4种菌根真菌对五氯酚耐受性及其生理基础研究

通过纯培养的方法，研究了4种外生菌根真菌——美味牛肝菌(Boletus edulis)、褐环乳牛肝菌(Suillus luteus)、丝膜菌、(Cortinarrus russus)和厚环粘盖乳牛肝菌(Suillus grevillei)的生长效应、对五氯酚的耐受性，并采用点试方法对真菌氧化还原酶的产生情况进行了检测。结果表明，4种外生菌根真菌在MM培养基上的生长速率显著高于MMN培养基。4种外生菌根真菌对五氯酚均有一定的耐受性，厚环粘盖乳牛肝菌(Suillus grevillei)耐受性最高，其生长抑制率显著低于其它真菌。酶测试结果表明，厚环粘盖乳牛肝菌是4种真菌中氧化还原酶活性较强且酶种类多样的菌株，它表现出很高的过氧化物酶、多酚氧化酶和漆酶活性，是一种具有高效降解芳环结构污染物潜力的菌根真菌。4种真菌在生物量和“酸化效应”方面差异较大。厚环粘盖乳牛肝菌(Suillus grevillei)对五氯酚的高耐受性可能与其产酶特性和“酸化效应”有关。     

菌根真菌与樱桃苗建立共生组织的培养基筛选

[目的]筛选适宜菌根真菌与樱桃苗建立共生组织的培养基,为提高樱桃组培苗移栽成活率提供参考依据.[方法]在培养基为DE、1/2DE、1/4DE及1/8DE的樱桃组培苗瓶中分别接种纯化菌根真菌,接种30、40、50和60 d后分别测定樱桃组培苗根系的侵染率、株高、叶片酶活性、根系分枝数及组培苗成活率,筛选出适宜菌根真菌与樱桃组培苗建立共生组织的培养基.[结果]培养基为DE和1/2DE的樱桃组培苗在接种菌根真菌30和50 d后全部死亡,培养基为1/4DE和1/8DE的樱桃组培苗在接种菌根真菌60 d后仍保持20.0%和70.0%的成活率.接种菌根真菌30 d后,培养基为1/4DE和1/8DE樱桃组培苗的根系侵染率、根系分枝数、株高及叶片过氧化物酶活性逐渐增加,在接种菌根真菌后60 d达最大值.[结论]在组培苗培养过程中接种菌剂使其根系菌根化,实际上是组培苗、菌根真菌和培养基间复杂的相互反应结果.1/8DE可作为较适宜菌根真菌与樱桃组培苗建立菌根共生组织的培养基.     

云杉、冷杉外生菌根菌培养基筛选试验

云、冷杉外生菌根真菌与宿主植物是共生关系,在人工条件下很难模拟其生长发育所需营养物质和条件。所以菌根真菌适宜母种、原种培养基配方的筛选,是该课题重要技术支撑。经筛选试验,使用麸皮、玉米粉、高粱粉、马铃薯等天然基质的培养基,菌根真菌的生长远优于传统的无机盐类培养基。     

培养基对链格孢属（Alternaria Nees）真菌种级形态分类特征影响的研究

通过对链格孢属(Alternaria Nees)12个种在自然寄主、PDA培养基、1／4PDA培养基、水洋菜麦秆培养基和滤纸培养基上的测定表明：生长在自然寄主上的本属真菌形态特征典型，滤纸培养纸上的特征最接近自然培养基。分生孢子的着生方式，分生孢子隔膜，分生孢喙部形态和喙长与孢身长的比值等形态特征在不同培养基上生长相对稳定，可做为该属真菌形态分类的种级标准。     

钾对外生菌根真菌分泌氢离子及吸收氮磷钾的影响

利用无钾、低钾、中钾和高钾的液体培养基培养3种外生菌根真菌28d,研究了外生菌根真菌的生物量、氢离子的分泌状况以及真菌菌丝体内氮、磷、钾含量。结果表明,外生菌根真菌在中钾的条件下生长最好,无钾、低钾或高钾时生长受到抑制;在无钾和低钾时分泌氢离子的速率最高,有利于土壤中无效钾的活化;钾的供应水平对真菌体内氮、磷、钾的含量有不同程度地影响。     

不同氮源对铁皮石斛菌根真菌生长的影响

为了研究铁皮石斛菌根真菌对不同氮源的适应性,以碳酸铵、硫酸铵、硝酸铵、硝酸钾、尿素、牛肉膏、牛肉蛋白胨、鱼肉蛋白胨作为PDA培养基中的氮源,探讨其对3种铁皮石斛菌根真菌菌丝生长速度和干重的影响.结果表明,以牛肉膏、鱼肉蛋白胨、硝酸铵3种物质作为氮源时,各种菌根真菌的生长速度较快、干重较高.因此认为,牛肉膏、鱼肉蛋白胨、硝酸铵为适用于铁皮石斛菌根真菌的外源氮源.研究以期为优化铁皮石斛菌根真菌的培养条件以及生物菌肥的制备提供参考.     

3种锥栗外生菌根真菌培养条件的单因素优化

明确3种锥栗外生菌根真菌的最适培养条件,为锥栗外生菌根真菌进一步研究和生产应用奠定基础。采用固体培养方法,用十字交叉法测量菌落的直径,研究不同温度（15、20、25、30℃和35℃）、pH值（4.0、5.0、6.0、7.0、8.0）、碳源（葡萄糖、蔗糖、甘露醇、麦芽糖、可溶性淀粉）、氮源（KNO₃、（NH₄）2HPO₄、NH₄NO₃、蛋白胨、酵母膏）对3种锥栗外生菌根真菌生长的影响。结果表明,3种锥栗外生菌根真菌最佳生长条件差异不大,最适生长温度均为25℃,属中温菌;3种外生菌根真菌在pH4.0~8.0均能生长,鸡枞菌(Termitornyces albuminosus)和正红菇(Russula griseocarnosa)最适生长pH为6.0,橙黄硬皮马勃(Scleroderma citrinum)为7.0;3种外生菌根真菌的最适碳源均为甘露醇,最适氮源均为KNO₃。     

丛枝菌根真菌的快速繁殖方法研究

以小麦和高粱为寄主植物,以Glomus mosseae(GM)和Glomus etunicatum(GE)2种丛枝菌根真菌为菌种,采用盆钵加富培养法和双重培养法对丛枝菌根的快速扩繁方法进行研究。结果表明:在盆钵加富培养法中,高粱扩繁4个月后,接种GM和GE的侵染率分别为51.5%和53.3%,侵染效果好。在双重培养法中,培养30 d后,小麦为寄主植物时,接种GM的Hoagland培养基侵染率为75.5%,显著高于其他方法,小麦接种GM后Hoagland培养基适宜作为扩繁基质;高粱为寄主植物时,接种GE的水琼脂培养基的侵染率最高,为72.0%,高粱接种GE并选择水琼脂培养基效果好。双重培养法培养时间短、侵染率高,但易污染且要求操作技术高,适宜在室内研究;盆钵加富营养法培养时间长,但成本低、易操作,适宜在生产中推广。     

孑遗植物双蕊兰菌根真菌培养条件的优化

以兰科孑遗植物双蕊兰(Diplandrorchis sinica)菌根为材料,通过分离、纯化、培养其菌根真菌,根据正交试验设计原理,利用正交试验方法筛选温度、碳源、氮源和培养基p H等培养条件建立双蕊兰菌根真菌培养体系。结果表明,双蕊兰菌根真菌菌落白色或浅黄色,呈均匀辐射状向外生长;生长面有稀松或较丰富的气生菌丝,带有透明液滴。通过对菌落生长速率的测定与分析,4种因素的最佳综合水平为:碳源为半乳糖,浓度为2%;氮源为硝酸铵,浓度为0.5%;p H为6;温度为25℃。菌落生长速率随着天数的递增而以较快的速度下降,第7天之后趋于稳定。     

两种丛枝菌根真菌扩繁比较及其对玉米促生的研究

以摩西球囊霉(Gm)和根内球囊霉(Gi)为供试菌种,利用丛枝菌根真菌对寄主植物的偏好性,采用寄主植物间作的培养方法,比较了两种丛枝菌根真菌扩繁效果。结果表明,在玉米、万寿菊和三叶草间作的盆栽培养条件下,接种Gm后的处理促进寄主生长和营养吸收方面效果要好于接种Gi,此外Gm的菌根侵染率、孢子密度及菌丝密度均高于Gi,表明在相同的植物间作培养条件下,Gm较Gi促进植物生长的效果更好,同时Gm的生长速度和扩繁增殖率也快于Gi。     

重金属汞对外生菌根真菌钾吸收的影响

为了研究重金属汞对外生菌根真菌钾素吸收的影响,以4种外生菌根真菌(Pisolithus tinctorius715和Lactar-ius deliciosus的3个株系)为材料,在4种汞浓度处理0,5,50,150μmol/L的Pachlewski液体培养基中培养3周,测定它们的生物量和菌丝中钾含量。结果表明,4种供试菌种间的生物量差异显著,而不同汞浓度处理对各供试菌种的生物量变化无显著影响;4种供试菌种间的钾含量差异显著,不同汞浓度处理对各供试菌种菌丝中的钾含量变化影响也显著。     

铝胁迫下钙信号抑制剂对外生菌根真菌分泌草酸的影响

【目的】探讨铝胁迫条件下,外生菌根真菌分泌草酸的调控机理,为减轻树木铝害、指导抗（耐）铝菌株的筛选和保持森林健康奠定理论基础。【方法】以从强酸性森林土壤中分离获得的菌株Suillus luteus（Sl 08和Sl 14）、Boletus sp.（Bo 15）为材料,采用液体培养的方法,研究铝胁迫下外生菌根真菌的生长与草酸分泌的关系,以及钙信号抑制剂对抗铝菌株草酸分泌的影响。【结果】在培养液铝浓度为0.4 mmol•L-1时,Sl 14的生物量显著降低,Sl 08 和Bo 15在铝浓度达到1.2 mmol•L-1时,生物量才受到显著抑制。说明Sl 14对铝敏感,Sl 08 和Bo 15的抗铝性较强。同时,Sl 14的草酸分泌量很低,不随铝浓度的增加而变化;Sl 08 和Bo 15在铝浓度为0.2—0.8 mmol•L-1范围内,随铝浓度提高草酸分泌量显著增加,说明草酸分泌是外生菌根真菌拮抗铝胁迫的重要因子。无铝培养时,钙离子通道抑制剂异搏定（VP）、内膜钙通道抑制剂钌红（RR）、钙离子螯合剂乙二醇双（2-氨基乙基）四乙酸（EGTA）、钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪（TFP）对Bo 15分泌草酸无显著影响,但VP、TFP和EGTA均不同程度地显著抑制Sl 08分泌草酸。说明在无铝时,Bo 15未启动钙参与诱导草酸分泌的信号转导,而Sl 08则启动了钙参与的信号转导。在铝胁迫条件下,钙信号抑制剂都不同程度地显著降低Sl 08和Bo 15分泌草酸。说明铝诱导下,Bo 15和 Sl 08的草酸分泌均受到钙信号转导的调控。其中,Bo 15分泌草酸对TFP敏感;而Sl 08分泌草酸对RR和TFP敏感,草酸分泌量减少最多。【结论】在铝胁迫条件下,钙信号是介导外生菌根真菌分泌草酸的信号因子。     

美味牛肝菌合成漆酶的发酵条件研究

[目的]研究美味牛肝菌合成漆酶的最适发酵条件。[方法]采用液体深层培养法研究不同碳源、氮源、pH、温度等因素对美味牛肝菌产酶量的影响。[结果]美味牛肝菌合成漆酶的最适发酵条件为：葡萄糖2.0%,牛肉膏0.5%,KH2PO4 0.4%,MgSO4.7H2O 0.3%,微量元素溶液8.0%,维生素B1 0.003%,pH 4.5,温度28℃,培养时间为8 d。[结论]在此条件下,漆酶产量最高,为71.27 U/ml,该研究为美味牛肝菌漆酶的开发应用提供了科学依据。     

桑黄真菌优势菌株筛选研究

本文以确定分属P.baumii及P.linteus种的2类桑黄真菌的11株菌株为研究材料,分别测定其生长速度、生物量、胞内和胞外多糖含量、淀粉酶、羧甲基纤维素酶、纤维素酶、漆酶、愈创木酚酶、多酚氧化酶活性及胞外蛋白质含量,明确不同菌株在生长性能方面的差别,筛选优势菌株.结果表明,桑黄菌株PB0802生长速度最快,菌丝生物量、胞内和胞外多糖产量优于其它菌株,且PB0802淀粉酶、羧甲基纤维素酶、纤维素酶活性及胞外蛋白质含量显著高于其它菌株,确定PB0802为优势菌株.     

元蘑液体菌种的优化培养

[目的]筛选元蘑液体菌种培养基配方,优化液体菌种培养工艺。[方法]通过设置不同的液体培养基配方、不同的接种条件(包括不同菌龄、不同接种量)和不同的培养条件(包括不同转速、不同培养时间),以菌丝体生物量、菌丝球密度及菌丝球形态为指标进行元蘑液体菌种的筛选。[结果]液体培养元蘑菌种的最佳培养基配方为:200 g马铃薯、150 g稻草粉、10 g玉米粉、20 g葡萄糖、3 g蛋白胨、2 g酵母膏、维生素B_11片;最佳接种菌龄为5 d;最佳接种量为9%;最佳培养转速为160 r/min;最佳培养时间为7 d。[结论]元蘑液体菌种经过优化培养,菌丝体生物量、菌丝球密度及菌丝球形态都有很大提高。     

九株绿僵菌液体振荡培养初步研究

本文对九株绿僵菌液体振荡培养的研究表明，不同氮源和菌株对菌丝生长量和液生孢子产孢量影响显著．某些绿僵菌菌株可以微循环产孢形式直接产生液生分生孢子，但微循环产孢现象发生与否可能与菌株有一定的相关性．     

盆栽桧柏幼苗接种五种不同菌根真菌的比较研究

本文针对内蒙及三北地区主要园林绿化树种桧柏进行了盆栽菌根真菌接种试验。通过试验证实：兰丝膜菌（Ｃｏｔｉｎａｒｉｕｓｃａｅｒｕｌｅｓｃｅｎｓ）对桧柏幼苗生物生长量的促进作用十分明显：高生长量比对照提高５２％,生物量提高８８％;其它供试菌种各项测试指标均相对较差。由此初步认为兰丝膜菌为桧柏的一个优良共生菌根真菌。     

6种培养基对不同来源白术白绢病菌培养的影响

6种培养基对不同来源白术白绢病菌培养的影响研究结果表明,6种培养基上,4个不同来源地菌株菌丝生长和菌核产量存在一定的差异,尤其是菌株LA20,在几种供试培养基上长势均较其他3个菌株差,产核量也最少。比较几种培养基上供试菌株生长状况和产核量的关系发现,供试4个菌株产菌核量与菌丝的生长状况呈一定的正相关关系,即在同一个培养基上菌株菌丝生长越好,产核量也越多。     

白桦幼苗外生菌根的初步研究

在温室花盆中播种白桦 (B .platyphyllaSuk .)种子获得白桦幼苗 ,并对幼苗接种外生菌根真菌进行菌根合成试验。所用的外生菌根真菌有 :灵芝 (GanodermalucidumKarst)、铆钉菇 (Gomphidiusviscidus)、厚环乳牛肝菌(Suillusgrevillei)、褐环乳牛肝菌 (S .luteus)、彩色豆马勃 (Pisolithustinctorius)、美味牛肝菌 (Boletusedulis)、赭丝膜菌 (Cortinariusrussus)、土生空团菌 (Cenococcumgeophilum)。接种两个月后 ,在灵芝、铆钉菇、厚环乳牛肝菌、褐环乳牛肝菌、彩色马勃和美味牛肝菌接种的白桦幼苗上观察到了外生菌根 ,而赭丝膜菌和土生空团菌接种的白桦幼苗上未形成外生菌根。进一步对形成的外生菌根做组织切片观察 ,在细根皮层细胞间均形成明显的哈蒂氏网 ,证实了6种外生菌根真菌与白桦幼苗的共生关系     

外生菌根真菌鳞柄白鹅膏的纯培养研究

鳞柄白鹅膏（毒伞）属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、鹅膏科、鹅膏属,是一种有毒蘑菇,能与山毛榉形成外生菌根,作者开展了鳞柄白鹅膏的纯培养研究,考察并首次报道了不同培养基种类,C、N源、pH值及温度条件对人工培养的影响。