提高猕猴桃果实品质与贮藏性能的初步研究

１材料与方法试材为湖南农业大学果树试验站１３年生美味猕猴桃东山峰７８－１６,常规管理。试验共设４个处理：Ⅰ猕猴桃增糖剂（广东省农科院果树研究所生产,含有氮、磷、钾、钙、锌矿质元素及核苷酸）４００倍液;Ⅱ旺力肥（台湾生产,以氮为主,并含有动物胆精、硼等...     

猕猴桃果实采收贮藏与保鲜

猕猴桃果实采收到销售过程中有许多技术需要掌握。现分述如下。１采收采收到果实商品化，包括采收期的确定、采收、分级和包装４个环节，忽视任何一个环节都会影响经济效益。猕猴桃果实不能像桃、李等果实一样，到了食用期再采收。它的成熟过程有三个阶段：一、采收成熟期，即生理成熟期。二、生理后熟期。三、食用期。生理成熟期为果实内各种营养物质积累量能够达到成熟时的要求，采收后，经过后熟，能够充分表现出品种固有风味和营养水平，此阶段果实不软，细胞没有分离，所含淀粉未完全分解成糖，氨基酸水平也较低，蛋白质酶原不能分解蛋…     

钙和萘乙酸对猕猴桃果实贮藏的影响

室温条件下，１０ｍｇ．ｌ＾－１ＮＡＡ、０．５％ＣａＣｌ２、５％ＣａＣｌ２和５％ＣａＣｌ２与１０ｍｇ．ｌ＾－１ＮＡＡ混合使用均缩短猕猴桃果实贮藏期，而０．５％ＣａＣｌ２与１０ｍｇ．ｌ＾－１ＮＡＡ混合处理能延长果实贮藏期。     

若干果实因素对猕猴桃贮藏期间失重的影响

猕猴桃果实因品种、采收期和果实大小不同，在贮藏期间的失重率存在显著差异。茸毛孔是果实失水的主要部位，而带果梗与否对果实的失重影响不大。     

基于RNA-seq的黄肉猕猴桃类胡萝卜素合成相关基因的表达分析

【目的】探讨黄肉猕猴桃发育过程中果实类胡萝卜素合成途径中相关差异基因的功能。【方法】以黄肉型中华猕猴桃‘金丰’果实为试材,在前期RNA-seq测序的基础上,利用实时荧光定量PCR技术检测其类胡萝卜素合成过程中相关差异基因的表达水平。【结果】Unigene23885、CL10798、Unigene11266、CL1511四个基因相对表达量较高,其他基因表达量相对较低;相关性分析结果显示,类胡萝卜素含量与Unigene11266、Unigene23885、Unigene2673三个基因相对表达量显著相关,与基因Unigene23823、Unigene12775相对表达量呈极显著相关。聚类分析结果显示,基因Unigene23885和Unigene11266、基因CL1511和CL10798分别被聚为一类,其表达模式非常接近且与其他基因明显不同,并在类胡萝卜素合成中高水平表达,基因CL10467与其距离最近。【结论】综合相关性分析和聚类分析,基因Unigene11266、Unigene23885可能是类胡萝卜素合成的关键基因,且较其他基因而言,基因CL10467、Unigene12775、CL10798、CL1511、Unigene2673与其关系更密切。     

猕猴桃Cu/ZnSOD的克隆及其在果实贮藏中的表达分析

【目的】探讨猕猴桃Cu/ZnSOD的序列特征及其在不同组织部位与果实贮藏中的表达特征,丰富超氧化物歧化酶与果实采后品质关系的研究。【方法】以‘米良1号’猕猴桃为材料,采用RT-PCR法克隆得到2个Cu/ZnSOD家族成员,分别命名为AdCSD1和AdCSD2,通过生物信息学软件分析序列特征、功能结构域、基因结构及系统进化关系,应用qRT-PCR技术研究它们在不同组织部位、不同贮藏温度和激素处理后的表达模式。【结果】AdCSD1和AdCSD2的开放阅读框分别为459和621 bp,分别编码152和206个氨基酸,登录号分别为MF034869和KY471357。生物信息学分析结果表明,AdCSD1和AdCSD2对密码子选择偏性不强,均编码具亲水性的稳定酸性蛋白,且包含完整的Cu/ZnSOD结构域和保守的Cu2+/Zn2+结合位点。AdCSD1和AdCSD2的外显子内含子组成不同,且它们的序列一致性较低,在系统进化树中位于2个不同的分支,可能源自不同的基因祖先。AdCSD1和AdCSD2在猕猴桃各组织部位(根、茎、叶、花、幼果和成熟果)均有表达,但表达水平不同。猕猴桃果实中AdCSD1和AdCSD2在4℃低温贮藏过程中的表达量均比25℃常温贮藏中同期的表达量低;它们在脱落酸处理后的表达均下调,而在赤霉素处理后的表达模式不同。【结论】AdCSD1和AdCSD2均参与猕猴桃各组织部位活性氧的清除,且在果实低温贮藏中的表达受到抑制,但它们对外源脱落酸和赤霉素的应答模式不同。     

猕猴桃幼果期钙处理对果实贮藏和品质的影响

以中华猕猴桃品系湘酃８０－２为试材,在幼果期进行浸钙处理。结果表明：不同钙处理能不同程度地延长猕猴桃果实贮藏期,其中以０.５％Ｃａ_２（ＮＯ_３）_２处理对果实贮藏与品质的综合效果最好;０．５％Ｃａ（ＮＯ_３）_２＋ １００ ｍｐ·ｌ~(－1)萘乙酸能显著提高果实硬度与贮藏性能。     

猕猴桃幼果期钙处理对果实贮藏和品质的影响

以中华猕猴桃品系湘酃８０－２为试材,在幼果期进行浸钙处理。结果表明：不同钙处理能不同程度地延长猕猴桃果实贮藏期,其中以０．５％Ｃａ（ＮＯ３）２处理对果实贮藏中品质的综合效果最好;０．５％Ｃａ（ＮＯ３）２＋１００ｍｇ．ｌ＾－１萘乙酸能显著提高果实硬度与贮藏性能。     

猕猴桃贮藏中存在的问题与对策

1 采收期把握不住 猕猴桃的适宜采收期因品种而异。一般在园内用手持糖量计测试可溶性固形物(也叫糖分)。以陕西主栽品种“秦美”为例,糖分达到7％时采收较为合适,花后150天左右,即可达到这个标准。关中地区“秦美”品种以10月中旬采收最为适宜,过早过迟都不利于贮藏,下雨、雨后刚晴或采前灌水都不宜采收。采前更不能加大氮肥的施用量,氮肥过多,影响果实贮藏的硬度和品质。     

猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系

 通过RT-PCR从美味猕猴桃（Actinidia deliciosa）果实中克隆了D–半乳糖醛酸还原酶（GalUR）全长 cDNA序列,并分析其序列特征,进行原核表达,制备特异抗体,分析其mRNA及蛋白表达水平与果实发育过程及不同组织中抗坏血酸（AsA）合成和积累的关系。结果表明：克隆的GalUR cDNA（GenBank登录号为GU339035）包含的最大开放阅读框（open reading frame,ORF）为990 bp,编码329个氨基酸残基,预测分子量为37 kD,与报道的草莓等其他植物GalUR具有较高的相似性。构建的pET-32a（＋）-GalUR载体在大肠杆菌BL21（E. coli BL21）中异源表达后,获得了主要以包涵体存在约58 kD的融合蛋白GalUR-His（His约21 kD）。以该蛋白制备抗体,与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GalUR蛋白发生特异反应。对猕猴桃可溶性蛋白杂交显示,猕猴桃体内GalUR蛋白的分子量约37 kD。在猕猴桃不同组织和发育过程中,GalUR表达水平与AsA含量表现为高度一致,但前体饲喂发现,与L–半乳糖相比,D–半乳糖醛酸并不能有效促进猕猴桃AsA的合成。这些结果表明以单体形式存在的GalUR与猕猴桃AsA合成有着密切关系,但它可能并不是猕猴桃AsA积累的主要调控环节。     

甜橙果实膳食纤维与PG、Cx活性的研究

以红肉脐橙、纽荷尔脐橙和塔罗科血橙果实为试材,测定了果实发育过程中总膳食纤维（TDF）、可溶性膳食纤维（SDF）、不溶性膳食纤维（IDF）、总果胶（TP）、原果胶（protopectin）、水溶性果胶（WSP)、纤维素（CEL）、半纤维素（HC）和木质素（lignin）等的含量以及多聚半乳糖醛酸酶（PG）和纤维素酶（Cx）活性。结果表明：3个品种果实发育过程中总膳食纤维含量变化趋势基本一致,随着果实的成熟含量逐渐减少;果肉中,塔罗科血橙TDF含量最少,纽荷尔次之,红肉脐橙最多;IDF含量变化趋势与TDF基本一致,而SDF与TDF相反。果实发育过程中果胶含量呈下降趋势,果肉中表现较果皮明显;WSP含量随着果实成熟不断增加。随着果实的发育,木质素和HC含量急剧下降,且果肉中木质素和HC含量与Cx活性呈显著负相关;PG活性在果实发育前期较低,随着果实的成熟迅速增加,在11月初达到最大值后急剧下降。     

1-MCP处理对‘红阳’和‘徐香’猕猴桃保鲜效果的影响

以‘红阳’和‘徐香’猕猴桃为试材,研究了不同浓度的1-MCP处理对猕猴桃保鲜效果的影响。结果表明:1-MCP能够显著降低猕猴桃低温贮藏过程中呼吸速率、乙烯释放速率,延缓果实硬度、可滴定酸的下降以及前期可溶性固形物的上升。各处理浓度的猕猴桃均能正常后熟,但处理效果存在差异,浓度为0.50 mL/L 1-MCP处理对‘红阳’保鲜效果好,‘徐香’适宜的1-MCP处理浓度为0.25μL/L。     

两个耐贮性不同的红肉苹果株系果实硬度与香气成分及相关酶活性与基因表达差异分析

以‘红心7号’和‘红心9号’两个红肉苹果新品系的成熟果实为试材,检测贮藏期间硬度与香气成分及其相关酶活性与基因表达量。‘红心9号’苹果贮藏期间果实硬度极显著低于‘红心7号’,而乙烯释放速率极显著高于‘红心7号’;总香气物质、酯类含量及AAT1、AAT2和LOX基因表达量均极显著高于‘红心7号’,而在贮藏后期(90~120 d)果实醇类与醛类含量及HPL和ADH基因表达量均极显著低于‘红心7号’;PG、XET、PME、AM、α-L-Af和β-Gal等6个果实软化相关基因表达量及其酶活性大都极显著高于‘红心7号’。上述结果表明乙烯释放速率和酯类含量高及酯类生物合成和果实软化相关基因上调表达可能是导致‘红心9号’苹果贮藏期间果实硬度显著低于‘红心7号’的主要原因。香气物质种类、含量及其变化能作为果实贮藏品质评价的指标之一。     

基于EST库的猕猴桃脂氧合酶基因家族成员的克隆

利用猕猴桃EST库及相关生物信息学手段, 从果肉组织克隆了LOX基因家族成员6个, 命名为AdLox1-6。AdLox1、AdLox2、AdLox3和AdLox4 为全长cDNA, 编码区长度分别为2 739、2 595、2 739 和 2 709 bp, AdLox5和AdLox6为cDNA片段, 长度为1 359和1 557 bp。猕猴桃AdLox2和AdLox5氨基酸序列同源性最高, 约74%, 而AdLox3 和AdLox5 仅为49%。生物信息学分析表明, AdLox1、AdLox3、AdLox4 和 AdLox6可能具有132LOX活性, 在N端含有额外约60个氨基酸残基, 而AdLox2和AdLox5则属于92LOX类型。猕猴AdLox1与番茄TomLoxD具有最高氨基酸序列同源性(约80%) , AdLox2和AdLox5与TomLoxA高度聚类, 序列同源性分别为68%和75%, AdLox4和AdLox6与TomLoxC的氨基酸序列同源性分别为62%和63%, AdLox3与番茄LOX基因序列同源性低于55%。     

伞形花内酯处理对美味猕猴桃果实品质和青霉病抗性的影响

通过体外试验,研究伞形花内酯对扩展青霉（Penicillium expansum）生长的影响;同时以美味猕猴桃‘布鲁诺’（Actinidia deliciosa‘Bruno’）为材料,研究0.5 mg · mL-1伞形花内酯处理对猕猴桃果实品质和腐烂率,以及果实损伤接种P. expansum后病斑直径和抗病相关酶活性及其基因表达的影响。结果表明,伞形花内酯能够有效抑制P. expansum孢子萌发和菌落生长（体外）;延缓猕猴桃果实可滴定酸和维生素C下降,以及可溶性固形物含量上升,降低果实的腐烂率;降低贮藏后期果实损伤接种P. expansum后病斑直径,延缓棒曲霉素的积累,提高果肉几丁质酶（CHT）、β–1,3–葡聚糖酶（GLU）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）的活性,以及编码这些酶的基因相对表达量。结果表明伞形花内酯处理有助于保持猕猴桃采后果实品质,并诱导提高果实对青霉病的抗性。     

PG和LOX对采后番茄果实软化及细胞超微结构的影响

以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和LOX活性迅速增加 ,而果实硬度逐渐下降。呼吸强度和LOX活性高峰出现在发白期 (BR) ,而乙烯释放量高峰延迟至转色期 (TU)。PG活性随着果实的成熟逐渐增加 ,而LOX活性在发白期之后保持较高水平。分别用外源LOX和LOX加底物处理番茄组织切片 ,发现组织细胞的衰老进程加速 ,进而导致细胞膜瓦解、胞壁纤维松弛以及细胞器空胞化。PG和LOX都与果实的后熟软化有关 ,LOX与衰老的启动有关     

苹果果实质地软化过程中碳水化合物代谢及其关键酶基因表达的变化

以耐贮的富士苹果和不耐贮的金冠苹果果实为试材,研究果实发育和采后软化过程中糖和淀粉含量及其代谢相关酶活性变化,并分析其关键酶基因表达的变化。结果表明,淀粉含量和淀粉酶(AM)活性与果实硬度变化显著相关,且在富士和金冠果实间差异显著。随果实软化,金冠果实AM活性显著升高,而富士果实维持在较低水平,与金冠果实淀粉含量下降而富士淀粉含量低且稳定的变化规律相吻合;MdAM基因在金冠贮藏期的表达量迅速增加,显著高于富士。苹果果实蔗糖、果糖和葡萄糖含量均与成熟期果实硬度变化显著相关,贮藏期金冠果实蔗糖含量与硬度变化显著负相关,且SPS活性与硬度下降显著负相关,MdSPS基因大量表达,与此期SPS活性升高及蔗糖积累相一致。由此认为,淀粉降解参与了苹果果实软化,并与果实耐贮性关系密切,而且SPS在苹果果实蔗糖代谢和果实软化中起着重要作用,也与果实贮藏品质存在一定的相关性。     

海红果冻藏品质分析

以海红果特优品种"晋海1号"及内蒙古清水河县的2个实生品种为试材,通过测定可溶性固形物含量、可滴定酸含量、固酸比、出汁率以及果实硬度,研究了不同解冻方式、冻藏时间以及冻藏过程中的解冻次数对海红果品质的影响,以期为海红果冻果加工工艺的提升提供参考依据。结果表明:2种实生海红果的可溶性固形物含量高于"晋海1号",出汁率低于"晋海1号";随着冻藏时间延长,3种海红果的出汁率均逐渐升高;经水浴解冻海红果的可溶性固形物含量低于微波解冻和空气解冻;可溶性固形物含量随着解冻次数增加逐渐降低;与未经解冻海红果相比,经解冻海红果的出汁率显著提高。     

有机肥和生物炭施用对猕猴桃果实品质的影响

以4年嫁接树龄的“贵长”猕猴桃为试验材料,采用田间试验的方法,共设置4个试验处理,测定了不同施肥处理下猕猴桃的产量和品质指标,研究了生物炭和有机肥混施以及单施处理下对猕猴桃产量以及品质指标的影响,以期为“贵长”猕猴桃果实品质和产量的提升提供参考依据。结果表明:与对照相比,各施肥处理极显著提高了果实的产量及单果质量、可溶性固形物、可溶性糖、可溶性蛋白质、糖酸比和维生素C含量,显著降低了可滴定酸含量;通过主成分分析得到各处理下的果实品质综合得分,表现为2种肥的混合配施效果优于单施,而单施优于对照。生物炭和有机肥的施入可以提升猕猴桃的果实品质和产量,其中生物炭肥和有机肥混合施肥的处理施肥效果最佳。