芫荽花叶病病原病毒鉴定

 从芫荽(Coriandrum Sativum L.)花叶病株上分离到一病毒分离物(CMV-Co),汁液摩擦接种和桃蚜(Myzus Persicea)均能传毒。人工摩擦接种可侵染5科21种植物,在黄瓜、心叶烟等植物上引起系统花叶;在苋色藜、昆诺阿藜、豇豆等接种叶片上引起局部枯斑。此病毒的钝化温度为55～60℃,稀释限点为10^-3～10^-4,体外存活期2～3天。部分提纯的病毒最大紫外吸收为258nm,最小吸收为238nm,表现为典型的核蛋白吸收,A260/A280=1.26.SDS-不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒其外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25500道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,CMV-Co与黄瓜花叶病毒有明显的血清学反应:用1.5%醋酸双氧铀负染,电镜观察病毒粒子球形(正二十面体),直径为28～30nm.根据上述特征,CMV-Co是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

鸡旦果花叶病病原病毒的鉴定

根据病毒粒体形态、血清学反应、寄主范围、鉴别寄主反应及物理性质,广州地区鸡旦果花叶病病原病毒被鉴定为CMV的一个分离物。此CMV分离物可由汁液摩擦、桃蚜、棉蚜传染鸡旦果及西番莲(龙珠果)幼苗。首次发现花生是人工接种的枯斑寄主。     

温州盘菜病毒病病原鉴定

１９９９年从温州市郊盘菜基地采集病毒病样本,得到病毒分离物Ｓ１８和Ｓ２８。经生物学测定、血清学试验及电镜观察,表现病毒病症状的样本均检测出芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）,有少量样本中也检测出黄瓜叶病毒（ＣＭＶ）,这是国内首次在温州盘菜上分离到ＴｕＭＶ和ＣＭＶ。     

一串红花叶病及其病原研究

１９８９－１９９２年间对杭州等地一串红花叶病的发生及其病原进行了系统研究，从病株上分离得到的１７个病毒分离物，经生物学和血清学反应测定均符合黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）的特点，病毒分离物Ｍ－２２不能经由桃蚜传播使黄苗榆等供试寄主发病。用０．５ｍｏｌ／Ｌ磷酸钾卤缓冲液对Ｍ－２２进行提纯，提纯病毒经醋酸铀负染，测定其粒大子小为３０．２ｎｍ．ＳＤＳ－聚丙燃酰胺凝胶电泳测定Ｍ－２２的外壳蛋白分子量约为２８ｋＤ，     

山西西葫芦花叶病病原鉴定与部分序列分析

利用双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)技术和非序列依赖PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)方法对感病西葫芦进行了分子鉴定。序列测定及分析发现,具有明显花叶和斑驳症状的西葫芦受到黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的侵染。为进一步明确黄瓜花叶病毒山西西葫芦分离物(CMV-XHL)的分类地位,克隆了CMV-XHL RNA3的外壳蛋白和移动蛋白基因全序列。通过序列比对分析,发现CMV-XHL CP核苷酸序列和氨基酸序列与CMV亚组ⅠB中CMV烟草分离物(CMV-SG)的相似性最高,分别为98.6%和99.5%;MP核苷酸序列和氨基酸序列与CMV亚组Ⅰ分离物的相似性最高,为93.2%~94.6%。MP和CP氨基酸序列系统进化分析表明,CMV-XHL与中国大多数CMV分离物聚为一类,属于CMV亚组Ⅰ中的成员。研究结果对西葫芦病毒病的防治提供一定的理论依据。     

丝瓜病毒病病原的初步研究

１９９５年从温州市郊的蔬菜基地采集丝瓜病毒病样本９３份，经生物学测定，电镜及血清学试验，其中６３份鉴定为黄瓜花叶病毒，３０份未发现病毒，初步确认引起丝瓜病毒病的病原为黄瓜花叶病毒。     

珊瑚豆花叶病病原病毒鉴定

从珊瑚豆(Solanum pseudocapsicum L.var diflorum(Vell)Bitter)花叶病株上分离到一病毒(SPV—I),汁液摩擦接种和桃蚜(Myzus persicea)、棉蚜(Aphis gossypii)均能传毒。两次试验证明该病毒不经种传,人工摩擦接种可侵染7科中的21种植物。在黄瓜、心叶烟等植物上能引起系统花叶,能引起苋色藜、昆诺阿藜接种叶片局部枯斑。该病毒钝化温度为65～70℃10分钟;稀释限点为10~(13)～10~(-4);体外存活期为1～2天(22℃)。琼脂免疫双扩散表明,此病毒与黄瓜花叶病毒有明显的血清学关系。浸蘸法制备样品,2%醋酸铀负梁,透射电镜观察,该病毒粒子为正二十面体,其直径为28～30nm。根据此病毒的生物学、血清学特性和病毒粒子的形态特征,初步认为该分离物是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

云南省唐菖蒲花叶病的鉴定研究

 对云南省的唐菖蒲花叶病进行调查和病样采集,通过鉴别寄主反应、电镜负染观察、免疫双扩散实验证实此病原为黄瓜花叶病毒CMV.     

黑皮果蔗花叶病病原鉴定

在南宁市郊采集到l份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品(NN-Ba2),经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC-ELISA检测显示NN-Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMV CP基因分别设计合成特异引物,利用RT-PCR对NN-Ba2进行分子鉴定,扩增出大小约900 bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN-Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,测序结果在DDBJ上用BLAST进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的核苷酸序列同源性为97.36%~97.77%,根据马铃薯Y病毒科(Potyviridae)病毒种和株系的划分标准,NN-Ba2鉴定为SCMV.田间采集的另外10份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT-PCR检测,证明也感染了SCMV.     

黑皮果蔗花叶病病原鉴定

在南宁市郊采集到1份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品（NN—Ba2）,经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC—ELISA检测显示NN—Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMVcP基因分别设计合成特异引物,利用RT—PCR对NN—Ba2进行分子鉴定,扩增出大小约900bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN—Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,测序结果在DDBJ上用BLAST进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的核苷酸序列同源性为97．36％～97．77％,根据马铃薯Y病毒科（Potyviridae）病毒种和株系的划分标准,NN—Ba2鉴定为SCMV。田间采集的另外10份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT—PCR检测,证明也感染了SCMV。     

侵染西洋芹菜的黄瓜花叶病毒及品种抗病性测定

1987～1989年,从田间采集病害样本55个,根据鉴别寄主和血清学反应的结果,黄瓜花叶病毒(CMV)占样本总数的66.45％,是危害西洋芹菜的主要毒源。代表分离物Ce-20的各种性状与典型的黄瓜花叶病毒相似。苗期抗病性测定表明,在7个西洋芹菜品种、意大利冬芹和南京本地芹菜中,未发现对黄瓜花叶病毒的免疫和高抗品种,其中西洋芹84-3和84-6两个品种比较耐病,意大利冬芹较为抗病。     

黄瓜花叶病毒（CMV）土壤非介体传播研究

对黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）土壤非介体传播的试验结果表明，土壤非介体传播是ＣＭＶ传播的新途径，不同作物间的传播效率有差异，一般ＣＭＶ传入根部后多数地上部不表现症状，但根系生长明显受到影响。文章还分析了ＣＭＶ能够以土壤非介体方式传播的原因。     

烟草不同生育阶段对黄瓜花叶病毒侵染的表现

为了探索烟草不同生育阶段对CMV的侵染反应、为防治烟草黄瓜花叶病提供理论依据。1984～1986年对不同生育阶段的烟草品种“Speight G28”、“Nc89”、“中烟15”以CMV接种。观察其侵染和发病情况及对各个器官和产量的影响、试验结果指出:3个品种从大十字期至现蕾期对CMV的侵染无抵抗能力,但各生育阶段的耐病性存在明显差异。SpeightG28,中烟15自大十字期至50天属于感病阶段、50天后属于耐病阶段。“Nc89”前40天属于感病阶段。在感病阶段中、前两个品种又有两个高峰期、分别为从大十字期至第10天和第40天左右、“Nc89”为第10天和第40天。第一次高峰尤为严重、病情指数可达80以上、产量降低35%左右、潜育期短13～15天、推迟现蕾期30～50天、个别植株不能现蕾。耐病阶段病情指数低于40以下,产量降低10%左右。植株的感、耐现象与体内的蛋白质、总糖的含量有密切的关系。     

烟草花叶病毒株系鉴定研究进展

烟草花叶病毒具有许多株系，因内外近十几年来主要在生物学，血清学上的生物化学和分子生物学等方面进行株系的研究。文章就上述研究进展作一简要综核实工针对某些研究方面阐述了一些见解和评论。     

侵染姜的烟草花叶病毒的鉴定

从莱芜市莱城区大田表现严重花叶的姜上分离到一种病毒,接种到１３ 科４３ 种鉴别寄主上,能侵染５ 科２５ 种植物。该病毒分离物的钝化温度为９５ ～９８ ℃,稀释限点为１０ － ７ ～１０ － ８ ,体外存活期为１２８ｄ 以上。提纯病毒呈典型的核蛋白吸收,最大吸收峰为２５８ｎｍ ,最小吸收峰在２４３ｎｍ , Ａ２６０／ Ａ２８０ ＝ １ ．３２ 。病毒外壳蛋白分子量为１７ ．３ Ｋ Ｄ,杆状粒体长度为３００ｎｍ ,该分离物与烟草花叶病毒的抗血清有明显的阳性反应。根据这些特性,该病毒分离物属于烟草花叶病毒属的烟草花叶病毒。     

千金子花叶病的毒原鉴定

在陕西杨陵地区栽培的千金子花叶毒林上分离到一种病毒,经汁液磨擦接种三生烟及心叶烟产生环斑症状。其TIP为60℃,DEP为10~(-2)～10~(-3),L则为4～5天。能通过种子传播但不能通过蚜虫传播。该病毒与TRSV抗血清有明显的沉淀反应。在电镜下观察到直径30nm的球状粒子。该病毒被鉴定为TRSV。     

侵染西瓜的烟草花叶病毒的鉴定

从莘县一株表现蕨叶、花叶的西瓜上得到了分离物Ｗ－ＳＸ。Ｗ－ＳＸ经人工接种可侵染茄科、葫芦科、苋科、藜科的１７种（或品种）植物。钝化温度为９２℃，稀释限点１０－７～１０－８。病毒汁液在室温下保存５０ｄ仍有侵染活性。Ｗ－ＳＸ不能由蚜虫传播。病毒粒子杆状，长３００ｕｍ。提纯病毒的最大吸收在２６０ｕｍ，最小吸收在２４６ｕｍ。Ａ２６０／Ａ２８０＝１．２９９。在琼脂中与烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的抗血清产生明显的沉淀线。这些结果表明Ｗ－ＳＸ应为ＴＭＶ的一个分离物。ＴＭＶ在所有西瓜病样分离物中占８．６５％。这是ＴＭＶ侵染西瓜的首次报道，其对西瓜的为害性有待于进一步研究。     

芜菁花叶病毒非蚜传株系的鉴定

1983年从南京蚕豆苗上采得斑驳症状的标样,分离到病毒标样B-98。用汁液摩擦接种在10科50种植物上,有7科20种植物表现不同类型的症状。在苋色藜上产生大块的褪色枯斑,在油菜、青菜上产生系统花叶症状。热钝化温度为55—60℃,稀释限点为10~(-3)—10~(-4),体外存活期为11天(8℃)。不能经蚜虫传播,也不能经种子传毒。病叶的汁液及粗提纯样品在电镜下均可见到大小为680—850×12—15nm的线状病毒粒体。免疫电镜和SDS-琼脂免疫双扩散试验表明,病毒分离物B-98与芜菁花叶病毒有十分密切的血清学关系。B-98为芜菁花叶病毒的一个非蚜传株系,定名为TuMV-NAT株系。     

山东省大豆花叶病毒株系鉴定

1987～1989年鉴定山东省大豆花叶病毒的标样145个,根据它们在6个抗性不同的鉴别品种上的反应差异,区分为6个株系。sd_1、sd_2属弱毒株系,sd_3、sd_4属中毒株系,sd_5、sd_6属强毒株系。并明确山东省各地区株系的分布情况。强毒株系的出现,使推广品种齐黄10号、文丰5号、丰收黄、东解1号、烟黄2号、诱变30和跃进4号等丧失抗性,并对高抗品种鲁豆4号、齐黄22号等存在威胁,应引起重视。