农用抗生素94166-Ⅱ、Ⅲ的提取、分离、纯化及结构鉴定

在创制农用抗生素科技攻关筛选中得到一株放线链霉菌,菌号为SPRI-94166,通过发酵、吸附、提取等手段分离得到5个活性化合物,经UV、IR、MS、NMR等手段鉴定,发现其中活性组分94166-Ⅱ、Ⅲ为黄酮类化合物。     

菌株Tu 49 代谢产物的分离及抗菌素活性的初步研究

从吐鲁番葡萄沟、苏公塔、五道林、交角沟等郊区采集的52种土样中筛选到一株能产生抗菌素活性的好气菌Tu49，革兰氏阳性，类群为黄色类群。所产生的抗菌素，对不同的微生物有明显的抑制作用。最适生长温度为30℃-32℃，最适pH为6．8－7．5，气生菌丝和孢子丝为无色，基丝体为黄色，产黄色可溶性色素。     

海洋放线菌BM-2菌株抗真菌活性物质的分离纯化与结构鉴定

从海洋放线菌菌株BM-1发酵液中分离抗植物病原真菌的活性物质。以对禾谷镰刀菌Fusarium graminearum的生物活性为跟踪,采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、薄层层析和HPLC等技术,海洋放线菌菌株BM-1发酵液中含有4种对禾谷镰刀菌具有抑菌作用的活性物质,对其进行分离纯化,得到了4种具有强抗菌作用的组分Aa、Ab、Ba、Ca。采用ESI-MS、1H NMR、13C NMR等波谱分析技术,对分离量较大、活性较强的活性组分Ca进行结构鉴定,鉴定Ca为邻苯二甲酸二丁酯(DBP)。     

棉花PGPR菌株的分离、筛选、鉴定、作用机制及其分子生态学研究

 本文系统地进行了棉花PGPR菌株的研究。主要包括菌株的分离、筛选、菌种鉴定;首次用gusA基因和lux AB基因导入棉花PGPR菌株,并研究它们在棉苗根际中的分子生态学;选用代表菌株研究它们对棉苗的防病促生作用机制;并发现PGPR菌株CS85能够诱导棉苗产生抗性,进一步探讨诱导抗性后的棉苗体内防御酶系统的变化等。     

采用大孔吸附树脂D-101初步分离提取TJ430菌株发酵液中的抗生素

借助生物活性测定法和高效液相色谱法对发酵液中农用抗生素进行追踪监测,探讨了大孔吸附树脂对菌株TJ430发酵液中农用抗生素的分离纯化条件.经过对比试验发现D-101型大孔吸附树脂的吸附性能最好;最佳吸附时间为120 min; 70％丙酮水溶液的解吸附能力最佳;最佳解吸附pH为接近中性条件;最佳解吸附时间为120 min.采用D101型大孔吸附树脂对TJ430菌株发酵液中抗生素进行吸附,在中性条件下经70％丙酮水解吸附,使发酵液中抗生素得到了有效的分离纯化.     

黄连根腐病病原菌分离纯化及鉴定

对湖北省利川市的黄连样品上的病原进行分离、纯化培养,采用生物学、分子学等方法对病原进行鉴定。结果表明,样品上的病害为黄连根腐病,引起病害的病原为镰刀菌,为当地黄连病害的防治提供了理论依据。     

花菜病害病原菌分离纯化及鉴定

对湖北省荆州市江陵县普济镇采集的花菜样品上的病原进行分离、纯化培养,采用生物学方法对病原进行分子鉴定。结果表明,样品上的病害为花菜菌核病,引起病害的病原为核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),为当地花菜病害的防治提供了理论依据。     

枯斑盘多毛孢Pf-毒素活性组分的分离纯化

 对枯斑盘多毛孢(Pestalotia funerea)培养滤液用70%乙醇沉淀,将其分为可溶性和不可溶(蛋白质等大分子)组分,浸渍法活性检测表明,蛋白质等大分子物质对马尾松、湿地松切根幼苗没有致病活力,非蛋白部分(Pf-毒素)则保留了病原菌培养滤液的致病活性,且与病原菌培养滤液相比活性有所增强。以最适流动相,正丁醇:甲醇:水(4:1:2)为洗脱液,采用硅胶H60型柱反复柱层析,从枯斑盘多毛孢的甲醇粗提物质中分离出9种组分,经致病活性测定出3种组分,Rf值分别为0.83、0.79、0.80,它们对马尾松切根幼苗、湿地松切根幼苗针叶都有致萎作用。     

放线菌菌株MY02的鉴定及发酵液中抗真菌活性组分的分离

从东北地区蔬菜保护地土壤中筛选分离到一株放线菌菌株MY02,通过对其形态学特征及16S rDNA序列分析,初步鉴定其为龟裂链霉菌龟裂亚种Streptomyces rimosussub sp.rimosus。该菌株的发酵液具有抗真菌活性。发酵液经离心、过滤、萃取、硅胶柱层析等步骤分离纯化其活性物质,并进行高效液相色谱(HPLC)分析,表明其活性物质中含有两种抗真菌活性组分。对活性组分的正丁醇溶液进行紫外光谱扫描,结果表明该活性组分具有四烯类抗生素的典型特征吸收峰。     

CP7菌株的抗菌活性及菌种鉴定

经分离、筛选获得一株高效分泌抗菌物质的CP7菌株,从该菌株中提取的抗菌产物,对大肠杆菌标准株、金黄色葡萄球菌标准株、苏云金杆菌等细菌;瓜类炭疽病菌、水稻纹枯病菌等真菌有较好的抑菌作用。用16S rDNA序列分析法进行生物分子的分类,该菌株16S rDNA序列与类芽孢杆菌属的34个细菌的同源性为96%~99%,与多粘类芽孢杆菌的同源性为99%。用传统细菌学的方法对CP7菌株进行鉴定,其形态特征、生理生化特性与多粘类芽孢杆菌的特征特性相一致。表明CP7菌株属于多粘类芽孢杆菌。     

农药常用有机溶剂对烟蚜、棉蚜和大豆蚜定居行为的影响

实验室内研究了10种常用有机溶剂对烟蚜Myzus persicae、棉蚜Aphis gossypii、大豆蚜Aphis glycines定居行为的影响及蚜虫的行为反应。结果显示,3种蚜虫对供试有机溶剂具有相似的行为反应。在1~10 μL剂量范围下,乙醇、乙二醇、乙酸乙酯、二甲基甲酰胺和丙酮对3种蚜虫的定居行为有轻度的影响,但苯、二甲苯、己烷、石油醚和乙醚对蚜虫的定居行为有显著的影响。在适宜剂量下,3种蚜虫对苯和二甲苯的移动率皆超过30%,并伴随剧烈的行为反应。此外,棉蚜、烟蚜对己烷与石油醚反应的移动率分别达到44.27%、46.45%和49.90%、52.58%。     

绒叶泡桐花中除草活性成分的分离与除草活性

采用活性追踪和柱层析技术,以对杂草反枝苋、生菜、黄瓜种子胚根生长的抑制作用为指标,对泡桐花中除草活性成分进行了提取、分离和鉴定。绒叶泡桐Paulownia tomentosa花乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取后进行活性测定,结果表明,石油醚萃取物在浓度为 0.5 mg/mL 时,对反枝苋、生菜和黄瓜种子胚根生长的抑制率分别为76.30%、56.17%和23.36%; 乙酸乙酯萃取物在浓度为0.5 mg/mL时,对反枝苋、生菜和黄瓜种子胚根生长的抑制率分别为99.89%、63.53%和32.74%。通过对乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析分离,得到一种活性较高的化合物,经鉴定其为对乙氧基苯甲醛,其抑制反枝苋种子胚根生长的EC50值为55.20 μg/mL。对乙氧基苯甲醛是首次从绒叶泡桐中分离鉴定的化合物,也是首次将其用于除草活性研究。     

长枝木霉对禾谷胞囊线虫卵的寄生和毒杀作用及其机制

为了明确长枝木霉Trichoderma longibrachiatum对小麦禾谷胞囊线虫Heterodera avenae卵的防治潜力和作用机制,在室内测定了长枝木霉分生孢子悬浮液对小麦禾谷胞囊线虫卵的寄生和毒杀作用,并通过温室盆栽试验测定了长枝木霉分生孢子悬浮液对小麦禾谷胞囊线虫卵的防治效果.室内试验中1.5×107 CFU/mL的长枝木霉分生孢子悬浮液处理12 d对小麦禾谷胞囊线虫卵的寄生率和卵孵化的相对抑制率分别为91.33％和88.35％.温室盆栽试验中1.5×107 CFU/mL处理对土壤中胞囊、线虫和根系中线虫的相对防治效果分别为89.84％、92.67％和88.30％;接种卵悬浮液和长枝木霉分生孢子悬浮液后,小麦幼苗株高、根系长度、地上部鲜重和根系鲜重的增长率分别为66.72％、159.31％、169.09％和170.19％;叶绿素总量和根系活力显著高于对照,分别为17.52 mg/g和356.25 μg·g-1·h-1.研究表明长枝木霉可作为小麦禾谷胞囊线虫的生防制剂.     

旋覆花中1-氧-乙酰大花旋覆花内酯的分离分析及抑菌活性测定

为了明确菊科植物旋覆花中主要抑菌活性物质,对旋覆花花序粗提物氯仿萃取组分进行分离,得到化合物1-氧-乙酰大花旋覆花内酯(ABL),运用高效液相色谱法测定花序粗提物中化合物ABL的含量,并测定化合物ABL对黄瓜白粉病菌、黄瓜霜霉病菌、黄瓜灰霉病菌、番茄早疫病菌和致病疫霉等5种植物病原菌的抑菌活性。结果表明,化合物ABL对照品,经紫外光谱、红外光谱、核磁共振等确定结构,纯度为99.5%,符合中药化学对照品含量测定要求。运用高效液相色谱法测定旋覆花花序粗提物中ABL的含量为2.45%,进而计算得到旋覆花花序中ABL的含量约为0.25%。化合物ABL对5种植物病原真菌具有不同的抑菌活性,其中对致病疫霉休止孢萌发抑制作用最强,在浓度为0.1mg/mL时,抑制率可达100%。     

苹果梨黑斑病的发生及侵染过程

苹果梨果实的黑斑病为典型的潜伏侵染性病害,采后冷藏60天,表面光滑无任何症状,采后90天开始,皮孔或萼筒伸出黑灰色菌丝,进而其周围组织坏死形成黑斑.采后100天,黑斑病的发病率达28.86%.黑斑病是由链格孢Alternaria alternata（Fr.）Keissl.侵染引起的,链格孢在采前可经两条途径侵入苹果梨果实.一是在花朵开放时经花柱侵入,花后50天定殖于花柱的病原菌通过萼室间组织陆续进入心室,至采收时,心室中链格孢出现率可达45%;二是自果实膨大期开始侵入果皮,潜伏于皮下组织,至采收时萼端、胴部、梗端链格孢的带菌率分别为40%、24%和42.8%.     

水稻条纹病毒胁迫对灰飞虱mucin基因表达量的影响

为分析灰飞虱mucin基因在水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)侵染过程中的作用,采用荧光定量PCR的方法分析了RSV 胁迫条件下灰飞虱mucin基因mRNA表达量的变化。饲喂RSV病叶1天和2天时灰飞虱mucin基因的表达量没有明显变化,而在3天和7天时灰飞虱mucin基因的表达量增加了3.60倍和1.97倍。饲喂健康水稻叶片1、2、3和7天后,灰飞虱mucin基因的表达量分别为饲喂前的1.07、1.12、0.78和0.34倍,而饲喂病叶1、2、3和7天后,mucin基因的表达量分别为饲喂前的1.15、1.19、3.19和1.01倍。结果表明,病毒胁迫使灰飞虱体内mucin基因的表达量增加,暗示mucin基因在RSV与灰飞虱互作过程中起着重要作用。     

Separation and characterization of the pyrethroid-hydrolyzing esterases of the cattle tick, Boophilus microplus

The principal esterases present in homogenates of cattle tick larvae have been separated by gel filtration and preparative isoelectric focusing. Substrate specificities have been determined using trans-permethrin, trans-cypermethrin, p-nitrophenyl butyrate, and the pyrethroid analog, p-nitrophenyl-(1R,S)-3-(2,2-dichlorovinyl)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxylate (t-NPDC). One of the esterases, with pI = 4.6, and molecular weight ～67,000, hydrolyzed the α-cyano-substituted pyrethroid, trans-cypermethrin, but not permethrin. The major esterase activity was found in the pI 5.6–5.8 region, and corresponded to a molecular weight of ～89,000. Small differences in substrate specificity and differences in the banding pattern after isoelectric focusing were detected between esterases of ticks of a pyrethroid-resistant strain (Malchi) and a pyrethroid-susceptible strain (Yeerongpilly). Rate constants were determined for the inhibition of the different esterases by the organophosphate coroxon and by naphthyl N-propylcarbamate, using p-nitrophenyl butyrate and t-NPDC as substrates.     

甲酸乙酯对三种主要仓储害虫的熏蒸作用

为明确甲酸乙酯对仓储害虫的实际控制效果,避免二氧化碳对熏蒸作用的影响,该研究利用循环熏蒸系统(FTFS),测定甲酸乙酯对米象、赤拟谷盗、谷蠹三种主要仓储害虫混合虫态的熏蒸作用.结果表明:在25℃、70%RH条件下,甲酸乙酯43.34、80.72、99.08、117.74、146.49mg/L 熏蒸处理6 h,对赤拟谷盗和谷蠹混合虫态有很好的控制作用,死亡率大于95.96%;甲酸乙酯80.72、99.08、117.74、146.49mg/L处理对米象混合虫态的杀虫效果较好.甲酸乙酯对米象蛹的杀虫效果较差.     

B型烟粉虱成虫对五种寄主植物的取食和产卵行为

为明确烟粉虱的寄主选择机制,利用刺吸电波技术(EPG)记录了B型烟粉虱在苘麻、棉花、黄瓜、甘蓝和烟草上的刺吸取食波型,并比较了烟粉虱在寄主植物上的产卵行为.研究结果表明,烟粉虱在5种寄主植物上的刺吸过程由A、B、C、E、G和np波组成,但取食不同植物的波型比例、频次及平均持续周期等指标有显著性差异.烟粉虱取食苘麻时,反映被动取食行为的E波比例和平均周期分别达83.8%和20.2min,明显高于其它寄主植物.总体上,B型烟粉虱取食5种寄主植物的适宜度为苘麻>黄瓜>棉花>烟草>甘蓝.烟粉虱在不同寄主植物上的产卵量随产卵时间延长而增加,但增加量明显低于接虫24 h的产卵量.烟粉虱对苘麻的产卵选择性显著高于棉花,但与黄瓜、甘蓝、烟草没有显著的差别.在本试验烟粉虱雌虫密度的范围内,各种寄主植物的产卵量与烟粉虱成虫密度成正相关,高密度下烟粉虱成虫在甘蓝和苘麻上的产卵量显著高于黄瓜、烟草和棉花.     

植物提取物对苏云金芽孢杆菌杀虫活性的影响

植物提取物对苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)的杀虫活性有不同程度的影响。试验结果表明,处理48 h后,花椒Zanthoxylum bungeanum、假连翘Duranta repens、南洋楹Albizia falcataria、羊蹄甲Bauhinia variegata、番石榴Psidium guajava、荷花玉兰Magnolia grandiflora 的乙醇提取物对Bt的杀虫活性有显著增效作用; 小蜡Ligustrum sinense、胜红蓟Ageratum conyzoides、 一品红Euphorbia pulcherrima、烟草Nicotiana tabacum、南洋杉Araucaria cunninghamii、 繁缕Stellaria media、光叶子花Bougainvillea glabra、小飞蓬Conyza canadensis、地肤Kochia scoparia的乙醇提取物对Bt杀虫活性有显著拮抗作用;其他植物提取物则没有显著影响。