毛细管与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测甜菜SSR位点的比较研究

为了探究毛细管与聚丙烯酰胺电泳方法的适用情况，比较其优缺点。本研究以8个甜菜栽培种资源为材料，选择8个SSR位点，分别使用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测和毛细管电泳荧光检测每个位点的多态性，并对这两种方法的检测结果进行了比较。毛细管电泳荧光标记法可以准确的知道DNA片段的分子大小；PAGE电泳只能用肉眼与Marker比较估测得出大致分子量，不能得出准确分子量。8对引物两种检测方法的匹配比率分别是75%、87.5%、50%、75%、25%、100%、37.5%、50%。研究结果证明，两种检测平台数据整合存在较大差异。检测结果与引物是否是单拷贝、引物多态性，稳定性等因素有直接关系。测序检验结果表明，样品较少时利用PAGE电泳的方法来检测SSR位点的多态性，既能节省成本又能节省时间，还能保证检测结果的准确性。     

菠菜种质资源SSR指纹图谱构建和遗传多样性分析

为研究菠菜品种间的亲缘关系,本研究利用PAGE电泳法对33份菠菜种质资源进行指纹图谱构建和遗传多样性分析。结果表明,筛选出的27对多态性明显、带型稳定的引物共扩增出109个多态性位点,平均每对引物3.7个。经多态性位点分析,最后仅用7对高多态性引物构建了能够区分33份菠菜种质的指纹图谱,为供试材料的鉴别提供参考。聚类分析显示,遗传相似系数变幅为0.58 0.96,在遗传相似系数0.68处可以将所有供试材料分为六类,且分类结果与地理来源相近。此研究结果说明33份菠菜种质具有丰富的遗传多样性,可为菠菜品种选育提供理论依据。     

蛋白质电泳法检验玉米种子纯度常见闻题分析

玉米蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳法是指利用电泳技术对备检样品的种子或幼苗的蛋白质进行分离、染色,形成蛋白质电泳谱带的差异,并与标准品种相比较,从而鉴定品种的真实性和纯度的一种方法。不同作物品种的基因不同,基因的直接表达产物——蛋白质在种类、数量、结构等方面也不同。该法即是利用蛋白质的多态性来反映不同品种DNA组成上的差异,从而进行品种鉴定。该法快速、可靠,不受环境影响。     

同工酶差异位点分析在蔬菜杂交种纯度检测中的应用

用10种同工酶和蛋白质分析体系，分析了7种重要蔬菜的71个杂交种与其亲本之间的差异位点，以及这些差异位点用于杂交种纯度检测的可能性和存在的问题。试验表明，作物的不同种类，杂交种与亲本之间的亲缘关系以及作物各类的遗传多态性，都会影响同工酶差异位点产生的多寡，从而影响到这一技术是否能用于此种作物的纯度检测。分析了不同同工酶在不同蔬菜中的多态性以及在蔬菜种子纯度检测中的表现。     

酸溶蛋白质电泳方法鉴定小麦种子纯度

本试验通过对小麦种子酸溶蛋白质的提取液浓度、提取时间和电泳凝胶组分浓度进行研究,建立了一种对小麦种子纯度进行鉴定的常规电泳技术方法.结果表明该方法具有以下特点:①样品提取时间短;②蛋白质组分多态性丰富;③电泳谱带清晰,分辨率高.     

浅析利用种子贮藏蛋白鉴定品种纯度

1种子贮藏蛋白电泳技术 贮藏蛋白是种子的主要成分，也是基因表达的产物，几乎所有作物种子贮藏蛋白都具有特异性，且容易分离和提取。此技术就是根据种子贮藏蛋白的这些特点利用电泳中谱带的多态性来鉴定品种的真实性和纯度。通常种子中所含蛋白质可分为4类，即清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。每一类蛋白质的比例因作物种类不同而有差异，如水稻含有高水平的谷蛋白，     

电泳法鉴定玉米种子纯度与种植鉴定结果的一致性和相关性分析

本文通过对醋酸尿素丙烯酰胺电泳法（AU－PAGE）和田间种植法鉴定玉米种子纯度结果69对数据的统计分析，找到了两种方法结果的相关关系，证明了电泳法和田间种植法鉴定部分玉米品种种子纯度的一致性，从而为电泳法成为室内测纯的有效方法提供依据。     

甜瓜SSR标记在葫芦科不同作物间的通用性分析

微卫星标记(SSR)在近缘物种间具有通用性,因其高效率、低成本可广泛用于跨物种间的遗传多样性分析、基因定位和图谱构建等。本试验基于甜瓜基因组测序结果开发了120对SSR标记,研究其在8种葫芦科作物间的通用性及作物内的多态性,并利用NTSYS软件分析37份不同瓜类作物材料间的遗传多样性。结果显示,114对标记均在甜瓜基因组中得到有效扩增,黄瓜中有108对标记有效扩增,通用性比率为94.7%,南瓜中能有效扩增标记最少,其通用性比率也达到了41.2%,在8种葫芦科作物间均通用的标记有29对;通过对通用性标记的多态性分析表明,甜瓜多态性比率最高为61.4%,西瓜、黄瓜、苦瓜、冬瓜、西葫芦、南瓜和丝瓜多态性比率分别为32.5%、14%、4.4%、8.8%、3.5%、13.2%和11.4%;不同作物间的平均遗传相似系数在0.70~0.83之间,其中甜瓜和黄瓜平均遗传相似系数较小,亲缘关系较近,西葫芦和南瓜间的平均遗传相似系数最小,亲缘关系最近。这些通用性标记将有利于提高葫芦科作物整体分子生物学研究水平。     

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 利用微卫星标记对中国宁夏固原地区地方品种鸡固原鸡和培育品种鸡固原红鸡两个群体DNA水平上的遗传多态性进行了研究，探讨群体内的遗传多态性，为种质资源的保护、开发、利用等提供理论依据。结果表明，利用微卫星标记分析6个位点，共检测到38个等位基因，固原鸡和固原红鸡分别发现29个和20个等位基因；平均有效等位基因数分别为4.6983和3.9385个；群体内平均杂合度分别为0.7198和0.6944。固原鸡和固原红鸡平均多态信含量分别为0.6456和0.5584，表明两个鸡群均为高度多态，均具有较为丰富的遗传多态性。     

浅谈植物病害在种子纯度鉴定中的作用

1目前我国种子纯度鉴定的方法及利与弊 目前我国常用种子纯度鉴定方法有:形态鉴定法(包括子粒与幼苗形态鉴定)、蛋白质电泳鉴定法、田间种植鉴定法.形态鉴定法:根据子粒与幼苗的形态特征进行鉴别的方法,该方法简单、快速、经济,但由于子粒与幼苗可辨性状较少,结果准确性差;蛋白质电泳鉴定法:随着科学技术的发展,蛋白质电泳鉴定法广泛应用于实验室检测纯度,该方法准确、时间短,是杂交玉米、杂交水稻、杂交番茄、小麦等作物用以室内电泳鉴定的主要方法,但对其他作物品种或某一作物的其他品种不太适宜;田间种植鉴定法:是鉴定品种纯度最为可靠、最为准确的方法,但是所需周期长,费用高.     

我国棉花大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)电泳图谱分析

对24株来自不同地区、作物的不同致病类型的大丽轮枝菌,进行了同工酶和可溶性蛋白电泳图谱分析。结果表明,24株大丽轮枝菌苹果酸脱氢酶酶谱具有种的特异性,酯酶酶谱具有属的特异性。谷氨酸脱氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶和可溶性蛋白电泳图谱与病菌的致病类型有关,可将24株大丽轮枝菌分为2群,群Ⅰ包括20个菌株,均属于中等致病力或弱致病力的非落叶型菌系;群Ⅱ包括4株菌,均属于强致病力的落叶型菌系。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）在烤烟品种鉴别中的应用

随着烤烟品种数目的增多，单从形态上鉴别比较困难。本文报道了应用PAGE鉴别8个烤烟品种的试验结果。种子酸溶蛋白质、盐溶蛋白质SD8—PAGE无法将各品种区分开来；幼苗酯酶同工酶PAGE则能很好地鉴别出这8个品种，显示出其在烤烟品种鉴别中的潜力。     

玉米杂交种及其亲本自交系的生化指纹鉴定

本试验以浙单9号等五个玉米杂交组合及其亲本自交系为材料,进行种子盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳等多种电泳鉴定方法的研究,以揭示玉米杂交种及其亲本自交系的“生化指纹”(biochenucal fingerprint),以及筛选出适合于玉米杂交种及其亲本自交系真实性和纯度鉴定的方法。结果表明,各供试玉米杂交种及其亲本自交系都具有相应的、唯一的种子盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳所显现的生化指纹。对于有些组合。玉米芽鞘和叶片绿色组织过氧化物酶同工酶电泳图谱存在阴极第4、第5酶带差异,因这两条酶带的差异稳定,并且重现性好,故能用过氧化物酶同工酶技术对其进行有效地鉴定。上述两种方法,尤其是前者,因技术要求不高,费用低,快速及重现性好等特点,能满足我国目前种子检验室日常玉米品种纯度快速测定工作的要求,具育良好的应用前景。     

荞麦过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对毕节地区栽培荞麦(Fagopyrum Mill)23个收集系的过氧化物酶同工酶进行了研究.结果发现:过氧化物酶同工酶共12条酶带,其中甜荞(F.esculentum)有8条酶带,而苦莽(F.tataricum)有10条.酶谱分析和系统聚类表明:荞麦在种内存在一定的遗传差异,但这种差异明显小于种...     

苹果酸脱氢酶在番茄F1杂种纯度检测中的应用

本文应用垂直板不连续系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）法,分析了５个杂交一代种（佳粉一号、佳粉二号、佳粉十号、佳粉十五号、双抗二号）发芽肿种苗的五种同工酶（苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）、磷酸葡萄糖变位酶（ＰＧＭ）、酯酶（ＥＳＴ）、异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）。发现５个杂交一代种中,３个要交一代种与其双亲的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）谱带有有明显稳定的区别。两个杂交一代种与其双亲酯（ＥＳＴ）     

利用EST同工酶谱鉴定黑稻品种纯度的研究

采用改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳对5种黑稻主要栽培品种进行了EST同工酶谱分析.结果表明,此方法分辨率高.测试各品种的EST同工酶存在丰富的多态性,其电泳图谱具有鲜明的特征,并构成了各自的＂指纹＂.其中黑优粘和云黑酶谱条带数多达15条,a1和a3为5个品种的共有谱带.通过EST同工酶谱相似度指数分析,黑优粘与黑丰糯、乌贡1号相似度指数大于0.75,说明这3个品种间亲缘关系较近.     

Comparison of isoenzymes in Prunus avium separated by two different electrophoretic techniques

Isoenzyme variation for seven systems revealed by two different electrophoretic procedures was compared in Prunus avium. Fourteen cultivars and 14 wild selections were analysed for acid phosphatase (ACP), isocitrate dehydrogenase (IDH), leucine aminopeptidase (LAP), malate dehydrogenase (MDH), phosphoglucomutase (PGM), shikimate dehydrogenase (SKD) and superoxide dismutase (SOD). Extracts were separated by isoelectric focusing (IEF) and by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). For the eight loci that had been described previously in these enzyme systems on the basis of IEF analysis, we compared the variation revealed with IEF and PAGE. Similar variation was revealed for Acp‐1 and Pgm‐1, and the alleles revealed by PAGE could be identified directly with those reported for IEF. For Lap‐1, Mdh‐1 and Skd‐1, variation was seen with IEF but not with PAGE. For Mdh‐2, PAGE revealed additional variation not revealed by IEF. For Idh‐1, different patterns of variation were revealed by PAGE and IEF, and both procedures would be needed to genotype cherry accessions. We were unable to detect variation corresponding to that reported previously for Sod‐1 with either technique. The implications of these findings for allele labelling, for studies of genetic diversity and for linkage analysis are discussed.     

GPV感染扰动雏鹅系统互作网络的研究

为了解GPV(Goose parvovirus)侵染的病理学致病机理,探究GPV感染扰动雏鹅动态代谢网络平衡系统,对GPV感染雏鹅血液中的蛋白质、代谢酶活性及其同工酶结构和功能等进行生化分析。结果显示,GPV感染雏鹅的血液中,蛋白酶、Est、POD、SOD、ALP、ADH、Amy、CAT、GPT、LDH活性分别提高约41%/63%,30%/53%,50%/14%,36%/73%,156%/142%,1005%/22%,36%/26%,13%/51%,60%/244%,289%/139%;Ig G、IgM含量分别降低约50%,40%;蛋白质含量增长约50%,GPV感染雏鹅的血浆Est、SOD、ADH、Amy同工酶分别新增2,2,1,3条酶谱带,Est同工酶消减2条慢区谱带;血细胞Est、POD、SOD、Amy同工酶分别新增1,2,1,2条酶谱带;血液中CAT、LDH、GPT、ALP同工酶分别出现7,1,3,3条酶带变异,血细胞CAT、ADH同工酶分别缺少快区和慢、快区酶带,ALP同工酶在血浆与血细胞方面分别缺少慢区和快区酶带。同时显示重链59 kDa蛋白带是CK组IgM/G的共同特征,感染组Ig G还缺失258,36 kDa蛋白带;血浆与血细胞分别新增加131,86,43,33 kDa和144,104,58,53 kDa蛋白。血浆消减1条慢区酶蛋白,血细胞增加2条慢区酶蛋白。提示GPV感染应激与寄主蛋白质、蛋白酶及同工酶基因表达的协同作用,通过独特的扰动宿主动态平衡代谢网络直接或间接调控细胞易感性能。     

八个榆黄蘑菌株同功酶分析

为了探讨不同榆黄磨菌株之间的亲缘关系.采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,利用酯酶同工酶和过氧化物同工酶酶谱的相似性和差异性,计算了8个榆黄蘑供试菌株间的Pearson相似系数;并采用类间平均法(Between-groups linkage)进行系统聚类,对供试菌株的亲缘关系进行分析.结果表明,所有供试菌株在2个同工酶系统中均有共同特征谱带,同时又体现了一定的多态性.菌株pc-5与其他各菌株遗传差异均较大;菌株pc-2与菌株pc-7的遗传差异很小,可能是源于同一种或为亲缘关系很近的变异类型;其余各菌株都有一定程度的差异性.     

Genetic Control of Five Isozyme Systems in Sugar Beet (Beta vulgaris L.)

Genetic markers are most useful in plant breeding but so far only a few morphological and isozyme markers are known in Beta vulgaris. In this paper, the isozyme systems aconitase (AGO), NADH-:dihydrolipoamiddehydrogenase (DIA), esterase (EST), fructose-1,6-bisphosphatase (FDP), and hexokinase (HK) were genetically analysed. Isoelectric focussing (IEF), vertical polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and starch gel electrophoresis (SGE) were used to separate the isozymes. A total of eight loci could be identified. The allelic forms of Aco-1, Dia-1, Est-1, Est-5 and Hk-1 are active monomers. The gene products of Est-3 and Fdp-2 are active as dimers. Est-2 also showed allelic forms without activity; null-alleles.