,最大耐受量试验提取液按1.25、1.00、0.80、0.64、0.51 g/mL的质量浓度、0.04 mL/g (bw)的灌胃量对各组小鼠24 h之内灌胃3次,对小鼠连续观察7 d;将40只小鼠随机分为高、中、低剂量组及对照组,连续28 d灌服等体积不同含量[15、7.5、3.75、0 g/kg (bw)]的复方制剂,测定小鼠的血液生理生化指标。【结果】急性毒性结果表明:该复方制剂粗提物经口LD505 g/kg(bw),小鼠对其最大耐受量达到150 g/kg (bw),最大耐受量为人用剂量的1 050倍;28 d经口毒性试验中各组小鼠体重、血液生理指标与对照组相比差异不显著(P0.05)。血液生化指标仅中剂量组LDH与对照、低、高剂量组差异显著(P0.05),GPT、GOT、Cr和BUN各指标无显著差异(P0.05)。【结论】该复方制剂对小鼠无毒性作用,对血液生理生化部分指标无影响,临床使用安全。     

非繁殖期笼养绿尾虹雉血液生理生化指标比较分析及参考范围建立

【目的】通过比较非繁殖期不同性别和年龄阶段笼养绿尾虹雉血液生理生化指标,并构建参考范围,以期为绿尾虹雉健康状况评估、疾病诊治提供科学依据。【方法】采集15只非繁殖期健康成年绿尾虹雉的血液,采用兽用全自动血细胞分析仪和兽用生化分析仪,检测其12项血液生理指标和13项血液生化指标。同时,使用非配对t检验对不同性别和不同年龄段组个体进行比较分析,依照正态分布区间建立相应指标参考范围。最后,将参考范围分别与相近雉类以及1只体况较差绿尾虹雉的对应指标进行对比验证。【结果】在非繁殖期绿尾虹雉中,α-羟丁酸脱氢酶存在性别差异（P<0.05）,红细胞数目、红细胞压积、血镁和γ-谷氨酰转移酶存在年龄差异（P<0.05）,其余指标均不具有显著的性别或年龄差异（P>0.05）;绝大多数绿尾虹雉血液生理生化指标参考范围与近缘雉类高度相似;25项指标的参考范围中,体况较差个体共有14项指标出现偏差。【结论】建立的非繁殖期笼养绿尾虹雉血液生理生化指标参考范围具有一定的可靠性,可为非繁殖期笼养绿尾虹雉健康状况评估、疾病诊治提供依据。     

甘草多糖对哺乳仔猪健康状况和血清抗氧化能力的影响

【目的】研究甘草多糖对哺乳仔猪健康状况和血清抗氧化能力的影响，为甘草多糖在仔猪饲粮中的应用提供参考。【方法】选择体质量相近的5日龄“杜×长×大”三元杂交仔猪180头，随机分成3个组，分别为对照组、1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组，每组8个重复，每重复7～8头仔猪。采取常规饲喂方法，对照组饲喂基础饲粮，1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组在基础饲料中分别添加质量分数2.5%和1.0%的甘草多糖，饲喂30 d，试验期末统计仔猪健康状况，观察其皮毛发育程度。试验结束后第2天，每重复随机选择1～2头仔猪，每组10头，空腹前腔静脉采全血10 mL/头，采集的血液分两管收集，其中一管血液抗凝用于血常规测定，另一管血液制备血清用于生化指标及抗氧化指标测定。【结果】与对照组相比，1.0%甘草多糖组仔猪的末质量和平均日增质量均显著升高（P＜0.05）；2.5%甘草多糖组仔猪的末质量和平均日增质量虽有升高，但与对照组差异不显著。与对照组相比，1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组仔猪的平均日采食量和料重比均显著升高（P＜0.05），但其死亡率显著降低。与对照组相比，1.0%甘草多糖组仔猪皮毛发育状况评为5分的比例显著升高，评为1分的比例显著降低。2.5%甘草多糖组仔猪血液中的白细胞数、红细胞数和血小板数最多，与对照组存在显著差异（P＜0.05）；1.0%甘草多糖组仔猪血液中的白细胞数、红细胞数和血小板数均高于对照组，但与对照组差异不显著。与对照组相比，1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组仔猪血清中甘油三酯、葡萄糖、总蛋白和总胆固醇含量均有提高，且其甘油三酯和葡萄糖含量与对照组差异显著（P＜0.05）。1.0%甘草多糖组仔猪血清中乳酸脱氢酶活性显著高于对照组（P＜0.05），2.5%甘草多糖组仔猪血清中谷胱甘肽过氧化酶活性显著高于对照组（P＜0.05），1.0%甘草多糖组仔猪血清中的MDA含量显著低于对照组（P＜0.05）。【结论】基础饲料中添加甘草多糖可以降低仔猪死亡率，改善皮毛发育，提高血糖水平，增强机体的抗氧化能力，进而提高仔猪的健康状况。甘草多糖添加量以1.0%为宜。     

复方中草药对尖吻鲈血液生理生化指标的影响

以尖吻鲈Lates calarifer（初始体重16.94 g±0.12 g）为对象,投喂添加不同水平复方中草药的饲料,研究了复方中草药对尖吻鲈血液生理生化指标的影响。试验共分6组（对照组、A-E组）,A-E组饲料中复方中草药的添加量（质量分数）分别为0.05%、0.1%、0.2%、0.4%、0.8%,对照组饲料中不添加。每组设3个重复,饲养试验共进行56 d。结果表明：与对照组相比,C组和E组尖吻鲈血液中的红细胞数量显著提高（P〈0.05）,E组鱼血液中的白细胞数量和血红蛋白含量显著提高（P〈0.05）;E组鱼的血糖浓度显著高于其它组（P〈0.05）;B组鱼的谷丙转氨酶显著高于其它组（P〈0.05）。本试验结果表明,在饲料中添加复方中草药能改变尖吻鲈的部分血液生理生化指标。     

中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-12 mRNA表达量的影响

【目的】中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-12 mRNA表达量的影响。【方法】采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡外周血淋巴细胞,分别加入终浓度为100、75、50、0μg/mL中药复方多糖共培养24 h,收集细胞,采用Real-time PCR方法检测不同MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量。【结果】(1)与对照组相比,不同剂量中药复方多糖均能显著增强不同MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量(P0.05)。(2)中药复方多糖剂量为50μg/mL时,AA、BC基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量最高,中药复方多糖剂量为100μg/mL时,BB基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12基因mRNA的表达量最高。【结论】中药复方多糖能不同程度的促进各MHC B-LβⅡ基因型鸡IL-2、IL-4、IL-12 mRNA的表达,且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。     

复方天门冬多糖注射液的稳定性试验

[目的]研究复方天门冬多糖注射液的稳定性,为其申报生产、运输及贮存等提供科学依据.[方法]以苯酚—硫酸法测定复方注射液中天门冬多糖含量、高效液相色谱法（HPLC）测定三七总皂苷含量,分别通过光加速试验和温度加速试验探讨贮存过程中复方注射液天门冬多糖、三七总皂苷含量的变化规律,并观测样品的pH和澄明度,以评价复方注射液的稳定性.[结果]复方注射液中可添加1％吐温-80,但不适宜添加焦亚硫酸钠、亚硫酸钠或维生素C作为抗氧化剂.在4500±500 1x的光照条件下贮存,对复方注射液中天门冬多糖含量和pH无明显影响,但对三七总皂苷含量的影响较大.复方注射液按照市售包装后在温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）％的条件下放置6个月,其天门冬多糖含量、三七总皂苷含量、pH及澄明度的变化均在有效范围之内.[结论]复方天门冬多糖注射液可选用1％吐温-80作为助溶剂,确保密封避光,其在温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）％的条件下至少可贮存6个月.     

苦木生物碱提取及其复方注射液的安全性研究

[目的]筛选出苦木中生物碱的最佳提取方法及研究复方苦木注射液的安全性,为优化苦木生物碱有效成分的提取工艺及开发出能有效治疗畜禽大肠杆菌病的复方中药注射液奠定基础.[方法]采用高效液相色谱法对乙醇回流提取法、乙醇渗漉提取法和酶解—乙醇渗漉提取法提取的苦木生物碱进行含量测定并比较,同时对昆明小鼠进行口服和腹腔注射复方苦木注射液的急性毒性试验,测定半数致死量(LD50).[结果]酶解—乙醇渗漉提取法提取的苦木总生物碱、苦木碱己和苦木碱丁含量分别为3.10±0.22、0.30±0.06和0.05±0.01 mg/mL,均极显著高于乙醇回流提取法和乙醇渗漉提取法(P<0.01).昆明小鼠口服复方苦木注射液的给药剂量为10000 mg/kg时,小鼠仍健康存活;腹腔注射给药的LD50=2336 mg/kg,安全性评价为基本无毒物质.[结论]酶解—乙醇渗漉可作为复方苦木注射液中苦木生物碱的规模化提取方法,复方苦木注射液具有毒性小、无传染、无残留、无耐药性等优点,可在畜禽业中代替抗生素对大肠杆菌等细菌性传染病进行防治.     

黄芪多糖脂质体对罗非鱼免疫功能和

【目的】证实脂质体形式的黄芪多糖能否提高其药效、减少药物剂量。【方法】选用体重40.99±8.84 g的尼罗罗非鱼200尾,随机均分为5组,设为空白对照组、黄芪多糖组（200 mL/kg）及黄芪多糖脂质体高剂量组（400 mL/kg）、中剂量组（200 mL/kg）、低剂量组（100 mL/kg）;分别于试验第10、20和30 d测定罗非鱼脾脏指数、一氧化氮（NO）水平、溶菌酶（LZM）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及总抗氧化力（T-AOC）。【结果】与空白对照组相比,黄芪多糖脂质体对罗非鱼脾脏指数、LZM活性的影响不显著（P＞0.05）,但能显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）提高罗非鱼血浆NO水平及SOD、POD、GSH-Px活性;黄芪多糖脂质体提高罗非鱼机体免疫功能与抗氧化能力的效果优于黄芪多糖,且整体上呈中、低剂量的效果优于高剂量。【结论】黄芪多糖脂质体能提高罗非鱼免疫功能和抗氧化能力,效果优于黄芪多糖,且可降低其使用剂量和提高生物学利用度。     

复方黄芪多糖注射液对仔猪血液生理生化指标的影响

选取42日龄断奶仔猪90头,随机分为3组.第Ⅰ组注射生理盐水(3 mL/头),第Ⅱ组、第Ⅲ组猪颈部肌内分别注射3、6 mL/头复方黄芪多糖注射液,连用5 d,观察临床表现及药物对仔猪血液生理生化指标的影响.结果表明,仔猪临床表现无异常;给药第3天,血液中RBC、PLT较给药前分别提高了14.05%、20.45%,差异显著(P<0.05);血清中总蛋白较给药前分别提高8.94%、4.47%,差异不显著(P>0.05).给药第5天,血液中RBC、PLT较给药前分别提高了16.26%、20.86%,差异显著(P<0.05);HCT也有提高,但差异不显著(P>0.05);血清白蛋白分别提高1.31%、10.91%,差异不显著(P>0.05);白球比(A/G)在正常范围之内,其他指标差异不显著(P>0.05),说明复方黄芪多糖注射液在3~6 mL/头内对仔猪血液生化指标没有明显影响,对血液生理指标有明显改善作用.     

Ⅰ群禽腺病毒双价油乳剂灭活苗的研究

【目的】提高国内I群禽腺病毒疫苗的防控能力,防止I群禽腺病毒蔓延。【方法】优化I群禽腺病毒的增殖条件,以I群禽腺病毒血清4型（FAV-4）及血清8型（FAV-8）的抗原液制备油乳剂单价及双价灭活苗,比较甲醛及β-丙内酯（BPL）的灭活效果,并检验疫苗性状、监测免疫抗体水平及进行免疫攻毒试验和田间试验。【结果】疫苗灭活以1.00 mL/L终浓度的甲醛或0.500 mL/L终浓度的BPL为宜;3种疫苗均为白色状乳液,4°C下保存期均可达12个月,单价疫苗的最小免疫剂量为100 μL/羽,双价疫苗的最小免疫剂量为250 μL/羽;免疫抗体水平监测结果表明,免疫后第4周抗体水平达到峰值,且在免疫后第8周仍维持较高水平;免疫攻毒试验结果显示,3种疫苗的保护率均为100%,能完全抵抗病毒攻击;田间试验结果表明,在免疫初期3种疫苗抗体均达到预期免疫效果,免疫保护期在6个月以上,在生产中使用双价疫苗可以减少注射次数。【结论】FAV-4、FAV-8双价油乳剂灭活苗免疫效果好、保存期长、安全性好,为净化I群禽腺病毒提供了技术支撑。     

广西猪源禽Ⅰ型副粘病毒的分离与鉴定

[目的]了解广西猪源禽Ⅰ型副粘病毒的流行特征、毒力强弱及基因类型,为今后开展猪源副粘病毒的相关研究提供参考,也为有效防控副粘病毒感染奠定基础.[方法]采集疑似发病猪组织病料,通过鸡胚接种传代分离病毒后,分别进行血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验、平均死亡时间(MDT)和脑内接种致死指数(ICPT)测定,然后运用RT-PCR对分离株进行鉴定及扩增部分F基因片段,并对扩增片段进行克隆测序及比对分析.[结果]从广西疑似发病猪组织中分离获得一株猪源禽Ⅰ型副粘病毒,其HA、HI效价均为26,鸡胚最小致死量为10-8/0.1mL,MDT为60 h,ICPI为1.45;分离株F基因112~117位裂解位点的氨基酸组成为R-R-Q-R-R-F,与NDV标准强毒株HER33、F48E9的裂解位点一致;同源性分析结果表明,分离株与标准强毒株F48E9、中等毒力代表毒株BeaudetteC的核苷酸同源性分别为86.5%和85.7%,其推导氨基酸同源性分别为90.1%和90.8%.[结论]猪源禽Ⅰ型副粘病毒分离株为强毒株,属于基因Ⅱ型,是传统型毒株,广西地区禽Ⅰ型副粘病毒宿主范围呈不断扩大趋势.