不同方法培养保存后相似穿孔线虫的单雌繁殖力的测定

采用胡萝卜愈伤组织培养(25℃)的方法,测定传入中国温室的相似穿孔线虫6个种群单条雌虫的繁殖力,并比较这些种群经长期在胡萝卜愈伤组织上培养保存和在寄主红掌上接种复壮保存的单雌繁殖力.结果表明,在25℃条件下,供试相似穿孔线虫种群经长期在胡萝卜愈伤组织上培养保存和在寄主植物上复壮后的单条雌虫在胡萝卜愈伤组织上均能完成生活史并进行繁殖,同一种群经不同保存处理的后代单雌繁殖力以及不同种群经同种保存处理的后代单雌繁殖力均存在差异;在胡萝卜愈伤组织上长期培养保存和在寄主植物上接种复壮保存都会对相似穿孔线虫的单雌繁殖力产生影响,但不同种群单雌繁殖力所受影响的情况不同.     

胡萝卜愈伤组织上长期培养和红掌上复壮繁殖对相似穿孔线虫耐低温能力的影响

利用从观赏植物上截获的相似穿孔线虫Radopholus similis 6个种群,研究在胡萝卜愈伤组织上长期培养繁殖和在红掌Anthurium andraeanum上接种繁殖复壮后,相似穿孔线虫耐低温能力的变化.将经2种方式培养繁殖的相似穿孔线虫接种在胡萝卜愈伤组织上,测定其耐低温能力.结果表明,在胡萝卜愈伤组织上长期(6代)连续培养后,相似穿孔线虫的耐低温能力降低,在低温下的生存能力和繁殖能力明显降低;通过在自然寄主植物红掌根系上接种繁殖后,相似穿孔线虫在低温下的生存和繁殖能力又可得到不同程度的恢复,即耐低温能力得到复壮.胡萝卜愈伤组织上长期培养繁殖对相似穿孔线虫不同群体耐低温能力的影响不同,相似穿孔线虫不同种群在红掌上繁殖后耐低温能力的恢复程度也有所不同.     

相似穿孔线虫消毒方法筛选及其对线虫繁殖量的影响

通过比较不同消毒方法对相似穿孔线虫的消毒效果和对其活力的影响,筛选出5种消毒方法,再通过接种 胡萝卜愈伤组织繁殖线虫的方法,测定了这些消毒方法对相似穿孔线虫繁殖量的影响.结果表明:供试的5个相似 穿孔线虫种群,用硫酸链霉素进行消毒后的雌虫平均繁殖量最大,用次氯酸钠处理后的雌虫平均繁殖量最小,而用 氯化汞、洗必泰+氯化汞和硫酸链霉素 氯化汞进行处理后的雌虫平均繁殖量介于上述两者之间,综合消毒效果 和对繁殖量的影响2个因素,其中洗必泰 氯化汞是最合适的消毒方法.     

4种杀线虫剂对红掌相似穿孔线虫病的防治效果

通过盆栽试验,测定了杀线虫剂克线磷、福气多、涕灭威、卡线特对红掌相似穿孔线虫病的防治效果.结果表明:红掌在被相似穿孔线虫侵染前或侵染后,在根际土壤中施用供试药剂,均能有效防止病害的发生,且在侵染前用药防治效果更好;每盆施用克线磷1.2 g、福气多1.5 g和涕灭威0.9 g,不仅能有效地杀灭红掌根和根际介质中的相似穿孔线虫,且能将病级控制在1以下;在红掌被相似穿孔线虫侵染发病的情况下,施用上述药剂虽然也能有效地杀灭线虫,但因施药前红掌根部被线虫侵染而严重腐烂,故对植株病情的恢复效果较差;卡线特对红掌有药害,不宜用于红掌相似穿孔线虫病的防治.     

海南省红掌穿孔线虫的鉴定

用漏斗分离法,从海南省海口市花卉基地的红掌上分离到穿孔线虫群体,经光学显微观察和测计发现:该线虫的雌虫虫体头部骨质化明显,唇区半圆形,连续或稍缢缩,3～4个体环;中食道球发育好,瓣膜清晰,食道腺从背面覆盖肠;阴门明显,偶尔轻微突起,位于虫体的中后部;双生殖管平衡发育;角质膜具有细而明显的环纹,侧区刻线4条,在尾中部合并成3条。雄虫唇区高,半球形,明显缢缩,头架骨化程度低,食道退化,交合刺发育良好,引带和交合刺的前端伸出泄殖腔,交合伞包裹尾部的2/3,尾末端钝圆或尖,具有较长的透明区。该线虫被鉴定为相似穿孔线虫Radopholus similis(Cobb)Thorne。     

相似穿孔线虫PCR检测鉴定的技术与方法

运用PCR技术,实现了对相似穿孔线虫单条虫ITS区域的扩增,通过基因测序以及与GenBank中rDNA序列的比较,结果显示GFCh、HANh、GZll和GZlbs 4个种群的序列与GenBank中Radopholus similisThrone序列具有高度同源性。聚类分析表明,这4个种群可能有着不同的地理来源。     

6种杀线虫剂对香蕉相似穿孔线虫病的防治效果

通过盆栽试验,测定了10%噻唑磷颗粒剂、5%丁硫克百威颗粒剂、5%灭线磷颗粒剂、1.8%阿维菌素乳油、0.5%阿维菌素颗粒剂和5亿活孢子/g淡紫拟青霉颗粒剂等6种杀线虫剂对香蕉相似穿孔线虫的防治效果。结果表明:香蕉植株在被相似穿孔线虫侵染前或侵染后,在香蕉根际土壤中施用以上6种杀线虫剂均能有效地防治该线虫的发生与危害,且在该线虫侵染香蕉植株前用药防治效果更好。其中,10%噻唑磷颗粒剂表现出最好的防治效果,各制剂用量处理防治效果均达100%,但在试验过程中香蕉植株表现出了轻度药害;而0.5%阿维菌素颗粒剂不仅表现出良好的防治效果,还可有效促进香蕉植株的生长。建议在田间可将10%噻唑磷颗粒剂低剂量和0.5%阿维菌素颗粒剂混合使用。     

马铃薯腐烂线虫不同群体同工酶表型与致病力研究

    对国内不同地理来源的10个马铃薯腐烂线虫群体进行同工酶表型研究,同时在2个中抗甘薯茎线虫病品种(苏薯9号、宁薯9-9)上测定马铃薯腐烂线虫群体致病力、繁殖力、雌雄比(性比)、甘薯薯块鲜重损失量.结果表明:①10个群体苹果酸脱氢酶(MDH)酶谱分为2个酶型, 酶型Ⅰ的相对迁移率(Rf值)约为0.21、0.26;酶型Ⅱ的Rf值约为0.21、0.26、0.31,而酯酶染色不成形;②在P=0.05水平上,各群体间的致病力、繁殖力、性比差异显著,其中致病力最高的群体来自河北廊坊DeHB,对苏薯9号的致病力为75%;③在苏薯9号和宁薯9-9上,各线虫群体致病力与线虫繁殖力呈正相关;④偏相关分析显示,在苏薯9号上不同线虫群体繁殖力与性比呈负相关,相关系数为-0.213,而在宁薯9-9上不同群体繁殖力与性比呈显著正相关,相关系数为0.901,说明寄主品种的改变对线虫群体性别分化影响显著;⑤在抗甘薯茎线虫病和保鲜力方面,宁薯9-9分别比苏薯9号高33.48%和19.86%.     

香蕉种资资源对相似穿孔线虫的抗性鉴定

[目的]初步筛选出抗相似穿孔线虫的香蕉品种.[方法]通过在温室中采用盆栽接种方法,分别测定了13个香蕉种资资源对相似穿孔线虫种群1和种群2的抗病性.[结果]接种种群1的处理中,云南粉蕉属高抗品种,皇帝蕉(AA)属抗病品种,有7个品种表现中抗;接种种群2的处理中,没有高抗或抗病品种,有9个香蕉品种表现中抗,巴西蕉(AAA)为高感品种.[结论]试验结果为寻找抗相似穿孔线虫的香蕉品种或基因奠定了基础.     

相似穿孔线虫伴生细菌群落多样性研究

[目的]揭示相似穿孔线虫伴生细菌群落物种丰度及其细菌多样性。[方法]通过构建细菌16S rDNA克隆文库,对阳性克隆进行ARDRA分析和构建系统发育树。[结果]依据97%序列相似性划分OTU,构建的细菌16S rDNA文库包含13个OTU,分别属于Alpha-proteobacteria、Betaproteobacteria和Gammaproteobacteria,其中优势菌群为Betaproteobacteria,特别是Burkholderia为优势细菌。[结论]相似穿孔线虫的伴生细菌多样性较高,这些细菌可能对相似穿孔线虫具有一定的生态意义。     

Study on burrowing nematode,Radopholus similis,pathogenicity test system in tobacco as host

Radopholus similis(Cobb 1893) Thorne(1949) is a destructive migratory endoparasitic plant nematode. In this study,the pathogenic process of R. similis infection in Nicotiana benthamiana(tobacco) was studied using quartz sand culture in laboratory. The results showed that R. similis mainly parasitised the root cortex, leading to cortical cell decomposition and tissue decay. We optimised the inoculation conditions to establish a method for determining the pathogenicity of R. similis as follows:(1)...     

香蕉穿孔线虫的识别鉴定

穿孔属线虫(Radopholus)可从雄虫食道退化明显、引带伸出泄殖腔外、无颈乳突等与较易混淆的拟短体属(Pratyienchoides)区别;从雌虫后食道腺复盖肠的背侧与接合垫刃属(Zygotylenchus)相区别.香蕉穿孔线虫(R.similis)主要鉴定特征为:雌虫唇环3—4环,口针粗状,基部球圆形,有时微向前突,侧线4条,在尾中部合并为3条,受精囊球形,精子杆状,尾端为不规则缨枪头状.雄虫交合撒包裹尾端的2/3—3/4处.可从明显较长的尾及尾端形状、受精囊及精子形状等与同属其他种相区别.该虫的形态变异主要表现在尾形上.鉴定时要有全体概念,同时要参照典型生境及形成隧道、穿孔的典型症状.     

Parasitism and pathogenicity of Radopholus similis to Ipomoea aquatica,Basella rubra and Cucurbita moschata and genetic diversity of different populations

Ten populations of Radopholus similis from different ornamental hosts were tested for their parasitism and pathogenicity to water spinach(Ipomoea aquatic), malabar spinach(Basella rubra), and squash(Cucurbita moschata) in pots. The results showed all three plants were new hosts of R. similis. Growth parameters of plants inoculated with nematodes were significantly lower than those of healthy control plants. All R. similis populations were pathogenic to the three plants, but pathogenicity differed among populations from different hosts. The same R. similis populations also showed different pathogenic effects in the three different plants. Rad N5 population from Anthurium andraeanum had the highest pathogenicity to the three studied plants. Rad N1 from A. andraeanum had the lowest pathogenicity to squash and Rad N7 from Chrysalidocarpus lutesens had the lowest pathogenicity to water spinach and malabar spinach. R. similis is usually associated with root tissues, but here we report that it could be found to move and feed in the stem bases of all three studied plants. Sequence and phylogenetic analyses of DNA markers of the 18 S r RNA, 28 S r RNA, ITS r RNA, and mitochondrial DNA gene sequences of ten R. similis populations revealed significant genetic diversity. Rad N5 and Rad N6 populations from anthurium showed a close genetic relationship and could be distinguished from other populations by PCR-RFLP. At the same time, Rad N5 and Rad N6 populations were the most pathogenic to three studied plants. These results confirm the e xistence of large biological variability and molecular diversity among R. similis populations from the same or different hosts, and these characteristics are related to pathogenic variability.     

香蕉穿孔线虫不同种群耐寒性的测定

采用胡萝卜片愈伤组织接种培养法,在室内条件下对供试香蕉穿孔线虫10个种群的耐寒性进行了测定.结果表明,在12℃和10℃低温下分别处理15 d、25 d、35 d后,供试香蕉穿孔线虫各种群生活力虽然有所下降,但仍然能够保持一定的繁殖能力;而在8℃时,各种群生存能力明显下降,有些种群无法在此温度下存活.8℃处理15 d后,Rs6种群无法存活;处理25 d后,Rs 2种群亦无法存活;处理35 d后,Rs8、Rs4种群无法存活.Rs1、Rs3、Rs5、Rs7、Rs9和Rs10等6个种群在8℃低温下处理35 d后仍然能够存活.     

相似穿孔线虫在中国的适生区预测

 【目的】相似穿孔线虫（Radopholus similis）是中国一类检疫对象，随着国际贸易日益加剧，该线虫传入中国的风险也日益加大，急需对其适生性进行分析。【方法】利用已广泛用于物种潜在分布预测的GARP与MAXENT两种生态位模型预测相似穿孔线虫在中国的适生区，并对预测结果进行了阈值依赖和非阈值依赖比较。【结果】两个模型均能较好地预测相似穿孔线虫的潜在地理分布；预测在中国适生区主要分布在南方各省，包括海南、广东、福建、云南、台湾等省区；经检验MAXENT预测结果较GARP好。【结论】相似穿孔线虫可随花卉苗木的国际运输传入中国，并可在中国南方沿海地区及花卉进出口大省云南省等地区发生；上述地区的进出口口岸应加强对相似穿孔线虫的检疫工作。     

香蕉穿孔线虫培养技术及其种群繁殖力研究

以10g/L琼脂粉培养基为对照，研究筛选了新的培养基．新筛选的100g／L马蹄粉培养基、100g/L玉米粉培养基和100g/L菱角粉培养基可以培养用于繁殖香蕉穿孔线虫的胡萝卜愈伤组织．其中100g/L马蹄粉培养基和100g／L玉米粉培养基培养的胡萝卜愈伤组织繁殖香蕉穿孔线虫的效果较好，而100g/L马蹄粉培养基培养周期短、速度快、成本低，可以用于代替琼脂粉培养基培养胡萝卜愈伤组织来繁殖香蕉穿孔线虫．香蕉穿孔线虫不同种群的繁殖力存在明显差异，本研究的10个种群中，来源于红掌的RH1种群的繁殖力最强．     

香蕉穿孔线虫土壤存活力的测定

温室内对香蕉穿孔线虫在无植物及其组织土壤中的存活能力进行了观察和测定.结果表明:在8～38℃环境下的潮湿土壤中(湿度为50%～100%),所有供试7个种群至少能存活5个月,多数种群可存活6～9个月,个别种群可存活11个月;种群间在同一种土壤中的存活力有差异,同一种群在基质土和蕉园土中的存活力差异不显著;在存活虫态方面,多数种群雌虫最多、存活时间最长,雄虫次之,幼虫则很少,但也有少数种群的雄虫存活力强于雌虫;在8～38℃环境下的干燥土壤中(湿度为6%～10%),供试的9个种群存活时间不超过20 d;各种群在干燥基质土的存活能力强于干燥蕉园土,存活的虫态多数是雌虫,雄虫很少,未见幼虫.