玉米幼苗不同部位的再生能力和某些影响因子

为建立以玉米幼苗为外植体的高效再生体系, 克服幼胚取材的限制, 本研究选取萌发3 d的玉米幼苗作为供体材料, 研究其不同部位的再生能力。分别研究了种子萌发时的光照条件, N6培养基中Ca²⁺浓度, 及6个不同基因型对芽尖和根尖愈伤组织诱导率和分化率的影响。结果显示, 黑暗条件下萌发的幼苗, 其芽尖和根尖更适合作为外植体, 诱导培养基中添加终浓度为5 mmol L^-1的CaCl₂ 时的愈伤组织诱导率最高, 不同基因型的玉米愈伤组织的诱导率和分化率存在差异, 但影响趋势相同, 且同一基因型的不同外植体形成的愈伤组织形态相似, 分化率也相似。最后结论是黑暗条件下萌发3 d的齐319和鲁原92的幼苗, 可以代替玉米幼胚作为外植体用于组织培养研究。     

洋葱通用型愈伤组织诱导的建立

为研究洋葱愈伤诱导体系建立问题,对洋葱种子幼苗、鳞茎盘、幼嫩花序不同组织进行愈伤诱导,同时对愈伤组织进行继代培养和发芽诱导筛选。结果表明,12份洋葱种子材料未诱导出愈伤组织,12份洋葱球的鳞茎盘只有‘早春黄3号（不育系）’诱导出愈伤组织;22份洋葱花序在黑暗条件进行愈伤诱导,诱导率为100%,说明洋葱不同组织对愈伤的诱导发生存在差异,洋葱幼嫩花序培养基诱导率100%,说明洋葱最佳诱导愈伤的组织为幼嫩花序。对不同材料愈伤进行继代培养,‘早春黄3号（不育系）’和‘黄金大玉葱’愈伤生长最快;利用液体培养基进行继代培养,能够快速、高效扩繁愈伤组织。选用27份不同梯度组合的培养基对愈伤组织进行出苗诱导,在光照条件下,开始会有绿色组织形成,全部诱导出根,均未诱导出苗。石蜡切片观察外植体诱导愈伤和继代培养愈伤无差异,再生培养基诱导后有根形态形成。说明不同成分的培养基诱导洋葱愈伤组织,其内部促进生根的激素增加,导致根的诱导发生。通用型洋葱愈伤组织的诱导形成,为不同基因型的洋葱诱导出苗、生根奠定材料基础,对洋葱基因编辑等技术应用具有促进作用。     

不同培养基和激素浓度处理对草地 早熟禾愈伤组织诱导的影响

以3种不同的草地早熟禾种子为外植体，研究了不同培养基、不同浓度的2，4-D、BA及水解酪蛋白对愈伤组织诱导的影响。试验表明：(1)MN6培育基有利于愈伤组织的诱导；(2)种胚愈伤组织的诱导和继代宜采用MN6 +2,4-D 3mg/L+BA0.2mg/L的培养基；(3)水解酪蛋白对草地早熟禾种子愈伤组织诱导的影响不大；(4)3种草地早熟禾种子中，新哥莱德(Nuglade)出愈率较高。     

龙芽槐木愈伤组织诱导及胚状体发生初探

以樵木幼茎及根为试材，添加不同种类和浓度的激素，进行愈伤组织诱导、胚状体发生及幼苗分化。结果显示，幼茎在MS＋2，4-D1．0mg／L培养基上愈伤组织诱导率最高。愈伤组织在MS＋BA1．0mg／L＋NAA0．04mg／L培养基上胚状体形成最多，幼苗分化率达92．5％，并能保持旺盛的再生能力。     

利用体细胞无性系变异培育籼稻铝毒耐性品系

为了提高水稻对铝毒的耐性，本试验使用了离体培养诱导的体细胞无性系变异。通过离体培养筛选胚发生的愈伤组织而培育成了耐性植株。用成熟种子胚诱导出愈伤组织，再将其愈伤组织培养在添加有不同浓度Al2（SO4）318H2O的培养基中。随着铝（Al）浓度的增高，种子萌发、愈伤组织诱导、小苗再生和愈伤组织的健康状况都降低了。     

BN对小麦花粉愈伤组织诱导频率的影响

BN对小麦花粉愈伤组织诱导频率的影响结果表明，在W14＋2.0mg/l 2,4-D KT0.5mg/l 11%蔗糖诱导培养基中添加BN可以明显缩短出愈时间，提高花药愈伤组织诱导率。BN在低浓度1.0-1.5μg/l时对愈伤组织诱导起促进作用，提高花药愈伤组织诱导率1．7－4．2个百分点；而当浓度升至10．1μg/l时，则有抑制愈伤组织形成的趋势。     

杜仲愈伤组织诱导及胚性愈伤组织的判别

为探索杜仲胚性愈伤组织诱导的条件,建立杜仲体细胞胚胎发生初步体系,以杜仲幼嫩叶片和未成熟合子胚为外植体、MS为基本培养基,探究外源激素配比、未成熟合子胚发育阶段与基因型对愈伤组织诱导的影响,并从形态学和细胞学对愈伤组织进行胚性的判断。试验结果表明：4种不同激素配比的培养基诱导出的叶片愈伤组织在形态上具有差异,MS+ 2,4-D 2 mg/L+ 6-BA 1 mg/L和MS+ 2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L有利于叶片胚性愈伤组织诱导;在培养基MS+ 2,4-D 2 mg/L+ 6-BA 1 mg/L上,以未成熟合子胚为外植体诱导出4种类型愈伤组织,其中圆球形和颗粒型突起的愈伤组织具有胚性;未成熟合子胚采集时间对愈伤组织诱导率具有显著差异,6月14日采集的外植体愈伤诱导率最高,不同基因型差异不显著。     

秤锤树愈伤组织诱导和生长的初步研究

为了研究秤锤树外植体的最佳采集时间和愈伤组织的诱导及生长状况,以秤锤树的叶片为外植体,选择WPM+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L作为培养基,研究不同月份取材和不同灭菌时间的处理对秤锤树愈伤组织诱导的影响,以及比较不同灭菌时间和盐胁迫条件下秤锤树愈伤组织的生理生化指标和生长情况。结果表明：秤锤树愈伤组织诱导的最佳取材月份是4月,该时期外植体的污染率最低;最佳灭菌方式为无菌水3次+75%酒精30 s+0.1%升汞1~5 min+无菌水3次。不同灭菌时间处理对愈伤组织生化指标影响明显,其中用升汞进行1 min、3 min表面消毒处理诱导产生的愈伤组织中可溶性糖显著高于5 min表面消毒处理诱导的愈伤组织中可溶性糖的含量,用升汞进行1 min、3 min表面消毒处理诱导产生的愈伤组织中可溶性蛋白显著低于5 min表面消毒处理诱导的愈伤组织中可溶性蛋白的含量,不同灭菌时间对SOD和POD的活性影响不显著;而用升汞进行3 min和5 min表面消毒诱导产生的愈伤组织表现出更好的耐盐性。     

基因型在棉花花药培养中的效应

棉花花药培养愈伤组织的诱导是植株再生的第一步，基因型在愈伤组织诱导上的差别必将影响着植株再生。本试验中，亚洲棉愈伤组织诱导率最高，陆地棉次之，海岛棉较差，野生种最差。在花药愈伤组织诱导上，种间杂种没显示出优势，但陆地棉品种间杂交则表现出优势。不同基因型诱导产生的花药愈伤组织的颜色、质地、生长量和生活力不同，亚洲棉生长量最大，但活力较差。     

甘啤4号大麦幼胚愈伤组织诱导及植株再生的研究

本研究以甘啤4号的幼胚为外植体材料,以模式品种Golden promise为对照,研究了不同培养基和激素配比对甘啤4号幼胚愈伤组织的诱导及植株再生的影响。研究结果表明,在同一培养基上,甘啤4号出愈率低于Golden promise,但都达到50%以上;在诱导愈伤组织的过程中,甘啤4号在IM2培养基上的出愈率较高,达71%,IM1与IM2培养基上形成的愈伤质量较IM3好,说明培养基对愈伤组织的出愈率起决定作用;且研究发现dicamba较2,4-D能提高大麦幼胚的出愈率。在相同的培养基上,Golden promise的诱导率明显高于甘啤4号,可见基因型对大麦愈伤组织的诱导率起决定作用。且不同的培养基和不同激素配比对幼胚愈伤组织的诱导率及分化率不同,分化培养基DM1的分化率高于DM2,这说明除基因型外,激素也对植株再生产生重要影响。研究证明甘啤4号愈伤组织诱导率及分化率均较高,适合于作为遗传转化的受体材料。     

多倍体大蒜胚状体及再生幼苗诱导研究

用秋水仙素诱导产生大蒜多倍体根尖,将其接种至诱导愈伤组织培养基中,诱导得到愈伤组织。将愈伤组织在继代培养基和MS培养基中继代培养,得到大小适宜且结构均为致密型的愈伤组织。将致密型愈伤组织移至细胞分化培养基和1/2 MS培养基中培养,得到有伸长的根状物并具有芽点的胚状体,1/2 MS培养基诱导胚状体的效果更好。最后将长出嫩叶的幼苗转入不同比例NAA和6-BA的1/2 MS培养基中,发现NAA浓度为0.5 mg/L,6-BA浓度为1、2、2.5mg/L时生长状况较好,作为对照组不加激素的1/2 MS培养基个别植株生长旺盛。     

小麦不同杂种世代花药脱分化特性研究

对5个小麦不同组合基因型的F1，F2，F3花药进行培养，结果表明：不同组合基因型在同一杂种世代的花药愈伤组织诱导率、愈伤组织鲜重和绿苗分化率等方面存在较大差异，而同一组合基因型在不同杂种世代的花药愈伤组织诱导率、愈伤组织鲜重和绿苗分化率等方面差异较小。花药愈伤组织诱导率与绿苗分化率具有显著的相关性。以石4185为亲本配制的两个组合基因型，在F1，F2，F3都表现出较高的花药愈伤组织诱导率和绿苗分化率，说明石4185是理想的花培育种桥梁亲本。     

普通荞麦愈伤组织诱导及其分化的正交设计试验研究

用正交设计法研究不同激素处理及不同外植体对普通荞麦愈伤组织诱导及分化过程中的影响。结果表明，在本实验设计中，2，4-D是诱导普通养麦愈伤组织的主要因素；诱导愈伤组织的最佳培养基为MS＋2．0mg／L 2，4-D＋1．5mg,／L 6-BA；愈伤组织分化的主要因素是6-BA；愈伤组织分化的最佳培养基为MS＋2．5mg／L 6-BA＋1．0mg／LKT。     

桃儿七不同外植体愈伤组织诱导研究

旨在建立一种桃儿七愈伤组织诱导培养体系,筛选出最佳诱导培养基和最适外植体。以MS为基本培养基,采用正交试验法研究6-BA、2,4-D和TDZ 3个因素及其组合对桃儿七成熟叶片、叶柄和茎段愈伤组织诱导率的影响。研究结果表明：3种外植体均可诱导出愈伤组织,叶片愈伤组织诱导率最高,达44.3%,其次是叶柄,达24.7%,茎的愈伤组织诱导率为18.1%,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+2,4-D 1.5mg/L,细胞分裂素6-BA和TDZ联合使用有利于提高愈伤组织诱导率并改善愈伤组织质地。与茎段和叶片所得愈伤组织相比,以叶柄为外植体获得的愈伤组织质地较疏松,呈明显的黄绿色颗粒状,更适合进一步细胞培养和诱导分化。本研究建立了一种高效的桃儿七愈伤组织诱导培养体系,为桃儿七体细胞胚的培养提供了材料。     

两种诱导子对菘蓝愈伤组织诱导及增殖的影响

以菘蓝叶片为外植体,在培养基中添加一定浓度的La(NO3)3和CuSO4,研究两种非生物诱导子对愈伤组织的发生时间、诱导率、重量及增殖的影响。结果表明:15.0 mg/L La(NO3)3处理能使叶片提前5 d产生愈伤组织,愈伤组织的诱导率和鲜重分别比对照提高了18.33%和79.68%,并且该浓度的硝酸镧还促进了愈伤组织的增殖和干物质的积累;0.8 mg/L CuSO4处理能使叶片提前4 d产生愈伤组织,诱导率和鲜重分别比对照提高了18.33%和60.24%,而且0.8 mg/L CuSO4最有利于愈伤组织的增殖和干物质的积累;但高浓度镧和铜会抑制菘蓝愈伤组织的诱导及增殖。     

单基因型匍匐翦股颖茎段的愈伤组织诱导和植株再生

为建立匍匐翦股颖愈伤组织再生体系,通过种子愈伤组织诱导和再生实验,筛选出克隆系Penn A4-1。进一步以克隆系的茎段为材料,建立了高效稳定的单一基因型Penn A4-1愈伤组织诱导和再生体系。愈伤组织诱导和愈伤组织增殖的最适培养基均为MS+1 mg/L 2,4-D,出愈率和增殖率分别达到91.67%和169.25%;愈伤组织分化的最适培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率达到52.38%。高效愈伤组织再生体系的建立,为匍匐翦股颖品种Penn A4持续稳定的基因工程研究奠定了重要的基础。     

蒙古黄芪与膜荚黄芪愈伤组织诱导及再生植株体系的建立

本研究以蒙古黄芪和膜荚黄芪无菌苗的茎段、下胚轴、子叶、叶片为外植体,通过调整生长调控激素(6-BA与NAA)的浓度,筛选出愈伤组织诱导的最适外植体和植株再生的最佳培养基,建立了黄芪再生植株体系。结果表明蒙古黄芪愈伤组织诱导最佳外植体是下胚轴,愈伤组织诱导率是100%,愈伤组织与再生植株的最佳培养基是MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,再生植株分化率为92%;膜荚黄芪愈伤组织诱导最佳外植体是茎段,愈伤组织诱导率是97%,愈伤组织与再生植株的最佳培养基是MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,再生植株分化率为96%。两种黄芪的愈伤组织经过6周时间均可诱导出幼苗,再生苗生长两周可以移栽。本研究所建立的黄芪再生植株体系可为优良黄芪种质资源保存、种苗快速繁育及开发利用提供参考。     

南方红豆杉愈伤组织诱导初探

为了研究南方红豆杉愈伤组织诱导的影响因素,选取不同外植体、不同外源激素、不同光照条件进行研究。结果表明：（1）茎段是诱导红豆杉愈伤组织的最佳外植体,出愈时间快,愈伤组织黄绿色,质地疏松;而叶片则出愈时间慢,愈伤组织黄白色,质地紧密。（2）2,4-D与NAA的协同促进作用明显,当2,4-D/NAA为1/5时,诱导效果最好,而比值较大时不利于愈伤的诱导。（3）黑暗培养能够明显促进愈伤组织发生,褐化现象减轻。     

梅花品种"美人"叶片离体再生体系建立

以“美人’梅离体培养的叶片为材料进行愈伤组织诱导再生研究，诱导过程分两步，第一步是愈伤组织的诱导，诱导过程中生长素2,4-D起了决定性的作用，并且以液体培养基为佳，而且暗培养的愈伤组织再分化率明显高于光培养。具体培养基为1／2WPM＋5mg／L 2,4-D；第二步是在愈伤组织诱导出之后，进一步诱导愈伤组织再生出植物，在经过7d液体培养基的诱导之后将离体叶片转入1／2WPM＋1．0mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋8mg／L AgNO3＋100mg／L水解乳蛋白培养，再分化率可以达到24．25％。愈伤组织分化出苗之后，进一步诱导生根，“美人”梅最佳生根培养基是1／2WPM＋0．5mg／L NAA。     

轮叶党参不同外植体愈伤诱导比较

分别以轮叶党参叶片、叶柄、茎段和种子为外植体诱导愈伤组织。结果表明,不同外植体均可诱导出愈伤组织,但其在出愈率和愈伤生长方面差异较大。其中叶片诱导愈伤组织效果最好:愈伤诱导率达到100%,愈伤生长最快,平均每天可增加24.5mg,且诱导的愈伤质地紧密,不易破碎。不同外植体所产生的愈伤组织均可分化再生,其中以种子和叶片为外植体产生的愈伤再分化率较好,分别为100%和87.5%。综合各方面得出,叶片是诱导愈伤组织的最佳外植体。