花生体细胞胚发生及植株再生

以花生优良品种四粒红成熟种子胚轴为外植体,诱导体细胞胚发生并获得了再生植株。将胚轴切成小段,接种于附加40 mg/L的MS培养基上诱导胚性愈伤组织,愈伤组织转移至2,4-D 20 mg/L的MS培养基上形成体细胞胚。体细胞胚发生率达到66.67%;体细胞胚在BA浓度逐渐降低的MS培养基上培养,发育成完整植株。     

龙牙忽木体细胞胚状体发生及植株再生

龙牙忽木叶柄培养诱导性胚性愈伤组织,进一步分化形成体细胞胚状体,并发育成完整植株。初代培养以MS＋BA＋NAA培养顶芽,当芽萌发后取幼嫩叶柄在含有2,4－D的MS培养基上进行愈伤组织诱导,将胚性愈伤组织继代培养,成熟的体细胞胚状体经分化形成完整植株。     

苜蓿组织培养和再生体系研究

以农菁一号苜蓿和肇东苜蓿无菌苗幼叶和茎段为外植体,在含6-BA和NAA的MS培养基中诱导出愈伤组织,并通过外植体直接再生途径和胚性愈伤组织再生途径获得再生芽。在含有IBA的1/2MS培养基诱导再生苗生根。     

铁皮石斛离体根尖经体细胞胚再生植株研究

以铁皮石斛离体根尖为外植体,研究了在不同培养条件下离体根尖经愈伤组织形成体细胞胚及直接产生体细胞胚再生植株的细胞学过程,认为铁皮石斛类原球茎是单细胞起源的真正体细胞胚.     

新疆陆地棉体细胞胚状体的发生和植株再生

以新疆陆地棉品种下胚轴为外植体，在含有４种激素（２，４－Ｄ、ＫＴ、ＮＡＡ、ＩＡＡ）不同组合的培养基上进行愈伤组织诱导，通过对体细胞胚胎发生的悬浮培养条件与植株再生各因子的比较研究，获得了陆地棉新陆中２号、新陆早１号两个优良栽培品种的体细胞胚胎的发生，体细胞胚经固体或液体培养，均可萌发，萌发的胚在成株培养基上形成了具有根、芽的完整再生植株。     

中国沙棘体细胞胚胎间接发生与植株再生

以中国沙棘组培苗茎尖为外植体,在1/4 MS基本培养基上,对愈伤组织、胚性愈伤组织及体细胞胚胎进行诱导,探讨植物生长调节剂配比对中国沙棘愈伤组织、胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。结果表明:在KT 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L的最佳组合中,暗培养20 d后,愈伤组织的诱导率达到90.10%;暗培养30 d后,胚性愈伤组织的诱导率达到77.67%;将胚性愈伤组织转移到新鲜诱导培养基上,光培养20 d,平均体细胞胚发生数达到15.48。为了得到完整的再生小植株,将胚状体转移到不含任何生长激素的体细胞胚发育及植株再生培养基上,分析了KT和白砂糖不同浓度的组合对小植株再生的影响。结果发现:WPM + KT 0.05 mg/L + 白砂糖 20 g/L + 琼脂粉 6.5 g/L + CH 0.5 g/L处理上的植株再生率达到60.30%。该研究建立起了完整的中国沙棘体细胞胚胎间接发生的再生体系。      

玉米组织培养和植株再生的研究现状

随着植物基因工程的发展，玉米的遗传转化已由理论研究转向应用研究，玉米组织培养是遗传转化中的一个基础而重要的环节，论述了近年来玉米组织培养及植株再生的研究进展，影响因素以及存在的问题和解决办法。     

魔芋块茎组织培养及植株再生

采用野生魔芋(Amorphophallus albus)块茎为外植体,经消毒处理,以MS培养基为基本培养基,在不同生长调节剂组合的培养基上进行组织培养试验。结果显示,在MS 1.0 mg/L NAA 2.0 mg/L 6-BA培养基上容易诱导愈伤组织,诱导率为47%±6.73%;在MS 1.0 mg/LNAA 1.0 mg/L6-BA培养基上愈伤组织容易增殖和分化出不定芽。     

马铃薯根组织培养与植株再生

利用马铃薯温室生长幼芽和组培根组织进行了以MS为培养基、附加不同种类和浓度生长素和细胞分裂素组成的8种培养基,在散光和黑暗条件下培养诱导愈伤组织,在3种分化培养基上培养分化再生植株的试验。结果表明,青薯5号和青薯8号温室生长幼芽根组织接种MS＋2,4-D 2mg/L＋BAP 3mg/L＋NAA 0.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L培养基上散光条件下培养45-90d产生愈伤组织,诱导率为0.024%;青薯5号愈伤组织接种1/2MS＋2,4-D 0.5mg/L＋BAP 2mg/L＋KT 2mg/L＋GA30.5mg/L＋ZT0.2mg/L＋蔗糖20g/L＋琼脂7g/L培养基上培养80d分化出再生植株,分化率为6.25%,再生植株切成一叶茎段接种于MS＋BAP 0.1mg/L＋IAA 10mg/L＋GA30.1mg/L＋白糖30g/L＋琼脂6g/L培养基上培养3周长成株高8-10 cm、叶7-10片、叶色深绿和根系发达的小植株。     

萝藦的组织培养与植株再生研究

以具有有利变异性状萝藦茎上的生长点为外植体,以不同浓度的BA、IAA、NAA、2,4-D、GA的MS、1/2MS和1/3 MS为基本培养基,进行了芽伸长生长培养、芽分化培养和试管苗生根培养研究.结果表明:1/2 MS+IAA 0.2mg/L是促进萝藦培养芽伸长生长的理想培养基;MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.5 ms/L是萝藦芽分化培养的理想培养基;1/3 MS+IAA 0.5 mg/L是萝藦试管苗生根培养的理想培养基.     

大岩桐的组织培养和植株再生

大岩桐为苦苣苔科、苦苣苔属的多年生肉质草本植物,春末至秋初开花.大岩桐原产巴西,早已广植于世界各地,是著名的温室盆栽花卉.     

丹参的组织培养及植株再生

丹参为中国重要中草药,临床上广泛用来治疗心血管疾病。研究丹参的组织培养和植株再生。结果表明,在幼茎、幼叶、花蕾等3种外植体中,幼茎为最佳外植体;6-BA,NAA或2,4-D不同激素组合中,以MS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-DO．5mg／L为最佳的愈伤组织诱导培养基,MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L为最佳的芽诱导培养基;IAA,IBA和NAA3种激素中,以1／2MS＋IBA0．5mg／L为最佳的丹参试管苗生根培养基。     

陆地棉胚性愈伤组织诱导和植株再生

以陆地棉“泗棉３号”、“北元２０３１”、“鲁９５５４”为材料进行全固体体细胞培养，获得了胚性愈伤组织和再生植株。起始愈伤组织阶段，用含２，４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ，ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ和２，４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ，ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基效果较好；进入胚性愈伤组织诱导阶段，在含ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ，ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上胚性愈伤组织诱导频率较高。     

玉米(Zea mays L.)体细胞胚状体的发生和植株再生

在 mMSA、mMSB 和 N_6C 三种培养基系列中分别培养11个玉米自交系的未成熟胚,其中10个系的幼胚盾片能诱导产生胚性愈伤组织和胚状体,并能再生植株。试验结果表明,适当调节培养基系列中不同培养基的蔗糖浓度能有效地促进胚状体的发生。通过扫描电镜观察了玉米体细胞胚状体的形态发生过程。部分再生植株移栽成活并结实。再生植株当代(R_0代)均有不同程度的形态变异。所观察的再生植株下一代(R_1代)根尖细胞染色体数目均为20条。文章对影响玉米体细胞胚状体发生的因素进行了讨论。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

湿地松及其杂种的体细胞胚胎发生与植株再生

【目的】明确适合湿地松Pinus elliottii及其杂交种的体细胞胚胎发生条件,建立体胚成熟萌发的技术。【方法】以2016年6月采集的2个湿地松家系(EE1,EE2)、2个湿地松杂交种家系(EC,EH)的未成熟合子胚(含胚乳)为材料,从诱导、增殖、成熟到萌发配制3个系列培养基,比较外植体采集时间、家系、基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。用显微镜进行胚性愈伤组织鉴别后,进一步挑选诱导形成的胚性愈伤组织进行增殖、成熟、萌发,最终获得再生植株。【结果】湿地松及其杂交种合子胚的发育进程可划分为8个阶段,阶段Ⅱ、Ⅲ为未成熟胚,适合体胚发生,EC最早出现阶段Ⅲ合子胚。外植体诱导产生具有胚性胚柄团(ESM)结构的胚性愈伤组织,可进一步增殖。诱导培养基对愈伤组织形成及胚性愈伤组织占比具有较大影响,3种诱导培养基(T1、T2和T3)产生愈伤组织效率最高的为T1培养基(49.0%),胚性愈伤组织所占愈伤组织的比例最高为T2培养基(22.4%)。培养基配方的诱导率存在基因型间的差异,T1培养基整体诱导率低;T2培养基对家系EE1诱导率最高,为5.82%;T3培养基对参试材料均能诱导成功,且平均诱导率最高,为3.75%。随采样时间延后,家系EE1、EH的体胚诱导率逐渐增加,家系EE2、EC的体胚诱导率则随采样时间延后逐渐降低。体胚诱导率与合子发育阶段结果基本一致,阶段Ⅲ合子胚均出现较晚,前期诱导率低。胚性愈伤组织继代24次以后,胚活性逐渐降低。成熟培养基T1S和T3S可完成胚的成熟,平均每克成熟培养基分别成熟23.3和15.9个子叶胚,萌发率为32.1%,移栽保存率为47.8%。【结论】诱导培养基T3对参试家系均能诱导成功,T3具有较广泛适用性,各家系在阶段Ⅲ合子胚出现时表现出较大的诱导率,阶段Ⅲ合子胚可能为体细胞胚发生的最佳诱导阶段。建立了湿地松及其杂种体细胞胚发生方法并形成了再生植株。     

细叶百合组织培养植株再生

以细叶百合的鳞片和花丝为外植体,通过两种不同的发生方式,成功获得再生植株,并建立了细叶百合两种外植体的再生体系。结果表明:鳞片可以通过器官直接发生途径再生,其最适诱导培养基为MS+NAA0.5mg·L-1+6-BA1.5mg·L-1;花丝通过愈伤组织间接器官发生途径再生,诱导愈伤组织的最适培养基为MS+2,4-D2mg·L-1+KT2mg·L-1,诱导愈伤组织产生不定芽的最适培养基为MS+NAA0.5mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1;最适继代增殖培养基均为MS+NAA0.2mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1;最适生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L-1。     

枸杞体细胞胚胎发生及植株再生的研究

以甘肃农业大学林学院实验基地内“宁杞 2 号”枸杞为材料,幼果用 0.1 % HgCl2进行消毒,在无菌条件下取出未成熟胚进行诱导,在胚成苗后进行继代和生根培养。培养结果表明:以 MS 为基本培养基,附加 6-BA1.0 mg/L和 IBA0.5 mg/L对体细胞胚胎诱导最有效;在 2,4-D为 1.0 mg/L和 1.5 mg/L时的培养基上胚性愈伤组织诱导率较高,分别为 51.0 %和 56.7 %;黑暗低温(10℃)处理 5d 不但可以促进细胞胚胎的发生,而且可以提高其发生的频率(60.0%)。     

不同红蓝配比的光质对棉花体细胞胚胎发生 和植株再生的影响

【目的】设置不同的光质组合,明确不同光质对棉花体细胞胚胎发生的影响,为提高棉花体细胞胚胎发生能力和加快棉花转基因过程提供依据。【方法】分别设置不同红蓝配比的光质组合B﹕R（蓝﹕红）=1﹕1、B﹕R（蓝﹕红）=3﹕1、B﹕R（蓝﹕红）=1﹕3和DL（日光灯）,将CCRI12（中棉所12）棉花下胚轴切段依次在愈伤诱导培养基上（callus induction medium,CIM）、胚性愈伤组织诱导培养基上（embryogenic callus differentiation medium,ECDM）、体细胞胚诱导培养基上（embryoid induction medium,EIM）和再生植株诱导培养基（regenerated-plantlet induced medium,RIM）上培养。统计在4种不同光质配比下,体细胞胚胎发生各个阶段对应的指标,包括愈伤增殖率（callus proliferation rate,CPR）、愈伤增殖量、胚性愈伤分化率、体细胞胚数量、生根率、下胚轴数量、再生棉花植株数量、叶绿素浓度等。【结果】与B﹕R=1﹕3和DL光质组合相比,B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1的光质组合均显著促进了愈伤的增殖率,但抑制体细胞胚长出下胚轴;与B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1相比,B﹕R=1﹕3和DL光质组合均促进胚性愈伤分化和诱导体细胞胚的产生,在诱导下胚轴生根方面,B﹕R=1﹕1组合生根率明显高于其他3种处理;B﹕R=1﹕3和B﹕R=1﹕1处理后下胚轴成苗数、植株高度和叶绿素浓度明显高于B﹕R=3﹕1和DL光质组合,B﹕R=1﹕3的促进效果最明显。【结论】 明确了不同光质组合在体细胞胚胎发生各个阶段的调控作用,在体细胞胚胎发生各个阶段可以选择性地应用最优的光质组合。其中红蓝配比为B﹕R=1﹕3的光质组合在整体上能促进棉花体细胞胚胎的发生。     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。