玉米丝黑穗病菌PCR检测

利用玉米丝黑穗病菌基因组特异引物PCR技术,检测了该菌对玉米植株的侵染状况,并对不同玉米品种在苗期对丝黑穗病菌的抗性进行了初步判断。研究结果表明,感病品种K12分别在接种后第3 d的茎中,6 d的茎,9 d的根、茎、叶,12 d茎,抗病品种20060分别在接种后第3 d的茎、6 d的茎、9 d的茎和叶、12 d的茎和15 d叶都能扩增出PCR特异片段,经过EM种衣剂包衣的玉米幼苗的根茎叶材料扩增出来的特异DNA条带明显少于未经包衣的玉米幼苗。EM包衣处理能够有效的提高玉米种子的抗病能力,减少了玉米丝黑穗病菌对幼苗的侵染机会,有效地防治了玉米丝黑穗病。     

玉米对丝黑穗病菌抗性影响因子研究

在进行抗病性鉴定的基础上,测定了抗、感病品种胚芽和胚根内的N、P、K、可溶性糖和维生素C的含量以及不同时期玉米生长点内防御酶活性的变化。结果表明：玉米对丝黑穗病菌的抗性与胚根和胚芽内的N、P、K含量呈正相关,与Vc和可溶性糖含量呈负相关。当病菌侵入后抗病品种苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)活性上升幅度高于感病品种,而多酚氧化酶(PPO)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)在感病品种中上升幅度高。土壤施用氮肥和钾肥能明显提高玉米对丝黑穗病菌的抗性,磷肥效果不明显。     

玉米丝黑穗病菌致病性分化研究

从我国玉米品种资源中筛选出6个具有广泛血缘代表性的自交系B73、掖478、Mo17、齐319、黄早四和丹340作为玉米丝黑穗病菌的生理分化鉴别寄主,确定了玉米丝黑穗病菌生理分化鉴别寄主体系。利用6个抗病性差异明显的鉴别寄主对玉米丝黑穗病菌进行生理分化鉴定,结果鉴别出7个生理分化致病类型。     

玉米丝黑穗病菌的PCR检测

A pair of species-specific primer for sporisorium reilianum was designed according to the pra3 gene of sporisorium reilianum,and the results of polymerase chain reaction showed that a 499bp DNA was amplified by using the primers,and the PCR-based assay could detect more than 1pg fungal DNA using the primer.The PCR as a highly sensitive and reliable tool,could be used in detection of sporisorium reilianum.     

玉米丝黑穗病菌对寄主防御相关酶活性的影响

玉米丝黑穗病是玉米生产上的一种主要病害,对玉米生产造成了严重损失。研究表明:当丝黑穗病菌侵染玉米后,激活寄主体内相关防御酶系,使PAL、SOD、EST和PPO四种酶活性明显提高,抗病品种新铁10的酶活性升高幅度大于感病品种沈单16;而POD和CAT酶活性却下降,抗病品种新铁10的酶活性下降幅度大于感病品种沈单16。不同品种的成株期抗病性与其相关防御酶活性高低明显相关。     

玉米丝黑穗病菌DNA多态性的初步研究

从169个随机引物中筛选出了9个单引物和3个双引物,利用这些引物对玉米丝黑穗病菌进行了RAPD遗传多态性分析。聚类分析结果将24个菌株划分为3个致病类型:菌株03-12、03-13、03-01、03-02、03-03、03-11、03-04、03-16、03-07、03-08和03-14聚为一类;03-18、03-20、03-17、03-26、03-29、03-27、03-23、03-25、03-28聚为一类;03-21、03-22、03-15和03-10聚为一类。表明玉米丝黑穗病菌菌株间存在一定的遗传多态性和遗传分化,分化与菌株地域来源关系不大。     

6省区玉米丝黑穗病菌遗传多样性分析

采用随机扩增多态性DNA技术(RAPD)对我国6省区玉米丝黑穗病菌的生理分化情况进行了初步研究。通过10个随机引物将来自于吉林、辽宁、黑龙江、山西、河北、内蒙古自治区的102株玉米丝黑穗病菌大致划分为6个类群(相似系数0.42),在更高的相似水平上,类群A和类群B还可以进一步划分为众多的亚群。从聚类分析的结果可以看出,相似性较高的菌株大多来源于相同或相近的地区,说明玉米丝黑穗病菌的亲缘关系存在一定的地域性。     

玉米丝黑穗病菌致病力分化研究

采用土壤接种方法,对采自黑龙江省不同玉米生产区的3个菌株进行了致病力分化测定。试验结果表明,来自不同地区的菌株对同一玉米自交系(品种)的致病力无明显差异。哈尔滨、佳木斯和肇东的3个菌株对Mo17和维27的发病率为0～5%,哈尔滨的菌株对龙抗11的发病率为9.4%。相对比较而言,佳木斯和肇东地区的菌株致病力稍低。     

玉米丝黑穗病菌DNA提取及UP-PCR反应体系建立

采用CTAB法、SDS法和尿素法,从玉米丝黑穗病菌液体培养物中提取基因组DNA,比较其提取效果。结果表明：改进的CTAB法可有效去除多酚、多糖和色素等杂质对DNA的污染,可获得高质量模板DNA。以此为模板进行UP-PCR(Universally Primed PCR)反应,对UP-PCR扩增反应中的一些重要参数进行了优化,建立适合于玉米丝黑穗菌的UP-PCR反应体系。     

低磷胁迫下不同基因型玉米内源激素的动态变化

用高效液相色谱法测定在低磷胁迫下不同基因型玉米生育进程中叶片和根系内源激素含量的动态变化。结果表明,不同基因型玉米叶片和根系内源激素含量除ABA含量为磷低效自交系>磷高效自交系>F₁外,ZT、GA₃和IAA含量均为F₁>磷高效自交系>磷低效自交系。低磷胁迫下,除ZT含量较正常供磷水平减少外,GA₃、IAA和ABA含量均较正常供磷水平增加。ZT和ABA的变幅表现为磷低效自交系大于磷高效自交系和F₁,GA₃和IAA的变幅表现为磷高效自交系和F₁大于磷低效自交系。此外,低磷胁迫下磷高效自交系与磷低效自交系间同一内源激素最值出现时期不同。说明低磷胁迫下不同磷利用效率自交系内源激素表现出规律性变化,因此可将内源激素作为鉴定和选育玉米磷高效基因型的参考指标。     

吉林省玉米丝黑穗病研究进展及抗病品种选育

吉林省近几年玉米丝黑穗病有逐年加重的趋势,给粮食生产带来巨大的损失。丝黑穗病是以土壤传病为主,发病轻重取决于品种抗病性和土壤内越冬菌源数量以及播种和出苗期环境因素的影响。玉米对丝黑穗病的抗性呈数量性状遗传。根据其抗性遗传特点,在抗病品种选育上应坚持以拓宽种质基础为主的综合选择方法。     

高效液相色谱法测定玉米内源激素方法的改进研究

以玉米植株为材料,对提取、纯化和利用高效液相色谱法分析测定玉米植株中内源激素生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)和玉米素(ZT)的含量的方法进行改进。针对玉米植株的糖分、叶绿素含量高等特点,对以往的HPLC分析植物内源激素的植物材料前处理方法进行改进。试材用液氮研磨以80%预冷的甲醇浸提,浸提液利用旋转蒸发仪浓缩、石油醚去除色素、乙酸乙酯提取激素、PVP 去除酚类杂质,最后用0.45 um微孔滤膜抽滤,紫外检测器在254 nm波长下检测吸收波长,以甲醇和水位流动相,利用高效液相色谱法检测内源激素含量,回收率分别为IAA 93.79%±7.43%,ABA 95.79%±6.14%,GA388.63%±6.31%,ZT 89.69%±7.34%。     

甜菜生长发育期内源激素的变化规律

应用高效液相色谱法测定了甜菜生长发育期内源生长素(IAA)、赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)在甜菜根尖和幼叶中的含量，分析了这些内源激素含量对甜菜生长发育的影响。试验结果表明：在甜菜生长发育过程中，根尖和幼叶，均是GA3的含量高于IAA和ABA。幼叶与幼根中IAA比值为11-29，表明甜菜IAA源于幼叶中，IAA含量提高，可促进叶丛快速生长。在糖分积累期，新叶继生时IAA含量迅速提高。随生育进程，幼根中GA3与幼叶中IAA的比值逐渐下降，与叶丛生长速度比较，表现了同步下降的关系。ABA主要存在于幼叶中，是幼根的1．6～17．4倍，随生育进程，幼根中ABA变化较小，有逐步下降趋势，而幼苗中ABA含量在生育后期明显升高。     

化控剂对玉米光合、激素及茎秆力学特性的影响

以东农253为试验材料,在玉米9叶期喷施密高和KP(主要成分DCPTA和ETH),在玉米5个生育时期测定叶片光合酶活、内源激素及茎秆力学特性参数,并进行测产及相关性分析,探究大田条件下化控剂对玉米生长发育的影响。结果表明,喷施密高和KP后叶片SPAD、P_n、RuBPc和PEPc显著提高,增加叶片IAA、GA和ZR含量并降低ABA含量。玉米茎秆单位节间长度干物重、穿刺强度、横折强度和田间致倒伏推力有所增大,降低扁率及子粒含水量,密高和KP处理下玉米产量分别增加6.47%和9.23%。相关性分析表明,除ABA含量与产量呈显著负相关外,光合和其他激素指标呈显著正相关,PEPc、SPAD在完熟期与产量相关性最大,RuBPc在乳熟期与产量相关性最大,P_n在灌浆初期与产量相关性最大。     

玉米丝黑穗病接种浓度与发病关系研究

采用人工控制的土壤接种方法，对玉米丝黑穗病[Sporisorium reilianum(Kühn)Langdon & Fullerton]病菌不同接种菌土浓度与发病程度的关系进行了研究。结果表明，土壤接菌量与玉米丝黑穗病发病率关系密切，供试玉米品种的丝黑穗病发病率均随着接种菌土浓度的增加而增加，当接种菌土达到一定浓度后，发病率不再显著提高。抗性材料的接种浓度达到3‰以上时其发病率不再显著提高。因此，在玉米抗病育种中可采用3‰接种菌土浓度筛选抗病种质或品种。     

离体玉米茎尖直接产生雌、雄花序过程中内源激素的研究

Using ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay) methods,three-type phytohormone in cultured shoot apices of maize were determined.It showed that the contents of three kinds of endogenous cytokinins changed unbalanced,which including ZRs,DHZRs and iPAs,cytokinins kept in high contents totally compared to the contents of IAA and GA_1/3.The concentration of IAA decreased with the in-vitro culture time was postponed,specially at the time of the 35-40 days when the ears or tassels emerged from the in vitro cultured shoot apices.The contents of GA_1/3 increased steadily in all 40 days of the in-vitro culture progress,but the concentration of ABA kept in a very low level in all the in-vitro culture progress.These results exhibited that both GA_1/3 and three kinds of cytokinins played an important and positive role when the maize shoot apices changed from the vegetative developmental stage to the reproductive one.     

茶树新梢内源激素的HPLC分析及日变化

研究了茶树新梢内源赤霉酸（ＧＡ３）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）、吲哚乙醛（ＩＡＡＤ）、脱落酸（ＡＢＡ）和玉米素（Ｚｅａｔｉｎ）等激素的ＨＰＬＣ分析方法。在ＯＤＳ（Ｃ１８）反相柱上，ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ和ＡＢＡ用甲醇—乙腈—ＫＨ２ＰＯ４缓冲液系统为流动相、Ｚｅａｔｉｎ用甲醇—乙腈—磷酸缓冲液系统为流动相得到满意的分离，它们与相邻峰间的峰高分离度均在０．６５以上。在紫外波长λＧＡ３＝２１０ｎｍ，λＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ＝２８０ｎｍ和λＺｅａｔｉｎ＝２５４ｎｍ、灵敏度０．００３ａｕｆｓ（ＧＡ３）和０．００１ａｕｆｓ（ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ）条件下，各种激素得到定量。ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ的平均标样添加回收率分别为７６．２４％，８９．６９％，８４．３３％，９０．９６％和８２．０９％。茶树新梢内源激素含量在一天内有明显的变化，其高峰值均出现在１３时左右。一天内以１０—１６时取样进行内源激素测定较适宜