用于卵母细胞保护剂添加过程的微混合器优化模拟

为了减小卵母细胞低温保存的渗透损伤与毒性损伤,微流体装置被应用于低温保护剂的连续添加和去除。针对卵母细胞保护剂添加过程,建立了基于S形混合通道的微混合器模型,研究了通道的几何参数与操作参数对流体混合过程的影响,并对其进行了理论优化。结果表明:混合通道的高度增加,或宽度减小都会增加流体的混合性能;当Re数的范围在0.04~11.2,流体处于层流状态,混合仅靠分子扩散实现,随着Re数的增大,分子扩散的时间减少,两股流体的混合长度增加,混合效果变差;弯道产生的二次流对流体的扩散混合起着重要作用,明显提高了流体的混合效率,同时弯道并不会增大流体流动的局部阻力。这些结论可为微混合器的优化设计及后期卵母细胞低温保存试验提供参考。     

秸秆发酵剂生产工艺稳定性研究

对秸秆发酵剂生产工艺稳定性进行了研究,包括液体种子质量控制、低成本配方的研究、杂菌控制方法研究及生产终点的快速判定方法研究等。试验结果表明,当光密度(D_(660nm))在0.2~0.8时,其大小与菌数成正比;加入20%的肥土的培养效果最好,目的菌菌数为150×10~8个/g,杂菌数为13×10~8个/g,杂菌率为8.7%;加入抑菌剂亚硫酸钠效果较好,菌数达到250×10~8个/g,是对照菌数的1.92倍,杂菌率为12.0%,比对照低8.8百分点。放线菌在固体发酵中用于控制染菌方面未能获得良好效果,有待于进一步深入探讨。     

美国山核桃采穗圃修剪技术研究

通过对美国山核桃采穗圃不同粗度枝条采取不同的修剪方式,比较了不同修剪方式下母枝长度、萌芽数、新枝数、新枝长度及粗度、成枝率等指标差异,分析了各指标间的相关性,建立了回归方程.结果表明:枝条粗度为10～15 mm时,宜采取重剪方式,保留2～3个芽,成枝率可达70%～100%;枝条粗度为15～20 mm时,宜采取轻剪方式,保留6～8个芽,成枝率可达81.57%～92.46%;枝条粗度为20～30 mm时,宜采取轻短截或重剪方式,保留8个芽或者2～4个芽,成枝率可达89.28%～96.49%.新枝长度与粗度(0.902~(**))、母枝长度与萌芽数(0.889~(**))、留芽数与萌芽数(0.771~(**))具有较为密切的极显著正相关关系,成枝率与留芽数(-0.250~(**))存在极显著负相关关系,与新枝数(0.240~(**))、新枝长度(0.468~(**))、新枝粗度(0.419~(**))、母枝粗度(0.506~(**))存在极显著正相关关系.并建立了母枝长度、萌芽数、新枝数、新枝长度及粗度、成枝率与留芽数、母枝粗度间的回归方程.     

鲫细胞与病毒微载体规模化培养工艺研究

本文研究了在Cephodex微载体悬浮培养系统中规模化培养鲫脑组织细胞(Gi CB)和鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)的工艺。结果表明,Cephodex微载体适合GiCB细胞的贴壁培养,细胞贴壁期培养基中血清浓度为10%,微载体浓度为6 g/L;细胞初始接种密度为2.5×10~5cells/m L时,以转速35 r/min,每静置30 min搅拌2 min的间歇搅拌条件贴壁率最佳,8 h后贴壁率可达90%以上;增殖期以45 r/min的连续搅拌速度可获得最佳的细胞生长效能。采用优化的工艺条件,以感染复数为0.2的CyHV-2病毒接种规模化培养的GiCB细胞5 d后,出现典型的细胞病变效应,病毒滴度(TCID_(50)/m L)可达10~(6.50±0.30)。本项研究为鲫造血器官坏死症疫苗的规模化制备技术研究奠定了前期基础。     

单环刺螠幼体生长及摄食强度的研究

为探讨不同饵料(微绿拟球藻、2/3微绿拟球藻+1/3螺旋藻、1/2微绿拟球藻+1/2三角褐指藻)对单环刺螠Urechis unicinctus幼体(体质量约0.5 g)生长的影响,采用室内生态学试验方法测定了单环刺螠幼体的清滤率和滤食率。结果表明:用混合饵料投喂可显著提高单环刺螠幼体的增重率(P0.05);在一定盐度范围内,单环刺螠幼体的清滤率和滤食率均与盐度呈正相关关系;盐度为20~28时幼螠清滤率和滤食率随盐度的升高逐渐增加,盐度为28时达到最大值,幼螠的清滤率为(262.16±3.90)mL/(ind.·h),摄食率为(123.41±0.74)×10~4cells/(ind.·h);温度对幼螠的清滤率和滤食率影响显著(P0.05),温度为15~25℃时,清滤率和滤食率随温度升高逐渐增加,水温为20℃时幼螠的清滤率最高,为(251.33±10.16)mL/(ind.·h),水温为25℃时幼螠的滤食率最高,为(159.11±4.35)×10~4cells/(ind.·h)。研究表明:在较为理想的外界环境下,单环刺螠幼体的增重率与食物来源相关性较大,以混合饵料投喂效果最好;盐度和温度对单环刺螠幼体的摄食有显著的影响,幼体摄食的最适水温为20~25℃,最适盐度为28。     

增强微流控芯片化学发光检测灵敏度的研究

为增强微流控芯片化学发光检测的灵敏度,扩大该方法的应用领域,利用金属离子催化鲁米诺-过氧化氢反应,通过比较几种结构不同的微流控芯片,对影响检测发光信号灵敏度的因素,如试剂浓度、流速和微通道的尺度等作了详细地讨论。提出了具有双螺旋形结构芯片的微流动注射系统,大大增强了化学发光检测的灵敏度。在最佳实验条件下,铬离子(Cr3+)浓度在5.0×10-9~2.0×10-6mol/L范围内与其体系的发光信号强度具有一定的线性关系,对浓度为6.0×10-8mol/L的铬连续11次进样,相对标准偏差为1.59%,其检出限为1.50×10-9mol/L。该体系可以成功地用于天然湖水和自来水中金属铬的分析和检测。     

黄瓜花叶病毒在甜瓜种子中的带毒检测及脱毒方法研究

为明确甜瓜种子携带黄瓜花叶病毒(Cucumher mosaic virus,CMV)状况,以5个品种甜瓜种子为材料,采用实时荧光定量PCR技术检测甜瓜种子、胚芽中CMV带毒率和带毒量。结果表明,供试种子、种胚带毒率分别为80%～96.6%和5.0%～25.0%,带毒量分别为6.62×10~4～5.47×10~7拷贝/粒和3.78×10~4～1.00×10~6拷贝/粒;种苗传毒率为0～6.6%,不同品种之间存在差异。种子的带毒率高而传毒率低,表明CMV主要存在于甜瓜种子的种皮上。试验比较了5种处理方法对带CMV甜瓜种子的脱毒效果。干热(65℃)、湿热(100℃沸水)、温汤(55℃)、干热+湿热(65℃干热+100℃沸水)、干热+10%Na_3PO_4(65℃干热+10%Na_3PO_4)处理甜瓜种子,均能降低种子带毒量。干热、湿热、干热+湿热和干热+10%Na_3PO_4处理后种子脱毒率可达96%以上,显著优于温汤处理(P0.05),并能促进种子发芽。干热+10%Na_3PO_4处理甜瓜种子后的种苗中未检出病毒,对CMV的脱除效果最佳。     

胡萝卜切片的超声强化远红外干燥特性及动力学模拟

为探讨超声波对远红外干燥过程的强化效果,以胡萝卜切片为干燥材料,研究不同超声频率、超声功率和超声处理时间条件下,胡萝卜切片的干燥特性和品质变化规律,并用Weibull函数对干燥过程进行动力学模拟。结果表明:随着超声频率、超声功率和超声处理时间的增加,干燥时间明显减少,干燥速率显著增加;Weibull分布函数可实现较高的模型精度,拟合结果的决定系数R~2值均在0.97以上,离差平方和χ~2值均很小,尺度参数α随着超声参数的增加而呈现减小的趋势,表明超声强化的干燥过程由内部的水分扩散阻力控制。估算有效水分扩散系数D_(cal)为3.601×10~(-8)～5.317×10~(-8) m~2/s,有效水分扩散系数D_(eff)为3.535×10~(-10)～5.601×10~(-10) m~2/s,均随着超声频率、超声功率和超声处理时间的增加而增大;并且随着超声频率、超声功率和超声处理时间的增加,胡萝卜干制品的总色差值总体呈现上升趋势,胡萝卜切片细胞中微孔数量增多,热质迁移效率增大,干燥速率显著提高。     

黄梁木环割促萌正交试验及混合效应模型分析

[目的]开展黄梁木环割促萌正交试验并进行混合效应模型分析,为培育黄梁木高幼化程度无性繁殖材料及黄梁木优良种质资源保存和推广应用打下基础.[方法]以黄梁木成年大树为试验材料,设环割高度和宽度2个因素,环割宽度分别为2、3和4 cm及环割高度分别为20、30和40 cm 3个水平的正交试验,共9个处理(处理1~9);环割后每隔1周调查并记录各处理的不定芽发芽数;利用双因素方差分析和线性混合效应模型,分析筛选黄梁木环割促萌最佳条件组合.[结果]处理1的平均发芽数最多,为6.38个,明显多于处理2、处理4、处理8和处理9,显著多于处理3、处理5、处理6和处理7(P<0.05,下同).双因素方差分析结果显示,环割高度和环割宽度对发芽数影响不显著(P>0.05,下同),但二者的交互作用对发芽数具有极显著影响(P<0.01);线性混合效应模型分析结果表明,环割高度、环割高度×初始胸径和环割宽度×初始胸径对发芽数有显著影响,环割宽度、初始胸径和环割宽度×环割高度对发芽数无显著影响.[结论]经双因素方差分析和线性混合效应模型分析,黄梁木环割促萌的最佳条件为环割高度20 cm、环割宽度2~3 cm.     

干旱胁迫对白刺花根尖细胞有丝分裂的影响

为探讨白刺花(Sophora davidii)种子萌发期对干旱的适应性,采用PEG-6000模拟干旱胁迫环境对白刺花根尖细胞有丝分裂、染色体畸变、微核变化等进行研究。结果表明,短时间(0~6 h)、低浓度(10%)胁迫对白刺花根尖细胞有丝分裂指数有促进作用,分裂指数由8.78%上升至9.09%;中度处理及长时间、高浓度胁迫致使细胞分裂指数下降,抑制效应明显,尤其当浓度达到50%时,细胞分裂指数由3.14%下降至1.96%。在染色体畸变类型中,出现类型最多是染色体断片,当PEG-6000浓度为0~20%时,白刺花根尖细胞染色体畸变率在10%以下;当浓度大于30%,染色体畸变率均在10%以上。微核的观察随处理时间和胁迫浓度的变化而变化,当PEG-6000浓度小于20%时,微核率的大小在10‰以下;当PEG-6000浓度高于20%后,微核率均大于10‰;尤其当浓度达到50%时,处理48h的微核率最高,达15.76‰,且多以间期微核和单微核为主。     

竹纤维与丙烯酸接枝共聚反应的研究

用正交法探讨了以高锰酸钾为引发剂的竹纤维与丙烯酸接枝共聚改性反应。试验结果表明:当高锰酸钾浓度为7.5×10~(-3)mol/L,丙烯酸浓度为2.67mol/L,硫酸浓度为0.2mol/L,预处理温度为60℃,预处理时间为10min,反应温度为50℃,反应时间为4h 时,接枝率可达30%以上。同样的条件在微波体系中,反应时间为6min 时,接枝率可达36%。利用 FTIR 和 SEM 等分析手段对竹纤维的接枝共聚产物进行了表征。     

精子数量对小鼠体外受精与胚胎早期发育的影响

【目的】研究不同精子数量对小鼠体外受精与胚胎早期发育的影响,通过比较分析进一步完善小鼠的辅助生殖技术。【方法】试验随机选用9周龄C57BL/6雄鼠附睾尾获取的精子放入HTF培养液,在二氧化碳培养箱中培养1 h后通过精子计数计算1、3、5、10、15、20 μL精子溶液的精子数量,并吸取相应的精子溶液于4周龄C57BL/6雌鼠超排后获取的卵母细胞团中,体外培养24 h后计算体外受精率与2-细胞胚胎发育率。【结果】1、3、5、10、15、20 μL精子溶液的精子数量分别为0.25(±0.23)×10~6、1.23(±0.31)×10~6、2.03(±0.35)×10~6、3.95(±0.33)×10~6、6.50(±0.76)×10~6、9.88(±0.52)×10~6个/mL;同时,小鼠体外受精率分别为88.92%、95.17%、94.29%、90.56%、85.89%、78.26%,其中2-细胞胚胎率分别为78.21%、81.75%、81.51%、77.42%、70.47%、50.76%。精子数量为1.23(±0.31)×10~6、2.03(±0.35)×10~6个/mL的体外受精率与2-细胞胚胎发育率较好,差异不显著,但极显著高于精子计数为6.50(±0.76)×10~6、9.88(±0.52)×10~6个/mL的情况。【结论】不同的精子数量对小鼠体外受精与胚胎早期发育影响有显著性差异,精子数量为1.23(±0.31)×10~6～2.03(±0.35)×10~6个/mL时能有效提高小鼠的体外受精率并促进胚胎的正常发育。     

酶制剂和微生态制剂对广西三黄鸡生产性能的影响

该研究使用酶制剂与微生态制剂,减少广西三黄鸡饲养中使用抗生素,为广西三黄鸡的健康养殖提供科学参考。将120只45周龄,体重、生产性能一致的广西三黄鸡,随机分成4个组,每组设置3个重复,每个重复10只鸡。试验A组为对照组,饲喂基础日粮;试验B组在基础日粮中添加3000ppm (活力：1×10⁵U/g)的酶制剂;试验C组在基础日粮中添加500ppm (活菌数：1.05×10¹⁰CFU/g)的微生态制剂;试验D组在基础日粮中添加3000ppm (活力：1×10⁵U/g)的酶制剂和500ppm (活菌数：1.05×10¹⁰CFU/g)的微生态制剂。试验持续60d,结束后测定日均产蛋数、日均产蛋率、平均蛋重、日均采食量、料蛋比、死淘率、鸡蛋合格率。试验结果表明,相比于对照组,酶制剂与微生态制剂联合使用,能提高日均产蛋数45.99%,能提高日均产蛋率39.54%,能提高平均蛋重26.03%,能提高日均采食量16.89%,能降低料蛋比7.37%。可见,在基础日粮中添加3000ppm (活力：1×10^5<...     

玻璃化法及小液滴玻璃化法对香石竹茎尖超低温保存效果的影响

[目的]探索更有效的香石竹茎尖超低温保存方法,为球宿根花卉的超低温保存提供相关技术支持。[方法]以香石竹茎尖为材料,研究预培养条件(蔗糖浓度、预培养时间)、玻璃化处理时间和玻璃化方法(常规玻璃化法、小液滴玻璃化法)对香石竹茎尖超低温保存效果的影响。[结果]在0.5 mol/L的蔗糖浓度培养基上预培养5 d香石竹茎尖成活率最高,为88.3%;玻璃化处理80 min成活率最高,可达86.7%;常规玻璃化法成活率及再生率在80%以上,小液滴玻璃化法成活率可达90%以上且全部再生,小液滴玻璃化法再生天数比常规玻璃化法少3~5 d。[结论]小液滴玻璃化法是一种有发展前景的超低温保存方法。     

Duddingtonia flagrans冻干制剂厚壁孢子优化培养及其杀线虫幼虫剂量研究

【目的】探究捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂厚壁孢子的批量培养方法及其对线虫幼虫的毒杀剂量。【方法】通过玉米粒或大麦粒培养基的单步培养法,以及先在含有0.05%琼脂粉的沙氏葡萄糖肉汤培养基中培养7d后继而转接到玉米粒或大麦粒培养基的双步培养法,以培养3~5周后洗脱的每克固体培养基中的厚壁孢子数为依据,对D.flagrans的最优培养方法进行筛选;然后使用最优培养法培养D.flagrans厚壁孢子并将其冻干后用于体外杀线虫幼虫试验,研究D.flagrans冻干制剂的杀线虫幼虫剂量。【结果】培养基质不同时,D.flagrans的菌落颜色有一定差异,玉米粒培养基中的菌落颜色呈微黄色,而大麦粒培养基中的菌落呈白色;D.flagrans的适宜培养时间为3周。采用单步培养法时,玉米粒培养基培养的厚壁孢子数量为2.4×10~5个/g,大麦粒培养基培养的厚壁孢子数量为3.2×10~5个/g;而采用双步培养法时,玉米粒培养基培养的厚壁孢子数量为3.0×10~5个/g,大麦粒培养基培养的厚壁孢子数量为3.5×10~5个/g。D.flagrans冻干制剂杀线虫幼虫剂量的阈值为每克粪便4×10~5个D.flagrans厚壁孢子,相应对线虫幼虫的杀虫率为95.2%。【结论】采用双步培养法培养厚壁孢子并将其制备成冻干制剂,在D.flagrans生物防治寄生性线虫病方面有较好的应用前景。     

铅诱导蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的研究

[目的]研究铅对蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的影响。[方法]用不同浓度的Pb Cl2溶液培养蚕豆种子,以蒸馏水培养作为对照,培养4~7 d时,每天随机取根尖固定、染色、压片后镜检,观察微核和染色体畸变,计算微核率和染色体畸变率。[结果]培养第4~7天,1.0×10-4~5.0×10-4mol/L Pb2+处理组的微核率和染色体畸变率均极显著高于对照组,且Pb2+浓度越大,微核率和染色体畸变率越高。[结论]Pb2+对蚕豆根尖细胞微核率和染色体畸变率有影响,其影响程度与Pb2+处理浓度和处理时间有关。     

球孢白僵菌菌株MZ041016对马铃薯块茎蛾的毒力测定

为评价球孢白僵菌菌株MZ041016对马铃薯块茎蛾的致病力,以马铃薯块茎蛾3龄幼虫为靶标害虫,采用浸叶法进行了毒力测定.结果表明,马铃薯块茎蛾3龄幼虫的死亡率与MZ041016的分生孢子浓度成正比,在孢子浓度为4.0×10~8个/ml时,最大累计校正死亡率达88.63%,致死中时间LT_(50)为4.58 d;孢子浓度为4.0×10~7个/ml时,累计校正死亡率达76.42%,LT_(50)为5.17 d;4.0×10~6个/ml分生孢子浓度下,LT_(50)是6.31 d,累计校正死亡率为69.81%;4.0×10~5个/ml分生孢子浓度下,LT_(50)是8.95 d,累计校正死亡率为41.74%;4.0×10~4个/ml孢子浓度下,累计校正死亡率为24.69%.5～8 d的致死中浓度依次为4.31×10~8、4.039×10~7、3.232×10~6、4.04×10~5个/ml.     

嗜气芽孢杆菌ZDXC-01产芽孢培养条件的优化

为了提高嗜气芽孢杆菌的有效活菌数和芽孢数,采用单因素筛选和正交试验法对菌株的发酵条件进行了优化。结果表明,优化后的最佳发酵条件为发酵时间30～36 h、接种量5%、温度37℃、转速200 r/min、起始p H值7.5、装液量25 mL/250 mL。优化后发酵菌液含菌量为5.8×10~9cfu/mL,与初始发酵工艺的发酵菌液含菌量(2.2×10~9cfu/mL)相比,提高了163.6%;优化后发酵菌液芽孢数为5.5×10~9cfu/mL,与初始发酵工艺的发酵菌液芽孢数(1.8×10~9cfu/mL)相比,提高了205.6%。     

用胚挽救方法获得月季杂交后代植株

研究了3个接种时期和5个杂交组合对月季胚挽救效率的影响.结果表明:在含有0.05mg/L 6-BA,0.1 mg/L NAA的MS培养基上,杂交组合阳光粉×阿斯米尔黄金的幼胚芽苗再生率最高,为88.6%;接种时期以50~80 d的幼胚培养效果最佳,芽苗萌发率达83.3%,芽苗生根移栽后,其成活率可达90%以上.     

金叶甘薯扦插繁殖试验

试验结果表明:金叶甘薯插穗8~10 cm长,0.2 cm粗,生根率可达95%以上;用a-萘乙酸250mg/kg处理,生根率可达95%;1/2蛭石 1/2珍珠岩基质中生根率可达100%。