越橘葡萄座腔菌枝枯病的病原菌鉴定

 通过形态学观察、诱导产孢、致病力测定和分子生物学研究,对引起辽宁地区越橘枝枯病 的病原菌进行鉴定,确定其为葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）。病原菌在越橘植株上接种后表现枝 条枯萎、木质部变色等症状,与田间自然发病植株一致;在PDA 培养基上菌落初期为白色,后转为灰黑 色,分生孢子纺锤形或梭形,无色,单胞,内含多个油滴;水琼脂 + 麦芽提取物、苹果枝条和苹果幼果 3 种病原菌培养方法均可诱导产孢,苹果幼果是诱导病原菌产孢的最佳基质。供试菌株LB1 的rDNA-ITS 和β-tubulin 基因序列与GenBank 中已有的Botryosphaeria dothidea 序列相似性分别达到99%与100%。     

樱桃番茄病害的识别与防治措施

1樱桃番茄莲格孢黑斑病1.1 症状番茄链格孢黑斑病又称钉头斑病、指斑病。主要危害樱桃番茄的果实和茎秆。果实上病斑近圆形,灰褐色、褐色,稍凹陷,有明显的边缘。一个果实上有1 至数个病斑不等,上生黑色霉状物,即病原菌菌丝、分生孢子梗和分生孢子。茎秆、叶柄染病产生长椭圆形褐色大斑,病斑上生有轮纹。     

萱草叶斑病的病原鉴定及其生物学特性

为明确在贵州发现的萱草（Hemerocallis fulva）叶斑病病原菌及其生物学特性，采用组织分离法和离体接种法分别对其病原菌进行分离和致病性测定，利用形态学及ITS基因序列分析对病原菌进行鉴定并对其生物学特性进行研究。鉴定结果表明：分离得到的萱草叶斑病病原菌菌株（编号为XCS369）的菌丝为灰白色、绒毛状，菌落中心隆起呈灰褐色，背面橄榄绿色，培养15 d表面可产生白色孢子粉；分生孢子光滑，无色，椭圆至长椭圆形。在以ITS基因序列构建的系统发育树中，XCS369与古巴炭角菌（Xylaria cubensis）聚于一支，且支持率达99%，结合形态特征与系统发育分析将其鉴定为古巴炭角菌。该菌菌丝最适生长温度为25 ~ 28 ℃，最适pH 7，在马铃薯葡萄糖培养基上生长最快，对碳源麦芽糖、氮源酵母浸粉的利用最高，菌丝生长对光照不敏感。     

山药漆腐叶斑病病原菌的鉴定及其生物学特性研究

在河南山药(Dioscorea opposita)主产品种‘铁棍山药’生产中出现了一种新的叶部病害,田间发病株率为6.6%。该病害主要发生在植株下部叶片,病斑圆形褐色,具同心轮纹,后期病斑上产生大量黑色孢子堆。对该病害的病原菌进行了组织分离培养和柯赫氏法则验证。其分生孢子座碗状或浅盘状,分生孢子梗呈笤帚状分枝,分生孢子梗顶端着生棒状产孢细胞;分生孢子长椭圆形、棒形、长卵形或梨形,透明无色,不分隔,两端钝圆,大小为1.7~2.5μm×4.9~6.8μm。病原菌菌落白色绒毛状,产生大量墨绿色胶质状分生孢子团,呈环状排列。用ITS通用引物对病原菌的基因组DNA进行扩增并测序(序列在GenBank的登录号为KY369166),同源性比对结果显示其与露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)的一致性达到99%,结合形态学鉴定结果,确定该病害的病原菌为露湿漆斑菌。病原菌的最适生长温度为30℃,分生孢子致死温度为52℃,pH 5~10之间该菌生长良好,光暗(12 h/12 h)交替最有利于病原菌产孢,菌丝生长的最适碳氮源为乳糖和丙氨酸,产孢的最适碳氮源为果糖和酵母。     

樱桃番茄病害的识别与防治措施

1樱桃番茄莲格孢黑斑病1.1症状番茄链格孢黑斑病又称钉头斑病、指斑病。主要危害樱桃番茄的果实和茎秆。果实上病斑近圆形,灰褐色、褐色,稍凹陷,有明显的边缘。一个果实上有1至数个病斑不等,上生黑色霉状物,即病原菌菌丝、分生孢子梗和分生孢子。茎秆、     

梨树主要病害的发生与防治

梨树病害种类较多，但发生普遍，比较严重的主要有：梨黑星病、轮纹病（包括干腐病）和腐烂病。一、梨黑星病在我国各梨产区均有发生，可引起早期落叶，削弱树势，被害果形成黑斑，甚至畸形龟裂，降低产量和品质。（一）症状可为害芽、新梢、花序、叶片和果实等部位。芽被害鳞片茸毛较多，表面生出霉层，鳞片开裂；被害新梢和花序基部先呈淡黄色斑，后长出黑霉，常引起花序枯萎。叶片发病初期，叶背主脉两侧、叶柄上也是先产生不规则形淡黄色斑，几天后生出黑色霉状物，即是病原菌的分生孢子梗和分生孢子。（二）病原菌是真菌中的子囊菌。分…     

西昌地区茄子白粉病病原菌的初步鉴定及分生孢子的萌发特性

对四川省西昌地区茄子白粉病病原菌进行了初步鉴定,并对其分生孢子萌发特性进行了研究。结果表明：西昌地区茄子白粉病病原菌的分生孢子单生,初生分生孢子顶端略尖,大小为（65.44～84.98）μm×（17.31～22.09）μm,次生分生孢子两端钝圆,大小为（69.92～83.32）μm×（15.82～21.53）μm|分生孢子梗不分支,2～4个细胞,长102.59～179.50 μm,未发现有性世代,初步鉴定为旱金莲内丝白粉菌〔Oidiopsis tropaeoli（Berger.）〕。分生孢子萌发特性研究表明,其最佳萌发温度为25 ℃,致死温度54 ℃|相对湿度90%以上分生孢子可以萌发,保湿条件下萌发率最高|光照对孢子萌发有一定抑制作用。     

葡萄霜霉病防治措施

1症状 葡萄霜霉病主要危害叶片,也能危害新梢、卷须、叶柄、花序、穗轴、果柄和果实等幼嫩组织。叶片发病初期呈半透明、边缘不清晰的水渍状不规则病斑,后扩展为黄色至褐色多角形斑,叶斑背面产生白色霉层（似霜物）,后期霉层变为褐色,多个病斑可联合成不规则大斑,叶片早落。新梢、卷须、叶柄、穗轴发病产生黄色或褐色斑点,略凹陷,潮湿时也产生白色霉层,     

食用菌制种常遇杂菌及其防治

制作食用菌菌种时,经常遇到的杂菌有青霉、根霉、毛霉、曲霉、木霉、细菌和酵母菌等。1.青霉:青霉是制种中最常遇的杂菌,它分布极广,菌落呈青绿色,其污染后培养基呈现绿色霉斑。青霉主要靠分生孢子繁殖,菌丝有横隔,菌丝顶端产生直立的分生孢子梗,并进一步分化成小梗,其上产生青绿色分生孢子,使整个菌丝呈扫帚状(图1)。     

蘑菇病害

9.1 木霉病害名称绿霉病;木霉斑病病原菌 Trichoderma 分类地位真菌门,半知菌亚门,丝孢纲,丝孢目,丛梗孢科生长环境很普遍地生长在堆肥上、覆土上以及少量地在谷粒和琼脂上。木霉时常寄生在培养下的蘑菇子实体上,可以抑制或缩小子实体。许多种生在木头上或木质组织上并且更多地生于泥炭内。木霉常常生长在盛肥料的木制容器内。喜欢生长在pH4-5.5(-6)环境中。宏观特征为棉絮状的霉,在覆土层或肥料上形成圆形菌落,早期灰色,生长迅速;不久由于孢子的产生呈林绿色。在麦芽糖琼脂培养基上,木霉     

柑橘落花落果的营养元素含量及其脱落损耗

 以成年纽荷尔脐橙、兴津温州蜜柑和沙田柚为材料,研究落蕾、落花和脱落幼果中的养分 含量及其脱落造成的损耗。结果表明,3 个品种的蕾和花营养元素含量为N 3.34% ~ 3.66%,P 0.26% ~ 0.31%,K 1.67% ~ 2.30%,Ca、Mg 和S 含量0.17% ~ 0.48%,Fe、Mn、Zn、Cu 和B 含量8.1 ~ 87.5 mg · kg^-1。 除花的B 含量显著高于蕾外,花和蕾的多数营养元素含量相近,且品种间差异小。与蕾和花相比,幼果 的N 和P 含量较少,N 和P 含量分别少21.8%和19.5%,但Fe 含量较多,其它营养元素含量变化不明显。 纽荷尔脐橙、兴津温州蜜柑和沙田柚单株脱落的蕾、花和幼果干物质量合计分别为3 016.3 g、3 533.6 g 和1 486.7 g,由此所造成的单株主要养分损耗为N 49.2 ~ 119.4 g、P 4.3 ~ 10.1 g、K 30.1 ~ 76.2 g、Mg 2.5 ~ 7.1 g、Zn 24.0 ~ 81.5 mg 和B 65.5 ~ 170.2 mg。兴津温州蜜柑和沙田柚均以落花的养分损耗最大,落蕾其 次,落果最小;纽荷尔脐橙则是落花和落蕾的养分损耗相近且远高于落果。品种间以兴津温州蜜柑脱落 的养分损耗最大,纽荷尔脐橙其次,沙田柚最小。因此,柑橘应控制过量开花,并在萌芽开花期及时补 充养分。     

脐橙果皮内裂发生的解剖结构和矿质营养元素变化

 以果皮内裂严重的和正常的枳砧‘纽荷尔’和‘卡拉卡拉’脐橙为材料,研究盛花后不同时期果皮厚度和果皮显微结构,以及果实和叶片N、P、K、Ca、Mg和S营养元素含量变化与果皮内裂的关系。结果表明,盛花后80 ~ 140 d果皮厚度下降,果皮厚度下降速率与内裂有关;盛花后80 d,两个品种内裂果园植株的果实海绵层细胞出现裂隙,盛花后140 d裂隙进一步扩大,在果皮横切面上肉眼可见裂口或小空洞,从果实外观可见陷痕;裂隙或小空洞的形成从解剖结构上可见细胞撕裂和细胞皱缩两种形式;两个品种在盛花后80、140及217 d,内裂果的果皮Ca含量均显著低于正常果,果肉Ca含量均低于正常果且多数达显著差异,N、P、K、Mg和S元素无明显变化规律;两个品种的内裂果园植株叶片Ca含量也均显著低于正常果园,而S含量显著高于正常果园,其余N、P、K和Mg元素无明显变化规律,显示Ca不足与果皮内裂有重要关系。     

土霉素处理对Valencia夏橙中淀粉及相关基因表达的影响

黄龙病(Huanglongbing,HLB)会造成柑橘韧皮部坏死堵塞,导致光合同化物运输不畅,淀粉大量积累。在感染HLB的4年生Valencia夏橙病株上分别注入0.1和0.2 g·株~(-1)土霉素(Oxytetracycline,OTC),90 d后运用qPCR检测,病株中HLB病原菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,Las)含量均明显降低,且0.2和0.1 g·株~(-1) OTC处理的效果相当。I2/KI显色及LM观测表明,0.2 g·株~(-1) OTC处理后植株的淀粉含量从注射前的18.58μg·mm~(-2)减少至90 d的5.24μg·mm~(-2),而0.1 g·株~(-1)的处理90 d仅降至11.88μg·mm~(-2)。高效液相色谱(HPLC)检测结果表明,注射后90 d内,试验用浓度0.2 g·株~(-1) OTC在植株体内可降解至200μg·kg~(-1)以下。基因表达结果表明,注射0.2 g·株~(-1) OTC后30和90 d,淀粉合成及分解相关基因表达量均下降,其中淀粉合成相关基因AGPase表达量下降最显著,这与OTC注射后30和90 d叶片内淀粉含量下降结果一致。     

纽荷尔和清家脐橙果实大量矿质营养元素含量与累积变化

在重庆北碚,以30年生枳砧清家脐橙和纽荷尔脐橙为材料,分析果实生长发育过程中N、P、K、Ca、Mg和S等6种大量营养元素含量和累积量变化。结果表明,果实生长发育过程中,纽荷尔和清家果实中N、P、Mg和S含量4月最高,Ca在10月最高,纽荷尔和清家K含量分别在9月和7月最高;Ca的主要累积时期,纽荷尔脐橙果实为6—7月和9—10月,清家脐橙果实为6月、8月和10月;除Ca外的其他大量矿质营养元素累积量较大的时期,纽荷尔和清家脐橙果实的总体上均为6—9月和11月,但清家脐橙累积最高峰一致出现在6月,纽荷尔脐橙累积最高峰至少推迟1个月左右。     

绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉菌的抑制活性及其定殖能力

为探讨绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉病的生防潜力,通过对峙培养和孢子萌发试验测定其对灰葡萄孢菌的抑制活性;进行离体试验和苗期试验测定其对番茄灰霉病的防治效果;采用平板稀释法测定其在番茄果实和叶片的定殖能力;并根据形态特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性对其进行鉴定。结果表明:HL5-4显著抑制灰葡萄孢菌的菌丝生长和分生孢子萌发,萌发抑制率为70.74%;在离体试验中,对番茄果实和叶片灰霉病的防治效果分别达到72.36%和59.85%,在盆栽试验中,对番茄苗期灰霉病的防治效果为62.88%;HL5-4在番茄果实和叶片保持一定的定殖密度,处理7d时能保持10~4和10~3 cfu·g~(-1)以上;HL5-4菌株鉴定为绿针假单胞菌(Pseudomonas choloeaphtis)。     

柑桔钙离子结合蛋白基因克隆及植物表达载体构建

以伏令夏橙叶片中分离的总RNA为模板,经RT-PCR扩增到一条约600bp、含钙离子结合蛋白基因(CsCaBP)的片段,将此片段克隆到pMD-19T中,经测序分析该片段与甜橙基因组中的对应序列完全吻合。设计2对带有限制性内切酶位点的特异性引物,以cDNA为模板扩增到2个CsCaBP片段,并连接到TA克隆载体pMD-19T上;经双酶切消化后,分别以正反2个方向插入到植物表达载体pFGC5941的查耳酮合成酶(CHSA)内含子两侧,构建成功CsCaBP的RNA干扰载体,但未获得转基因植株。将CsCaBP的正向片段定向克隆到具有CaMV35S启动子的pF-GC5941表达质粒上,构建成功CsCaBP过量表达载体。将构建好的表达载体导入根癌农杆菌LBA4404菌株,转化酸橙下胚轴,经PCR检测,获得9株过量表达转基因植株,荧光定量PCR验证发现目的基因在转基因植株中有不同程度的表达。     

柑橘SCoT分子标记技术体系的建立及其在遗传分析中的应用

 采用正交设计方法,对影响柑橘SCoT-PCR反应的Mg2+ 、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶及模板DNA用量等因素进行优化,建立了适于柑橘的SCoT标记分析体系。20 μL反应体系中含有：Mg2+ 1.5 mmol · L-1,dNTPs 0.35 mmol · L-1,引物0.625 μmol · L-1,TaqDNA聚合酶0.25 U,模板DNA 10 ng。最适退火温度为49 ℃。利用该体系对Wan2橘橙 × Li2甜橙的杂交后代及沙田柚四倍体进行分析,扩增条带清晰,扩增产物在150 ~ 2 100 bp之间。7个引物在Wan2橘橙、Li2甜橙及其18株杂交后代中共扩增出74条带,多态性条带48条,多态性比率为64.9%,在相似系数0.85处,18株杂交后代可聚为5类,表明其具有较丰富的遗传多样性;11个引物在4株沙田柚四倍体及其二倍体亲本中共扩增出84条带,其中多态性条带46条,多态性比率为54.8%,聚类分析显示5株沙田柚遗传相似系数在0.785 ~ 0.880,在相似性系数0.825处可分为3类,3株同源四倍体分别聚在不同的位置,四倍体材料均发生了不同程度的遗传变异。研究结果表明建立的柑橘SCoT体系结果稳定,重复性好,可为柑橘遗传育种提供新的技术支持。     

拮抗酵母菌对沙糖桔采后绿霉病的抑制作用

采用在NYDB上共培养酵母菌与绿霉菌Penicillium digitatum孢子、酵母菌防御接种沙糖桔果实后,挑战接种绿霉菌孢子的方法,研究了几株酵母菌对沙糖桔采后绿霉病的控制效果。结果表明,膜醭毕赤酵母Pichia membranaefaciens Hansen和深红酵母Rhodotorula rubra Demme Lodder显著抑制绿霉菌孢子萌发和芽管生长,有效减少沙糖桔绿霉病发生率及病斑数;添加2%NaHCO3可增强膜醭毕赤酵母的抗病效果,添加2%CaCl2对深红酵母的抗病效果有轻微的增强作用。4个拮抗剂组合均能提高沙糖桔果皮几丁质酶活性,以添加2%NaHCO3的拮抗菌制剂的几丁质酶活性最高。膜醭毕赤酵母和深红酵母可作为防治沙糖桔采后病害的拮抗菌,NaHCO3适合作为膜醭毕赤酵母制剂的添加剂,该制剂能有效地诱导几丁质酶活性增加,提高拮抗防病效果。