藏鸡胚胎血液学参数及尿囊绒毛膜血管密度分析

通过在不同海拔（西藏：2900m,北京：100m）对藏鸡和小型鸡（对照）胚胎的血液学参数和高原胚胎血管密度的测定,分析其在藏鸡胚胎高原适应性中的作用。结果表明：高原孵化第9天藏鸡胚胎尿囊绒毛膜（CAM）血管密度系数（VDI）比小型鸡胚胎低32．23％（P〈0．05）,孵化第12天后两者均无显著差异（P〉0．05）,说明高原孵化藏鸡胚胎在CAM毛细血管上并没有表现出比小型鸡更有利于气体交换的特征。藏鸡红细胞压积在高原孵化第12和15天显著高于小型鸡（P〈0．05）,而红细胞计数与小型鸡无显著差异,同一时期藏鸡胚胎的纽细胞平均容积（MCV）和红细胞平均血红蛋白（MCH）都比小型鸡胚胎高,而红细胞平均血纽蛋白浓度（MCHC）藏鸡胚胎低于小型鸡胚胎。说明在高原孵化藏鸡胚胎表现出较强的适应性,可能与体积较大、血红蛋白含量较高的原始型红细胞产生较多并且存在时间较长有关。     

鸡胚胎孵化期死亡原因及解决措施

在种蛋孵化过程中,无论是高孵化率鸡群,还是低孵化率鸡群,都不可避免地会出现胚胎死亡现象.一般情况下,胚胎死亡分3个时期:1～7 d为前期;8～14d为中期;15～21d为后期.鸡的胚胎死亡在整个孵化期中并不呈均匀分布,存在2个明显胚胎死亡高峰.第一个胚胎死亡高峰在2～4胚龄期,正常情况下,这个时期的死亡数占孵化全期总死亡数的15%左右;第二个胚胎死亡高峰在19～21胚龄期,正常情况下,这个时期的死亡数占孵化全期总死亡数的50%左右.一般在较高的管理水平下,前、中、后期胚胎死亡率依次为1.5%～3%、0.1%～0.5%、2%～3%.胚胎的死亡情况直接影响着孵化率的高低,如果发现异常应及时查找原因并找出解决对策.     

Ultrastructural Studies of the Goose Embryo Liver

Development of the liver in goose embryo was studied ultrastructurally. The structural changes of the liver in the 14, 21, 24 and 28 days old embryos were investigated.
The liver primordium of endodermal origin localized around the ductus venosus. The hepatocyte trabeculae proliferating into the ductus venosus, first divide the lumen into wide sinusoids then with the number of trabeculae increasing the sinusoids become narrow on the 15th day. The hepatocytes in 11–14 days old embryos are less differentiated and poor in cell organelles. There are many fat drops in multi vacuolic form at the hepatocytes in 21 days old but specially in 27 days old embryos. The liver contain little connective tissue, it is formed between days 17 and 21. The endothelial cells comprise well developed endoplasmic reticulum. The Kupffer-cells contain lipid drops after the 22th day.     

鸡蛋高海拔孵化条件分析

鸡蛋孵化率是鸡的一个重要经济性状，遗传力0．1—0．15，除受鸡蛋本身因素影响外，还受各种气候因子的影响。长期以来，人们很重视家禽的孵化环境研究，以期不断提高孵化率。高海拔地区气压低，氧分压低，空气干燥，日温差大，紫外辐射强，孵化条件不能套用平原地区的各项参数。本文综述鸡蛋孵化的环境因素，分析高海拔地区孵化条件的优化。     

Formaldehyde Vapour Effects in Chicken Embryo

A total of 763 fertile chicken eggs were divided in two groups. The eggs of the first group were manipulated intact. The shell of each egg of the second group was drilled at the air chamber position. The eggs of both groups were divided in 6 subgroups and they were placed in an automatic incubator. Between the second and the fourth day of incubation each subgroup of eggs was moved to another incubator saturated with formaldehyde vapour, and it was exposed for a certain time. The hatched chicks were examined, measured, and processed, in order to search for any external, visceral, and skeletal malformation. Although the chicks of the first group did not show any particular abnormalities after their exposure to formaldehyde vapours, those of the second group were found to be affected in a rate of about 29:100. The observed embryotoxic effects of the hatched chicks of the second group were mainly early and late prenatal deaths, extensive and limited congenital anomalies as well as reduction deformities.     

孵化期间鸡胚、肝脏、卵黄及蛋白组成的变化及其相关关系

将1188枚种蛋随机码放在6个蛋盘内，同机人孵，每盘为1个试验重复。于人孵的第6、9、12、15、18和21天从各盘取出36个胚蛋用于测定蛋清葡萄糖的含量；胚质量及其水分、蛋白质和脂肪含量；肝脏质量、水分和脂肪含量；卵黄囊质量、卵黄脂类及其脂肪酸的含量。结果表明，随着孵化时间的增加，肝脏的脂肪含量不断增加，但胚胎的水分含量、蛋清的葡萄糖含量和卵黄囊质量则不断减少，脂肪在孵化的第12天含量最低，蛋白质在孵化的第6、12和15天含量较高。相对肝质量与胚胎的水分含量正相关，与孵化第15天的卵黄棕榈酸和油酸分别为正相关和负相关。卵黄硬脂酸含量与孵化第6天的亚油酸和孵化第12天的油酸均为负相关，但与孵化第6和15天的花生四烯酸均正相关。     

鸡胚胎期和出生后Pax3基因时空表达规律的研究

为探讨鸡Pax3基因在胚胎阶段以及不同生长阶段的时空表达规律,试验选取同一批鸡胚(8、16、20 d和21 d)以及2、4、6、8、10、12周龄的如皋鸡各6只,公、母各半,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术分析了Pax3基因在胸肌、腿肌中的表达规律。结果表明:胸肌和腿肌组织中公、母鸡表达水平变化趋势一致,无性别效应;在胸肌组织中,Pax3基因在8 d的鸡胚中表达水平最高,随后降到最低,出雏前缓慢上升,出雏后随着周龄的增加表达水平保持在较低状态。但在腿肌组织中,Pax3基因的表达高峰在出雏前(20 d和21 d),出雏后随周龄的增加表达量持续降低,并保持在较低的水平。表明Pax3基因表达存在组织特异性,且集中在胚胎期大量表达,出雏后表达水平较低,揭示该基因可能对鸡肌纤维生长发育存在调控作用。     

早期鸡胚抗氧化活性物质的变化研究

通过检测鸡胚在早期发育过程中的抗氧化能力指数、脂质过氧化产物丙二醛、维生素C及谷胱甘肽的含量和超氧化物歧化酶活性,探讨内源性抗氧化活性物质变化,旨在为胚胎的抗氧化系统形成提供参考.结果显示,鸡胚在发育初期,胚胎内维生素C、谷胱甘肽、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性均有不同程度的提高,而卵黄内的抗氧化能力指数水平则逐渐降低.此外,试验结果还提示每克组织内的抗氧化指标在孵育前期呈递增趋势,发育至13日龄时随着体内抗氧化功能的健全而单位组织内的抗氧化水平趋于下降.以上结果说明,鸡胚内的抗氧化系统是在早期发育过程中逐渐形成并日益完善的,可能在胚胎发育过程中发挥着重要的生理意义.     

绿色荧光蛋白在鸡胚成纤维细胞中的表达

应用阳离子脂质体介导法,将含绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-C1转染到培养至第二代的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,同时使用活体DNA染料Hoechst3334(2H342)对CEF细胞核荧光染色,通过荧光倒置显微镜和RT-PCR方法检测GFP的表达产物。在荧光倒置显微镜下可见CEF的胞质和核均呈现绿色荧光,且细胞核的绿色荧光强度强于细胞质,在H342作用下,细胞核呈现蓝色荧光;转染细胞中转录产物经RT-PCR扩增后,在凝胶上可见与GFP基因片段分子量大小一致的条带。可见,GFP基因可以被转染至CEF中,并在CEF中表达。     

蛋重对巨型玫瑰冠鸡种蛋孵化的影响

为探讨蛋重对巨型玫瑰冠鸡种蛋受精率、孵化率以及母雏率的影响,将挑选的900个45~70 g健康种蛋以5 g为一区间分为5组,每组180个(设6个重复,每个重复30个)。结果表明:在相同条件下,巨型玫瑰冠鸡最佳受精率和孵化率的蛋重区间为60.00~64.99 g;蛋重对巨型玫瑰冠鸡母雏率没有显著的影响。     

几种鸡胚原代细胞的制备方法

在病毒分离、繁殖，中和试验及药物毒理试验中，细胞培养是经常被选用的技术。本文描述通过选择不同日龄的鸡胚，分别对皮肤上皮细胞、肝细胞和肾细胞进行了组织培养，确定了生长所需的培养液要求。认为１２日龄鸡胚适于皮肤上皮细胞的制备，１７～２０日龄鸡胚适合于肝细胞、肾细胞的制备，并确定了细胞生长的ｐＨ条件。     

Ultrastructural Study of the Early Development of the Sheep Embryo

An ultrastructural study of the different stages of pre-implantation in sheep was carried out, analysing the changes brought about mainly in the morula and blastocyst stages. The analysis of the embryos obtained showed a series of common characteristics in all stages, most noticeable being the presence of a high number of vesicles distributed in a uniform way in the cytoplasm, and also the presence of numerous electron-dense mitochondria in many varied forms. The most important ultrastructural modifications took place at the 16-cell stage and affected, principally, the nucleus, which presented numerous condensations of chromatin distributed along the nucleoplasm. The nucleoli adopted a reticular morphology, abandoning the compact aspects presented in the previous stage. These changes might be involved in the synthesis of embryonic RNA, and, accordingly, in the activation of the genome of this species. These data indicate that this stage is critical to the embryonic development and might be related to the blockage produced in the development of cultivated sheep embryos at the point of transition from 8 to 16 cells. Nevertheless, it should be pointed out that the first signs of modifications in the aspect of the nucleus are observed at the four-cell stage, being characterized by the appearance of vacuolated areas in the nucleolus, indicating the first signs of embryonic nucleic activity, which would anticipate the main change in the control of the protein synthesis.     

圈养红腹锦鸡人工孵化技术研究

2005—2008年在陕西省动物研究所试验基地对圈养红腹锦鸡进行人工孵化试验。采用中型孵化机孵化,共孵化412枚受精卵,孵化率为74．76％（67．62％～90．74％）,孵化期为22．90～23．03d。结果表明：采用中型孵化机对红腹锦鸡的规模化孵化是可行的。     

新城疫病毒致鸡胚成纤维细胞病变特性研究

为探讨新城疫Ⅳ系和Ⅰ系毒株对鸡胚成纤维细胞(CEF)致病变特性的影响,采用细胞病变观察(CPE)、血凝试验(HA)和半数细胞培养物感染量(TCID50)测定等方法对新城疫Ⅳ系和Ⅰ系毒株在CEF上的感染特性进行检测。结果表明:经鸡胚复壮的新城疫Ⅰ系毒株不管胰蛋白酶是否参与,均能在CEF上增殖并产生典型的细胞病变,主要以发生细胞融合和形成多核巨细胞为特征;而新城疫Ⅳ系毒株,必须在胰蛋白酶参与的情况下才能产生CPE,主要以胞浆内出现可见大小不等的空泡或颗粒为特征。新城疫Ⅰ系毒株与新城疫Ⅳ系毒株(胰酶参与)相比CEF培养上清液最高HA效价高2个滴度,TCID50也明显增高,证明新城疫Ⅰ系毒株在CEF细胞上的感染力更强。     

破骨细胞分化因子可诱导鸡骨髓细胞形成破骨样细胞

研究了鸡破骨细胞分化因子（Chicken osteoclast differentiation factor,chODF）体外诱导鸡骨髓细胞形成破骨样细胞的能力。在无菌条件下取鸡股骨和胫骨,收集骨髓细胞。试验分设A、B、C、D、E、F、G7组。A组为对照组,不加细胞因子,其他各组为试验组,其中B组仅加chODF,C组只加巨噬细胞集落刺激因子（Macrophage-colony-stimulatingfactor,M-CSF）,D、E和F组同时加不同浓度的chODF和M—CSF,G组同时加chODF、M-CSF和鸡护骨素（Chicken osteoprotegerin,chOPG）。通过抗酒石酸盐酸性磷酸酶（Tratrate-resistant acid phosphatase,TRAP）、HE、骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色和显微、超微检查,观察和鉴定破骨样细胞（Osteoclastlikecell,OLC）的形成。结果表明,chODF可诱导形成典型的OLC,骨吸收陷窝清晰可见,其陷窝面积大,数量多,且TRAP阳性多核细胞的数目与ODF的浓度呈正相关,多组比较其差异显著（P〈0．05）,但若加入chOPG,则阻断了OLC的形成和骨吸收。本试验建立了一种鸡骨髓细胞诱导破骨样细胞方法,既为体外研究鸡破骨细胞的分化发育和功能调节创造了条件,也为进一步研究OPG／ODF／RANK（NF-κB受体,Receptoractivator of NF-κB）在蛋鸡骨质疏松症等骨骼疾病的作用机制提供理论基础。     

鸡原肠胚期细胞收集方法的优化

鸡原肠胚(Gastrula stage cell,GSC)是一个位于胚盘内膜与卵黄之间的一层细胞层,细胞数量约为5万～6万个[1],是可分化细胞,因此是很好的试验研究材料.由于它位于胚盘内膜与卵黄之间,这给该种细胞的收集带来了很大的难度,收集的细胞常常数量少且带有大量卵黄,很难除去,但对此材料的收集却没有有效的参考方法,为后续试验带来了麻烦.本研究通过对鸡原肠胚不同收集方法的研究比较,确定了最佳的鸡原肠胚期细胞的收集方法,为以后与该细胞相关的试验研究奠定方法学的基础.     

孵化期间乌骨鸡种蛋水钙变化研究

孵化期间，鸟骨鸡种蛋内蛋黄和蛋清的含水量变化呈互补性，即蛋黄含水多时．蛋清含水少，而胚胎的含水量是逐渐减少的。12日龄前，蛋壳、蛋清、蛋黄内钙含量变化相对较小，12日龄后，蛋壳内的钙比蛋清、蛋黄内的钙变化大，且成为胚胎发育过程中的主要钙源。试验还发现，孵化前蛋黄内的水、钙含量和出壳时剩余蛋黄内的水、钙含量相差不大，但18日龄前后，蛋黄内的钙大幅度上升，证实蛋黄有富集钙的功能。鸟骨鸡胚胎的生长在9日龄前是缓慢的，9日龄以后是快速的，且胚胎的重量与孵化时问的关系呈指数式回归。     

一种优化鸡胚成纤维细胞制备方法及生长曲线测定

鸡胚成纤维细胞（CEF）的来源方便,制备简单,耐受性好,且适合于许多病毒的生长繁殖,因此被广泛用于疫苗的生产、病毒的培养以及一些细胞和分子生物学的研究。然而传统的鸡胚成纤维细胞制备方法存在制备时间长、死细胞较多和细胞贴壁慢的问题。笔者根据经验摸索出一种实验室快速制备CEF的简便方法,并通过台盼蓝染色用细胞计数法绘制了原代CEF及次代CEF的生长曲线。该简便方法的建立为实验室快速制备高质量高纯度的鸡胚成纤维细胞提供了方便,同时对其生长曲线的测定也为进行基因转染方面的研究积累了资料。     

鸡贫血病毒的致病机理、检测及疫苗研究现状

鸡贫血病毒（chicken anemia virus,CAV)是鸡传染性贫血病的病原，广泛分布于世界各国。CAV感染能导致雏鸡严重贫血，并能造成免疫抑制，从而影响养禽业的发展。近年来，随着分子生物学的发展，许多国家对CAV进行了深入研究，取得了较大的进展。本文就近年来国内外对CAV的致病机理、检测以及疫苗研制的研究现状综述如下。