E.coli纤毛抗原K_(99)菌株电子显微镜观察试验

肠致病性埃希氏大肠杆菌(E.co1i)的粘附因子K_(99)抗原,是一种易热蛋白质,从形态上看是一种纤毛结构,这种纤毛可以粘附于小肠上皮细胞,使细菌在小肠中聚集产生肠毒素而致病。这种纤毛的致病作用越来越引起人们的重视,在兽医研究方面,现已发现猪的肠致病性大肠杆菌带有K_(88)、K_(99)和987P三种纤毛抗原,在引起新生仔猪腹泻     

K_(88)、K_(99)、F_(41)三价基因工程菌的构建

利用基因工程技术构建的带有K_(99)和F_(41)两种纤毛抗原基因的重组质粒与K_(88)抗原工程菌C_(84)的质粒转化同一受体菌,得到双质粒。同时表达K_(88)、K_(99)、F_(41)三种纤毛抗原的菌株。用小白鼠试验初步证实。该菌株生物学性质稳定,对动物安全,对K_(88)、K_(99)和F_(41)强毒菌的攻击具有较强的保护作用。     

K_(88)K_(99)工程菌基因质粒在动物体内外扩散性试验

K_(88)K_(99)双价基因工程菌,是一株人工构建的无肠毒素基因、丧失了病原性但仍保留产生 K_(88)、K_(99)两种保护性抗原基因的菌株,它具有优良的免疫原性和相当良好的安全性、稳定性,具备用于制备无毒活菌苗的良好条件。因此,我们在研究菌苗的工艺路     

河北某农场仔猪腹泻大肠杆菌K_(88)抗原菌株的分离与鉴定

自河北某农场分离的21株仔猪腹泻大肠杆菌K_(88)抗原菌株全部有致溶血作用,并对小鼠显示不同的致病性。其血清分布在8个O抗原组,其中O_8菌株占优势,并在省内首次分离到具有K_(88)抗原的O_8菌株3株。O_8菌株对氟哌酸、卡那霉素、新霉素很敏感,对喹乙醇不敏感。     

化学诱变剂和紫外线对K88抗原工程菌及产肠毒素性大肠杆菌质粒作用的比较

某些产肠毒素性大肠杆菌可致仔猪黄痢病,危害养猪业。猪源性产肠毒素性大肠杆菌有两种致病因子,其一为肠毒素,其二为粘附因子(即纤毛抗原)。后者有K_(88)、K_(66)、987P和F_(41)四个血清型,但以K_(88)纤毛抗原产生菌居多。现已知道K_(88)基因和肠毒素基     

仔猪大肠杆菌性腹泻3p—ELISA诊断试剂盒的研究——中间试制及检验总结

在仔猪腹泻中,约有40%由肠毒素原性大肠杆菌引起。肠毒素原性大肠杆菌产生二种致病因子,即肠毒素(LT、ST)和纤毛粘着素(纤毛抗原)。与仔猪腹泻有关的大肠杆菌纤毛粘着素主要有 K_(88)、K_(99)和987P,F_(41)较少见,且往往与 K_(99)在同一菌株上表达。由于仔猪腹腹泻病因的复杂性,给该病的防治带来了一定的困难。我们在先     

犊牛腹泻大肠杆菌二种新纤毛抗原菌株的分析鉴定

本报告用因子血清玻板凝集反应首次从国内分离的54株犊牛腹泻大肠杆菌中检出5株新表面抗原菌株,并用电子显微镜技术证实这种表面抗原为纤毛抗原。用玻板凝集反应、免疫扩散和免疫电源试验及电子显微镜技术对菌株进行分析鉴定的结果表明:5个菌株产生二种纤毛形态相同,但抗原性完全相别的纤毛抗原。其中2个菌株产生242菌株型纤毛抗原,暂标记为F242纤毛抗原;3个菌株产生293菌株型纤毛抗原,暂标记为F293纤毛抗原。二种新纤毛抗原菌株产耐热肠毒素(ST)性和部分动物红细胞的甘露糖抗性血凝特性测定表明:3株F293抗原菌产生ST,对豚鼠和兔红细胞具有甘露糖抗性血凝特性,而对绵羊红细胞不具有该特性;2株F242抗原菌对不产生ST,对豚鼠、兔和绵羊红细胞均具有甘露糖抗性血凝特性。     

大肠杆菌定居因子K_(88)抗原ELISA检测法

本文报告用ELISA双抗体夹心法检测大肠杆菌定居因子K_(88)抗原。K_(88)大质粒转化子和K_(88)基因重组子。结果说明此法灵敏度较高,特异性较好,可直接检测菌液,有快速、简便的优点,可以作为检测k_(88)基因克隆是否表达的一种筛选方法,亦可考应虑用于大肠杆菌k_(88)菌株的检测。     

大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原提纯及抗血清制备

采用加热法和盐析法对大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原进行了提取、纯化,并通过SDS—PAGE凝胶电泳对提纯效果进行了检验。将纯化的纤毛抗原免疫家兔,制备了K88、K99、987P纤毛抗原抗血清,用琼脂扩散试验检测了抗血清的效价。结果表明,纯化的K88、K99、987P纤毛为高纯度的纤毛抗原,其分子量分别约为26、18、20kD。K88、K99、987P抗血清的琼扩效价依次为1：32、1：32、1：128,且特异性高。本研究为K88、K99、987P纤毛抗原定量检测及产纤毛大肠杆菌菌株的鉴定奠定了基础。     

K_(88)抗原工程菌株构建中的电镜观察

在K_(88)抗原工程菌株的构建中,通过对供体菌、受体菌相接合菌的电镜观察发现,在接合菌C-84中,菌体表面长有纤细、柔韧的纤毛,与供体菌B-5所见相似.而在受体菌1548中,未见有纤毛,证明不含肠毒素质粒的K_(88)抗原,工程菌株的构建已经完成.     

仔猪黄痢和白痢的肠病原性大肠杆菌O、K抗原鉴定

肠病原性大肠杆菌是仔猪黄痢和白痢的病因之一。1980年我们通过肠毒素测定,业已证实致病性大肠杆菌在我省猪群中的存在。本文报道大肠杆菌中具有K_(88)、K_(99)的O_9、O_6、O_(149)菌株,是我省仔猪黄痢和白痢的主要致病菌群。     

吉林省猪源致病性E.coli K_(88~ )株的检测及两种检测方法的比较

病原性 E.coli K_(88)抗原的发现(Φrs-kov,1961)大大地推动了大肠杆菌病的研究。近年来,国内外学者就 K_(88)抗原的多种特性进行了大量的研究工作。现已查明:凡具有 K_(88)抗原的 E.coli 株均能吸附在小肠粘膜的绒毛上,并产生两种肠毒素,即热稳定肠毒素(ST)和热敏肠毒素(LT)而导致仔猪发生腹泻。因此,检测病原性 E.coli的 K_(88)抗原无疑对流行病学的调查和免疫学的防治研究起着重要作用。     

大肠艾希氏杆菌987p菌株的初步探讨

一、前言肠病原性E.Colj的987p纤毛抗原是促使细菌在仔猪肠道中定居的纤毛群之一,它与K_(88)、K_(99)抗原一样,是一种不耐热的表面抗原,并证明是一种粘着因子,能使E.Coli菌在仔猪粘膜表面上粘着定居,随之细菌产生肠毒素而引起仔猪腹泻发病。Nagy等于1976年报告了缺乏K_(88)抗原的肠病     

河南省仔猪腹泻病原学研究

从88例病猪分离到1177个菌株,对其中42例病猪的138个菌株,用自制的大肠埃希氏菌抗血清鉴定出O_8:K_(87),K_(88ac)血清型是引起河南省乳猪腹泻的优势血清型.调查了八个地区,其中七个地区分离到O_8群,说明分布很广,主要危害3～6日龄的初生乳猪.O_(141):K_(85ac),K_(88ac)和O_6:K_(2ac)在较小范围内流行,主要危害3～4日龄的新生乳猪。O_(139):K_(82)为引起70日龄左右的仔猪水肿病的血清型.大多数含有K_(88)抗原和能溶解绵羊红血球,有的能产生肠毒素,有较强的致病力。     

脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)产肠毒素菌株和非产肠毒素菌株的抗原特性

从腹泻犊牛(62株)、羔羊(2株)和猪(5株)的粪便中获得脆弱拟杆菌产肠毒素株(44株)和非产肠毒素株(25株)。利用微量全细胞凝集试验和凝胶双扩散试验检测,菌株对13株脆弱拟杆菌产肠毒素菌株制备的非吸收兔抗血清有反应。脆弱拟杆菌有多种抗原。根据凝集反应,44株产肠毒素脆弱拟杆菌(ETBE)中有37株(84%)组成13个血清群、25株非产肠毒素脆弱拟杆菌(non—ETBF)中有14株(56%)组成13个血清群中的4个血清群。与凝胶扩散试验的结果比较,大部分菌株对13株抗血清有不同的凝集试验反应模式,从 non—ETBF 中不能区分ETBF。脆弱拟杆菌抗原的异源性促进了个别菌株的变异,这种能力对将来的流行病学和毒力研究是有益的。从腹泻犊牛、羔羊和猪的粪便中分离的ETBF,属于专性厌氧菌。利用肠结扎试验,证明脆弱拟杆菌在犊牛和羔羊中产生一种肠毒素,当给予新生羔羊口服时,证明 ETBF是腹泻病原。根据凝集和凝胶扩散分析,脆弱拟杆菌人株含有多种抗原,许多人株含有热稳定多糖荚膜抗原,可作为一种肠道外感染的毒力因子,有些脆弱拟杆菌人株也含有纤毛。本研究的目的,是根据抗原的不同,区分腹泻家畜的 ETBF 和 non—ETBF 的血清群,是否能从 non—ETBF 中区分 ETBF。     

育成牛感染O142型大肠杆菌引起肠毒血症报告

从我场感染大肠杆菌引起肠毒血症的4头育成牛的空肠内分离出4株革兰氏阴性杆菌,经O抗原鉴定、纤毛抗原检查、ST肠毒测定及动物感染试验,证明分离的4株细菌均具有K_(99)、F_(41)两种纤毛抗原的产ST肠毒的O_(142)血清型致病性大肠埃希氏菌。     

大肠艾希氏杆菌K_(99)抗原菌株的分析鉴定

大肠艾希氏杆菌的K_(99)抗原和菌株的肠病原性有着密切关系,这种抗原最早是由Sojka所发现,他观察了许多牛、羊的病原菌株,虽然其“O”抗原不同,但具有一个发生交互反应的共同K抗原,标记为“KCO”     

大肠杆菌K88纤毛抗原的提纯和抗血清的制备

以5％绵羊血改良Minca琼脂筛选和克隆表达良好的K88^＋菌株，改良Minca琼脂培养获得K88菌液。用加热法及高速匀浆法使K88纤毛从菌体上脱下。饱和硫酸铵沉淀粗提，用Sepharose CL-4B凝胶过滤纯化K88抗原。提纯的抗原经SDS—PAGE电泳测定其分子量约为25000，且仅此一条蛋白带；与K88抗血清进行琼脂扩散试验只出现一条沉淀线。用提纯的抗原经多次免疫家兔制备了K88抗血清。抗血清在玻板凝集试验中只凝集K88菌株，不凝集K99，987P或F41菌株；在琼扩试验中，只与K88粗提抗原出现一条沉淀线，且效价为1：64，而不与K99，987P抗原出现沉淀线；在免疫电泳试验中，与无细胞K88纤毛液只出现一条沉淀线。鉴定结果表明，所制备的K88血清特异性强、效价高，可作为单因子血清用于凝集试验、琼扩试验等血清学试验，对K88菌株进行鉴定，对K88纤毛抗原进行定性和定量检测。     

大肠杆菌K_(88)-K_(99)抗原工程苗对仔猪黄痢的预防效果

为预防仔猪黄痢病,我们应用大肠杆菌K_(88)-K_(99)抗原工程苗在丽水市良种场进行了预防接种,取得了较好的效果,现简述如下。材料和方法一、菌苗:上海植物生理研究所生产的大肠杆菌 K_(88)-K_(99)抗原工程苗,批号     

大肠杆菌K_(88ac)与LT(A~-B~ )抗原基因质粒在猪霍乱沙门氏菌弱毒株中的表达

应用细菌质粒转化技术,将大肠杆菌K_(?)与LT(A~-B~ )抗原基因重组质粒转入猪霍乱沙门氏菌弱毒菌苗株中.对获得的其中8个转化子进行鉴定的结果表明,转化的细菌仍保持沙门氏菌的形态、生化及抗原特性,同时可稳定地表达K(?)和LT-B两种抗原.用微量间接血凝试验、抗甘露糖豚鼠红细胞凝集试验(MRHA)、ELISA等对转化菌表达的K(?)抗原进行了测定,用间接免疫溶血试验对其表达的LT-B抗原进行了测定.结果,这两种抗原在转化的细菌中均可高效表达.电镜下观察,转化的细菌在其表面形成菌毛样结构.这种转化细菌表现出猪霍乱沙门氏菌与产肠毒素性大肠杆菌的两种抗原特性,为这种双价工程菌苗的研制提供了有价值的候选菌株.本研究结果还表明,猪霍乱沙门氏菌弱毒菌苗株可作为基因转化的有效受体菌.