传染性法氏囊病重组亚单位疫苗保存期试验

将14日龄SPF鸡分为5组,A、B和C组分别接种保存期为203、403、70 d的传染性法氏囊病重组亚单位疫苗,D和E组不接种。35日龄时,对A、B、C、D组的鸡以100倍法氏囊感染剂量的标准强毒株IBDV BC-6/85进行滴鼻。攻毒后第4天,将所有鸡致死,进行剖检,观察法氏囊眼观病变,取法氏囊组织以琼脂免疫扩散试验检测传染性法氏囊病毒抗原。法氏囊未见到明显肿大、变黄或胶冻样渗出物或出血等眼观病变及法氏囊中传染性法氏囊病毒抗原检测阴性判定为受到免疫保护。将各组的试验数据以x2检验进行统计分析。结果,A、B、C、D组的免疫保护率差别具有统计学意义,A与D组、B与D组、C与D组之间的免疫保护率具有极显著差异。结果表明,在2~8℃保存1年该疫苗的稳定性和免疫原性仍然相当好。     

鸡病原性大肠杆菌（O2）亚单位疫苗的研究

试验提取并纯化了鸡病原性大肠杆菌血清型（Ｏ２）的菌毛，并电镜观察了菌毛及菌毛表达。提取了鸡病原性大肠杆菌血清型（Ｏ２）荚膜多糖及菌体可溶性蛋白质，电镜观察了提取过程中荚膜、细胞壁以及胞内物质等细菌结构变化。将提取的菌毛、荚膜多糖和灭活的菌体作为抗原、蜂胶作佐剂，制成蜂胶疫苗，免疫鸡只，于７周龄进行同尖毒保护试验，从保护指数、细菌分离和病变级数三方面比较了３种疫苗的免疫效果，试验结果表明：荚膜疫苗效     

传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫效力及安全性试验

以传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗3批次实验室制品分4个剂量(即0.500 ml、0.250 ml、0.125 ml、0.075 ml)分别免疫12组14日龄SPF鸡。接种后观察各组鸡只的食欲和精神状态。免疫后第21 d,以琼脂免疫扩散试验检测IBDV血清抗体;除N组(不免疫不攻毒)外其他组均以标准强毒株BC6/85进行攻毒。攻毒后第4 d剖检,观察法氏囊及注射部位的眼观病变,检测法氏囊中IBDV抗原。结果,9个组(A、B、C、E、F、G、I、J、K)的免疫保护率与对照组(N)的免疫保护率之间差异均显著(χ2>χ20.004 2),但3个组(D、H、L)的免疫保护率与对照组的免疫保护率之间差异均不显著(χ2<χ20.004 2)。将12个试验组(A组至L组)的血清抗体水平进行方差分析,差异显著(p<0.05);以q检验进行多重比较,9个组(A、B、C、E、F、G、I、J、K)之间及3个组(D、H、L)之间差异不显著(p>0.05),而前9组与后3组之间差异显著(p<0.05)。上述结果表明,该实验制品可诱导鸡只产生显著的血清抗体水平及抗强毒攻击的免疫力,并具有可接受的安全性。     

通用分子佐剂与IBDV亚单位联合的疫苗免疫效果

为评价通用载体pET-mLTA-CTLA-4表达的蛋白质与传染性法氏囊病毒(IBDV)亚单位联合疫苗的免疫效果,表达重组蛋白mLTA-CTLA-4,以家兔毒性试验确定其安全性:同时RT-PCR法扩增鸡IBDV的VP2基因,构建表达载体pET-VP2;选择10日龄非免疫健康鸡进行分组试验,包括IBDV活疫苗免疫组、不同剂量VP2+mLTA-CTLA-4免疫组及空白对照组,免疫后定期检测鸡血清抗体IgG小肠黏膜抗体IgA的ELISA效价;在加强免疫后用IBDV野生毒株攻击,连续观察2周并计算保护率.结果显示,重组蛋白mLTA-CTLA-4安全无毒性,IBDV活疫苗免疫组产生的抗体IgG、IgA水平均高于重组蛋白免疫组,重组蛋白免疫组与活疫苗免疫组对鸡的保护率均为100％.表明重组蛋白mLTA-CTLA-4可与IBDV亚单位疫苗联合应用,保护鸡只免受IBDV感染.     

细菌亚单位疫苗免疫小鼠的细胞免疫指标检测

将嗜水气单胞菌的胞外毒素（ＨＥＣ）和胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓ）与迟缓爱德华氏菌脂糖（ＬＰＳ）、脱毒多糖（ＰＳ）偶联,制成３种亚单位偶联疫苗（ＨＥＣ－ＰＳ、ＨＥＣ－ＬＰＳ、ＥＣＰａｓｅ－ＰＳ）,分别免疫小鼠。另设这两种细菌的全菌灭活苗免疫及注射生理盐水对照组,每组８只。在第２次免疫后第７天用四甲基偶氮唑盐比色法（ＭＴＴ）,检测脾淋巴细胞转化率与腹腔巨噬细胞吞噬活性,并检测各组小鼠的全菌凝集抗体。结果表     

布鲁氏菌免疫保护抗原与抗病疫苗的研究进展

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的世界性人畜共患传染病,主要的防治方法是注射疫苗.但当前常用的布鲁氏菌病疫苗具有免疫成本高、时间短、保护效率低、毒力不稳定等问题.介绍了布鲁氏菌病的致病机理与防治,综述了布鲁氏菌病常用疫苗、基因工程疫苗以及免疫保护抗原的研究进展.     

重组金黄色葡萄球菌FnbpA亚单位疫苗的研制

【目的】制备金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(FnbpA)基因工程亚单位疫苗,并以小白鼠为试验模型,检测其免疫保护效果。【方法】诱导表达FnbpA,经组氨酸标签亲合纯化后用Bradford法测定纯化的目的蛋白的含量,并检测其黏附活性及对动物的安全性。制备FnbpA亚单位疫苗,经无菌检验及安全检验后,进行免疫保护试验,用ELISA方法检测被免疫小鼠血清中的抗体效价,通过腹腔攻毒试验检测疫苗的免疫保护力。【结果】纯化的目的蛋白在80 ku处出现单一条带,蛋白质量浓度为0.245 mg/mL。细菌黏附抑制试验发现,经FnbpA蛋白预处理过的MDBK细胞黏附的金黄色葡萄球菌数较对照极显著减少;动物安全性试验显示,小鼠注射FnbpA亚单位疫苗后均健活,表明制备的FnbpA亚单位疫苗安全性良好。所有免疫组小鼠于首免后7 d即可在血清中检测到特异性抗体,抗体效价逐渐上升,在21 d达到最高值,之后逐渐降低。【结论】纯化的FnbpA蛋白达到了电泳级纯度,且依然保持良好的黏附活性;制备的FnbpA亚单位疫苗作用机体产生的抗体水平符合抗体消长规律,且表现出良好的免疫保护力。     

浅谈布鲁氏菌疫苗的研究进展

布鲁氏菌病是一种严重威胁着人和多种动物生命健康的人畜共患性传染病,致病原为布鲁氏菌（Brucellasp）。我国将其列为二类传染病,世界动物卫生组织将其列为B类法定传染病。疫苗在布鲁氏菌病的防治上发挥了积极的作用,各国学者在布鲁氏菌病疫苗研究方面取得可喜成绩。     

转移因子对猪圆环病毒亚单位疫苗免疫效果的影响

为探寻转移因子(TF)对猪圆环病毒亚单位疫苗免疫效果的影响,将猪脾脏研磨,并反复冻融研磨液,离心获取冻融上清,用超滤法从上清液中提取转移因子。TF经理化检验合格后,以添加剂的形式与猪圆环病毒亚单位疫苗(Cap疫苗)混合,制成TF–Cap疫苗,并和未添加TF的Cap疫苗同时进行小鼠免疫试验。TF–Cap疫苗和Cap疫苗免疫的小鼠都设一免组和二免组,首次免疫后每隔10 d对实验鼠进行尾静脉采血,并用间接ELISA方法测定血清中猪圆环病毒2型(PCV2)的抗体水平。结果表明：用超滤法制得的TF,多肽含量为1.83 mg/mL;抗体检测数据显示,4个免疫组与对照组(注射生理盐水)的抗体检测值有极显著差异(P<0.01),而4个免疫组之间无显著差异(P>0.05),TF–Cap疫苗一免组的抗体水平与Cap疫苗二免组的抗体水平相当,表明在圆环病毒基因工程疫苗中添加TF可一定程度的提高免疫动物的抗体水平。     

鸡痘病毒载体多价基因工程疫苗及禽流感等亚单位疫苗研制

一、项目简介及技术创新该项目主要是应用我国动物疫病及免疫预防中的问题,迫切需要用更新、更好、效率更高的疫苗来完善疫病防制体系,最终达到净化的目的而确定的。为了研制与现有常规疫苗免疫保护效果更加安全的鸡痘病毒活载体疫苗及其相配套的鉴别诊断技术,我们主要选择有代     

Research and development of a novel subunit vaccine for the currently circulating pseudorabies virus variant in China

Pseudorabies (PR) is a devastating viral disease which leads to fatal encephalitis and respiratory disorders in pigs. Commercial gE-deleted live pseudorabies virus (PRV) vaccine has been widely used to control this disease in China. However, the new-emerging variants of PRV compromises the protection provided by current vaccines and lead to the outbreak of PR in vaccinated pig herds. Several killed and live vaccine candidates based on current PRV variants have been reported to be effective to control the disease. A subunit vaccine based on gB protein, one major PRV glycoprotein which elicits strong humoral and cellular immune responses, however, was never evaluated for protection against the current circulating PRV variants. In this study, full-length PRV gB protein was successfully expressed in baculovirus/insect cells in the soluble format and was tested on 3-week-old piglets as a subunit vaccine. Compared with unvaccinated pigs, the gB-vaccinated pigs developed specific antibody-mediated responses and were protected from the virulent PRV HN1201 challenge. All vaccinated pigs survived without showing any PRV-specific respiratory and neurological signs, but all unvaccinated pigs died within 7 days after HN1201 challenge. Hence, this novel gB-based vaccine could be applied as an effective subunit vaccine to control PRV variant in China.     

动物寄生虫基因工程疫苗的研究进展

由于长期使用化学药物导致了动物寄生虫的抗药性、药物残留和环境污染等一系列问题，而基因工程疫苗具有安全、无药物残留和无环境污染等优点，本文简述了寄生虫基因工程疫苗的研究进展．     

鲤疱疹病毒3型ORF57基因工程亚单位疫苗制备及免疫保护研究

旨在研究鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)囊膜蛋白ORF57作为疫苗候选抗原的可能性。根据已经发表的鲤疱疹病毒3型全基因组(GenBank登录号为DQ657948.1),设计特异性引物,扩增、克隆ORF57序列并进行生物信息学分析。构建重组原核表达载体pET-32a(+)-CyHV-3-ORF57,大肠埃希菌体外表达获得重组蛋白ORF57。此外,对ORF57亚单位疫苗的免疫保护性进行研究。鲤鱼免疫4周后CyHV-3攻毒具有75%的存活率,ORF57亚单位疫苗组鲤鱼的存活率显著高于PBS和pET-32a(+)组。实验结果证明,重组ORF57亚单位疫苗具有较强的免疫保护性,为免疫学临床的应用和CyHV-3疫苗的开发提供了实验基础。     

茶叶酶研究的方法与进展

对茶叶酶研究方法、动态及成果进行了概述.随着研究技术、思路的拓宽,茶叶酶研究与应用领域已从内源酶扩展到外源酶,从酶的性状表现追踪到遗传特性,从酶活性的环境调控措施深入到化学干预,从自然状态下酶的利用发展到经过加工处理后酶的应用阶段.     

鸡毒支原体病研究进展

鸡毒支原体( Mycoplasma Gallisepticum , MG )是危害禽类的常见疾病之一,呈世界性流行,严重影响着养禽业的健康发展。因此,防控鸡毒支原体病,净化种鸡群对养禽业的发展意义重大。本文通过对MG 的病因、病原、流行特点、症状以及防治措施等的研究进展进行综述,以期为防控 MG 提供参考。     

农业机器人研究进展评述

【目的】系统梳理农业机器人研发现状,归纳凝练目前存在的关键科学问题,明确未来发展分析,促进农业机器人更好服务于农业生产,提高农业生产的机械化和智能化水平。【方法】通过对国内外大量文献资料的收集、查阅,总结梳理了当前国内外农业机器人的研究现状与应用现状。【结果】目前农业机器人总体包括植保机器人、采摘机器人、信息采集机器人、移栽嫁接机器人4种典型机器人,机器人的共性系统及关键技术主要包括:自动导航与路径规划、作物目标识别与分析、机械臂自主规划与控制、多机协作和智能交互。【结论】当前农业机器人在农业中的应用越来越广泛,但推广与普及的主要瓶颈是农业机器人的制造成本问题和智能化程度问题,农业机器人未来主要研究方向是低成本高适应性的开放性机器人研究和"农业大脑"智能决策体系的构建。     

我国番木瓜育种研究进展与展望

阐述了我国番木瓜育种研究进程的3个主要转折阶段,以及我国育成的主要品种与育种技术,初步建立了“杂交选育”和“生物信息技术”相结合的育种模式。提出了今后番木瓜育种与应用研究的方向:提高番木瓜品质和综合抗性;生物信息技术与杂交品种选育相结合,加速新品种的选育研究;番木瓜诱变育种与太空育种;番木瓜抗低温育种。     

牛心朴子的研究进展

牛心朴子(Cynanchum komarovii)是我国草地危害较大的毒草之一,属于萝摩科鹅绒藤属植物,民间用于镇痛、杀虫、退烧和止泻,也用于治疗胆囊炎.近年来的国内研究表明,牛心朴子的化学成分除含有一些无机元素外,还含有生物碱、挥发油、黄酮醇类、糖类、甾体及其甙、脂肪酸及脂肪酸酯、芳香族化合物等.因此,对该植物中的生物活性物质进行分离和结构测定,以及进一步进行生物活性研究,有着重要的理论意义和实用价值.对牛心朴子的生物学特性、资源状况、地理分布、危害以及近年来在化学成分、生物活性等几个方面的最新研究进展进行了系统的介绍.