籼稻成熟胚愈伤组织诱导及不定芽分化

以不同籼稻品种的成熟胚为研究材料,通过对比实验,结果表明,采用DNB为诱导愈伤组织培养基,DMS与DNB培养基交替继代,籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好;采用MSRc3(MS+casamino acids 500mg·L-1+gluttamine 300mg·L-1+proline 500mg·L-1+mannitol 36.4g·L-1+maltose 30g·L-1+TDZ 0.2mg·L-1+phytagel 5g·L-1pH 5.8)为分化培养基,愈伤组织不定芽分化率在90%以上,较对照MSR1提高300%～500%.     

奥地利黑松离体胚培养诱导不定芽的研究

培养基种类、激素种类及浓度、培养基中蔗糖浓度对奥地利黑松离体胚培养不定芽诱导影响显著.研究表明,以3/4WPM为基本培养基,附加2.0 mg·L-16-BA、蔗糖3.0,对诱导种胚产生不定芽最为有效,诱导率56.53.NAA不利于外植体不定芽的产生.     

白皮松离体胚培养与不定芽的诱导

以白皮松成熟胚为外植体进行离体培养诱导不定芽.采用L(45)16正交试验,结果表明:基本培养基和植物生长调节剂均对白皮松胚诱导不定芽起关键作用,Ms+6-BA3.5 mg·L-1+NAA0.4 mg·L-1+IBA0.1 mg.L-1对不定芽诱导率最高,达71,增殖系数为9.激素不利于不定芽的生长,培养基中加入1的活性炭有利于不定芽的形成和生长.     

离体条件下油松成熟合子胚不定芽的形成

为确定油松成熟胚离体培养诱导不定芽的最适条件,以油松成熟胚为外植体材料,分别接种在TE、DCR和MS3种基本培养基上以确定最适培养基;随后按照U6*(64)均匀设计表,在TE培养基中添加不同浓度梯度的植物生长激素6-BA、NAA、KT,建立试验组合以确定最佳激素配比;基于上述实验,进一步探讨了蔗糖浓度对不定芽诱导的影响及6-BA对不定芽生长的影响。结果表明:基本培养基对于不定芽的诱导起重要作用,在TE培养基上不定芽诱导率最高,DCR次之,MS最差;运用Uniform Design Version3.00均匀设计软件,通过数据处理、回归分析及试验优化,得到激素最佳组合为:6-BA6mg/L+NAA0.1mg/L,KT对试验没有显著影响;蔗糖浓度为4.0%时不定芽诱导率最高;培养基中降低6-BA的浓度有利于不定芽的生长,在TE+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的培养基中,丛生芽平均长度最长。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的研究

以小麦成熟胚为外植体，在ＭＳ＋２．４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ培养基上，愈伤组织诱导率为８３．１％；不同品种间诱导率有较大的差异，但愈伤组织的质量与诱导率的高低无关，在ＭＳ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ培养基上，分化率可达４４．４％。     

续随子愈伤组织诱导与不定芽分化探讨

为建立续随子的高频再生体系,从续随子外植体除菌方案与外植体选择、愈伤组织诱导以及不定芽分化等多方面进行了探索.结果显示,70%乙醇处理15s+无菌水冲洗3次+4%次氯酸钠处理5 min+无菌水冲洗5次为最佳外植体灭菌方案;根、茎和叶中,仅有叶片能诱导出愈伤组织;虽然多个激素组合可以诱导续随子叶片产生愈伤组织,但在MS培养基,TDZ 0.2 mg/L或0.4 mg/L以及TDZ/NAA(0.5/0.1 mg/L)组合,光下培养时,愈伤组织诱导率达到100%,且出愈时间短、愈伤生长速度快;新鲜愈伤组织只有在MS培养基,TDZ 0.4 mg/L或TDZ/NAA (0.5/0.1 mg/L)才可分化出单个不定芽(无丛生芽),且分化率也仅为25%和15%.     

小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化

[目的]筛选再生能力强的基因型小麦品种,建立高效的小麦成熟胚高频植株再生系统。[方法]以小麦品种抗冻早-30、百麦4411和06-4046的成熟胚为外植体,以MS为基本培养基,添加不同激素,组配诱导、继代、分化和生根培养基,通过胚性愈伤组织诱导。探讨影响小麦愈伤组织诱导和分化的因素。[结果]2,4-D浓度为1—5mg／L时对3个小麦品种愈伤组织的诱导差异不大,诱导率均高于80％,但2,4-D浓度为2mg／L时更有利于诱导胚性愈伤组织,诱导率在90％以上;在抗冻早-30和百麦4411分化培养基中加入2mg／L KT有助于提高分化率和再生率,在06-4046分化培养基中加入0．5mg／L KT对小麦成熟胚的分化和再生苗比较有利。[结论]在MS培养基中添加2mg／L2,4-D和一定量的KT可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化再生苗。     

长白落叶松愈伤组织诱导与不定芽分化

以长白落叶松成熟胚作为外植体进行消毒和不定芽诱导。研究结果表明:将去皮种子用流水冲洗3d,用70%酒精消毒1min,转入1%的次氯酸钠消毒50min后,再将剥出的胚放入0.5%的次氯酸钠中浸泡2s为最佳消毒方法;在光照条件下(约1600lx),BM培养基中填加1.0mg/LBA,愈伤组织与不定芽的诱导效果最好,愈伤组织诱导率达到100%,不定芽分化率为73.8%;在BM培养基中加入1%活性碳对不定芽有伸长作用。     

玉米成熟胚愈伤组织诱导的初步研究

试验以H99、综31和郑58三个玉米自交系的成熟胚为外植体,利用正交试验设计L9(34),对影响愈伤组织诱导的基因型、培养基、2,4-D浓度和Ag NO3浓度4个因素进行了研究。结果表明:各因素对初级愈伤诱导率影响大小为基因型培养基2,4-D浓度Ag NO3浓度;对胚性愈伤诱导率影响大小为基因型Ag NO3浓度2,4-D浓度培养基。诱导中最优组合为综31+10 mg/L Ag NO_3+MN+2 mg/L 2,4-D,继代中最优组合为综31+10 mg/L Ag NO3+MN+1 mg/L 2,4-D,其初级愈伤诱导率为87.41%,胚性愈伤诱导率为29.74%。     

白皮松成熟胚不定芽诱导分化技术的优化

以白皮松成熟胚为外植体进行不定芽诱导分化技术的优化,以此建立白皮松的再生体系.探讨了基本培养基、激素配比、糖浓度和不同摆放方式及不定芽继代增殖等问题.结果表明:成熟胚不定芽诱导以MS培养基最好,不定芽的平均增值系数超过4;MS中加入6-BA3～4 mg·L-1+NAA0.1～0.5 mg·L-1时不定芽的诱导率接近60%,平均分化系数可达6.0以上; 35 g·L-1的蔗糖浓度能有效的防止不定芽的玻璃化;垂直摆放有利于不定芽的分化;不定芽继代增值的最佳培养基为:MS+6-BA 0.3 mg·L-1 + NAA 0.05 mg·L-1.     

氮、磷、钾元素形态配比及浓度对油松胚培养的影响

以M S为基本培养基,以油松成熟胚为外植体进行离体培养诱导不定芽。试验和统计分析表明,硝态氮与氨态氮的配合使用有利于不定芽的诱导,NO3-/NH4 比值为4是不定芽诱导的最适氮源配比;磷素浓度为M S培养基中磷素浓度的2倍,更有利于不定芽的诱导;钾素浓度可保持M S培养基中的浓度不变。     

白沙枇杷成熟胚子叶诱导不定芽再生

枇杷(Eriobotrya japonica L.)是原产中国的特色树种,分红沙、白沙两大品系.因其基因型高度杂合,童期长,传统的育种方法周期长,所以采用现代生物技术手段育种显得尤为重要.基因工程是品种改良快速和有效的育种手段,而基因工程的遗传转化操作系统的建立依赖于不同类型的外植体高频植株再生.枇杷的离体培养植株再生主要集中在幼胚、胚乳、花药以及原生质体等方面 [1～6],目前存在再生频率低下、培养难度较大等问题[7].近几年在枇杷成熟胚子叶诱导再生方面相继展开了一些研究,但诱导产生不定芽仅限于红沙系品种[8,9],白沙系品种至今未有报道.为此,本试验拟进行白沙枇杷成熟种子子叶再生不定芽研究,试图建立白沙枇杷成熟子叶再生体系,为以后通过基因工程改良枇杷品种奠定基础.     

黄瓜不定芽诱导试验

研究了津优31号黄瓜适宜的外植体处理方式及诱导不定芽的适宜培养基。结果表明,适宜的外植体处理方式为:保留单片子叶,下胚轴纵切,去除2/3子叶;适宜的不定芽诱导培养基为:MS+TDZ0.005 mg/L+IBA 0.05 mg/L。     

番茄子叶愈伤组织及不定芽诱导

以番茄幼苗子叶为外植体、MS为基本培养基,研究不同激素配比培养基对番茄子叶愈伤组织和不定芽诱导的影响。结果表明,适宜番茄子叶愈伤组织及芽诱导的激素配比为MS+ZT2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L。这将为番茄子叶快繁体系的建立提供技术支持。     

玉米自交系成熟胚愈伤组织诱导和再生体系研究

[目的]研究玉米成熟胚组织培养条件和植株再生频率的影响因素,建立玉米成熟胚高效再生体系.[方法]以玉米成熟胚为材料,通过相关影响因子对成熟胚外殖体愈伤组织诱导、继代及分化培养影响的研究.[结果]2,4-D浓度在1.0-2.0 mg/L,NAA浓度为0.5-0.6 mg/L明显促进成熟胚愈伤组织生长;6-BA浓度为0.15mg/L时适合愈伤组织的继代培养;新自523在三个自交系中愈伤生长质量较好,并且容易产生胚性愈伤,早21愈伤组织较少,在0.5 mg/L NAA、1.5 mg/L6-BA、100 mg/L AgNO3浓度下早21分化能力和新自523相当,且两者都容易生根,再生苗频率达到30;-40;.B73分化和生根能力较弱.[结论]利用玉米成熟胚诱导产生愈伤、分化并产生再生植株是继幼胚再生体系有利的补充.     

不同大麦品种成熟胚愈伤诱导与分化研究

为了筛选不受生长季节限制的大麦遗传转化受体,分析、比较了我国15个大麦品种成熟胚在1种诱导培养基和3种分化培养基上的愈伤诱导和分化率。结果表明,大麦品种间成熟胚愈伤诱导率差异非常显著,早熟3号的诱导率高达98.7%,而扬农啤2号和鄂大麦9号则低于10.0%。成熟胚在形成愈伤组织过程中,伴随胚发芽现象,但愈伤诱导与胚发芽之间没有相关性;品种间愈伤组织分化率也差异显著,早熟3号的分化率为43.3%,而其它品种的分化率均在10.0%以下;不同分化培养基的分化效率不同,在M1培养基上的平均分化率较高。     

2,4D、KT对小麦成熟胚愈伤组织形成、分化的影响

以小麦新品种川农 17、12成熟胚为外植体进行离体培养 ,结果表明 :2mg/L 2 ,4 D有利于胚性愈伤组织形成 ,5mg/LKT有利于植株再生 (两品种植株再生率分别为 73 6 3% ,89 4 7% )。高浓度 2 ,4 D(4～ 8mg/L)虽不影响成愈率 ,但抑制植株再生。这种抑制作用能被KT拮抗。而KT的这种拮抗作用在 2mg/L 2 ,4 D条件下不能体现。