猪呼吸道冠状病毒研究进展

综述了猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的病原学意义、分子生物学特性、与传染性胃肠炎病毒TGEV的鉴别诊断、PRCV对TGEV的免疫保护作用等四个方面的研究进展。     

猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒荧光RT-PCR鉴别检测方法建立与应用

本研究根据Genbank登录的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因和S基因保守区序列设计合成了两对引物和探针,通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测TGEV的方法。该方法能有效地鉴别序列密切相关的猪传染性胃肠炎病毒与呼吸道冠状病毒。与常规RT-PCR试验比较表明,所建立的荧光RT-PCR检测技术快速、敏感,检测时限3个小时以内,具有很好的特异性和重复性。通过对39份临床样品进行检测,结果表明所建立的检测方法直接检测样品中猪传染性胃肠炎病毒。     

猪流行性腹泻研究概况

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种猪肠道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征。70年代初首先发现于英国和比利时。1976年，暴发了类似猪传染性胃肠炎（TGE）的急性腹泻，而且已排除了TGEV作为病原的可能．也不是其他已知肠致病性病原．Wood把这次暴发的腹泻称为腹泻Ⅱ型，以便与70年代初发生的腹泻（称为Ⅰ型1区别。1978年Pensacrt等发现一种类冠状病毒的病原与Ⅰ型腹泻暴发有关。实验表明Ⅰ型和Ⅱ型腹泻的发生是由相同的冠状病毒引起的．     

应用套式PCR检测和区分猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的试验

根据猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的S基因核苷酸序列，设计合成了2对引物，以猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒细胞培养物为模板，进行PCR特异性片段扩增，猪传染性胃肠炎病毒扩增片段大小为886bp，猪呼吸道冠状病毒扩增片段大小为214bp。建立的套式PCR经过特异性、敏感性试验及对临床送检样品检测，证明本法具有快速、特异和高度敏感的特点。     

干扰素诱导跨膜蛋白1对猪源冠状病毒吸附宿主细胞的影响

为探索干扰素诱导跨膜蛋白1（interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1）对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus,TGEV）高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因（interferon-stimulated genes,ISGs）的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1^-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验（IFA）及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1^-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1^-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1^-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。     

常州地区猪传染性胃肠炎和呼吸道冠状病毒病血清学调查

为了解本地区猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和呼吸道冠状病毒（PRCV）感染情况,采集生猪规模养殖场、散养户和不同来源的（本地和省外）屠宰场血清样品共308份,用TGEV和PRCV抗体鉴别诊断ELISA试剂盒进行检测。检测结果显示,TGEV抗体阳性率为2.92%,阳性样品都来自一个规模猪场,并与疫苗免疫有关;PRCV抗体总阳性率为27.92%,其中规模场阳性率11.93%,散养户阳性率35.96%,本地来源的屠宰场样品阳性率28%,省外来源的屠宰场样品阳性率45%。     

猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒一步法双重RT-PCR检测方法的建立与应用

本研究旨在建立一种用于临床腹泻病例中猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）快速检测的一步法双重RT-PCR方法。根据GenBank中收录的PEDV和TGEV的基因序列,分别设计两对特性引物,经最佳反应条件的优化和选择,结果显示,该一步法双重RT-PCR检测方法能同时特异性扩增PEDV和TGEV,该方法可检测到稀释度1×10^-5的疫苗毒。应用本方法检测2015年度实验室收集的疑似样品,PEDV阳性率为100%。本研究建立的方法快速、敏感性高、特异性强,可用于临床PEDV和TGEV的快速检测及流行病学调查。     

猪冠状病毒感染

冠状病毒属(Coronavirus)病毒颗粒略呈球形,直径约80-220nm,因其外被囊膜,且囊膜纤突规则地排列成皇冠状而得名。冠状病毒的基因组为单分子线状正股单链RNA,大小27-32kb,是已知RNA病毒基因组     

猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒二重PCR检测方法的建立

通过对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因和猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因进行序列分析,本试验利用DNAStar软件分别设计2对特异性引物,扩增片段长度分别为299和437 bp,建立一种针对TGEV和PEDV感染的二重PCR鉴别诊断方法.该方法能同时检测到TGEV和PEDV,而对猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)等均无扩增,其检测TGEV、PEDV的极限为10⁴ 拷贝/μL;用该方法对临床收集的68份疑似病毒性腹泻仔猪粪便和肠道组织样本进行检测,结果表明本试验建立的二重PCR方法具有特异性强、灵敏度高等特点,能用于临床诊断及流行病学调查.     

猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是80年代后期新发现的一种严重危害养猪业的传染病。临床上以妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。PRRS于1987年在美国首次发现临床     

猪繁殖与呼吸综合征检测技术综述

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是80年代末期出现的一种新病。美国1987年首次报道了这种不明原因的病毒性疾病,1995     

猪生殖--呼吸道综合征(PRRS)的诊断与防制

1987年在美国北卡罗来纳州、明尼苏达州以及衣阿华州等地的猪群中爆发了一系列令人震惊的"流产风暴",特征是妊娠母猪发生晚期流产、早产、死胎和木乃伊胎,以及仔猪出现呼吸道病和高死亡率.由于该病前所未闻且病原不明,故被称为"猪神秘病"(MSD)[1-4].其后,加拿大报道了类似的病症[5].1990年冬,欧洲开始流行MSD,首先在德国出现[6].继而,在荷兰、西班牙、比利时、英国、法国等养猪业较发达的欧洲国家陆续爆发了本病[7-10].     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起,以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道综合征为主要特征。PRRSV具有不断变异的能力,毒力更强的新型PRRSV毒株不断出现。2006年我国就出现了美洲型PRRSV变异株,严重危害着我国养猪业。为了更好地认识猪繁殖与呼吸综合征在我国的发生与流行,对PRRS的病原学、流行病学、致病机制、遗传变异、诊断与控制技术等方面的研究进展进行综述。     

猪繁殖与呼吸综合征

综述了猪繁殖与呼吸综合征,包括病原PRRSV病毒的病原特点、流行病学、临床症状及诊断方法和防治措施等六方面。介绍了该病的临床诊断、病理学诊断和血清诊断方法及病毒分离技术,同时提出了该病的防治措施。     

猪繁殖与呼吸综合征的研究

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的高度传染性病毒病。笔者就PRRS病毒的生物学特征、理化特性、基因组结构蛋白、免疫学特征以及疫苗等方面作一综述。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究概况

猪繁殖与呼吸综合征是一种引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状的急性热性接触性传染病。该病是威胁养猪业的主要传染病之一,给养猪业带来极大危害。目前对该病缺乏有效的治疗手段,疫苗免疫接种是主要的防控措施。尽管市场上的灭活疫苗和弱毒活苗具有一定的保护作用,但都存在一定局限性。基因工程疫苗具有生产工艺简单,安全高效等优点,但仍处于实验室研究阶段。论文对猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展进行综述,以供参考。     

PRRS的病原学和免疫学研究进展

本文从PRRSV的分类地位及分型、形态特征、抵抗力、培养特性、基因组结构、亚基因组RNA、结构蛋白以及PRRSV对猪感染的免疫应答、抗原性和疫苗研究等方面进行了较详细的综述     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征的调查报告

为了解2011年盘锦地区免疫猪群中高致病性猪繁殖与呼吸综合征的免疫效果和感染状况,采用ELISA和荧光定量RT-PCR方法分别检测了本年度1-12月采集到的2160份猪血清和120份猪组织样品。结果表明,受检的猪组织样品中均无高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原;大洼县、盘山县、兴隆台区、双台子区猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为82.2%、81.1%、78.8%、81.1%;种猪场、商品代猪场、散养户的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为90%、81.3%、75%。从总体来看,2011年盘锦地区的猪繁殖与呼吸综合征免疫状况良好,无猪繁殖与呼吸综合征疫情发生。