母鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体的检测及其相关性分析

为了解母鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体检测结果的相关性,试验采集了新城疫疫苗免疫母鸽的血液和卵黄,通过血凝抑制试验检测了新城疫病毒的抗体,利用GraphPad Prism软件中的Spearman Analysis分析了血清抗体效价和卵黄抗体效价的相关性。结果表明:绝大多数样品提取的卵黄液抗体效价低于血清抗体效价,而绝大多数样品的卵黄原液抗体效价高于血清抗体效价。血清抗体效价、提取的卵黄液抗体效价与卵黄原液抗体效价两两之间呈显著或极显著正相关(P0.05或P0.01),提取的卵黄液抗体效价与血清抗体效价之间的相关系数最高。说明鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体有明显的相关性,提取的卵黄液可代替血清用于母鸽新城疫病毒抗体的检测。     

蛋鸡H5、H9亚型禽流感和新城疫免疫血清抗体与卵黄抗体检测比较分析

为分析蛋鸡免疫后卵黄抗体与血清抗体的相关性,试验采集经H5、H9亚型禽流感和新城疫疫苗免疫的黔东南小香鸡、乌蒙乌骨鸡、威宁鸡血清样本和卵黄样本,采用血凝抑制试验进行相关免疫抗体检测。结果:3个地方品种鸡的血清样本和卵黄样本中均可检测出H5、H9亚型禽流感和新城疫免疫抗体,且几何平均效价均大于24以上,达到免疫合格标准,不同地方品种鸡群间差异不显著(P>0.05);免疫后30d,卵黄样本免疫抗体几何平均效价低于血清样本,但差异不显著(P>0.05);免疫后60d,卵黄样本免疫抗体几何平均效价低于血清样本,差异显著(P<0.05)。结果表明:卵黄抗体与血清抗体呈正相关性,卵黄抗体几何平均效价均低于血清抗体。在临床上可用卵黄抗体替代血清抗体进行H5、H9亚型禽流感和新城疫疫苗免疫效果的评价,但应选择在免疫后30d以内。     

大肠杆菌不同佐剂灭活苗血清抗体与卵黄抗体消长规律的研究

笔者用分离得到的猪源致病性大肠杆菌制成灭活疫苗免疫产蛋鸡,定期检测蛋鸡血清和卵黄的抗体效价。试验结果表明,免疫蛋鸡血清中和卵黄中抗体的消长规律相似,同一时期的血清抗体比卵黄抗体较高。同时比较3种不同佐剂疫苗产生的效果,结果表明,氟氏佐剂和氢氧化铝佐剂疫苗产生的抗体效价较白油佐剂疫苗产生的抗体效价高,但氟氏佐剂疫苗和白油佐剂疫苗较氢氧化铝佐剂疫苗抗体持续时间长。综合比较,氟氏佐剂较其他2种佐剂产生的抗体效价高、持续时间长。     

间接血凝抑制试验检测血清和卵黄中鸡毒支原体抗体的研究

将13只正处于产蛋期的试验鸡在接种疫苗前后分别采血、分离血清；收集鸡蛋，分离蛋黄，并分别用16％NaCl、8％柠檬酸纳和氯仿处理后，检测鸡毒支原体(MG)间接血凝抑制(HI)抗体。结果表明：接种疫苗前的血清和16％NaCl、8％柠檬酸钠和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为4.7，4．4，4．1和4.2 log2；第一次接种疫苗后的血清和16％NaCl、8％柠檬酸纳和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7．4、6．7、7．1、6．9log2；第二次接种疫苗后第1次采集的血清和16％NaCl、8％柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为10．4、9．6、10．1、9．710g2，第2次采集的血清和16％NaCl、8％柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7．9、7.1、7．6和7．4log2。8％柠檬酸钠处理后的卵黄抗体效价最高，与血清抗体效价最接近。血清HI抗体效价与卵黄HI抗体效价具有良好的一致性和相关性，用卵黄可以代替血清进行HI试验。     

商品蛋鸡新城疫和禽流感疫苗免疫后卵黄抗体代替血清抗体检测的相关性分析

为了评价商品蛋鸡免疫新城疫和禽流感疫苗后卵黄抗体替代血清抗体检测时卵黄的最适处理条件,试验采用经新城疫和禽流感疫苗免疫后40天产蛋率在90%以上的健康商品蛋鸡(海兰褐)56只,采血取血清,每只鸡取1枚鸡蛋分离卵黄,采用完全随机分组试验设计,随机分4组,分别为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组,每组56个重复,每个重复1份血清和1份相应卵黄。对照组为血清抗体检测,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别用生理盐水1∶1倍稀释卵黄、生理盐水1∶3倍稀释卵黄和三氯甲烷1∶3倍稀释卵黄,利用血凝抑制(HI)试验进行血清和处理后卵黄抗体检测。结果表明:检测卵黄中新城疫病毒和禽流感病毒H9抗体时使用生理盐水1∶3稀释卵黄,检测卵黄中禽流感病毒H7、禽流感病毒H5-11和禽流感病毒H5-12抗体时使用生理盐水1∶1稀释卵黄,处理后卵黄抗体效价与血清抗体效价均差异不显著(P>0.05),与血清抗体效价相关系数分别为0.837,0.853,0.888,0.888,0.839。说明在对卵黄进行适宜条件处理后,可以用卵黄抗体代替血清抗体评价商品蛋鸡抗体水平。     

血凝与血凝抑制实验测卵黄抗体应注意事项

近几年来规模养殖场越来越重视防疫,做疫苗之前把握机体的抗体水平是非常重要的。实验表明鸡蛋中卵黄抗体在鸡排卵前与血清抗体是一致的,但卵黄排入输卵管后,与母体不再有联系,所以卵黄抗体与排卵前血清中的抗体是一致的,也就是与     

鸡抗猪大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体消长规律及其相互关系的探讨

用猪源大肠杆菌单价(K88)与三价(K88、K99、987P)灭活疫苗分别免疫产蛋母鸡,定期检测母鸡血清和卵黄的抗体效价。结果表明,两种疫苗免疫母鸡的卵黄抗体和血清抗体的消长规律基本一致,但前者比后者上升和下降期有所滞后;血清抗体水平比卵黄抗体水平平均约高21 8以上,两者间的差异极显著(P<0 01)。     

鸡新城疫血清抗体和卵黄抗体效价比较研究

蛋鸡进行鸡新城疫疫苗免疫接种后,体内B细胞通过对抗原的识别、活化、增殖,最后分化成浆细胞并分泌抗体,产生的抗体进入血液后,血液中的抗体能从输卵管上皮层分泌滤泡分泌到卵黄内。免疫蛋鸡后采血测定血清中抗体效价或制备血清抗体过程中,抓鸡采血时经常造成惊吓而引起产蛋率降低,因而人们想到能否用卵黄抗体代替血清抗体进行上述工作。本研究的目的是对免疫后的蛋鸡血清抗体和卵黄抗体进行测定比较,看两者之间的差异程度     

牛支原体P48蛋白卵黄抗体的制备

为了研究牛支原体P48抗原蛋白的免疫学功能及相应卵黄抗体的生物学特性,探究其抗体效价随免疫时间的变化规律,试验采用牛支原体P48蛋白疫苗免疫健康产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋,用水稀释法结合硫酸铵盐析法制备特异性卵黄抗体,利用间接ELISA法检测血清抗体(IgG)和卵黄抗体(IgY)效价。结果表明,低、中、高剂量组均能诱导蛋鸡产生有效免疫应答,血清抗体效价与卵黄抗体效价的变化趋势基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,在首次免疫后8~10周Ig Y效价达到峰值,其中中剂量组的免疫效价最高,最高效价为1:212。经SDS-PAGE检测,制备所得的纯度达86%以上,得率在8.6 mg/m L以上。说明采用牛支原体P48蛋白免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度的抗牛支原体P48蛋白卵黄抗体,从而为卵黄抗体在牛支原体的检测与防控方面的研究奠定了基础。     

免疫蛋禽血清和卵黄禽流感抗体的相关性研究策

对免疫蛋禽血清和卵黄中的H5亚型高致病性禽流感抗体进行监测,比较血清和卵黄中HI效价的差异并找出其相关性.试验结果表明,蛋鸡和蛋鸭接种H5亚型高致病性禽流感疫苗后,在抗体的上升期,血清和卵黄HI效价差异显著或极显著(0.01＜P＜0.05,P＜0.01);而在抗体稳定期,血清和卵黄HI效价差异不显著(P＞0.05).在抗体稳定期,血清和卵黄抗体水平之间的相关系数都在0.85以上,(0.66＜r＜1.00),呈强直线相关.试验证明,无论是蛋鸡还是蛋鸭在抗体稳定期内均可以使用卵黄替代血清进行HI抗体监测.     

禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究

应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。     

SPF鸡感染J亚群禽白血病病毒血清抗体与卵黄抗体的变化动态及其相关性

为研究以卵黄抗体替代血清抗体判定SPF鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染状态的可行性,人工接种ALV-J的SPF鸡23周龄时,分别从25只抗体阳性鸡及22只抗体阴性鸡采集血清和卵黄,比较不同稀释度的卵黄与血清中ALV-J抗体的阴阳性吻合率及ELISA检测S/P值相关系数。结果表明,相对于血清抗体,将卵黄1∶400稀释,假阳性和假阴性最少,确定1∶400为卵黄最适稀释度。对40只攻毒SPF鸡和36只同批次单独饲养的空白SPF鸡在25~34周龄,每隔3周采集一次血清,每周采集一次种蛋,共采集304份血清样品和760份卵黄样品。血清按1∶500稀释,卵黄按1∶400稀释,所有血清和卵黄抗体用美国IDEXX公司ALV-J抗体ELISA检测试剂盒检测,同一只鸡同一时段采集的血清和卵黄样品严格在同一次ELISA中检测。结果显示,在25~34周龄,卵黄抗体检测判定结果与血清整体吻合率为82.5%~95%。上述结果表明用卵黄抗体替代血清样品检测来监控SPF鸡群对ALV-J的感染状态是可行的,疫苗生产企业可通过抽检SPF鸡场提供SPF种蛋的卵黄抗体水平来判断SPF鸡场的洁净度。     

SPF鸡感染禽白血病病毒A/B亚群后血清抗体与卵黄抗体的变化及其相关性

拟研究以卵黄抗体替代血清抗体检测判定SPF鸡群禽白血病病毒(ALV)感染状态的可行性。在人工接种ALV-A/B后的40只SPF鸡刚开产时,从21只抗体阳性鸡及19只抗体阴性鸡分别采集血清和卵黄并一一对应,比较卵黄不同稀释度与血清中ALV-Ab抗体的阴阳性吻合率及ELISA检测S/P值相关系数。另外36只同批次不攻毒的SPF鸡单独饲养作为对照,76只鸡在25~34周龄期间,每隔3周分别采集1次血清,每周采集1次种蛋,共采集了304份血清样品及836份卵黄样品。所有血清和卵黄抗体用IDEXX的ALV-Ab抗体ELISA检测试剂盒检测。血清按试剂盒规定的1∶500稀释,卵黄按预试验结果选定稀释度稀释。同一只鸡同一时段采集的血清和卵黄样品,严格在同一次ELISA试验中检测。结果表明,相对于血清抗体,将卵黄做1∶300稀释时,假阳性和假阴性最少,确定1∶300为卵黄最适稀释度。在25~34周龄,836份卵黄抗体的检测判定结果与304份血清抗体检测结果吻合率达94.7%,即这些血清抗体阳性鸡同时期采集的卵黄抗体也全部阳性,血清阴性鸡的卵黄抗体也均为阴性。结果提示疫苗生产企业可通过检测SPF种蛋的卵黄抗体来判断SPF鸡场对ALV的洁净度。     

蛋鸡卵黄与血清中禽流感H5N1HI抗体相关性研究

用鸡蛋蛋黄（直接稀释和经萃取两种方法）和血清监测禽流感H5N1（Re-1株）HI抗体，对三种方法监测结果进行相关性研究。选择免疫抗体处于临界状态的产蛋鸡群进行加强免疫，然后将鸡群分为随机采样组和固定采样组跟踪疫苗说明书规定的免疫期进行免疫抗体监测。结果表明：两组试验在免后21天抗体达到高峰．卵黄抗体和血清抗体HI值接近，在21天前卵黄抗体的上升滞后血清抗体的上升。免疫抗体达到高峰后三种方法监测结果呈强相关．个值分析血清与卵黄相差一个滴度以内的占绝大多数，均值经t检验有不同程度的差异，但差异不超过半个滴度。因此，用卵黄进行禽流感HI抗体监测是可行的。     

犬瘟热病毒免疫蛋鸡血清抗体与卵黄抗体消长规律的研究

试验旨在了解产蛋鸡对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)抗原的免疫反应及其血清抗体和卵黄抗体的消长规律,为制备卵黄抗体提供依据。将CDV接种Vero细胞和DF1细胞进行传代并测定其病毒滴度,选取细胞病变出现早、病毒滴度高的Vero细胞毒作为接种病毒抗原免疫蛋鸡。每10 d免疫蛋鸡1次,第4次免疫后每30 d加强免疫1次。免疫前及免疫后每10 d采血分离血清,每5 d收集鸡蛋提取卵黄抗体,用琼脂扩散法和间接ELISA法测定其抗体水平。结果显示,血清抗体比卵黄抗体的滴度高,两者呈正相关性,卵黄抗体出现较血清抗体迟3~5 d,卵黄抗体在第3次免疫后3~5 d就已达到较高水平,此时即可开始收集鸡蛋制备卵黄抗体。     

蛋鸡新城疫血清抗体检测和卵黄抗体检测的实际应用

新城疫是一种禽类传染病,目前主要是通过接种疫苗使机体产生抗体来进行预防,抗体水平的高低要通过抗体检测来判断。笔者介绍了血清抗体检测和卵黄抗体检测方法在蛋鸡场的实际应用及其区别。     

CDV免疫蛋鸡血清抗体与卵黄抗体的消长规律及其相关性分析

为了解产蛋鸡对犬瘟热病毒杭原的免疫反应及其血清抗体和卵黄抗体的消长规律及相关性,为制备卵黄抗体提供依据,将犬瘟热病毒接种Vero细胞和DF1细胞进行传代并测定其病毒滴度,选取细胞病变出现早,病毒滴度高的Vero细胞毒作为接种病毒抗原免疫蛋鸡。通过每10d进行蛋鸡免疫一次,四免后每30d加强免疫一次的方法进行免疫。免疫前和免疫后每10d采血分离血清和每5d收集鸡蛋提取卵黄抗体,用琼脂扩散法和间接ELISA法测定其抗体水平。结果显示,血清抗体比卵黄抗体的滴度高,两者间呈正相关性,卵黄抗体出现较血清抗体迟3～5d,卵黄抗体在三免后3～5d就已达到较高水平,此时即可开始收集鸡蛋制备卵黄抗体。     

卵黄抗体检测评估SPF鸡对鸡传染性贫血病病毒的感染状态研究

鸡传染性贫血病病毒(CIAV)是禽弱毒疫苗中常见外源病毒之一,选择未被CIAV污染的SPF鸡胚是生产合格疫苗的关键环节,疫苗生产企业通常通过检测SPF鸡血清中CIAV的抗体来评估CIAV感染状况,本研究以取样更为方便的卵黄抗体检测来评估SPF鸡群中CIAV感染状态。将40只SPF鸡于19周龄时人工接种CIAV,同时30只SPF鸡饲养于另一隔离环境内作为空白对照。23周龄时每只鸡分别采集种蛋和血清并一一对应,然后将卵黄分别进行1∶10、1∶20、1∶30稀释后与血清同时检测CIAV抗体,结果发现卵黄抗体1∶20倍稀释后判定结果与血清抗体吻合率最高。对70只SPF鸡从25~34周龄进行连续10周观察,结果显示卵黄抗体检测结果与血清抗体检测结果吻合率达91.57%。建议疫苗生产企业可通过抽检卵黄抗体来判断SPF鸡群的CIAV洁净度。     

蛋鸡场血清抗体与卵黄抗体的检测比较实验

<正>随着蛋鸡场规模的逐步扩大,万只以上的规模户随处可见,养殖理念逐步提升,对防疫环节重视程度提高,逐步追求精准的防疫时机,在免疫之前,了解抗体水平十分重要。在生产实践中,血清检测抗体操作烦琐,且给蛋鸡生产带来一定的影响。理论上讲,鸡蛋中卵黄抗体在鸡排卵前与血清抗体是一致的,但卵黄排入输卵管后,与母体不再有联系,所以,卵黄抗体与排卵前血清中的抗体是一致的,也就是与鸡蛋产出前一天血清抗体一致。对于产蛋鸡来说,使用卵黄测抗体的方法对鸡不产生应激,     

猪圆环病毒2型卵黄抗体和血清抗体水平的监测

为获得猪圆环病毒2型卵黄抗体消长规律,试验用猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活疫苗免疫健康鸡群,收集高免蛋,用水稀释法和饱和硫酸铵盐法提纯卵黄抗体,ELISA抗体检测试剂盒检测血清抗体和卵黄抗体效价。结果表明:卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,且卵黄抗体效价变化幅度小于血清抗体,卵黄抗体稳定性好,血清抗体最高效价可达5 000,提纯的抗体浓度最高为9 200μg/mL。