畜禽主要病毒性传染病的免疫防制

免疫接种是激发动物机体产生特异性抵抗力,使易感动物转化为不易感动物的一种手段.有组织有计划地进行免疫接种,是预防和控制畜禽传染病的重要措施之一,在某些病毒性传染病如口蹄疫、狂犬病、猪瘟、鸡新城疫、小鹅瘟、鸭瘟、兔瘟等病的防制措施中,免疫接种更具有关键性作用.现结合生产实践,分述如下.     

浅谈如何提高畜禽免疫效果

实施免疫接种是预防畜禽疫病的一项重要、有效措施,为提高免疫效果,必须建立合理的免疫程序,严格把握免疫接种技术环节,以达到良好的免疫效果。文章列举了几种主要疾病的免疫程序及免疫过程中的注意事项,以供生产实际参考。     

2018—2019年运城市鸡高致病性禽流感和鸡新城疫抗体监测与分析

为了降低动物疫病传播风险,推动禽类养殖业健康安全发展,为禽类综合疫病防控提供科学依据,2018—2019年对山西省运城市13个县市207个养殖场采集5081份血清样样品,通过血凝抑制试验进行高致病性禽流感和鸡新城疫免疫抗体检测。结果显示：2018—2019年,禽流感H₅亚型免疫抗体群体合格率分别为93.33%、76.36%,个体合格率分别94.83%、76.86%;禽流感H₇亚型免疫抗体群体合格率分别为100%、95.92%,个体合格率分别为100%、94.31%;鸡新城疫免疫抗体群体合格率分别为100%、92.73%,个体合格率分别为99.70%、87.64%。在全市13个县市中,9个县市禽流感H₅、H₇亚型、新城疫场群合格率均在70%以上,4个县市禽流感H₅亚型场群合格率不达标,3个县市禽流感H₅亚型个体合格率不达标。结果表明,虽然运城市鸡高致病性禽流感和鸡新城疫整体免疫效果较好,但是发生疫情的风险依然较大,应继续加强落实强制免疫,科学指导养殖户规范免疫程序,强化养殖户主体责任,提升整体防控能力。     

3种疫苗单独和联合免疫对猪抗体水平的影响

{目的]寻求有效结合注射的新型免疫程序,以有效控制猪瘟（CSF）、猪口蹄疫（FMD）和猪繁殖与呼吸综合征（PRRs）疫情的发生和流行[方法]在陕西省横山和米脂两县将140头猪随机分为7组,每组20头,采用CSF活疫苗（脾淋源）、FMD灭活疫苗（0型Ⅱ）、PRRS灭活疫苗（NVDC—JXA1株）分别进行单独、2种及3种同时分．点免疫注射试验,用正向间接血凝和EUSA法检测猪抗体水平。l结果10）3种疫苗都可以刺激猪产生特异性抗体,并且抗体在21、28和35d呈规律性增长。②CSF疫苗与FMD、PRRS疫苗分开和三者同时使用时．虽然FMD、PRRS疫苗推迟CSF抗体的上升时问,但是对CSF的免疫效果产生的影响不明显。（3）PRRS与FMD疫苗同时注射后,所产生抗体效价在21、28和35d均比单独注射PRRS疫苗阳性率高,说明FMD疫苗可对PRRs疫苗注射后有效抗体的产生达到积极协同作用,促进PRRS有效免疫抗体的产生,同时免疫CSF疫苗和PRRS疫苗的抗体水平低于单独注射PRRS疫苗,说明共同免疫CSF和PRRS疫苗时,2种疫苗会相互影响,使免疫效果不如单独免疫。④FMD和PRRS疫苗同时注射后,FMD疫苗所产生的抗体水平（OD值）最高,且一直呈上升趋势,优于FMD疫苗单独注射所产生的抗体水平,说明FMD和PRRS疫苗同时注射,更能促进FMD抗体的产生．[结论]3种疫苗同时分点注射和单注CSF产生抗体后再同时分点注射FMD和PRRS都是较好的防疫体系,具体应根据养殖规模及地域选择合适的防疫体系.     

乐山市2015～2017年猪口蹄疫免疫效果监测分析

为掌握乐山市猪口蹄疫免疫接种效果,2015～2017年,采用ELISA方法共检测猪口蹄疫血清样品3340份。结果显示,3年的猪口蹄疫免疫抗体合格率均超过了农业部规定的70%标准,分别为87.59%、94.48%和94.88%,免疫效果良好,但也存在不均衡性,表现为部分场点特别是散养户免疫抗体合格率较低。结果提示,对免疫抗体合格率低的场点应立即开展补免工作,加强监测,降低疫病发生风险。     

猪瘟抗体监测及免疫效果分析

 对 9个规模化养猪场 15 18份血清进行了猪瘟免疫抗体检测。 7日龄、2 0日龄和 4 0日龄仔猪无免疫保护力 (血凝抗体效价低于 1∶16 ,下同 )的比例分别为 0、4 .8%和 19.7% ;而抗体效价≥ 1∶12 8的比例分别为 87.8%、74 .6 %和 35 .2 %。乳前免疫后 2 0、30、4 0、5 0和 6 0日龄无免疫保护力仔猪的比例分别为 18.4 %、8.4 %、9.8%、10 .0 %和 15 .4 % ,而抗体效价≥ 1∶8的比例分别由 4 0日龄的 4 1.4 %降至 5 0日龄的 15 .0 %和 6 0日龄的 3.8%。所测 398份 2 5日龄仔猪母源抗体效价均≥1 16 ,但抗体效价≥ 1 12 8的比例由 2 0日龄的 92 .8%降至 2 5日龄的 6 2 .5 %。提示猪群中存在不同比例的免疫不合格和低抗体水平的猪 ,可能是猪场发生猪瘟的主要原因     

2016—2020年新疆兵团第四师羊口蹄疫免疫抗体监测分析

为详细了解、掌握和科学评价新疆兵团第四师辖区羊口蹄疫免疫成效,制定科学有效的羊口蹄疫防控方案,该文对辖区2016—2020年间羊口蹄疫免疫抗体检测数据进行整理分析,共检测羊血清样品15770头次,其中O型口蹄疫样品7640份,合格7050份,平均合格率92.28%;A型口蹄疫样品5736份,合格5254份,平均合格率91.60%;亚洲Ⅰ型口蹄疫样品2394份,合格2220份,平均合格率92.73%。师市羊口蹄疫整体免疫效果较好,已建立起有效的免疫保护屏障,确保养羊业能有效抵御口蹄疫的侵袭。     

猪瘟与高致病性蓝耳病混合感染的诊断及病原特性分析

[目的]诊断由猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪伪狂犬病毒（PRV）引发的猪疫病,并分析病原。[方法]采集福建某猪场发病猪的组织器官,提取病毒DNA或RNA,PCR检测病毒感染。采用ELISA方法检测CSFV、PRRSV和PRV的感染情况。[结果]测序分析和ELISA结果表明,猪场存在PRRSV、CSFV、PRV3种病毒感染。[结论]该次猪病疫情主要是由CSFV和高致病性PRRSV混合感染引起。     

2011—2013年广西地区猪瘟抗体监测及免疫效果分析

为了解广西地区猪瘟的免疫抗体水平,采用正向间接血凝试验对采集自2011—2013年广西14个地市不同规模猪场的20 271份血清样品进行了猪瘟抗体检测。结果表明,广西各地的猪瘟抗体水平存在一定差异,抗体合格率为64.4%~97.5%,平均合格率为84.9%,大型规模场和中小规模场的猪瘟抗体合格率较稳定,且保持在较高水平,分别为96.0%和87.5%;农村散养户和屠宰场/市场的抗体合格率相对较低,分别为82.7%和70.5%。     

免疫压力下猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异

为了解连续免疫压力下猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的变异规律,以及为猪繁殖与呼吸综合征病的防控提供科学依据,以贵州分离株 PRRSV AS 为研究对象,监测分析了 PRRSV 接种免疫猪群后其主要基因变异情况。结果表明：1）接种 PRRSV 后,免疫猪只未发生死亡现象,但出现轻微的临床表现和病理变化,且能在病变组织中分离到 PRRSV,并扩增出与预期大小相一致的 Nsp2和 GP5基因条带;2）对Nsp2基因,两次分离物 PRRSV AS-a、PRRSV AS-b 与原始病毒 PRRSV AS 的遗传距离相应为0．018和0．064,呈加速渐远趋势;PRRSV AS-a 发生16处点突变,其中9处为非同义突变,7处为同义突变;PRRSV AS-b 发生25处点突变,其中非同义突变12处,同义突变13处;从 PRRSV AS 向 PRRSV AS-a 到PRRSV AS-b 演变过程中,Nsp2基因编码蛋白第285～293位抗原指数发生不同程度改变,且演变趋势呈正向选择作用;3）对 GP5基因,两次分离物 PRRSV AS-a、PRRSV AS-b 与原始病毒 PRRSV AS 的遗传距离相应为0．004和0．015,变异趋势不明显;PRRSV AS-a 发生2处点突变,非同义突变和同义突变各1处;PRRSV AS-b 发生3处点突变,其中非同义突变2处,同义突变1处;从 PRRSV AS 向 PRRSV AS-a 到PRRSV AS-b 演变过程中,GP5基因编码蛋白重要抗原表位未发生改变,但其演变呈正向选择作用。说明,在连续免疫压力下 PRRSV 容易发生变异。     

猪瘟和猪蓝耳病疫苗临床免疫效果评价

为了切实做好河南省猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗在临床上使用范围、安全性、有效性的调查及免疫效果的评估工作,更好地利用疫苗免疫技术预防猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的发生和流行,在洛阳、新郑等20个市(县、区)、40个猪场进行了猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗的临床应用,并随机抽取了其中338份血清样品,用酶联免疫吸附试验检测其抗体效价。河南省猪瘟免疫抗体合格率平均为73.67%,而猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体合格率平均为87.57%。不同厂家疫苗对猪免疫后抗体合格率不同,不同年龄段的猪免疫后抗体合格率不同,不同疫苗种类对猪免疫后抗体合格率不同,对猪免疫次数不同其抗体合格率也不同。以上情况可能与不同厂家疫苗质量不同有关。     

广西种猪场CSF、PRRS、PCV2与PR监控效果研究

采用PCR和RT—PCR对2004～2008年广西种猪场猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪伪狂犬病（PR）进行监控。结果表明,2004～2008年广西种猪场CSF、PRRS、PR、PCV2均有不同程度的发生,其中2004年阳性率最高,2008年阳性率最低（全部为阴性）。从2004～2008年,组织样品的PRRSV阳性率呈逐年下降趋势;CSFV和PRV的阳性率变化趋势相似,即2004年较高、2005年有所下降、2006年有所反弹、2007～2008年呈下降趋势;PCV2阳性率变化趋势则是在2005～2006年出现一个峰值。在公猪精液方面,PRRSV、PRV、PCV2阳性检出率呈逐年下降趋势。不同年份内不同疫病对种猪场的影响程度也存在差异。可见,以PCR和RT—PCR来监控种猪场疫病具有较高的可行性。     

复合RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟及猪流感等3种病毒方法的建立

为了快速准确地对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流感病毒(SIV)进行诊断与鉴别诊断,特进行试验。根据GenBank上已发表的PRRSV的ORF7基因序列、CSFV的C基因序列和SIV的M基因序列,设计合成了3对特异引物,开展RTPCR检测方法的研究。分别建立了PRRSV、CSFV和SIV的单项RT-PCR诊断方法,并最终建立了PRRSV、CSFV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,可分别及同时扩增PRRSV 430 bp、CSFV 775 bp和SIV 225 bp的特异性片段。试验证明该方法适用于PRRSV、CSFV和SIV的诊断及鉴别诊断。     

CSFV和PRRSV双重RT-PCR检测方法的建立及其应用

为建立一种能够同时快速诊断猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)2种传染病的方法,根据GenBank上已发表的猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核苷酸序列,分别设计并合成2对能特异性扩增CSFV、PRRSV的引物,经过条件优化后,建立了检测CSFV、PRRSV的双重RT-PCR方法,扩增2种病毒的片段,大小分别为508bp和432bp.试验证明,该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,简便、快速、高效,为CSFV与PRRSV的快速诊断及进一步的CSFV与PRRSV的流行病学研究提供了重要的技术支持.     

猪繁殖障碍性疫病多重PCR诊断方法的建立及其应用

根据GenBank已发表的猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的序列,经DNAstar生物学软件和BLAST序列分析,利用Oligo6.0软件分别设计并合成了4对特异性扩增引物.在初步优化单项PCR反应退火温度和反应体系的基础上,建立了同时检测CSFV、PCV2、PRRSV和PRV的多重PCR诊断方法.结果表明:该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性;对30份临床样品进行检测,结果发现,CSFV、PRRSV、PCV2和PRV的阳性率分别为46.7%、43.3%、53.4%、10.0%,其中,PRV与PCV2、CSFV与PCV2和CSFV与PRRSV混合感染的阳性率分别为6.7%、36.7%和10.0%;PRV、PCV2和PRRSV单一感染的阳性率分别为3.3%、10.0%和33.3%.说明所建立的多重PCR诊断方法,可以应用于CSFV、PRRSV、PCV2和PRV混合感染所引起的猪繁殖障碍性疫病的临床鉴别诊断.     

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和乙型脑炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立

根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp、430 bp和1 015 bp目的片段.以纯培养病毒抽提RNA,制备cDNA模板,利用3对引物,通过条件的优化,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR.CSFV、PRRSV和JEV的RNA最小检出量分别为0.270 ng、0.049 ng、0.067 ng,其它的RNA病毒如TGEV以及DNA病毒如PPV、PrV、PCV-2检测结果为阴性.以β-actin为对照,利用本方法检测了174份临床样品(血清、肺脏和胎儿),其结果为:PRRSV、CSFV和JEV的阳性率分别为30.4%、4.6%和1.7%;CSFV和PRRSV混合感染阳性率为1.7%.同时对临床样品中CSFV、JEV和PRRSV阳性PCR产物进行测序分析,发现CSFV、PRRSV和JEV的PCR产物序列和NCBI数据库中目标基因的同源性分别为92%、90%和89%,这证实了多重PCR的阳性结果为上述3种病毒.结果证明,所建立的多重RT-PCR可用于临床检测.     

建立环介导间接PCR同时检测3种主要猪源性病毒

 【目的】建立同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的环介导间接PCR方法,实现3种病毒快速检测。【方法】根据GenBank数据库中猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的核苷酸序列设计3对特异性探针,利用PCR技术分别标记于大豆Lectin基因片段的两端形成3种不同的报告基因,此标记的报告基因与3种待测靶标基因经杂交、缺口补平、环化后,采用1对引物反向PCR扩增报告基因,建立了PCV2、CSFV和PRRSV的环介导间接PCR检测方法,扩增片段大小分别为564 bp、434 bp和338 bp,该方法即可用于单病毒检测又可用于多病毒检测。【结果】灵敏度和特异性试验结果表明,无论是单病毒检测还是多病毒检测,该法都具有高度特异性,与其它病原检测无明显交叉反应;对PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒同时检测的底限分别为0.8、25和6.2 pg•μL-1,和单个病毒的检测灵敏度相同。利用环介导间接PCR和常规PCR对20份临床样本进行比较检测,结果表明,无论单病毒检测还是多病毒检测,其结果均与常规PCR检测结果完全一致。【结论】环介导间接PCR检测技术可用于PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒的同时检测,是一种简便快速、灵敏、特异的病原学诊断工具。     

猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的诊断

2009年3月贵州省某猪场送检病猪3例,为确诊病因,进行了流行病学调查,实验室剖检病变观察,细菌学、荧光抗体和RT-PCR检测。经流行病学调查和剖检病变观察,该病例为疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒感染所致;该病例细菌分离鉴定结果为阴性,猪瘟直接荧光抗体检测结果为阳性,猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒RT-PCR核酸检测为阳性。表明,该病例为猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染。     

北京地区规模化猪场繁殖障碍性疾病的诊断研究

为了给猪病毒性繁殖障碍性疾病的鉴别诊断提供一个快速、灵敏、特异的检测手段,本试验应用ELISA、PCR、RT-PCR及细胞培养等方法对北京某猪场弱仔、流产、死胎、木乃伊胎及出生后几天死亡的小猪进行猪瘟病毒(CSFV),伪狂犬病毒(PRV),圆环病毒2型(PCV-2),细小病毒(PPV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS...