利用悬浮培养和培养基选择改善火炬松的体细胞胚胎发生和植株再生(英文)

三个基固型的火炬松成熟合子胚被培养在附加 8mg·L-12 ,4 D ,4mg·L-1BA ,4mg·L-1KT ,5 0 0mg·L-1水解酪蛋白和 5 0 0mg·L-1谷氨酰胺的愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织 .来自于子叶、胚轴和胚根的愈伤组织在附加 1 6mg·L-12 ,4 D ,0 8mg·L-1BA和 0 8mg·L-1KT的愈伤组织增殖培养基上培养 9周后 ,可获得 16 9%的胚性愈伤组织 .通过建立胚性细胞悬浮系和研究ABA、PEG和活性炭对体细胞胚成熟的促进作用 ,优化的体细胞胚胎发生体系被建立 .71棵再生小苗被用于移栽试验 ,2 3棵小苗在田间移栽成活     

花曲柳体胚发生和植株再生

以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征。经炼苗后的体胚苗移植到栽培基质(草炭土:蛭石:珍珠岩体积比为5:4:1)中可以正常生长,成活率为75.0%。     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料,在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明,附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基,为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基;在5种不同的外植体中,成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体;在诱导胚性愈伤组织中,成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中,WPM为最佳基础培养基,附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比,胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中,MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时,体胚的诱导率最高,达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...     

火炬松丛生芽诱导及植株再生

采用火炬松带子叶项芽为外植体建立了组织培养再生体系。结果表明,火炬松丛生芽的形成受诱导培养基中激素浓度及外植体年龄的影响较大。适合火炬松丛生芽诱导的培养基为改良GD 6-BA 4 ms／L NAA 0．02 mg/L(诱导率86．7％),截取外植体的最佳苗龄为14-21 d。已分化的丛生芽继代培养在无6-BA但附加0．5- 1．0 g/L活性炭或0．02-0．05 mg/L NAA的培养基上伸长很快。伸长的丛生芽接种在附加0．05 ms／L NAA的1／2改良GD培养基中,1个月后有12．5％产生不定根。     

南蛇藤愈伤组织的诱导和植株再生

以南蛇藤无菌苗子叶、上胚轴及幼根为材料,比较研究不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导、分化及植株再生。结果表明:上胚轴是诱导产生胚性愈伤组织的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5¹.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.11.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.1⁰.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.00.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.0².0mg/L)+NAA(0.1mg/L),增殖系数平均达7.05;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L,生根率达88%。     

火炬松胚性愈伤组织的诱导及体胚的形成

实验表明，火炬松以种胚诱导愈伤组织，一年中７月份是球果的最佳采集期。５月份获得的种胚未诱导出愈伤组织，６、７、８月份的诱导率分别为５５．０％、８８．０％和６６．０％。愈伤组织进行悬浮培养，观察到体胚形成。     

杉木愈伤组织诱导及植株再生

以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究了基本培养基、植物激素、凝固剂种类、有机附加物等因素对杉木愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代培养及不定芽分化的影响。结果表明:1/2MS+2,4D2mg/L+6-BA1mg/L+KT1mg/L+糖30g/L是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;1/2MS+2,4-D1mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+糖30g/L适于杉木愈伤组织继代增殖;改良MS+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L+蔗糖30g/L是诱导不定芽发生的最佳培养基。     

大果榉未成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生

将大果榉的未成熟胚培养在不同植物激素种类和浓度的术本植物培养基(WPM)上产生愈伤组织,然后将愈伤组织接种在芽的诱导培养基上形成不定芽,不定芽在生根培养基上生根形成完整植株．结果表明:大果榉愈伤组织诱导的适合培养基为WPM附加BA 1．0 mg·L-1+NAA 1．0 mg·L-1,诱导事为59．1％;不定芽的分化培养基为在WPM+NAA 0．5 mg·L-1+6．BA 2．0 mg·L-1,不定芽的诱导率为71．1％,在WPM+BA2．5 mg·L-1+NAA1．0 mg·L-1的培养基种芽分化的平均数未为5．21±1．02;生根培养基以WPM+0．1 mg·L-1 IBA的效果量好,生根率可达63．33％,平均最多生根条数为．再生植株在温室适应培养的存活率为92％．     

挪威云杉及杂种落叶松稳定胚性细胞系及体胚再生系统的建立

本文报道了挪威云杉(Picea abies)和杂种落叶松(Larix deciduas× L. kaempferi)人工授粉种子诱导胚性细胞系及植株的再生.挪威云杉在德国Saxon Ore 山区被选为对空气污染有抗性的树种并种植在位于Waldsieversdorf的林木遗传育种研究所的种植园中.对挪威云杉测试了几个不同亲本组合的种子形成胚性细胞系的能力.这些云杉种子于1992-01采收,含有干燥的成熟合子胚.作为对照,相同的亲本组合云杉种子于1993-08和1998-08采收,合子胚处于成熟中.杂种落叶松则只有一个人工授粉组合,大田试验证实幼苗生长良好.分别于1995和1996年采收含有未成熟合子胚的未成熟种子.诱导愈伤形成用附加细胞分裂素(激动素和/或BAP)和生长素(NAA, 2,4-D)及有机氮源(水解酪蛋白和谷氨酰胺)的标准培养基(SPE和MSG),于黑暗下培养.尽管在建立培养体系后5～12周产生了大量胚性愈伤组织,诱导率超过25%,但1 a后只有超过1%的胚性愈伤组织稳定生长.挪威云杉稳定胚性细胞系的数量与成熟合子胚的采收季节及建立细胞系的时间(8月或1月)无关,但在8月收获的合子胚在挪威云杉5～12周后胚性愈伤组织诱导率要高些,然而能在悬浮培养中生长及随后成熟体胚能顺利再生植株的稳定胚性细胞系的数量有限.挪威云杉体胚未充分发育的根影响其移栽到土壤中的成活率.在建立的12个细胞系中只有一个在干燥保存后能从体胚再生正常植株.同时考察了影响挪威云杉形成成熟体胚的因素,如用PEG4 000(7.5%)及ABA[8mg·L-1(30.26μmol)-1]处理及ABA灭菌方式(高温高压灭菌或过滤灭菌)对成熟体胚形成的影响.总体来说,过滤灭菌的ABA增加了成熟体胚的数量.营养培养基中用淀粉部分取代蔗糖只导致2个细胞系中的一个增加了成熟体胚的数量.1995和1996年对人工授粉杂种落叶松合子胚发育与自然授粉(不套授粉袋)的相比较,发现人工授粉袋的使用延迟了合子胚的发育.我们的实验中成熟合子胚没有形成胚性细胞系,只有未成熟合子胚形成了胚性细胞系.1995年用落叶松未成熟合子胚建立的胚性细胞系没有形成体胚,而1996年建立的4个胚性细胞系得到了可以移栽到温室中的再生植株.1.5 a的连续继代培养以后,大多数的杂种落叶松和挪威云杉的胚性细胞系的再生能力都下降.导致这种现象可能有多种原因包括培养物的老化以及出现难以检测到的内生细菌.尽管一组实验从最初培养即用了抗生素,但没有收效.因此目前只得到少量的稳定胚性细胞系(<5%),长期继代后丧失再生能力及无法成功移栽到土壤都是植株再生的重要的限制因素,有待进一步研究克服这些困难.     

火炬松体细胞胚胎发生和干化体细胞的氧化物酶活性(英文)

培养于附加2,4-D、BA和KT的愈伤组织诱导培养基上的火炬松成熟合子胚在培养3-9周后形成白色、半透明、有光泽的粘性愈伤组织。这类愈伤组织形成于成熟合子胚的子叶,但当用NAA或者IBA代替愈伤组织诱导培养基中的2,4-D时,它的诱导频率明显降低。这种粘性愈伤组织在分化培养基上形成体细胞胚。体细胞胚经过去50μm ABA和8.5%PEG600处理后成为耐干化胚。扫描电镜观察表明,萌发处理36小时后,耐干化胚恢复到干化处理之前的状态且大小和形态正常,而不耐干化胚不能恢复到干化处理之前的状态且表面撕裂。过氧化物酶活性的分析结果表明,耐干化胚有更高的过氧化物酶活性。耐干化胚的高过氧化物酶活性可能与催化H2O2的分解和保护体细胞胚免受氧化的伤害有关。     

美国火炬松优良家系引种试验研究

从美国引入火炬松种子园自由授粉的３３个优良家系进行引种试验。结果表明：家系间树高，胸径、单株材积生长量差异显著，经ＬＳＤ比较选择，仅有６个家系单株材积生长量优于商品种；家系前－后期树高生长相关性显著；家系的遗传力大于单株的遗传力。结果还显示，引进经人工选择的优良家系，还需经过引种区测试，并注意选择最适种源区，方能用于育种与生产。     

不同种泡桐叶片愈伤组织诱导及其植株再生

在确定 5种泡桐叶片诱导愈伤组织基本培养基为MS的基础上 ,筛选出了毛泡桐 (Paulowniatomen tosa)、南方泡桐 (Paulowniaaustralis)、白花泡桐 (Paulowniafortunei)、兰考泡桐 (Paulowniaelongata)和豫杂一号泡桐 (P .tomentosa×P .fortunei)叶片愈伤组织诱导的最适培养基 (分别为MS 0 .5NAA 4BA、MS 0 .3NAA 2BA、MS 0 .5NAA 4BA、MS 0 .3NAA 6BA和MS 0 .3NAA 8BA) ,然后 ,从 18个不同浓度NAA和BA组合的MS培养基中 ,找出了它们叶片愈伤组织诱导芽分化最适培养基 (分别为MS 0 .3NAA 12BA、MS 0 .3NAA 12BA、MS 0 .5NAA 12BA、MS 0 .5NAA 12BA和MS 0 .7NAA 12BA) ,最后 ,找出了 5种泡桐芽诱导根的最适培养基 (分别为 1 2MS 0 .1NAA、1 2MS 0 .1NAA、1 2MS、1 2MS 0 .3NAA和 1 2MS 0 .5NAA)。这些结果为开展泡桐基因工程研究和利用不同种泡桐叶片原生质体融合培育泡桐新品种提供了参考     

火炬松人工林林木营养特性的研究

通过试验控制，定位观测和养分元素分析测定，定量地研究了莎下蜀林场１５年生火炬松人工林林木矿质营养特征。     

马尾松共生菌根真菌调查研究

通过野外调查和室内鉴定,已查明与马尾松共生的菌根真菌27个种,其中有19个种是国内首次报道的。编制了马尾松菌根真菌名录(一)。马尾松隶属外生菌根树种,它可与多种菌根真菌共生形成典型的外生菌根的结构。     

西藏更张沟高山松的天然更新

西藏更张沟距林芝地区(八一新村)西35km,地理位置是东经94°05′,北纬29°44′。该沟为泥石流冲击而成,由西南向东北延伸达30km,从海拔3120m上升到3700—4000m,面积约20km~2(包括两边山坡)。气候状况参考林芝县(海拔3000m,距更张沟53km)气象资料,年平均温度8.5℃,≥10℃积温2262.8℃,1月平均气温0.2℃,7月平均气温15.5℃,年降水量654.1mm,年蒸发量1697.2mm,相对湿度63％,年日照时数2022.2,无霜期195.2天。     

Micropropagation of loblolly pine by somatic organogenesis andRAPD analysis of regenerated plantlets

IntroductionOrganogenesis and somatic embryogenesis haveben regarded as the in vitro system of choice withthe Pbtenhal for eventual mass propagation of superior and gen6tically engineering forest tree genotypesIn both conal6rous and hardwood (Gupts et al. 1991,Becwar et al. 1995). Somatic embryogenesis andorganeqenesis have been induced from more than 30ired speCies in conifers, but plant regeneration viaSOmahc embryogenesis and organogenesis remainsdffeutt cd a low rqeneration frequency (A…     

抗生素对火炬松的器官发生植株再生的影响(英文)

本文研究了氨苄青霉素、羧苄青霉素和头孢霉素等3种抗生素对火炬松愈伤组织的生长和分化及不定芽生根的影响。结果表明,头孢霉素最有利于愈伤组织的诱导和生长,羧苄青霉素最有利于芽的分化,氨苄青霉素降低了不定芽的生根频率。所有试验的3种抗生素提高愈伤组织的形成和芽再生,但降低了芽的生根频率。这些结果表明,选择合适的抗生素对优化火炬松遗传转化体系有重要作用。图3表4参25。