芫荽花叶病病原病毒鉴定

 从芫荽(Coriandrum Sativum L.)花叶病株上分离到一病毒分离物(CMV-Co),汁液摩擦接种和桃蚜(Myzus Persicea)均能传毒。人工摩擦接种可侵染5科21种植物,在黄瓜、心叶烟等植物上引起系统花叶;在苋色藜、昆诺阿藜、豇豆等接种叶片上引起局部枯斑。此病毒的钝化温度为55～60℃,稀释限点为10^-3～10^-4,体外存活期2～3天。部分提纯的病毒最大紫外吸收为258nm,最小吸收为238nm,表现为典型的核蛋白吸收,A260/A280=1.26.SDS-不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒其外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25500道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,CMV-Co与黄瓜花叶病毒有明显的血清学反应:用1.5%醋酸双氧铀负染,电镜观察病毒粒子球形(正二十面体),直径为28～30nm.根据上述特征,CMV-Co是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

侵染大丽花的黄瓜花叶病毒分离物的鉴定

根据病毒生物学特性、粒体形态和血清学性质，初步鉴定在厦门地区种植的大丽花上表现花叶症状的病株上分离的1个病毒分离物属于黄瓜花叶病毒。在供试的11科39种(或品种)植物中，该分离物通过摩擦接种能侵染其中的9科35种(或品种)；失活温度为50-55℃，稀释终点为10^-3～10^-4，体外存活期为24-28h；病毒粒体球状，直径约28-30nm。经间接ELISA测定，该分离物与烟草花叶病毒、南瓜花叶病毒、烟草环斑病毒、番茄不孕病毒、西番莲木质病毒的抗血清均无反应。与黄瓜花叶病毒抗血清具有强阳性反应，鉴定该病毒是黄瓜花叶病毒。     

侵染西瓜的黄瓜花叶病毒的生物学鉴定

用生物学、血清学及电镜技术鉴定了西瓜花叶病毒分离物 (XZ -1)的基本属性。研究结果表明 ,该分离物可侵染 6科 17种植物。其中 ,在葫芦科、茄科、菊科、苋科几种植物上表现为花叶 ;在苋色藜、蚕豆上表现为枯斑。桃蚜 (MyzusPersicae)可传毒 ,病毒汁液极易摩擦接种。该分离物汁液的致死温度为 5 5～ 60℃ ,稀释限点为 10 - 3～ 10 - 4,体外存活期约为 2～ 3d。分离物形态为典型球状 ,其提纯物紫外光吸收的最高峰在 2 60nm ,最低峰在 2 40nm。A2 80 /A2 6 0 =0 .69。该病毒核酸含量约为 11.3 %。ELISA测定该分离物与黄瓜花叶病毒的抗血清学反应为阳性 ,初步鉴定该分离物隶属于黄瓜花叶病毒 (CMV)     

茄子花叶病病原病毒鉴定

茄子花叶病是近年来山东分布较广的一种病害。发病植株表现斑驳、花叶、严重株叶片卷曲、矮化和畸形。从发病植株上分离到一病毒分离物(Smv—1)。可以通过汁液摩擦接种传播和由蚜虫非持久性传播。人工摩擦接种可侵染8科中的21种植物。系统侵染普通烟、心叶烟、黄瓜和番茄。局部侵染苋色藜、昆诺阿藜。此病毒的钝化温度为55～60℃10分钟,稀释限点为10~(-(?)～10~(-4)。体外存活期为5天(22C)。用差速离心法可以提纯该病毒,部分提纯的病毒最大紫外吸收峰为259nm,最小吸收峰为239nm,表现为典型的核蛋白吸收。A260/A280=1.68。SDS—不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒得到外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25000道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,Smv—1与黄瓜花叶病毒抗血清有阳性反应。用1.5%醋酸双氧铀负染。电镜观察部分提纯病毒粒子为球形(正二十面体)、直径为28～30nm。根据上述特征,Smv—1是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

蝴蝶兰病毒病的病原鉴定

鉴定结果表明,引起厦门地区蝴蝶兰(Phalaennopsis sp.)褪绿斑驳的病原为建兰花叶病毒(Cymbidium masaic virus,CyMV)的一个分离物.该分离物能通过摩擦接种侵染5科12种(或品种)植物中的3科3种;失毒温度为60～65℃,稀释终点为1×10-3～1×10-4,室温下,体外存活期超过10d.提纯病毒粒体线状,长约470～490 nm,宽为13 nm.ELISA测定结果表明,该分离物与建兰花叶病毒抗血清有密切血清学关系,而与黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)及齿兰环斑病毒(ORSV)的抗血清无血清学关系。     

广西西瓜花叶病病原病毒鉴定

从广西各西瓜主产区采集到表现花叶症状的样品124份,经ELISA测定,所采样品均与西瓜花叶病毒二号(WMV-2)抗血清呈阳性反应,与黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)抗血清呈阴性反应.取典型样本摩擦接种西瓜、西葫芦、南瓜、黄瓜、毛节瓜、瓠瓜、罗汉果等葫芦科植物表现花叶症状;接种苋色藜产生局部坏死斑;接种番木瓜、普通烟、心叶烟、番茄、辣椒、豇豆等无任何症状反应.该病毒还可通过棉蚜和嫁接传染.病毒初提纯液经电子显微镜观察,发现许多大小为12nm×(600～800)nm的线状病毒.ELISA测定结果显示,该病毒与莴苣花叶病毒(LMV)、大豆花叶病毒(SMV)抗血清呈阳性反应,它们之间有密切的血清学关系.据此,广西西瓜花叶病的病原病毒应为西瓜花叶病毒二号(WMV-2).     

辽宁省辣椒花叶病毒分离鉴定

在辽宁省主要蔬菜区获得辣椒花叶病毒两个分离物,一为烟草叶病毒辣椒分离株(TMV—P),其表现黄斑驳花叶症,病毒粒子呈长杆状,稀释限点10~(-6);致死温度97℃;体外存活期为10天以上,另一为黄瓜花叶病毒辣椒分熟株(CMV—P),病毒粒子球状,稀释限点1:3000,致死温度60～65℃。体外存活期3～4天。     

河北省侵染红小豆（Phaseolus angulavis wight）的黄瓜花叶病毒的鉴定

1985年在河北省红小豆主产区红小豆罹病植株上采集了38份标样,从中分离出8502分离物。二年重复鉴定表明,该分离物可以侵染茄科、豆科、藜科等7科31种植物。体外稳定性測定:钝化温度60°—65℃,稀释限点10~(-3)—10~(-4),体外保毒期(室温)1—2天。病毒可通过摩擦接种传毒。并由桃蚜做非持久性传播。该分离物和黄瓜花叶病毒抗血清呈阳性反应。电镜下病毒形态为球状粒体,大小30nm。根据上述性状判断,8502分离物属于黄瓜花叶病毒(CMV)。用琼脂双扩散法检测该病毒在田间自然感染率约为12.7％—36％。可以认为黄瓜花叶病毒是红小豆病毒病的主要病毒种类之一。     

花生上分离的黄瓜花叶病毒(CMV)

1984年在山东莱西采集的花生病毒病样本中,得到一个病毒分离物PN-14,经过寄主范围、蚜虫传病和血清学凝胶双扩散试验等研究,证明PN-14属于黄瓜花叶病毒(CMV)。 汁液摩擦接种的7科23种植物中,病毒分离物能侵染6科14种植物。接种花生(Arachis hypogeae)白沙1016品种后,顶叶有时出现脉明,褪绿斑,然后变为花叶,叶下垂而稍卷曲,全株矮化。接种苋色藜叶片,在2—3N后叶片产生针尖大小的褪绿点,然后变成小枯死     

菲律宾引种香蕉花叶病毒的鉴定

根据病毒生物学特性，粒体形态和血清学性质，明确在厦门地区种植的菲律宾引种香蕉，表现花叶症状病株上分离的一个病毒分离物是属于黄瓜花叶病毒亚组Ⅱ。该分离物能通过摩擦接种染供试１１科５２种植物中的１０科４７种；能够由棉蚜传播；失毒温度为５０￣５５℃，稀释终点为１１＾－３￣１０＾－４，体外存活期为２４￣４８ｈ。提纯病毒粒球状，直径约２８￣３０ｎｍ。用该分离物提纯病毒免疫家兔制备的抗血清，经琼脂双扩散方法测     

植物病毒复制抑制物的提取和其抗性测定

用烟草花叶病毒接种抗性植物心叶烟后,采用离心和ZnAc₂沉淀的方法提取植物胞间液中的病毒复制抑制物(IVR).5%～15%的不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定IVR的分子量为26000.对IVR进行的抗性检测实验表明,IVR对三生NN烟原生质体内TMV的复制抑制率达78%,对植物体内病毒的抑制率达47%～70%.     

木薯天蛾颗粒体病毒某些生化特性——病毒DNA限制性内切酶解及结构多肽分析

本文采用限制性内切酶,分析木薯天蛾颗粒体病毒(Erinnyis ello Granulosis Virus简称EeGV)的DNA。同时,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE),对病毒包涵体蛋白质和病毒粒子结构多肽进行分析。结果表明,EeGV基因组的分子量为89.82 Kbp(硷基对);包涵体蛋白只有一条带,其分子量为31.0KDa(道尔顿);病毒粒子至少有18种结构多肽,其分子量在14.00～205.00 KDa范围之间,其中,有6条带明显地不同于Piris rapae GV和Trichoplusia ni GV;经EcoR_1,Hind Ⅲ,Kpnl酶解的EeGV DNA片段数目和分子量都明显不同于PrGV和TnGV的DNA片段。     

莴苣病毒病的研究

从自然感病的109株莴苣上鉴定出莴苣花叶病毒(LMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)及蒲公英黄色花叶病毒(DYMV)。LMV 可通过种子传毒,病株种子的传毒率为10.35%(商业种子为5.37%);而 CMV 则不能种传。DYMV 也可种传(3.07%),桃蚜(Myzus persica)作非持久性传播,而汁液接种较为困难。其 TDP 为65—70℃,DEP 为10~(-4)—10~(-5),而 L 则为24h。病毒粒体呈球状,直径约为30mm,DYMV 与 SPqMV,RMV 及 TRSV 的抗血清不起反应。     

山东省烟草病毒类型鉴定

1978～1980年山东4个地、市产烟县(区)调查采样,据100个标样鉴定结果,对山东烟草上的病毒类型已明确有三种:烟草花叶病毒(TMV),黄瓜花叶病毒(CMV),马铃薯Y病毒(PVY)。     

武隆烟区烟草病毒病的病原初步鉴定

对重庆市武隆烟区田间烟草进行了病毒病病原种类的调查和鉴定。26个烟草样品经ELISA共检测到TMV,CMV,PVY及TuMV等4种病毒。所有样品均感染TMV,且病毒复合侵染严重,其中,以TMV,TuMV,CMV及PVY等4种病毒的复合侵染为主,侵染率达30．77％。ELISA结果表明,复合侵染的样品中TMV含量最高,TuMV含量最低。     

江苏省西瓜花叶病毒类型的鉴定

1985年从江苏镇江农科所西瓜试验田的西瓜花叶病株上分离到二种病毒分离物,试验的代表分离物分别为W_3和W_(40)。 W_3分离物的寄主范围较窄,除葫芦科植物外,只侵染苋色藜引起褪绿黄斑;体外抗性:失毒温度为50—55℃,稀释限点为10(-4),体外存活期为21天;棉蚜(Aphis gossypii),桃蚜(Myzus persicae)以非持久性方式传毒。病毒粒体为线条形,长度为600—750nm;在病叶细胞的超薄切片内可观察到典型的风轮状内含体。与西瓜花叶病毒二号(WMV-2)抗血清呈阳性反应。W_3分离物是西瓜花叶病毒二号的一个株系。 W_(40)分离物的寄主范围广,除葫芦科植物外,还能侵染茄科、菊科、苋科、豆科等作物。失毒温度为55—60℃,稀释限点10~(-3),体外存活期为3天,棉蚜、桃蚜以非持久性方式传病。与黄瓜花叶病毒(CMV)抗血清呈阳性反应。W_(40)分离物为黄瓜花叶病毒的一个株系。 在86年调查田间西瓜花叶病中,WMV-2占病株的70％,CMV占18％,还有4％左右的混合感染病株。     

湖北省白肋烟病毒病毒源种类鉴定

通过对湖北省五峰,恩施,建始３个县的１３９个病毒病标样生物学和血清学鉴定,证明湖北省白肋烟病毒病毒源种类主要是ＣＭＶ,ＰＶＹ和ＴＭＶ３种病毒,存在单独侵染和复合侵染５种侵染类型,其中ＣＭＶ侵染频率为３３．８１５,ＰＶＹ为２２．３０％,ＴＭＶ为１４．３９５,ＣＭＶ＋ＰＶＹ,ＴＭＶ＋ＰＶＹ复合侵染频率分别为５．７６％和５．０３％。     

用放射免疫吸附测定法检测大麦黄矮病毒及雀麦花叶病毒

放射免疫吸附测定法(Radioimmunosorbent assay RISA)是一种灵敏、快速检测植物病毒的方法,它的灵敏度高于酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked immunoso-sorbent assay ELISA)。作者应用~(125)I分别标记雀麦花叶病毒(Brome Mosaic VirusBMV)和大麦黄矮病毒(Barley Yellow Dwarf Virus BYDV)免疫γ-球蛋自,进了行病毒检测,取得了较为满意的结果,这为进行蚜虫带毒率的测定和病害流行测报打下基础。     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒(M_bNPV)的生物测定

从甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae L.)自然罹病死亡幼虫体分离出的多株核型多角体病毒(M_bNPV),选出毒力较强的 M_bNPV-80株,于1984年在哈尔滨进行生物活性测定。方差分析表明:1.2×10~2～1.2×10~8 PIB(多角体)/虫间,7种剂量感染3龄幼虫,不同剂量间的校正死亡率差异极显著。而各处理死亡均数差异显著性测定中,1.2×10~5～1.2×10~8 PIB/虫4个剂量差异不显著。剂量与死亡率回归方程为 y=2.819+0.416x;致死中剂量(LD_(50))为1.77×10~5 PIB/虫。每虫以1.2×10~4和1.2×10~5 PIB/虫分别处理3龄幼虫所得的致死中时(LT_(50))分别为6.59和4.31天。