血凝抑制试验的影响因素及控制

正血凝抑制试验(HI试验)的原理是病毒在适宜条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可以被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,沉降到V形孔底部,利用这种特性检测血清中的病毒抗体的试验就叫血凝抑制试验。血凝抑制试验的方法是将     

鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体最佳免疫程序及检测方法的筛选

为了获得高效价鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体,试验通过设计免疫程序免疫试验蛋鸡和筛选的卵黄抗体效价检测方法对氯仿法提取的卵黄抗体液进行鸡抗犬瘟热卵黄抗体效价检测并比较,筛选鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体最佳免疫程序,并作无菌与保存条件的探讨。结果表明:血凝及血凝抑制试验可作为鸡抗犬瘟热卵黄抗体效价的检测方法;按照基础免疫、加强免疫、强化免疫均间隔9 d,免疫剂量分别为1 m L/次、2 m L/次、3 m L/次的免疫程序能获得1∶512的鸡抗犬瘟热病毒卵黄抗体血凝抑制效价,为此次探讨的鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体最佳免疫程序,-20℃保存温度适合长期保存氯仿法粗提的鸡抗犬瘟热病毒卵黄抗体液。     

鸡传染性支气管炎微量血凝抑制试验方法的研究

用胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制成血凝(HA)抗原,HA＝1:16384,用此抗原建立了微量血凝抑制试验(HI)方法检测IBV阳性血清。IBV阳性血清鸡胚病毒中和试验(NT)结果与HI效价呈正相关,相关系数r＝0.29,HI效价达1:8以上可保护鸡胚抵抗200个MLD的IBV攻击,表明HI抗体是保护性抗体,该方法具有较大的实用价值。     

监测和诊断禽流感

常规鉴定禽流感病毒的方法是血凝试验 (HA)，血凝抑制试验 (HI)，琼脂扩散试验 (AGP)以及病毒中和试验 (NT)等。 　　检测采取的病料主要是血液、鸡蛋、肝脏等。 　　琼脂扩散试验可以检测出各种血凝亚型的病毒，但检出率较低，往往检测为阴性的鸡群，并不能保证没有感染禽流感。血凝抑制试验可以用于区别禽流感的血清亚型，且敏感性高，但一种血凝抗原只能检出相应的抗体，而不能查出其他血清亚型抗体。不过一个地区流行的禽流感病毒，其血清亚型在一定时间内是相对稳定的，所以用该地区流行的病毒株抗原做血凝抑制试…     

应用进口鸡传染性支气管炎ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体

鸡传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒引起鸡的一种急性高度接触性的呼吸道传染病,是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一。已有多种血清学方法可用于IB抗体检测,我国目前常用的方法有琼脂扩散试验(AGP)、血清中和试验(SN)、间接血凝试验(IHA)等。国内很多学者先后建立了ELISA方法检测IB抗体均取得理想结果,但仅限于实验室检测,在基层推广应用还有一定困难。     

祛除禽流感HI试验中鹅血清非特异反应现象的研究

目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。     

用微量间接血凝试验检出牛传染性鼻气管炎(IBR)病毒血清抗体的试验报告

用于检出牛传染性鼻气管炎病毒血清抗体的最普通方法是病毒——血清中和试验,此法检出的抗体水平较低,且费钱、费时,手续繁锁,很难适应港口检疫的需要.微量间接血凝试验(Micro—Passive hemagglutin～(a)tion·test简写MPH)为我们提供了一种简便、快速、敏感的血清学试验方法,很有希望取代中和试验而成为新的常规检疫手段.本文着重介绍微量间接血凝试验的操作程序,同时,用MPH试验与中和试验进行了比较.     

间接血凝试验检测鸡传染性支气管炎病毒抗体

间接血凝试验检测鸡传染性支气管炎病毒抗体江国托，徐宝春，王永坤（扬州大学农学院２２５００１）目前，鸡传染性支气管炎（ＩＢ）已成为国内养鸡业的主要疾病之一，虽然已建立的检测ＩＢＶ及其抗体的方法很多，如琼脂扩散试验、细胞中和试验、ＥＬＩＳＡ、血凝和血凝抑...     

H5NI型禽流感病毒纳米量子点快速检测方法的建立

本文介绍了一种用CdSe量子点标记技术用于H5NI型禽流感病毒检测的方法。采用CdSe量子点标记鸡抗AIVIgG,并对标记的抗体量子点复合产物进行了纯化。H5N1型禽流感病毒单克隆抗体作为包被抗体,CdSe量子点标记的鸡抗AIVIgG作为检测抗体,建立了纳米量子点应用于禽流感病毒快速检测的方法。此方法的最佳检测组织为气管和肺,整个检测过程只需3小时。实验结果表明,对已知的阳性样品其敏感性比血凝试验要高出4倍以上,与新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭肝炎病毒等无交叉反应。对65份病料进行检测,结果有5份阳性病例,60份阴性病例,与鸡胚分离法作为比对,结果符合率为98.46%,说明此方法具有较好的特异性和灵敏度,该方法操作简单、检测快速快,在进出口检疫方面有良好的应用前景。     

玻板间接血凝试验早期诊断鸡白痢病的研究

目前国内外对鸡白痢病的检疫方法,大都采用标准试管凝集试验、染色抗原全血试验、快速血清试验及四氯唑染色抗原微量凝集试验等,但要求16周龄开始检疫,对幼龄鸡的检测不理想。为此,需探索早期诊断法。我们已研制出玻板间接血凝试验抗原,可早期测出高检出率的抗体,现报告如下。     

禽病诊断与检测技术培训班——广州多德动物医疗有限公司将于2006年8月开办培训班

A班:实验室检测培训班学习内容:各种病毒、细菌抗体水平检测及病毒、细菌的分离培养。如血凝试验(H A)与血凝抑制试验(H I)、琼脂凝胶扩散试验(A G P)、酶联免疫吸附法(ELISA)、鸡胚接种技术、细菌的分离、培养、鉴定和药物敏感实验、药敏纸片的制作技术等。B班:禽病防治技术培     

新城疫诊断试剂盒的研制及初步应用

根据新城疫病毒(NDV)对鸡红细胞的凝集以及相应抗体对病毒血凝的抑制的原理设计出新城疫抗体监测试剂盒，主要用于鸡新城疫抗体水平的监测，为正确实施新城疫疫苗适时接种提供依据。试剂盒包括新城疫阳性血清、新城疫阴性血清、4单位新城疫抗原和10ml／L醛化红细胞。经对50多份血清检测结果表明，用于血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的醛化红细胞与新鲜红细胞无显著性差异(P＞0．05)，并能准确检测出鸡群新城疫抗体水平，具有操作简便、适用、易于保存等特点。     

微量血凝抑制试验操作中常见问题及解决办法

随着人们对动物源性食品质量卫生安全要求的日益提高和动物防疫检疫工作的需要 ,实验室检验成为基层动物防疫检疫机构的必要技术手段。血凝抑制试验是化验室中简便、快速、灵敏、准确且最常用的血清学诊断方法。但不规范的操作经常会发生一些问题 ,影响试验的精确性。下面就我局动检站化验室在实验中的一点体会与大家探讨。微量血凝抑制试验可以用来发现和鉴定病毒 ,诊断病毒性疾病 ,测定免疫机体抗体效价 (抗体检测 ) :常用于禽新城疫、禽流感、禽减蛋综合症、狂犬病、日本乙型脑炎、非洲马瘟、犬病毒性肠炎 (犬细小病毒病 )、兔病毒性出血…     

肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫抗体形成规律

以肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫１５日龄ＡＡ鸡，采用间接血凝试验分别检测免疫后第５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０天的病毒抗体绘制成免疫抗体制成曲线，采用１５日龄无母源抗体ＡＡ鸡对比试验，分别检测肾型鸡传染性支气管炎病毒强毒株攻毒后不同时间的病毒抗体，绘制成抗体形成曲线，比较两曲线可知肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫后第５天可检测到病毒抗体，抗体水平高峰期出现在免疫后第     

不同剂型禽流感疫苗对蛋鸡免疫效果的分析与讨论

使用重组禽流感病毒灭活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗对鸡禽流感进行免疫攻毒试验,通过血凝和血凝抑制(HI)试验技术检测机体内两种不同剂型疫苗的禽流感抗体水平,从中选出最佳免疫效果的疫苗。结果显示,禽流感病毒灭活疫苗优于禽流感-新城疫重组二联活疫苗,建议在防控禽流感时使用前者。     

产蛋下降综合症病毒血清学比较研究

试验用血凝抑制(HI)试验,酶联免疫吸附(ELISA)试验,血清中和(SN)试验,荧光抗体(FA)试验和琼胶免疫扩散(AGID)试验分别对接种产蛋下降综合症(EDS)病毒后的实验感染鸡血清中的抗体进行检测,以比较5种血清学试验的敏感性。比较结果表明,前四种血清学试验分别于接种后5天首次测出抗EDS病毒抗体,其中SN和FA试验检查所有5只接种鸡全部为阳性,     

用醛化红细胞分离抗禽流感病毒独特型多克隆抗体

用纯化的鸡抗禽流感病毒(AIV)抗体免疫家兔，制备抗独特型多克隆抗体；用戊二醛醛化的红细胞固定非特异性鸡抗体，再吸附兔抗鸡抗体，获得了纯的抗独特型抗体。经鉴定，该抗体既有弱的血凝性又有弱的血凝抑制性，并能与原病毒竞争性地和鸡抗AIV抗体结合。     

抗独特型抗体检测H9亚型禽流感血清抗体

为了探讨用抗独特型抗体替代病毒或病毒亚单位检测H9亚型禽流感血清抗体的可行性,本试验分别用全病毒抗原和抗独特型抗体(Ab2)作检测原,通过琼脂免疫扩散试验(AGP)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了鸡的血清样品。在AGP试验中,分别用Ab2和禽流感病毒(AIV)对10份血清样品检测的符合率为70%。在间接ELISA试验中,Ab2和AIV抗原对10份血清样品检测的符合率为90%。用Ab2间接ELISA试验检测出的血清阳性率(8/10)高于血凝抑制试验(6/10)和AGP试验(5/10)。结果表明,在一定的情况下Ab2可以用来代替具有污染环境风险的病毒抗原来检测抗病毒抗体。     

一株H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及免疫试验

为了解养禽业禽病流行病毒株的基本情况,本研究对2014年从山东某鸡场采集的疑似流感的病料样品采用鸡胚尿囊腔接种进行病毒的分离,并经血凝试验(HA试验)、血凝抑制试验(HI试验)及分子生物学试验对其病原学进行鉴定。结果显示,分离鉴定到一株病毒分离株。HA试验结果表明该分离株具有血凝活性,经病毒亚型鉴定为一株H9亚型禽流感病毒(AIV),该病毒株为欧亚分支的BJ亚分支,将该病毒株筛选纯化后作为毒种,制备了禽流感油乳剂灭活疫苗,将该疫苗免疫SPF鸡,21 d后对其HI抗体效价进行检测,结果显示其平均效价达到9.1 log2,免疫后第35 d HI抗体平均效价达到峰值10.3 log2,至免疫后第10周,HI抗体平均效价仍达8.5 log2。本研究分离的病毒制备成疫苗后具有较好的免疫效果,可以作为疫苗候选株。     

间接ELISA检测禽流感抗体方法的建立

应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的禽流感病毒 (AIV) ,经 triton X-1 0 0处理并反复冻融制备禽流感 EL ISA抗原。应用抗鸡 Ig轻链单抗 1 B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测禽流感抗体水平的 EL ISA方法。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 EL ISA效价(ET)的回归方程 y=0 .77452 x 0 .8793 5(r=0 .9466) ,可用于定量测定。血凝抑制 (HI)抗体与 EL ISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比血凝抑制试验敏感 1 .5倍以上