IBA、ABT1和发根农杆菌对大叶金叶椴嫩枝扦插生根的影响

以大叶金叶椴为试材,研究了IBA、ABT1和发根农杆菌对其嫩枝扦插生根的影响。结果表明:IBA、ABT1和发根农杆菌处理后,插条生根率、平均生根数、平均根长显著提高(P0.01),生根时间缩短。IBA、ABT1和发根农杆菌处理后,插条生根GA3和IAA含量,IAA/ABA均比对照增加,且差异极显著(P0.01);可溶性糖和全氮含量变化一致,先上升后下降与对照无显著差异,提高了IAA/ABA比值,降低了ABA和酚的含量。其中以500mg·kg~(-1) ABT1浸泡1min,再用发根农杆菌浸泡基部30min处理的嫩枝扦插生根效果最好,生根率、平均生根数、平均根长分别比对照增加了112.36%、112.61%和64.95%,生根时间比对照缩短了8d。     

超声波辅助发根农杆菌对黄瓜遗传转化的影响

 由于超声波处理可增加农杆菌与外植体之间的接触面积, 提高农杆菌对外植体的转化频率。本试验用野生型发根农杆菌A4 菌株感染黄瓜无菌苗的子叶和下胚轴, 建立了黄瓜的发根遗传体系。并对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮等影响因素进行了优化。     

利用发根农杆菌诱导毛状根的研究进展

对发根农杆菌进行了简单的介绍,重点综述了利用发根农杆菌产生发根的影响因素以及检测方法及应用情况.     

激素对黑果枸杞嫩枝扦插的影响

以黑果枸杞为试材,采用5种激素(生根粉(ABT)、赤霉素(GA)、萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA))的4种浓度(100、250、500、750 mg·L-1)处理,对黑果枸杞嫩枝扦插技术进行了研究.结果表明:ABT 250 mg·L-1处理的黑果枸杞嫩枝扦插成活率最高(70.00％),比对照提高33.33个百分点;GA的4个浓度成活率波动范围是50.00％～63.33％,平均成活率达到55.83％,比对照高19.16个百分点.IBA对插穗新生根数量,叶片大小、新枝条的长度有显著增加作用;IAA对新生根长度增加最多,对叶片数量有显著增加作用;NAA对根径增粗作用显著.激素可以促进黑果枸杞嫩枝扦插苗各项指标的生长发育,从而提高成活率.     

发根农杆菌介导山定子遗传转化及发根再生植株

为了提高山定子的生根能力,用发根农杆菌转化山定子,诱导产生发根,并由发根诱导出再生植株。通过对不同发根农杆菌株系、培养基、共培养时间以及添加乙酰丁香酮（AS）的研究,优化了发根农杆菌转化体系。当用添加AS（100μmol﹒L-1）的菌液侵染植株切段30 min,共培养3 d,在无植物生长调节剂的固体1/4MS培养基上诱导产生发根时,发根诱导率最高,达到88.89%。将发根根段在MS+BA 2.0 mg﹒L-1 +IBA 0.1 mg﹒L-1+GA3 0.1 mg﹒L-1的再生培养基上,通过愈伤组织的诱导得到再生植株,再生率3%。     

发根农杆菌K599对菊花活体转化及其高效再生

 发根农杆菌K599侵染菊花无菌苗刻伤的叶片形成转基因不定根,生根频率为88.0%;不定根经过诱导培养形成愈伤组织,并再生完整植株,愈伤组织诱导率和分化率分别为75.0%和63.3%。诱导的不定根和再生植株经过PCR鉴定含有K599 Ri质粒中的rolC基因,qRT-PCR检测显示rolC基因在再生转基因植株中实现了正常表达。再生植株表现出矮缩、多毛状根特征,并能正常开花。建立的利用活体材料直接作为发根农杆菌K599侵染的受体诱导不定根的遗传转化体系,能克服假阳性不定根的出现;同时,利用不定根繁殖过程中顶端生长点区域无菌的特点,通过截取不定根顶端靠近生长点区域进行继代培养,结合使用头孢霉素杀菌,能达到有效抑制和杀灭农杆菌的目的,在随后的不定根诱导愈伤及分化过程中无须再使用抗生素杀菌,提高了转基因再生效率,为菊花的矮化育种和目标基因的转移提供了良好的试验体系。     

蒙原欧李嫩枝扦插影响因子研究

对影响蒙原欧李嫩枝扦插育苗的几个重要因子进行研究。结果表明,选取新梢顶部作插穗留2片叶处理,生根剂IBA浓度为500 mg/L时,插穗愈伤组织出现多,不定根产生数量和成活率高,新梢生长好,扦插效果好。     

发根农杆菌介导西瓜转基因过表达体系的建立

【目的】建立发根农杆菌介导的西瓜转基因不定根过表达体系。【方法】探索利用野生型发根农杆菌K599侵染西瓜材料'Sugar Baby',诱导西瓜产生不定根的实验方法。借助该方法,将含有GUS基因和EGFP基因的过表达载体pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper导入发根农杆菌K599,侵染西瓜材料'Sugar Baby',通过常规PCR、qRTPCR、GUS染色和激光共聚焦显微镜检测,评价该过表达体系的效果。【结果】利用野生型和导入外源质粒的发根农杆菌均能成功诱导西瓜'Sugar Baby'产生不定根。PCR检测结果显示,携带pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper载体的发根农杆菌K599诱导产生的不定根阳性率达到100%。qRT-PCR、GUS染色和激光共聚焦显微镜检测均能成功检测到GUS基因和EGFP基因的过量表达。【结论】利用发根农杆菌K599诱导西瓜产生不定根介导基因过表达的方法,具有周期短,操作方便,转化率高的特点,可实现基因功能的快速验证,为西瓜根系相关基因的功能研究提供技术支持。     

发根农杆菌介导甜瓜转基因过表达体系的建立

遗传转化是实现基因功能验证和基因快速转育的重要手段,但目前甜瓜的遗传转化依旧存在众多技术难题。笔者利用野生型发根农杆菌K599侵染甜瓜'E31',成功诱导甜瓜产生了不定根。借助该技术,将含有GUS基因和EGF基因的过表达载体pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper导入发根农杆菌K599,利用转化后的农杆菌侵染甜瓜'E31',成功诱导出了不定根。PCR检测结果表明,新生不定根的阳性率达到100%。通过GOS染色和激光共聚焦显微镜检测,在不定根中检测到GOS基因和EGFP基因的大量表达,成功实现了外源基因在甜瓜新生不定根内过表达。该方法周期短、操作方便、转化率高,可实现基因功能的快速验证,为甜瓜根系抗病抗逆方面的研究提供技术支持。     

IBA和NAA处理菊花扦插生根试验

菊花通常以扦插繁殖为主.结果表明:单独使用IBA处理插穗时,在0～1 500μL/L范围内,根数、根长、根重随IBA浓度的升高而增加,在1500μL/L处理区生根效果最佳.IBA和NAA混合使用时,其最佳组合IBA 1500μL/L NAA 800 μL/L.     

吲哚丁酸在荔枝高空压条上的应用研究

通过对不同浓度的IBA在荔枝高空压条上的应用研究,结果表明:50 mg/kg浓度的IBA处理的压条,其生根数、根的长度、粗度、生根速度等都明显优于其它处理.因此,IBA应用于荔枝高空压条中的最佳浓度为50 mg/kg,该方法可缩短荔枝高空压条苗的生产周期,提高压条苗的质量,为荔枝高空压条苗的生产提供了依据.     

IBA与ABT不同浓度组合对喜树扦插生根效应的影响

以珍珠岩∶草炭=1∶1为基质,采用不同浓度组合的IBA和ABT配比,研究了各处理对2 a生喜树嫩枝扦插生根效应的影响。结果表明:与清水对照相比,不同浓度IBA和ABT组合均可显著提高插穗生根质量;处理后的插穗愈伤组织及新生根产生时间显著提前;新生根长度、插穗成活率及新生叶数量显著提高;干鲜重比值显著增加。在各处理中,以ABT 1 000 mg/L+IBA 1 000 mg/L浸泡20 s效果最好,第10天就可形成愈伤组织,比对照提前2 d;且愈伤生长速度最快,第10天直径可达0.43 cm;其生根时间也最早,第21天即可生根,比对照提前7.75 d;成活率平均可达81.67%,比对照提高了23.34%;同时,成活后的干鲜重比值比对照增加12.16%(P0.05)。同时试验还发现,喜树扦插中基质必须疏松透气、排水良好,而且要严格控制湿度,否则湿度过大仅产生愈伤组织,时间过长,愈伤褐化,引起插穗腐烂。     

外源IBA和PAs对苹果幼苗新根形成,多胺及核酸含量的影响

外源多胺（精胺、亚精胺、腐胺）可增加苹果幼苗新根数量，但效果不及ＩＢＡ；ＩＢＡ能够促进多胺与核酸的积累，有效期２０～２７天；多胺亦可增加ＲＮＡ、ＤＮＡ的含量；处理和对照内源多胺与核酸含量均同步变化。     

不同浓度的IBA对猕猴桃组培苗生根的影响

用不同浓度的IBA诱导猕猴组培苗生根。结果表明：把组培苗直接接种于IBA浓度为0．7mg/L的生根培养中，不仅存活率高，而且诱导生根效果最好，单株生根数量及根总长均高于其余浓度。     

NAA和IBA对福建茶扦插生根的影响

用300 mg/L NAA和300 mg/L IBA处理福建茶1 h、2 h、3 h、4 h,用600 mg/L NAA和600 mg/L IBA处理福建茶1 min、5 min、10 min、20 min,60 d起苗观察生根情况。结果表明,300 mg/LNAA和300 mg/L IBA处理福建茶,NAA处理3 h和IBA处理4 h效果最好,生根率83%和87%;600 mg/L NAA和600 mg/L IBA处理福建茶,NAA处理5 min和IBA处理10 min效果最好,生根率83%和90%。     

吲哚丁酸(IBA)对除虫菊分株繁殖作用的初步研究

用不同浓度吲哚丁酸(IBA)处理除虫菊分蘖苗后,对其后期生长有着不同程度的影响,除3125 mg/L浓度以外,用吲哚丁酸处理除虫菊后,其成活率、根冠比、须根数、分蘖数、干重、鲜重、叶片厚度、叶绿素含量各指标与对照相比均有明显提高,其中以625 mg/L处理效果最好,其叶片厚度、成活率根冠比、须根数、分蘖数、干重、鲜重、叶片厚度与对照相比均达到极显著水平,同时叶绿素a、叶绿素b含量也达到了显著水平。并根据各处理指标的分析结果,拟合回归方程,预测理论最佳处理浓度,为吲哚丁酸(IBA)对除虫菊分株繁殖的应用,提供一定的理论指导依据。     

不同浓度IBA及基质对迷迭香扦插生根影响

用50 mg/L IBA、100 mg/L IBA、300 mg/L IBA浸泡迷迭香嫩枝插穗、半木质化插穗、完全木质化插穗30min后,扦插在沙子及混合基质中,均促进生根,成活率83%～100%,其中100mg/L IBA促进迷迭香插穗在沙子里及混合基质里生根效果最好,不同部位枝条插穗生根总体效果:半木质化枝条>嫩枝>完全木质化枝条。