高效液相色谱法同时测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量

建立了高效液相色谱法测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱含量的方法。采用Agilent 1260型高效液相色谱仪,配二极管阵列检测器(PDA),色谱柱为waters SymmetryC18(4.6mm×250mm,5μm),柱温:35℃,流速为:1.0mL/min,流动相:乙腈-三乙胺溶液=25∶75(磷酸调pH值至2.5),检测波长270nm。结果表明:血根碱在0.5~100μg/mL范围内线性关系良好(R^2=1.000),平均回收率(n=6)为98.21%,RSD为1.76%;白屈菜红碱在0.25~50μg/mL范围内线性关系良好(R^2=1.000),平均回收率(n=5)为98.77%,RSD为0.83%。本方法简便快捷,可用于博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量测定。     

高效液相色谱法测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量

利用高效液相色谱法测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量。采用Agilent1100型高效液相色谱仪,色谱柱为AgilentEcpliseXDB—C18（5μm,4．6mm×250mm）,流动相为三乙胺溶液-乙腈（75：25,V／V）,流速1．0mL／min;检测波长270nm;柱温35℃。结果表明：血根碱在0．5～100μg／mL范围内线性关系良好（R2=0．9999）,平均加样回收率（n=3）为96．1％～97．9％,RSD为0．8％～1．8％;白屈菜红碱在0．5～100μg／mL范围内线性关系良好（R2=1）,平均加样回收率（n=3）为96．8％-98．8％,RSD为0．6％～1．0％。本法简单快捷,精密度好,可为制定质控标准提供参考。     

RP-HPLC法测定博落回总碱中白屈菜红碱含量的方法研究

建立博落回总碱中白屈菜红碱的RP—HPLC含量测定方法。采用日本资生堂ODS—MG C18液相色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）;以乙腈-0．1％磷酸溶液（45：55）（每100mL加十二烷基磺酸钠0．1g）为流动相;检测波长270nm;流速为1．0mL／min。结果显示,白屈菜红碱峰形对称,拖尾因子低于1．5;在0．1μg～0．9μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0．9999,n=5）;在80％、100％、120％三种添加水平下的平均回收率分别为97．4％（RSD：0．7％,n=3）、98．6％（RSD=0．1％,n=3）、99．5％（RSD=0．8％,n=3）。利用该法测定博落回总碱中的白屈菜红碱,结果准确度高、精密度好,可作为博落回总碱的质量控制方法。     

博落回的有效成分及其提取物在畜禽生产中的应用

博落回的主要功能性成分为血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱等异喹啉类生物碱。以血根碱和白屈菜红碱为主要成分的博落回提取物已经被批准作为饲料添加剂使用。博落回提取物应用在畜禽生产中能够提高畜禽生产性能、改善肠道功能、提高抗氧化水平,并具有抗炎、抗菌、抗寄生虫等功能。文章对博落回的有效活性成分进行介绍,并探讨其提取物在畜禽生产中的应用效果。     

二氢血根碱和二氢白屈菜红碱在鸡肌肉中的定量检测方法

建立了一种用于同时测定鸡肌肉中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的UPLC-MS/MS方法。肌肉样品经乙腈-水(95∶5)溶液超声提取后,离心取上清液经脱脂后氮吹浓缩,甲醇复溶。采用Agilent Poroshell 120 EC-C18(2.1mm×150mm i.d.,2.7μm)色谱柱分离,采用正离子化模式下的多反应监测模式进行测定。方法的特异性良好,二氢血根碱和二氢白屈菜红碱在0.2~200μg/L质量浓度范围内线性关系良好(r2≥0.999 6),最低定量限均为0.4μg/kg,平均回收率分别为103.44%和104.36%,准确度RE均≤10.49%,精密度RSD均≤7.43%。该方法应用于长期饲喂博落回散的健康雌性白羽肉鸡的鸡胸肌组织中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的残留量检测,在500mg/kg博落回散组测得DHSA残留量为0.804μg/kg。该方法灵敏度高,重复性好,适用于鸡肌肉中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的残留定量检测。     

博落回中四种生物碱的薄层鉴别研究

建立博落回药材中四种生物碱的薄层色谱(TLC)鉴别方法。开展利用二甲苯-甲醇(5∶1)展开剂分离鉴别博落回中的原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱;利用氯仿-二甲苯-甲醇-氨水(50∶10∶1∶0.1)展开剂分离鉴别博落回中血根碱和白屈菜红碱;利用环己烷-丙酮(3∶2)展开剂分离鉴别博落回中原阿片碱和别隐品碱的系统研究。结果表明建立的薄层方法简便,准确和稳定,可以用于控制博落回药材的质量。     

HPLC-MS/MS法检测猪肉中苯并菲啶类生物碱的研究

利用高效液相色谱串联三重四极杆质谱技术建立了猪肉中痕量苯并菲啶类生物碱定量检测方法。将猪肉样品匀浆经1％盐酸一甲醇（10：90,V／V）超声提取后,离心分离取上清液经脱脂后氮气吹干浓缩,甲醇复溶。采用C18色谱柱（2．1mm×150mm,2．7μm）分离,流动相由乙腈与0．2％甲酸组成,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3mL／min;采用液相色谱-电喷雾离子源质谱检测。血根碱和白屈菜红碱在0．5～50ng／mL浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系．线性相关系数分别为R2=0．9996和R2=0．9995．平均加标回收率分别为91．50％和91．30％,重复性RSD为11．68％和9．90％。精密度RSD为2．58％和3．89％。测定饲喂博落回散的猪的肌肉中血根碱和白屈菜红碱的残留量分别为4．76ng／g和2．09ng／g。该方法灵敏度高,重复性好,适合于猪肉中苯并菲啶类残留的定量检测。     

博落回生物碱对烟草黑胫病的抑制作用

为了研究博落回总生物碱、总生物碱盐、血根碱、白屈菜红碱对烟草黑胫病菌的抑制效果,试验分别用博落回总生物碱、总生物碱盐、血根碱对烟草黑胫病菌处理5d。结果表明:博落回总生物碱、总生物碱盐、血根碱的半数效应浓度分别为22.49,16.22,21.38μg/mL;博落回总生物碱、总生物碱盐320μg/mL药液抑制率分别为77.42%、86.54%,血根碱、白屈菜红碱40μg/mL药液抑制率分别为62.54%、32.60%。说明博落回总生物碱、总生物碱盐对烟草黑胫病菌抑制效果较明显,血根碱一般,白屈菜红碱较差。     

博落回主要功能成分及其在动物生产中的应用

博落回[Macleaya cordata (willd.) R.Br.]又名"号筒杆",是罂粟科博落回属的多年生草本植物。博落回富含生物碱资源,其主要功能活性成分为血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱等异喹啉类生物碱,具有抗微生物、抗炎、抗氧化、杀虫、抗病毒、抗肿瘤等多种生物学活性。文章通过对博落回主要功能成分血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱等异喹啉类生物碱的抗微生物、抗炎、抗氧化、改善肠道健康等生物学活性及其在动物生产中的应用进行综述,以期为博落回功能成分的开发和应用提供参考。     

内部沸腾法提取博落回生物碱的工艺研究

为了得到内部沸腾法提取博落回生物碱的最佳提取工艺,试验逐一考察硫酸浓度、浸泡的乙醇浓度、提取温度、料液比等因素对提取效果的影响,并采用高效液相色谱(HPLC)法测定了提取得到的博落回总碱中血根碱和白屈菜红碱含量。结果表明:当硫酸浓度为0. 10 mol/L、浸泡乙醇浓度为50%、提取温度为90℃、料液比为1∶20时,提取一次的提取率为13%,HPLC检测到的血根碱含量为6. 6%,白屈菜红碱含量为3. 1%,提取效率明显提高。     

高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体温孵体系中血根碱的含量

本研究建立了大鼠肝微粒体温孵体系中血根碱的高效液相色谱含量测定方法。采用Shimadzu VP-ODS (150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液(30∶70,V/V)为流动相,以1 mL/min流速进样量10 μL在284 nm波长下进行检测,结果显示500和1000 nmol/L血根碱对照品溶液的方法回收率分别为98.3％和98.9%;250、500、1000 nmol/L标准溶液的日内RSD分别为3.76%、2.88%和3.56%,日间RSD分别为5.19%、4.96%和3.84%;血根碱的摩尔浓度在250~10000 nmol/L内与峰面积呈良好的线性关系,表明该方法简单、快速、灵敏度高、特异性好,可用于血根碱在肝微粒体温孵体系中的含量测定。     

博落回中6种生物碱对大鼠和猪醌氧化还原酶2的作用研究

为了研究博落回中6种主要生物碱别隐品碱、原阿片碱、血根碱、白屈菜红碱、二氢血根碱和二氢白屈菜红碱对大鼠和猪肝胞液醌氧化还原酶2(NQO2)的影响,初步筛选出对大鼠或猪NQO2具有诱导或抑制作用的生物碱,探讨其在畜禽体内的代谢机制,建立了大鼠和猪NQO2体外孵育体系,以槲皮素为阳性对照,噻唑蓝(MTT)为底物,阳性对照物和待测化合物分别与空白组肝胞液孵育,初步筛选出具有诱导或抑制作用的生物碱。结果显示:博落回中的6种主要生物碱对大鼠和猪NQO2的抑制类型均是可逆性反竞争性抑制,其中原阿片碱和血根碱对大鼠和猪肝胞液NQO2具有较强的抑制作用;原阿片碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为29.26、93.84和18.35μmol·L~(-1),半数抑制浓度(IC_(50))分别为(39.80±2.42)、(203.65±0.20)和(309.20±0.83)μmol·L~(-1);血根碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为54.87、23.34和151.3μmol·L~(-1),IC_(50)分别为(160.67±5.77)、(148.00±6.62)和(118.25±0.11)μmol·L~(-1);别隐品碱和二氢白屈菜红碱对雌性大鼠NQO2无抑制作用,二氢血根碱对猪NQO2的抑制作用非常微弱。研究结果为博落回中原阿片碱和血根碱的临床应用提供了一定的理论基础。     

血根碱提取工艺、生物活性及在水产养殖中应用的研究进展

血根碱主要存在于博落回、血水草及白屈菜等植物中,具有保护肝脏、改善肠道健康、抗菌抗炎等多种生物学功能.目前,血根碱在畜禽中的研究已颇有成效,在水产动物中却鲜有报道.文章对血根碱的提取工艺、生物活性及在水产养殖中应用的研究进展进行综述,为血根碱的相关研究与应用提供参考.     

兽用苦豆子总碱注射液中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量测定

为提供苦豆子总碱制剂在奶牛疾病治疗方面的质量控制依据,特建立兽用苦豆子总碱注射液中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量测定方法。采用RP-HPLC法,色谱柱为YMC-packed ODS-A柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为V1(乙腈)∶V2(0.05mol/LKH2PO3)∶V3(三乙胺)=8∶92∶0.18,检测波长220nm,流速1.0mL/min。在确定的色谱条件下,兽用苦豆子总碱注射液中的槐定碱、苦参碱和槐果碱可以被很好地分离,槐定碱、苦参碱、槐果碱分别在10.0～160.0μg/mL、5.0～80.0μg/mL、5.0～80.0μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,r分别为0.9997、0.9992、0.9990,平均回收率分别为(n=5)99.54%、100.21%、99.99%,RSD分别为5.3%、1.9%、1.4%。结果表明,本法简便、准确,可用于兽用苦豆子总碱注射液中槐定碱、苦参碱、槐果碱的含量测定。     

HPLC测定大鼠肝微粒体温孵体系中二氢血根碱的含量

建立了测定大鼠肝微粒体温孵体系中血根碱代谢产物二氢血根碱含量的高效液相色谱法。色谱柱为Shimadzu VP-ODSShim-pack（150mm×4．6mm,5μm）;流动相为水：乙腈（37：63,V/V）;流速1mL／min;柱温35℃;检测波长285nm;进样量10μL。结果显示50nmol／L和1000nmol／L二氢血根碱标准溶液的方法回收率分别为101．72％和98．82％;50、100、500nmol／,L标准溶液的日内RSD分别为2．26％、2．57％和3．02％,日间RSD分别为6．21％、4．33％和3．95％：二氢血根碱在25-1000nmol／L内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9996）。本分析方法快速简便,灵敏度高,重现性好,符合方法学验证的要求,可满足二氢血根碱在体外代谢中的定量研究。     

兽用原料药博普总碱的HPLC特征谱图的建立

建立HPLC特征谱图控制兽用原料药博普总碱的质量。HPLC 特征谱图包含4个特征峰，用对照品定性鉴别4个特征峰分别为原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱。考察检测波长、流动相条件、柱温、流速、色谱柱品牌对各特征峰相对保留时间的影响，确定优化后的高效液相条件，并具有良好的精密度、稳定性和重复性。分析15批博普总碱原料药的液相图谱，样品的相似度均大于0.95，并对特征峰的相对保留时间进行了规定，为原料药博普总碱质量控制提供了依据。     

液相色谱-串联质谱法测定饲料中的血根碱和白屈菜红碱

研究旨在建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）检测饲料中血根碱和白屈菜红碱含量的分析方法。饲料样品用15 mL、0.2%盐酸乙腈溶液超声提取2次,每次20 min,提取液使用HLB固相萃取柱净化、微孔滤膜过滤后进行液相色谱-串联质谱法测定,用外标法定量,对检测方法进行验证。结果显示：在质量浓度为1～100 ng/mL范围内其线性相关系数≥0.999,定量限为0.005 mg/kg,回收率为91.9%～101.0%,相对标准偏差为2.00%～7.96%。表明所建立的液相色谱-串联质谱法结果准确、重复性好,适用于饲料中血根碱和白屈菜红碱的测定。     

博落回茎叶血根碱提取工艺的比较研究

为博落回提取血根碱开发新原料,为工业化生产提供依据。在单因素试验的基础上,以血根碱转移率为评价指标,分别对博落回茎叶使用酸性乙醇回流和酸水渗漉法进行工艺研究。试验结果表明酸性乙醇回流提取工艺最佳条件为乙醇体积分数90%,液固比301 ml/g,硫酸浓度0.12%,提取温度80℃,提取时间2 h,血根碱转移率达到(89.36±0.49)%(n=5, R~2=0.54%),最终得到博落回茎叶提取物收率(24.27±0.92)%(n=5,R~2=3.77%),血根碱含量(1.65±0.06)%(n=5,R~2=3.36%);酸水渗漉提取工艺最佳条件为硫酸浓度1%,浸泡时间30 min,渗漉温度80℃,溶剂用量30倍,渗漉速度0.5 ml/min,血根碱转移率达到(83.63±2.09)%(n=5,R~2=2.49%),最终得到博落回茎叶提取物收率(21.64±0.78)%(n=5,R~2=3.61%),血根碱含量(2.25±0.11)%(n=5,R~2=4.88%)。两种提取方法中酸水渗漉法碱沉步骤简便,得到的提取物中血根碱的含量比酸性乙醇回流法高出36.36%,溶剂用量一致,在工业化生产中应结合实际情况进一步优化参数条件,为博落回茎叶开发利用提供了理论依据。     

HPLC法测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的含量

为了用HPLC法同时测定复方防己口服液中粉防己碱和防己诺林碱的含量.采用Diamonsil C 18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈-0.2％磷酸水溶液-三乙胺(63∶37∶0.05)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长282 nm的液相检测方法.结果表明,在此色谱条件下,粉防己碱和防己诺林碱的分离良好,分别在20.52 ～ 205.2μg/mL和17.84 ～ 178.4 μg/mL浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系.按外标法以峰面积计算进行测定,粉防已碱和防己诺林碱的平均回收率分别为98.15％和97.35％,RSD分别为1.39％和1.90％.表明该方法简便,快速,准确,适用于防已散中粉防己碱和防己诺林碱的含量测定.     

不同剂量博落回提取物对断奶仔猪生长性能的影响

为了研究不同剂量的博落回提取物对断奶仔猪生长性能的影响,本试验选用(65±2)日龄、体重相近的杜×长×大三元杂交断奶仔猪252头,随机分为7个处理组,分别饲喂基础日粮(空白对照Ⅰ组),同时在基础日粮中分别添加不同剂量的0.337、0.675、1.35、2.7、5.4mg/kg博落回提取物生物碱(以血根碱+白屈菜红碱总生物碱计),以及30mg/kg金霉素(阳性对照组)作试验组,试验期为28d,试验结束时测定各处理组的生长性能等指标。结果显示,与其它剂量组及金霉素组相比,日粮中添加0.675和1.35mg/kg博落回提取物生物碱,均能显著提高仔猪的采食量(P0.05)、平均日增重(P0.05),降低仔猪料重比(P0.05)。同时日粮中添加不同剂量的博落回提取物生物碱能有效预防仔猪腹泻的发生率。因此,从改善仔猪的生长性能及提高经济效益角度考虑,在仔猪日粮中添加0.675mg/kg的博落回提取物(以血根碱+白屈菜红碱总生物碱计)为理想剂量。