灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

名贵畲药盘龙参种子快繁技术研究

以盘龙参蒴果为外植体,进行组织培养快繁试验,采用对比试验研究不同基本培养基、激素浓度的配比、天然添加物对盘龙参种子萌发、原球茎增殖、分化的影响,从中筛选出离体条件下适宜种子萌发、种苗快繁的培养基配方。结果表明,外植体最佳消毒方案是采用75%乙醇浸泡30 s结合0.1%Hg Cl2浸泡20 min。最适合的种子萌发诱导培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%;原球茎在1/2MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%的增殖效果最好,增殖率为380%;最适合盘龙参原球茎分化的培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁20%。     

建兰种子无菌萌发技术初探

以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及生长素浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果发现：添加外源植物生长调节剂6-BA与NAA以及适宜的蔗糖浓度都能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为：1/2 MS +8 g/L 琼脂粉+ 60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+ 0.4 mg/L 6-BA+1g/L活性炭;当0.8 mg/LNAA与0.4mg/L 6-BA组合时,生根率最高,在90天时最高可达80.50%;通过观察建兰种子萌发无菌芽的过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250d。     

金线莲增殖和生根培养条件的优化

为了优化金线莲(Anoectochilus formosanus Hayata)增殖和生根培养条件,将金线莲无菌苗的顶芽和带节茎段接种到不同种类和浓度的激素以及添加物组合的培养基中进行增殖和生根培养,以筛选出最适合金线莲增殖和生根的培养基.结果表明,金线莲最佳增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.6 mg/L+玉米素(Zeatin,ZT)0.8 mg/L+香蕉泥100 g/L,顶芽和腋芽的增值倍数分别为3.82和3.13;生根培养基以MS+NAA0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L最好,生根率达80%.     

蝴蝶兰种胚萌发影响因素的研究

改良KC培养基是蝴蝶兰种胚萌发的理想培养基,添加10%椰子汁或香蕉泥,对种子萌发有促进作用,椰子汁效果好于香蕉泥.不同的光照处理对诱导蝴蝶兰种子萌发的影响差异不显著.授粉后3～4个月果龄的蒴果,其种子播种萌发率高,原球茎块多.MS (0.5～1.0) mg/L 6-BA为最佳分化培养基,添加椰子汁有促进生长作用.蝴蝶兰小苗生根的适宜环境条件:温度为26±2℃,光照1 000 lx左右,培养基为1/2 MS 0.5 mg /L NAA 10%椰子汁 (v/v).     

铁皮石斛组培技术研究

以野生优质铁皮石斛种源授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为源材料进行组培快繁试验,结果表明:试验中种子萌发的最适培养基为MS+NAA0.5mg/L,萌发率达到95%;原球茎增殖培养基为MS+6~BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,鲜重增殖系数达到8.73;最适生根壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L。     

铁皮石斛组培技术研究

以野生优质铁皮石斛种源授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为源材料进行组培快繁试验,结果表明:试验中种子萌发的最适培养基为MS+NAA0.5mg/L,萌发率达到95%;原球茎增殖培养基为MS+6~BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,鲜重增殖系数达到8.73;最适生根壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L。     

不同授粉方法对百合不同杂交组合结实的影响

采用常规柱头授粉、切割花柱授粉和柱头涂抹0.1%NAA 3种授粉方法,以4个杂种系的品种和3个野生种为材料,分别进行系内、系间杂交试验,旨在研究不同授粉方法对百合不同杂交组合结实情况的影响。试验结果表明：在系内杂交试验中,采用常规柱头授粉方法对东方百合系内不同杂交组合的效果最好,14个杂交组合中,尤其以杂交组合Pink Expression（O1）×Rain Dance（O8）的结实率最高,其子房膨大率、蒴果结实率和种子有胚率分别为86.36%,72.73%和32.08%。在系间杂交试验中,切割花柱授粉并非都能提高结实率,在有些组合中,切割花柱授粉方法不仅不能克服其杂交障碍,反而降低其结实率,如对于组合Shocking（OT3）×Cocar D’Or（O4）,采用切割花柱授粉方法使蒴果结实率从66.67%降低到50%,降低了16.67%。在以野生百合为父本的远缘杂交试验中,组合Bonsoir（LA5）×L.pumilum（W2）采用柱头涂抹0.1%NAA授粉方法结实率最高,其蒴果结实率和种子有胚率分别为77.78%和10.85%。     

甘蓝型油菜与花椰菜种间杂种子房离体培养研究初报

在甘蓝型油菜×花椰菜种间杂种子房离体培养克服远缘杂交不孕的研究中,观察到不同基本培养基、离体培养时杂种子房的发育天数对杂交结实率有明显的影响。结果表明杂交授粉后12d的杂种子房离体培养效果最好,获得15粒种子,其中11粒种子能萌发成苗;培养基试验表明,1/2MS无机 B5有机 IAA1.5mg/L 蔗糖50g/L的培养基效果最好,结籽率达23%,种子萌发率达100%。     

3种观赏石斛蒴果特征及无菌播种萌发的影响因素

针对大苞鞘石斛、肿节石斛、报春石斛在引种地进行人工辅助授粉,蒴果存在假膨现象、种子量少、种胚发育不良、无菌萌发率低等问题,对这3种石斛蒴果特征及无菌播种萌发影响因素进行研究。结果表明,大苞鞘石斛、肿节石斛、报春石斛3种观赏原球茎颜色为绿色或深绿色,石斛蒴果适宜的采摘时间为150 d;采用MS培养基,添加浓度为0.05~0.40 mg/L 6-BA和有机添加物椰汁有利于提高种子的萌发率,萌发率最高达90%,种子萌发时间缩短为8~14 d。     

兰州百合和大花卷丹远缘杂交胚挽救技术研究

利用兰州百合与大花卷丹进行正反交,研究了花期调控、不同授粉方式、蒴果采收时间及胚挽救培养基配方对杂种胚萌发率及成苗率的影响。结果表明,兰州百合延后种植及大花卷丹提前种植,可有效地解决花期不遇的问题;兰州百合与大花卷丹杂交授粉时,花期授粉的蒴果膨大率可达93.3%,种子有胚率为2.00%;大花卷丹与兰州百合杂交授粉时,切割柱头的授粉膨大率最高,仅为7.6%,但种子有胚率为0%。兰州百合与大花卷丹杂交授粉后60～70 d的蒴果进行胚培养较为适宜。兰州百合与大花卷丹的杂交胚适宜培养基为MS+0.3 mg/LNAA+0.2 mg/L6-BA。     

不同授粉方式对食用百合种间杂交结实的影响

以龙牙、卷丹、兰州和铁炮百合为研究材料,采用不同开花时期授粉、切割柱头、涂抹花粉培养液和涂抹噻苯隆(TDZ)等授粉方法对百合进行杂交试验。以蒴果结实率、蒴果膨大率、种子有胚率作为判断指标来研究不同杂交配组的亲和性;利用体式显微镜检测杂交亲本花粉的生活力情况。结果表明,龙牙百合和铁炮百合花粉的生活力均较高,其次为兰州百合,卷丹百合花粉的生活力最低,萌发率仅为5.78%。龙牙×兰州切割花柱授粉可以明显提高蒴果的坐果率,特别是开花当天授粉,蒴果的坐果率达88.5%,种子有胚率为0.77%;龙牙×铁炮开花当天常规授粉,蒴果的坐果率达42.9%,种子有胚率为10.31%,但切割花柱授粉不能促进其坐果;卷丹×龙牙、卷丹×铁炮采用多种授粉方式均未能使蒴果膨大;兰州×龙牙开花当天常规授粉能使蒴果微膨大,但切割花柱授粉蒴果不能膨大;铁炮×兰州开花当天切割花柱授粉效果较好;卷丹×兰州开花第1、第2天常规授粉均能获得微膨大的蒴果。切割花柱仅对某些杂交组合有效,涂抹花粉培养液、0.2%TDZ在所有参试杂交组合中均无效;龙牙×兰州、龙牙×铁炮的蒴果长宽比均相对较小,在2~3之间。     

同色兜兰种子非共生萌发试验

研究了基本培养基、种子成熟度及次氯酸钠溶液处理对同色兜兰种子萌发的影响。结果表明,授粉后150 d的种子在1/4MS基本培养基附加0.5 mg/L NAA、100 mL/L椰子水、1.0 g/L活性炭和20 g/L蔗糖的培养基上萌发率最高,播种后90 d萌发率可达70.3%;授粉后240 d的种子在含有0.5%有效氯的次氯酸溶液中处理40 min能最有效地提高种子的萌发率,成熟种子的萌发率从14.3%提高到69.0%。     

3个籼粳杂交F1的花药培养初探

选用以IRBB60为父本的3个水稻籼粳杂交F1为试验材料,研究不同基本培养基与不同激素配比使用对其花药培养的影响。结果表明:(1)M8基本培养基适合于T475/IRBB60和Hu7/IRBB60的花药培养,而沈农15/IRBB60更适合在SK3基本培养基上培养;(2)添加有2 mg/L 2,4-D、4 mg/L NAA和0.5 mg/L KT的诱导培养基的出愈率比添加2 mg/L 2,4-D和2 mg/L NAA的培养基高0.09～2.68个百分点,并且其对进一步诱导芽的再分化有较好的影响;(3)添加激素组合为1 mg/L 6-BA、1 mg/L NAA和2 mg/L KT的MS-2分化培养基对沈农15/IRBB60的绿芽分化率最高,可达31.34%。     

云南独蒜兰原球茎诱导与增殖的研究

为组织培养快速繁殖云南独蒜兰,对其进行了种子无菌萌发的基本培养基、添加物与激素以及原球茎增殖激素配比的优化筛选.结果表明:在KC、1/2MS、B5这3种基本培养基中,B5较适于种子萌发;添加蛋白胨5g/L、马铃薯泥50g/L或活性炭粉1 g/L均有利于种子萌发形成原球茎;生长激素NAA、2,4-D对种子无菌萌发具有促进作用,而细胞分裂素6-BA则抑制了种子萌发.在以B5附加AC(活性炭)1g/L的基础培养基中,激素组合6-Bal.5mg/L+NAA0.5mg/L更有利于原球茎的增殖与生长.     

云南独蒜兰×陈氏独蒜兰种子萌发与幼苗生长研究

以云南独蒜兰(Pleione yunnanensis)×陈氏独蒜兰(P.chunii)授粉120 d成熟未开裂蒴果的种子作为试验材料,研究不同浓度6-BA、NAA和花宝2号对其种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:种子萌发的适宜培养基为3 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+50 g/L马铃薯+50 g/L香蕉+2 g/L蛋白胨+2 g/L活性炭+7 g/L琼脂,萌发率(94.45%)显著高于其他处理组,且萌发后植株生长速度最快;NAA对该杂交种无菌萌发具有明显的促进作用,而细胞分裂素6-BA则在一定程度上抑制其萌发。针对假鳞茎膨大和植株高度2个指标,幼苗生长的适宜培养基为1 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+1 g/L蛋白胨+1 g/L活性炭+7 g/L琼脂,在所研究的3个因素中花宝2号对该杂交种假鳞茎膨大作用最大,NAA对植株高度促进作用最大。     

齿瓣石斛无菌萌发条件优化研究

为优化齿瓣石斛无菌萌发条件,通过研究影响齿瓣石斛种子萌发的因子,探寻适合齿瓣石斛种子最优萌发的培养基及培养条件。结果表明:齿瓣石斛种子无菌培养的适宜培养基为MS培养基,蔗糖浓度为20g/L,浓度过低,萌发苗生长差,玻璃化严重;胚龄对齿瓣石斛的萌发率有重要影响,适宜的种子胚龄为10～11个月,胚龄时间短萌发率低;胚龄时间过长灭菌时蒴果易开裂,污染率大;添加0.3mg/L NAA,可缩短萌发时间,种子的萌发率、幼苗的成苗率和生长情况相比对照较好;不同培养条件萌发效果有明显的差异。适宜的萌发条件可促进齿瓣石斛萌发,提高萌发率,萌发后幼苗生长状况较好。     

管花肉苁蓉花序不同部位种子质量与 有效积温的关系

为探讨有效积温对管花肉苁蓉花序不同部位种子质量的影响,测定了花序不同部位蒴果发育的有效积温及其种子的大小、千粒重和萌发率.结果表明:管花肉苁蓉花序不同部位蒴果发育所需的有效积温有显著差异,中部和基部有效积温显著高于上部;中部蒴果中直径≥0.7mm 种子占总量的20.64%,显著高于基部和上部的15.67%和15.62%;中部蒴果种子千粒重(0.0343 g)显著高于基部(0.0263 g)和上部(0.0210 g);中部蒴果种子萌发率为78.88%,而基部和上部种子萌发率仅为56.67%和42.22%.因此,不同的有效积温是导致管花肉苁蓉花序基部和中部种子质量高于上部种子质量的重要因素之一.     

影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的若干因素

对影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的因素进行了分析。结果表明:用营养液、10%次氯酸钠溶液、0.1mol/L NaOH溶液手工振荡对杂交种子进行预处理均能促进种子萌发,其中春兰杂交种子经10%次氯酸钠的预处理培养后萌发率最高,蕙兰杂交种子经营养液振荡预处理培养后萌发率最高;1/2MS基本培养基加2 g/L蛋白胨比较适宜春兰杂交种子萌发,H基本培养基加2 g/L蛋白胨培养基比较适宜蕙兰杂交种子萌发;以葡萄糖为碳源的培养基培养春兰杂交种子萌发率高于以蔗糖为碳源的培养基;培养基中添加NAA、6-BA对提高春兰杂交种子的萌发率无明显影响,但一定浓度配比的NAA、6-BA能促进蕙兰杂交种子的萌发率。     

杯鞘石斛离体快繁体系的研究

为探究野生杯鞘石斛的快繁体系，以蒴果为材料，对杯鞘石斛的种子萌发、幼苗扩繁和生根的最适培养基进行筛选。结果表明，杯鞘石斛种子在MS+马铃薯汁50 g/L+蔗糖30 g/L培养基中萌发效果最佳，萌发率为76.42%；幼苗在MS+香蕉汁80 g/L+马铃薯汁50 g/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L中扩繁率最高，扩繁率为6.66；杯鞘石斛在MS+香蕉汁80 g/L+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中的生根表现最佳，平均根量为9条，根长为2.34 cm，株高为2.65 cm。