转基因唐鱼研究获新进展

中国水产科学研究院珠江水产研究所继转红色荧光蛋白基因唐鱼获得成功之后,最近在转生长激素基因唐鱼的研究中又获得可喜的进展——转基因实验组中出现了超大型的唐鱼个体。     

红色荧光蛋白基因在转基因唐鱼中遗传和表达的稳定性分析

为了评估转红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)基因唐鱼新品系的稳定性,研究了RFP基因在不同世代转基因唐鱼中的遗传和表达情况。荧光显微镜下观察显示,RFP基因在F6和F10代所检测的组织器官中均有表达,并且两个世代间相同组织部位的表达水平相似。F6和F10代个体分别配对繁殖实验表明,RFP基因在转基因唐鱼后代中的遗传仍然符合孟德尔分离规律,而且培育出的转基因个体表型特征无显著差异。利用PCR技术在F2、F6和F10代转基因唐鱼基因组中扩增外源性肌球蛋白轻链2启动子、RFP基因编码区和整合位点上下游侧翼区域(片段总长度为4 883 bp),测序结果显示,3个世代间的外源基因序列完全相同,没有发生碱基缺失或突变等现象。研究表明,红色荧光蛋白基因在转基因唐鱼传代培育过程中保持了稳定的遗传和表达。     

转红色荧光蛋白基因唐鱼与非转基因唐鱼肌肉营养成分的分析和比较

对含有外源基因的转红色荧光蛋白基因唐龟(简称:转基因唐鱼)和同胞家系中不含有外源基因唐鱼(简称:非转基因唐鱼)肌肉中的一般营养成分、游离氨基酸和脂肪酸的组成和含量进行分析和比较.结果表明:转基因唐鱼肌肉水分、粗蛋白含量粗灰分含量高于非转基因唐鱼,粗脂肪含量低于非转基因唐鱼,但差异均不显著(P>0.05);转基因唐鱼和非...     

萤光鱼的身世之迷

萤光鱼是基因转殖鱼的种。基因转殖鱼是科研人员运用基因工程和基因转殖技术研制出的新品鱼。简单地说就是科研人员把段外未的DNA基因片断．存显微方式下注入鱼胚胎的细胞核或细胞质中，让外来DNA基因片断能在胚胎中继续复制。进而表现该段外来基因的特性。     

“转红色荧光蛋白基因唐鱼的构建、生物学特性和生态安全性研究”通过成果鉴定

2012年11月16日,中国水产科学研究院珠江水产研究所完成的“转红色荧光蛋白基因唐鱼的构建、生物学特性和生态安全性研究”项目通过农业部科技教育司组织的成果鉴定。     

转基因鱼研究中存在的问题

针对转基因鱼技术中关于启动子和结构基因的选配、外源基因的定点整合、外源基因的可控表达、转 基因鱼鉴定、建立转基因鱼纯系个体以及转基因鱼应用安全问题几个方面进行了论述。     

非离子态氨对转红色荧光蛋白基因唐鱼的毒性研究

水体中氨氮是影响鱼类生存的重要环境胁迫因子。利用静水法测定水体中非离子态氨对转红色荧光蛋白基因唐鱼(Tanichthys albonubes)和野生唐鱼的急性毒性和慢性效应。急性毒性实验结果显示,转基因唐鱼的非离子态氨24、48、72、96 h半数致死浓度(LC50)(2.43、2.12、1.82、1.72 mg·L-1)分别比野生唐鱼相应时间的半数致死浓度(LC50)(2.40、2.10、1.76、1.67 mg·L-1)略高,但无显著性差异;慢性毒性实验结果显示,在不同浓度非离子态氨(0.02、0.18、0.35、0.53、0.70 mg·L-1)胁迫下,转基因唐鱼和野生唐鱼的死亡率无显著差异。研究结果可为评价转红色荧光蛋白基因唐鱼潜在生态风险提供参考依据。     

全球第一条全亮萤光基因鱼-TK-1萤光基因鱼

由邰港科技研发成功的TK-1绿萤光基因鱼，这种全身会发绿色萤光的基因鱼，就是利用显微注射的方式把外来的绿萤光基因植入到野生种的青口鱼之胚胎内，经长时间培养、筛选所得的基因转殖鱼。TK-1绿萤光基因鱼不止在外表会发绿色萤光，其实其全身组织都会，甚至于产下的卵、胚胎、稚鱼及仔鱼全身也都有绿色萤光出现。又由于所发出来的绿色萤光相当强，     

羊生长激素基因及表达产物对受体鲤鱼的促生长效应

两年的池塘生长对照实验证实了外源生长激素基因在受体鱼基因组整合及表达对部分受体鲤鱼有明显的促生长效应。实验组最大个体体重为对照组最大个体体重的1.47倍和1.15倍,从而预示转羊生长激素基因鲤鱼在速生鲤鱼品种培育方面有很好的应用前景,斑点杂交和Southern Blot杂交证实了外源基因确已整合在受体鱼基因组中,实验也表明外源基因在受体鱼基因组的插入对部分受体鱼的生长也有负效应。     

“全鱼”Mx基因重组构建与转导分析

通过分子重组将鲫Mx1基因的编码序列克隆到鲤β肌动蛋白基因启动子下游,构建成能在鱼体内表达的转“全鱼”Mx基因的重组分子.采用显微注射方法,将含有鲤β肌动蛋白基因启动子和鲫Mxl基因序列的重组片段转入草鱼受精卵中,经人工孵化和养殖获得转全鱼Mx基因草鱼.经PCR和Southern杂交检测分析,证实重组分子成功整合到2月龄转基因草鱼基因组中,为草鱼抗病育种研究奠定了基础.     

转Hu-IFN-α基因草鱼雌核发育F1的遗传配型分析

1998年,张学文等[1]通过分子重组,将人α干扰素(Hu-IFNα)基因编码序列克隆到鲤β肌动蛋白基因启动子下游,构建了能够在鱼体内表达的Hu-IFN-α基因重组分子,然后通过显微注射法将重组基因注射入草鱼1～2细胞期的受精卵内,获得转抗病基因草鱼.此后,该项目研究小组开展了一系列研究[2-6],对转Hu-IFN-α基因草鱼接种草鱼出血病病毒(GCRV991)的攻毒实验表明:转Hu-IFN-α基因草鱼对草鱼出血病病毒的抗性比普通草鱼提高了66%.但是,目前的转基因技术还无法使外源基因在鱼体内进行定点整合,目的基因在鱼体内的整合形式难以确定.     

转基因鱼研究及商品化展望

目前,转基因技术是农业和医药行业的研究热门。自1985年,世界上第一批转基因鱼诞生后,鱼类基因转移技术很快应用到培育高产、优质和抗逆的经济鱼类新品种,并在解决分子生物学、发育生物学和基因转移等方面的难题中发挥着重要作用。近几年,“全鱼”生长激素（GH）基因的克隆与应用,使快速生长转GH基因鱼的研究取得了突破性进展,但仍需要解决转移基因的定位整合、稳定表达和遗传,以及转基因鱼释放的生态和食品安全性等问题。     

瑞典专家对基因转殖鱼养殖发出警讯

<正>基因转殖鱼(transgenic fish)的遗传物质是抑制对鱼类资源过度捕捞,提升商业性水产养殖的最佳方法,但瑞典研究人员却担忧基因转殖鱼脱逃至自然环境可能会引发许多问题,并影响人类的福祉。     

唐鱼β-肌动蛋白基因启动子的分离及其驱动活性的检测

利用PCR技术克隆唐鱼（Tanichthys albonubes）β-actin基因。所克隆的β-aetin基因片段为1464bp,包含长为1374bp的启动调控区和90bp的部分开放阅读框。启动调控区包括105bp的β-actin基因上游调控序列、第一个外显子和第一个内含子。上游调控序列中含有对转录起重要作用的CAAT Box、TATA Box、CArG Box等元件。将唐鱼β-actin启动调控区克隆到红色荧光表达载体pDsRed2-1上,并显微注射到唐鱼受精卵中,荧光显微镜观察红色荧光蛋白（RFP）的表达。结果表明,RFP在转基因唐鱼中的表达阳性率较高,最高可达51．8％,且RFP的表达水平较高。PCR检测转基因唐鱼的部分器官组织,在被检组织器官中均能检测到外源RFP基因;而RT-PCR以及Southern blot验证显示RFP mRNA的表达有所不同;Southern blot检测肌肉组织基因组DNA,可见比阳性载体大的杂交条带。说明所检测的组织中已发生外源基因RFP的整合,但有些组织存在表达水平较低或者不表达的现象。本实验分离到的β-actin基因启动子序列具有有效的驱动功能,可启动外源基因在唐鱼体内的高效表达,从而为下一步进行功能基因的转化研究奠定基础。     

转牛（羊）生长激素基因工程鲤鱼研究

生产出转牛和羊生长激素基因实验鲤鱼一万余尾，筛选出生长速度快，含有外源基因的转基因鲤鱼１４３尾，遗传实验证实外源基因可遗传给后代，经池塘生长实验证明于代仍具有生长速度快的特征，建立了把外源基直接注入鲤鱼受精卵及确定了外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期等构建转基因鱼的一整套技术。     

浅谈转基因鱼

转基因鱼的研究,是广大水产工作者感兴趣的研究课题,随着有关技术的不断进步和完善,它必将造福人类社会。本文从转基因鱼的生物基础、转基因鱼的研究进展等方面,对其作一简介。1 什么是转基因鱼 所谓转基因鱼,就是接受了人们导入的体外基因的鱼。由于人们导入的基因一般都是对人类有利的基因,且经过大量实践证明这些基     

转基因鱼研究中存在的问题

针对转基因鱼技术中关于启动子和结构基因的选配、外源基因的定点整合、外源基因的可控表达、转基因鱼鉴定、建立转基因鱼纯系个体以及转基因鱼应用安全问题几个方面进行了论述.     

转Bt-基因棉棉仁粉对鲤鱼营养价值的研究

为评估转Ｂｔ－基因棉棉仁粉用作鱼饲料的有效性和安全性,将其配成试验饲料进行了１４周鲤鱼喂养,前８周着重就鲤钱垢增重率、特定生长率、铒料系数、鱼体化学成分含量等营养学指标进行了观察。上述各项指标经统计分析,在试验组和对照组之间均无显著性差异。表明转Ｂｔ－基因棉棉仁粉经脱棉酚处理后,与常规棉棉仁粉一样可作鱼用饲料的蛋白源。     

金鱼垂体细胞谱系基因切除研究↑（*）

将大鳞大麻哈鱼的垂体细胞特异性表达的生长激素基因的启动子与白喉毒素基因的Ａ链相连，构建成融合基因ＧＨ－ＤＴＡ。通过显微注射导入金鱼受精卵内，获得的鱼经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分子杂交检测表明，少数实验鱼染色体ＤＮＡ中含有导入的外源基因。胚胎的原位分子杂交和垂体的组织切片观察发现，转基因鱼和正常鱼之间存在差异。     

转生长激素基因鲤鱼的生长研究

本报导了生长激素基因对鲤鱼生长的影响。经池塘对照实验表明，转生长激素基因鲤鱼的快速生长效应比正常鲤鱼明显，而且由转生长激素基因阳性性成熟鲤鱼经人工催产繁殖的子一代群体中，仍表现出快速生长的特性。这一结果，为能获得一个转外源生长激素基因并具快速生长特性的遗传稳定的转基固鲤鱼核心群体提供了可靠的数据。